免疫血液學(xué)2、第五講血液成分制備課件

輸血前免疫血液學(xué)檢查及血液成分制備輸血前免疫血液學(xué)檢查及血液成分制備輸血前檢查的目的和要求選擇與患者血型配合的各種血液成分，使之能在患者體內(nèi)有效地存活，無不良反應(yīng)。即輸入的紅細(xì)胞在患者體內(nèi)必須不溶血，輸入的血漿成份不導(dǎo)致患者紅細(xì)胞破壞，也就是供者與患者之間的血液在免疫血液學(xué)方面“相溶”從而達(dá)到安全、有效輸血的目的。輸血前檢查的目的和要求選擇與患者血型配合的各種血液成分，使二、輸血前檢查的內(nèi)容包括以下幾個方面：1、患者的病史和標(biāo)本等的檢查、核對及處理。2、受血者、獻(xiàn)血者ABO和Rh血型鑒定。3、不規(guī)則抗體的篩選和鑒定。4、交叉配血試驗5、標(biāo)簽和發(fā)血。二、輸血前檢查的內(nèi)容包括以下幾個方面：（一）標(biāo)本的要求1、標(biāo)本必須經(jīng)鑒定和標(biāo)記，確實來自患者和獻(xiàn)血者。2、符合患者體內(nèi)狀態(tài)，能代表患者當(dāng)前的免疫學(xué)情況，3、防止血樣的稀釋和溶血的產(chǎn)生。（輸液患者對側(cè)抽血）4、最好用血清（血漿有纖維蛋白原的干擾）配血5、輸血后所有標(biāo)本（患者及供者）保存2-8℃一周。（一）標(biāo)本的要求1、標(biāo)本必須經(jīng)鑒定和標(biāo)記，確實來自患者和獻(xiàn)血（二）ABO血型鑒定用抗A和抗B試劑檢測紅細(xì)胞抗原，稱之正定型，用A型和B型、O型紅細(xì)胞檢測血清中抗體稱之反定型人ABO血型由紅細(xì)胞抗原和血清抗體所決定，其正、反定型相符。見表ABO血型常規(guī)定型

正定型（檢查紅細(xì)胞抗原）反定型（檢查血清中抗體）血型紅細(xì)胞標(biāo)本+抗體試劑血清標(biāo)本+標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞試劑抗A抗BA細(xì)胞B細(xì)胞O細(xì)胞A型+--+-B型-++--O型--++-AB型++---（二）ABO血型鑒定用抗A和抗B試劑檢測紅細(xì)胞抗原，稱之正定2、ABO血型正反定型不符及其原因可能因為操作技術(shù)，管理上問題也可能是紅細(xì)胞和血清標(biāo)本問題2、ABO血型正反定型不符及其原因可能因為操作技術(shù)，管理上問（1）技術(shù)操作、管理錯誤假陰性結(jié)果：試管中未加入抗體試劑或血清未能認(rèn)識溶血也是陽性反應(yīng)血清或試劑與紅細(xì)胞比例太小離心速度時間不夠使用了失效的抗體和紅細(xì)胞試劑沒能正確地記錄和解釋試驗結(jié)果。假陽性結(jié)果：離心速度過大和離心時間過長使用了受到細(xì)菌污染的試劑使用了不干凈的試管、器皿錯誤記錄、解釋試驗結(jié)果（1）技術(shù)操作、管理錯誤（2）紅細(xì)胞標(biāo)本相關(guān)問題①某些ABO亞型、白血病或其它惡性疾病病人紅細(xì)胞ABO抗原太弱（或缺乏），抗A抗B試劑未能出現(xiàn)預(yù)期的凝集反應(yīng)。②紅細(xì)胞獲得性或遺傳性的異常，如獲得性B抗原紅細(xì)胞或Tn/T多凝集紅細(xì)胞，試劑可與這些異常的紅細(xì)胞反應(yīng)③懸浮紅細(xì)胞的血清或血漿中含的型物質(zhì)濃度高，中和了抗體試劑，出現(xiàn)假陰性，如卵巢囊腫病例。④病人紅細(xì)胞自凝，病人血清中高活性，高濃度自身凝集嚴(yán)重致敏（包被）自身紅細(xì)胞，以至在稀釋液存在下，自發(fā)地發(fā)生凝集，而不是抗體試劑的特異性作用。⑤近期輸血：輸入過與自身血型不一致的血液，使標(biāo)本成為“混合外觀凝集”（2）紅細(xì)胞標(biāo)本相關(guān)問題（3）血清標(biāo)本的問題①異常的血漿蛋白：受檢查血漿中異常的白蛋白，球蛋白比例（某些肝病、傳染病如結(jié)核、多發(fā)性骨髓瘤等疾病患者球蛋白增加）高濃度的纖維蛋白原（心梗、感染、外傷、腫瘤患者）均易使紅細(xì)胞發(fā)生緡錢狀凝集現(xiàn)象。②免疫抑制疾病或免疫抑制治療的病人血清中ABO抗體減少或消失。③年齡：老年人隨年齡增高，ABO抗體減弱，嬰兒血清抗體是陰性或很弱（0-6月不做反定型）④不規(guī)則抗體的存在：反復(fù)多次輸血者妊娠者血清中有ABO血型以外的同種異型抗體，如鹽水抗M、高效價冷凝集素抗I。（3）血清標(biāo)本的問題（三）Rh（D）定型和定型中應(yīng)注意的問題假陽性結(jié)果：受檢細(xì)胞已被免疫球蛋白致敏，受檢細(xì)胞與血清孵育的時間過長多凝集細(xì)胞造成定型的假陽性器材或抗血清被污染，造成的假陽性假陰性結(jié)果：受檢細(xì)胞濃度太高，與抗血清比例失調(diào)漏加或錯加定型血清定型血清使用方法錯誤抗血清保存不當(dāng)，導(dǎo)致失效（三）Rh（D）定型和定型中應(yīng)注意的問題假陽性結(jié)果：受檢細(xì)胞關(guān)于弱D（傳統(tǒng)稱Du型）弱D型（Du型）是D的弱抗原，這種抗原與大部分鹽水抗D試劑不產(chǎn)生直接凝集反應(yīng)，而與部分的IgG抗D血清用間接抗球蛋白試驗反應(yīng)陽性弱D（Du型）鑒定：三種不同批號的IgG抗D定型—如果全部陰性方可認(rèn)定患者為RhD陰性，否則為弱D弱D臨床意義：作為供血者Du→RhD陽性作為受血者Du→RhD陰性關(guān)于弱D（傳統(tǒng)稱Du型）（四）不規(guī)則抗體篩選和鑒定1對受血者的血清做抗體篩選，以發(fā)現(xiàn)有臨床意義的不規(guī)則抗體，不規(guī)則抗體是指抗A抗B以外的血型抗體抗體篩選的原則讓受檢血清與已知的試劑紅細(xì)胞起反應(yīng)，以發(fā)現(xiàn)在37℃中有反應(yīng)的抗體方法：鹽水法、凝膠法、聚凝胺法、抗球蛋白試驗等抗體篩選陽性的，則須做鑒定試驗，以確定其特異性（四）不規(guī)則抗體篩選和鑒定1對受血者的血清做抗體篩選，以發(fā)現(xiàn)（五）交叉配血試驗1、要求及內(nèi)容主側(cè)：受血者血清+供者紅細(xì)胞——檢測對供者紅細(xì)胞起反應(yīng)的抗體。次側(cè)：供者血清+受者紅細(xì)胞——檢測對受者紅細(xì)胞起反應(yīng)的抗體。自身對照：Rs+Rc——顯示自身抗體、直抗陽性。（五）交叉配血試驗1、要求及內(nèi)容2、方法

鹽水交叉配血試驗：檢出IgM類抗體。檢測不完全抗體的交叉配血試驗蛋白酶（木瓜酶、波蘿酶）傳統(tǒng)抗人球蛋白試驗新方法：促凝劑（凝聚胺）微柱凝膠試驗2、方法

鹽水交叉配血試驗：檢出IgM類抗體。3、配血中異常原因與處理①緡線狀假凝集特點：顯微鏡下紅細(xì)胞膜完整，細(xì)胞界限清晰地成線串聚集37℃、室溫結(jié)果一樣，不受溫度影響，但加鹽水即可散開。解決方法：被檢細(xì)胞用鹽水洗滌后再配血。②自身抗體造成配血不合，共同特點是患者血清能凝集自身紅細(xì)胞天然自身冷凝激素獲得性病理性自身冷抗體：直抗陽性/室溫較37℃強(qiáng)/Rs+Oc>Rs+Rc自免溶貧血清中的溫型自身抗體，直抗陽性/37℃≥室溫③血清中的不規(guī)則凝集素3、配血中異常原因與處理①緡線狀假凝集三、常規(guī)和緊急情況下的發(fā)血程序血液的申請：醫(yī)生填寫輸血申請單護(hù)士抽取血樣，送至血庫檢驗師進(jìn)行血型鑒定、抗體篩選選擇血液，交叉配血填寫輸血記錄單發(fā)血給護(hù)士三、常規(guī)和緊急情況下的發(fā)血程序血液的申請：醫(yī)生填寫輸血申請單第七節(jié)新生兒溶血病一、新生兒溶血病的發(fā)病機(jī)制二、新生兒溶血病的臨床癥狀三、新生兒溶血病的血清學(xué)檢查四、新生兒溶血病治療與預(yù)防五、新生兒換血和輸血第七節(jié)新生兒溶血病一、新生兒溶血病的發(fā)病機(jī)制什么是新生兒溶血病？新生兒溶血病（hemolyticdiseaseofthenewborn）簡稱HDN。指母嬰血型不合，孕母體內(nèi)存在著與胎兒紅細(xì)胞不配合的IgG性質(zhì)的血型抗體，該抗體通過胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)，作用于胎兒紅細(xì)胞使之產(chǎn)生不同程度溶血。什么是新生兒溶血??？二、臨床癥狀

被IgG抗體體致敏的胎兒紅細(xì)胞在分娩前后加速破壞，這在臨床上有多種表現(xiàn)，嚴(yán)重可致胎兒宮內(nèi)死亡，輕者只在血清學(xué)中有所表現(xiàn)，嬰兒卻很健康，HDN的病理變化主要同紅細(xì)胞溶解所引起的，大量紅細(xì)胞破壞使紅細(xì)胞數(shù)目減少，引起貧血，組織和臟器因供氧減少而發(fā)生缺氧、并可影響其功能主要表現(xiàn)為水腫、黃疸、貧血、肝脾腫大、核黃疸。二、臨床癥狀被IgG抗體體致敏的胎兒紅細(xì)胞在分娩前后加速破水腫——全身性、伴低蛋白血癥；胸水、腹水、心包積液。黃疸——進(jìn)行性黃疸增高膽紅素51.3mol/L（3mg%）臍帶膠質(zhì)黃疸

68.4-102.6mmol/L（4-6mg%）面部淡黃

256.5-307.8（15-18mg%）面部+軀干橙黃，手心足底、呈淡黃

>342（>20mg%）手足橙黃色水腫——全身性、伴低蛋白血癥；胸水、腹水、心包積液。貧血——組織缺氧：心律快、組織增高、嗜睡、少吃、少哭、心衰。肝脾腫大——骨髓外造血組織來代償引起核黃疸——未結(jié)合膽紅素是對中樞神經(jīng)系統(tǒng)有毒害的物質(zhì)，嬰兒大腦發(fā)育未成熟，血腦屏障不健全，過多的未結(jié)合膽紅素可影響腦組織——腦神經(jīng)基底核，使腦神經(jīng)細(xì)胞發(fā)生變性——表現(xiàn)為發(fā)熱、嗜睡、吸吮反射弱、痙攣、肌張力病死率高，存活后有智力不全，運動障礙。貧血——組織缺氧：心律快、組織增高、嗜睡、少吃、少哭、三、血清學(xué)檢查1、測母子（父）ABO血型，確定ABO相合/不相合2、患兒標(biāo)本檢查：（1）直接抗球蛋白試驗：ABO溶血病患兒紅細(xì)胞上抗體結(jié)合得很少，常得到陰性結(jié)果（2）釋放試驗：陽性，紅細(xì)胞上有IgG抗體（3）游離抗體：陽性，就證明新生兒病情會繼續(xù)加重三、血清學(xué)檢查1、測母子（父）ABO血型，確定ABO相合/

新生兒血清中游離抗體檢查與指示紅細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果判定

AcBcOc

＋－－有游離的抗A抗體－＋－有游離的抗B抗體＋＋－有游離的抗A、抗B或抗A，B抗體＋／－＋／－＋有游離的ABO系統(tǒng)以外抗體－－－無游離的抗體新生兒血清中

患兒紅細(xì)胞抗體釋放試驗與指示紅細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果判定AcBcOc

＋－－釋放出IgG抗A抗體－＋－釋放出IgG抗B抗體＋＋－釋放出IgG抗A、抗B或抗A，B抗體－－－未釋放出抗體＋＋＋釋放出ABO血型系統(tǒng)以外的抗體患兒紅細(xì)胞抗體釋放試驗

新生兒ABO

HDN血清學(xué)試驗直接抗球游離抗體抗體釋放結(jié)果意義蛋白試驗試驗試驗判定＋＋＋確診ABO

HDN

＋－＋確診ABO

HDN

－－＋確診ABO

HDN

＋－－可疑可疑ABO

HDN

－＋－可疑可疑ABO

HDN

－－－否定血清學(xué)試驗未能證實HDN新生兒ABOHDN血清學(xué)試驗四、治療（一）藥物治療：葡萄糖、白蛋白（二）光照（藍(lán)光照射）：膽紅素能吸收光，以波長450-460m作用最強(qiáng)，未結(jié)合膽紅素（Z）轉(zhuǎn)化為異物體（E）后者不能進(jìn)入腦組織，為無毒水溶性，雙吡咯，易從尿內(nèi)排出，使血清膽紅素濃度降低。（三）換血：換出抗體和致敏紅細(xì)胞，減輕溶血，糾正貧血，防心衰，換血清膽紅素，防核黃疸。ABO系HDN：O型洗滌細(xì)胞加AB血漿/同型漿Rh系HDN：ABO血型同患兒，Rh血型同母親如子B型母Accdee血清含有抗D選B型D陰性血。四、治療（一）藥物治療：葡萄糖、白蛋白（一）宮內(nèi)輸血（二）提早分娩>64妊娠期內(nèi)的治療：（三）藥物治療孕婦服Vc、VE、VK注射葡萄糖，吸氧，苯巴比妥為酶的誘導(dǎo)劑，促進(jìn)肝臟清除膽紅素，新生兒輸白蛋白，能結(jié)合膽紅素防核黃疸。預(yù)防：對未致敏的Rh陰性婦女在分娩Rh陽性嬰兒72小時內(nèi)，肌注30mg（145-435mg）抗Rh(D)IgG，通?？深A(yù)防Rh陰性婦女發(fā)生同種免疫。（一）宮內(nèi)輸血第五章血液成份制備第一節(jié)血液的生理功能輸送氧氣和二氧化碳，在肺臟和人體組織間進(jìn)行氣體交換。輸送養(yǎng)分到組織，從組織帶走代謝產(chǎn)物。輸送激素，維生素和各種藥物。維持滲透壓、酸堿度以及電解質(zhì)平衡保持體溫恒定防御微生物或異物入侵有效的凝血和纖維蛋白溶解機(jī)制第五章血液成份制備第一節(jié)血液的生理功能細(xì)紅細(xì)胞——人體的內(nèi)呼吸，向機(jī)體組織運送O2、帶走CO2、由

Hb完成胞白細(xì)胞——粒細(xì)胞——中性、嗜酸、嗜堿、免疫系統(tǒng)，吞噬破壞入侵細(xì)胞成淋巴細(xì)胞——T細(xì)胞參與細(xì)胞免疫B細(xì)胞參與體液免疫分40-45%血小板——粘附，釋放凝固、收縮非（血漿）白蛋白保持滲透壓和體液平衡；載體蛋白的作用，傳遞運輸細(xì)胞免疫球蛋白——血漿中具有抗體活性的球蛋白的統(tǒng)稱，它包括所有血液中的抗體。成分凝血因子共14個、血漿中含除組織因子（FIII）外所有因子55-60%凝血過程分三個階段，凝血酶原激活物的形成，凝血酶原激活形成凝血酶；纖維蛋白原分解形成纖維蛋白。分內(nèi)源性途徑、外源性途徑和共同途徑。細(xì)紅細(xì)胞——人體的內(nèi)呼吸，向機(jī)體組織運送O2、帶走第二節(jié)全血第二節(jié)全血

血液成分的最佳保存條件紅細(xì)胞：4℃±2℃血小板：22℃±2℃水平振蕩，如4℃貯存，24h50%以上喪失功能，48h減小顯著，72h基本無止血作用，5天全部遭破壞。白細(xì)胞：室溫，24h微量減弱，3-5天顯著減弱，7天完全消失凝血因子：-20℃以下冷凍保存

血液成分的最佳保存條件第三節(jié)血液細(xì)胞成分的制備一、制備原理：利用血液細(xì)胞比重、體積等因素的不同通過離心分層而得到濃度較高的單一成分。如圖所示。二、制備方法1、手工法；

2、血細(xì)胞分離機(jī)單采法第三節(jié)血液細(xì)胞成分的制備一、制備原理：利用血液細(xì)胞比重、三、紅細(xì)胞制品濃縮紅細(xì)胞：全血中大部分血漿分離后剩余部分即為濃縮紅細(xì)胞。比積0.65-0.804℃±2℃懸浮紅細(xì)胞：全血中大部分血漿分離后，向剩余部分加入紅細(xì)胞添加液制成的成分即為懸浮紅細(xì)胞。有MAP（甘露醇-腺嘌呤-磷酸鹽）等添加液比積0.50-0.654℃±2℃少白細(xì)胞的紅細(xì)胞：離心或過濾去除白細(xì)胞比積0.60-0.754℃±2℃三、紅細(xì)胞制品洗滌紅細(xì)胞：用生理鹽水洗去大部分非紅細(xì)胞成分。較徹底地去除血漿（98%）和白細(xì)胞（≥80%）紅細(xì)胞回收率≥70%4℃±2℃冰凍解冰去甘油化紅細(xì)胞

6日內(nèi)血，紅細(xì)胞保護(hù)劑為甘油，低溫-80℃保存，使用時去甘油化后加生理鹽水制成紅細(xì)胞回收率≥80%4℃±2℃用于稀有血型和自體血保存輻射紅細(xì)胞：用射線（鈷60）輻照，滅活紅細(xì)胞制品中淋巴細(xì)胞預(yù)防輸血相關(guān)性移植物抗主病洗滌紅細(xì)胞：用生理鹽水洗去大部分非紅細(xì)胞成分。四、白細(xì)胞制品：單采用血細(xì)胞分離機(jī)及配套耗材一次從單一獻(xiàn)血者采集的粒細(xì)胞為1人份，容量200ml，含量≥1.0×1010

室溫靜置保存24小時五、血小板制品：單采用血細(xì)胞分離機(jī)及配套耗材一次從單一獻(xiàn)血者采集的血小板為1人份，容量200ml，含量≥2.5×101120-24℃振蕩保存，24小時（普通袋）

5天（專用袋）四、白細(xì)胞制品：單采用血細(xì)胞分離機(jī)及配套耗材一次從單一獻(xiàn)血

第四節(jié)血液非細(xì)胞成分的制備

新鮮冰凍血漿：全血采集后6h(ACD保養(yǎng)液)、8h（CPD保養(yǎng)液）分離出血漿制成的成分稱為新鮮冰凍血漿，-20℃保存1年轉(zhuǎn)為普漿。含全部凝血因子，白蛋白、免疫球蛋白普通冰凍血漿：和新鮮冰凍血漿比較，只缺少不穩(wěn)定凝血因子V和Ⅷ，-20℃保存5年第四節(jié)血液非細(xì)胞成分的制備

新鮮冰凍血漿：全血采集后6冷沉淀：以400ml全血分離的200ml新鮮冰凍血漿制備的冷沉淀為1u，容量20-30ml，含Ⅷ≥80ID纖維蛋白原≥150mg纖維結(jié)合蛋白250-500mg/L-30℃保存1年根據(jù)輕、中、重度出血所需劑量為10IU、25IU、40IU/kg體重，用于兒童血友病甲：血管性血友病，纖維蛋白原缺乏癥及手術(shù)后出血，嚴(yán)重外傷及DIC等治療。免疫血液學(xué)2、第五講血液成分制備課件血漿蛋白制品白蛋白免疫球蛋白：肌肉注射免疫球蛋白，靜脈注射免疫球蛋白凝血因子Ⅷ濃縮制劑凝血酶原復(fù)合物血漿蛋白制品輸血前免疫血液學(xué)檢查及血液成分制備輸血前免疫血液學(xué)檢查及血液成分制備輸血前檢查的目的和要求選擇與患者血型配合的各種血液成分，使之能在患者體內(nèi)有效地存活，無不良反應(yīng)。即輸入的紅細(xì)胞在患者體內(nèi)必須不溶血，輸入的血漿成份不導(dǎo)致患者紅細(xì)胞破壞，也就是供者與患者之間的血液在免疫血液學(xué)方面“相溶”從而達(dá)到安全、有效輸血的目的。輸血前檢查的目的和要求選擇與患者血型配合的各種血液成分，使二、輸血前檢查的內(nèi)容包括以下幾個方面：1、患者的病史和標(biāo)本等的檢查、核對及處理。2、受血者、獻(xiàn)血者ABO和Rh血型鑒定。3、不規(guī)則抗體的篩選和鑒定。4、交叉配血試驗5、標(biāo)簽和發(fā)血。二、輸血前檢查的內(nèi)容包括以下幾個方面：（一）標(biāo)本的要求1、標(biāo)本必須經(jīng)鑒定和標(biāo)記，確實來自患者和獻(xiàn)血者。2、符合患者體內(nèi)狀態(tài)，能代表患者當(dāng)前的免疫學(xué)情況，3、防止血樣的稀釋和溶血的產(chǎn)生。（輸液患者對側(cè)抽血）4、最好用血清（血漿有纖維蛋白原的干擾）配血5、輸血后所有標(biāo)本（患者及供者）保存2-8℃一周。（一）標(biāo)本的要求1、標(biāo)本必須經(jīng)鑒定和標(biāo)記，確實來自患者和獻(xiàn)血（二）ABO血型鑒定用抗A和抗B試劑檢測紅細(xì)胞抗原，稱之正定型，用A型和B型、O型紅細(xì)胞檢測血清中抗體稱之反定型人ABO血型由紅細(xì)胞抗原和血清抗體所決定，其正、反定型相符。見表ABO血型常規(guī)定型

正定型（檢查紅細(xì)胞抗原）反定型（檢查血清中抗體）血型紅細(xì)胞標(biāo)本+抗體試劑血清標(biāo)本+標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞試劑抗A抗BA細(xì)胞B細(xì)胞O細(xì)胞A型+--+-B型-++--O型--++-AB型++---（二）ABO血型鑒定用抗A和抗B試劑檢測紅細(xì)胞抗原，稱之正定2、ABO血型正反定型不符及其原因可能因為操作技術(shù)，管理上問題也可能是紅細(xì)胞和血清標(biāo)本問題2、ABO血型正反定型不符及其原因可能因為操作技術(shù)，管理上問（1）技術(shù)操作、管理錯誤假陰性結(jié)果：試管中未加入抗體試劑或血清未能認(rèn)識溶血也是陽性反應(yīng)血清或試劑與紅細(xì)胞比例太小離心速度時間不夠使用了失效的抗體和紅細(xì)胞試劑沒能正確地記錄和解釋試驗結(jié)果。假陽性結(jié)果：離心速度過大和離心時間過長使用了受到細(xì)菌污染的試劑使用了不干凈的試管、器皿錯誤記錄、解釋試驗結(jié)果（1）技術(shù)操作、管理錯誤（2）紅細(xì)胞標(biāo)本相關(guān)問題①某些ABO亞型、白血病或其它惡性疾病病人紅細(xì)胞ABO抗原太弱（或缺乏），抗A抗B試劑未能出現(xiàn)預(yù)期的凝集反應(yīng)。②紅細(xì)胞獲得性或遺傳性的異常，如獲得性B抗原紅細(xì)胞或Tn/T多凝集紅細(xì)胞，試劑可與這些異常的紅細(xì)胞反應(yīng)③懸浮紅細(xì)胞的血清或血漿中含的型物質(zhì)濃度高，中和了抗體試劑，出現(xiàn)假陰性，如卵巢囊腫病例。④病人紅細(xì)胞自凝，病人血清中高活性，高濃度自身凝集嚴(yán)重致敏（包被）自身紅細(xì)胞，以至在稀釋液存在下，自發(fā)地發(fā)生凝集，而不是抗體試劑的特異性作用。⑤近期輸血：輸入過與自身血型不一致的血液，使標(biāo)本成為“混合外觀凝集”（2）紅細(xì)胞標(biāo)本相關(guān)問題（3）血清標(biāo)本的問題①異常的血漿蛋白：受檢查血漿中異常的白蛋白，球蛋白比例（某些肝病、傳染病如結(jié)核、多發(fā)性骨髓瘤等疾病患者球蛋白增加）高濃度的纖維蛋白原（心梗、感染、外傷、腫瘤患者）均易使紅細(xì)胞發(fā)生緡錢狀凝集現(xiàn)象。②免疫抑制疾病或免疫抑制治療的病人血清中ABO抗體減少或消失。③年齡：老年人隨年齡增高，ABO抗體減弱，嬰兒血清抗體是陰性或很弱（0-6月不做反定型）④不規(guī)則抗體的存在：反復(fù)多次輸血者妊娠者血清中有ABO血型以外的同種異型抗體，如鹽水抗M、高效價冷凝集素抗I。（3）血清標(biāo)本的問題（三）Rh（D）定型和定型中應(yīng)注意的問題假陽性結(jié)果：受檢細(xì)胞已被免疫球蛋白致敏，受檢細(xì)胞與血清孵育的時間過長多凝集細(xì)胞造成定型的假陽性器材或抗血清被污染，造成的假陽性假陰性結(jié)果：受檢細(xì)胞濃度太高，與抗血清比例失調(diào)漏加或錯加定型血清定型血清使用方法錯誤抗血清保存不當(dāng)，導(dǎo)致失效（三）Rh（D）定型和定型中應(yīng)注意的問題假陽性結(jié)果：受檢細(xì)胞關(guān)于弱D（傳統(tǒng)稱Du型）弱D型（Du型）是D的弱抗原，這種抗原與大部分鹽水抗D試劑不產(chǎn)生直接凝集反應(yīng)，而與部分的IgG抗D血清用間接抗球蛋白試驗反應(yīng)陽性弱D（Du型）鑒定：三種不同批號的IgG抗D定型—如果全部陰性方可認(rèn)定患者為RhD陰性，否則為弱D弱D臨床意義：作為供血者Du→RhD陽性作為受血者Du→RhD陰性關(guān)于弱D（傳統(tǒng)稱Du型）（四）不規(guī)則抗體篩選和鑒定1對受血者的血清做抗體篩選，以發(fā)現(xiàn)有臨床意義的不規(guī)則抗體，不規(guī)則抗體是指抗A抗B以外的血型抗體抗體篩選的原則讓受檢血清與已知的試劑紅細(xì)胞起反應(yīng)，以發(fā)現(xiàn)在37℃中有反應(yīng)的抗體方法：鹽水法、凝膠法、聚凝胺法、抗球蛋白試驗等抗體篩選陽性的，則須做鑒定試驗，以確定其特異性（四）不規(guī)則抗體篩選和鑒定1對受血者的血清做抗體篩選，以發(fā)現(xiàn)（五）交叉配血試驗1、要求及內(nèi)容主側(cè)：受血者血清+供者紅細(xì)胞——檢測對供者紅細(xì)胞起反應(yīng)的抗體。次側(cè)：供者血清+受者紅細(xì)胞——檢測對受者紅細(xì)胞起反應(yīng)的抗體。自身對照：Rs+Rc——顯示自身抗體、直抗陽性。（五）交叉配血試驗1、要求及內(nèi)容2、方法

鹽水交叉配血試驗：檢出IgM類抗體。檢測不完全抗體的交叉配血試驗蛋白酶（木瓜酶、波蘿酶）傳統(tǒng)抗人球蛋白試驗新方法：促凝劑（凝聚胺）微柱凝膠試驗2、方法

鹽水交叉配血試驗：檢出IgM類抗體。3、配血中異常原因與處理①緡線狀假凝集特點：顯微鏡下紅細(xì)胞膜完整，細(xì)胞界限清晰地成線串聚集37℃、室溫結(jié)果一樣，不受溫度影響，但加鹽水即可散開。解決方法：被檢細(xì)胞用鹽水洗滌后再配血。②自身抗體造成配血不合，共同特點是患者血清能凝集自身紅細(xì)胞天然自身冷凝激素獲得性病理性自身冷抗體：直抗陽性/室溫較37℃強(qiáng)/Rs+Oc>Rs+Rc自免溶貧血清中的溫型自身抗體，直抗陽性/37℃≥室溫③血清中的不規(guī)則凝集素3、配血中異常原因與處理①緡線狀假凝集三、常規(guī)和緊急情況下的發(fā)血程序血液的申請：醫(yī)生填寫輸血申請單護(hù)士抽取血樣，送至血庫檢驗師進(jìn)行血型鑒定、抗體篩選選擇血液，交叉配血填寫輸血記錄單發(fā)血給護(hù)士三、常規(guī)和緊急情況下的發(fā)血程序血液的申請：醫(yī)生填寫輸血申請單第七節(jié)新生兒溶血病一、新生兒溶血病的發(fā)病機(jī)制二、新生兒溶血病的臨床癥狀三、新生兒溶血病的血清學(xué)檢查四、新生兒溶血病治療與預(yù)防五、新生兒換血和輸血第七節(jié)新生兒溶血病一、新生兒溶血病的發(fā)病機(jī)制什么是新生兒溶血??？新生兒溶血?。╤emolyticdiseaseofthenewborn）簡稱HDN。指母嬰血型不合，孕母體內(nèi)存在著與胎兒紅細(xì)胞不配合的IgG性質(zhì)的血型抗體，該抗體通過胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)，作用于胎兒紅細(xì)胞使之產(chǎn)生不同程度溶血。什么是新生兒溶血??？二、臨床癥狀

被IgG抗體體致敏的胎兒紅細(xì)胞在分娩前后加速破壞，這在臨床上有多種表現(xiàn)，嚴(yán)重可致胎兒宮內(nèi)死亡，輕者只在血清學(xué)中有所表現(xiàn)，嬰兒卻很健康，HDN的病理變化主要同紅細(xì)胞溶解所引起的，大量紅細(xì)胞破壞使紅細(xì)胞數(shù)目減少，引起貧血，組織和臟器因供氧減少而發(fā)生缺氧、并可影響其功能主要表現(xiàn)為水腫、黃疸、貧血、肝脾腫大、核黃疸。二、臨床癥狀被IgG抗體體致敏的胎兒紅細(xì)胞在分娩前后加速破水腫——全身性、伴低蛋白血癥；胸水、腹水、心包積液。黃疸——進(jìn)行性黃疸增高膽紅素51.3mol/L（3mg%）臍帶膠質(zhì)黃疸

68.4-102.6mmol/L（4-6mg%）面部淡黃

256.5-307.8（15-18mg%）面部+軀干橙黃，手心足底、呈淡黃

>342（>20mg%）手足橙黃色水腫——全身性、伴低蛋白血癥；胸水、腹水、心包積液。貧血——組織缺氧：心律快、組織增高、嗜睡、少吃、少哭、心衰。肝脾腫大——骨髓外造血組織來代償引起核黃疸——未結(jié)合膽紅素是對中樞神經(jīng)系統(tǒng)有毒害的物質(zhì)，嬰兒大腦發(fā)育未成熟，血腦屏障不健全，過多的未結(jié)合膽紅素可影響腦組織——腦神經(jīng)基底核，使腦神經(jīng)細(xì)胞發(fā)生變性——表現(xiàn)為發(fā)熱、嗜睡、吸吮反射弱、痙攣、肌張力病死率高，存活后有智力不全，運動障礙。貧血——組織缺氧：心律快、組織增高、嗜睡、少吃、少哭、三、血清學(xué)檢查1、測母子（父）ABO血型，確定ABO相合/不相合2、患兒標(biāo)本檢查：（1）直接抗球蛋白試驗：ABO溶血病患兒紅細(xì)胞上抗體結(jié)合得很少，常得到陰性結(jié)果（2）釋放試驗：陽性，紅細(xì)胞上有IgG抗體（3）游離抗體：陽性，就證明新生兒病情會繼續(xù)加重三、血清學(xué)檢查1、測母子（父）ABO血型，確定ABO相合/

新生兒血清中游離抗體檢查與指示紅細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果判定

AcBcOc

＋－－有游離的抗A抗體－＋－有游離的抗B抗體＋＋－有游離的抗A、抗B或抗A，B抗體＋／－＋／－＋有游離的ABO系統(tǒng)以外抗體－－－無游離的抗體新生兒血清中

患兒紅細(xì)胞抗體釋放試驗與指示紅細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果判定AcBcOc

＋－－釋放出IgG抗A抗體－＋－釋放出IgG抗B抗體＋＋－釋放出IgG抗A、抗B或抗A，B抗體－－－未釋放出抗體＋＋＋釋放出ABO血型系統(tǒng)以外的抗體患兒紅細(xì)胞抗體釋放試驗

新生兒ABO

HDN血清學(xué)試驗直接抗球游離抗體抗體釋放結(jié)果意義蛋白試驗試驗試驗判定＋＋＋確診ABO

HDN

＋－＋確診ABO

HDN

－－＋確診ABO

HDN

＋－－可疑可疑ABO

HDN

－＋－可疑可疑ABO

HDN

－－－否定血清學(xué)試驗未能證實HDN新生兒ABOHDN血清學(xué)試驗四、治療（一）藥物治療：葡萄糖、白蛋白（二）光照（藍(lán)光照射）：膽紅素能吸收光，以波長450-460m作用最強(qiáng)，未結(jié)合膽紅素（Z）轉(zhuǎn)化為異物體（E）后者不能進(jìn)入腦組織，為無毒水溶性，雙吡咯，易從尿內(nèi)排出，使血清膽紅素濃度降低。（三）換血：換出抗體和致敏紅細(xì)胞，減輕溶血，糾正貧血，防心衰，換血清膽紅素，防核黃疸。ABO系HDN：O型洗滌細(xì)胞加AB血漿/同型漿Rh系HDN：ABO血型同患兒，Rh血型同母親如子B型母Accdee血清含有抗D選B型D陰性血。四、治療（一）藥物治療：葡萄糖、白蛋白（一）宮內(nèi)輸血（二）提早分娩>64妊娠期內(nèi)的治療：（三）藥物治療孕婦服Vc、VE、VK注射葡萄糖，吸氧，苯巴比妥為酶的誘導(dǎo)劑，促進(jìn)肝臟清除膽紅素，新生兒輸白蛋白，能結(jié)合膽紅素防核黃疸。預(yù)防：對未致敏的Rh陰性婦女在分娩Rh陽性嬰兒72小時內(nèi)，肌注30mg（145-435mg）抗Rh(D)IgG，通常可預(yù)防Rh陰性婦女發(fā)生同種免疫。（一）宮內(nèi)輸血第五章血液成份制備第一節(jié)血液的生理功能輸送氧氣和二氧化碳，在肺臟和人體組織間進(jìn)行氣體交換。輸送養(yǎng)分到組織，從組織帶走代謝產(chǎn)物。輸送激素，維生素和各種藥物。維持滲透壓、酸堿度以及電解質(zhì)平衡保持體溫恒定防御微生物或異物入侵有效的凝血和纖維蛋白溶解機(jī)制第五章血液成份制備第一節(jié)血液的生理功能細(xì)紅細(xì)胞——人體的內(nèi)呼吸，向機(jī)體組織運送O2、帶走CO2、由

Hb完成胞白細(xì)胞——粒細(xì)胞——中性、嗜酸、嗜堿、免疫系統(tǒng)，吞噬破壞入侵細(xì)胞成淋巴細(xì)胞——T細(xì)胞參與細(xì)胞免疫B細(xì)胞參與體液免疫分40-45%血小板——粘附，釋放凝固、收縮非（血漿）白蛋白保持滲透壓和體液平衡；載體蛋白的作用，傳遞運輸細(xì)胞免疫球蛋白——血漿中具有抗體活性的球蛋白的統(tǒng)稱，它包括所有血液中的抗體。成分凝血因子共14個、血漿中含除組織因子（FIII）外所有因子55-60%