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腫瘤干細(xì)胞高全立河南省腫瘤醫(yī)院生物治療科1編輯ppt腫瘤干細(xì)胞1編輯ppt干細(xì)胞生物學(xué)特性干細(xì)胞有自我復(fù)制更新能力:通常情況下只有干細(xì)胞具有分裂產(chǎn)生子代干細(xì)胞的能力干細(xì)胞有定向分化為功能細(xì)胞能力已經(jīng)定向分化的細(xì)胞一般情況下不能逆轉(zhuǎn)化為干細(xì)胞2編輯ppt干細(xì)胞生物學(xué)特性2編輯ppt干細(xì)胞分類根據(jù)來源分類
胚胎干細(xì)胞成體干細(xì)胞根據(jù)分化潛能分類:全能干細(xì)胞多能干細(xì)胞單能干細(xì)胞3編輯ppt干細(xì)胞分類根據(jù)來源分類3編輯ppt胚胎干細(xì)胞培育過程4編輯ppt胚胎干細(xì)胞培育過程4編輯ppt干細(xì)胞的再編程核移植如克隆羊多莉細(xì)胞融合基因轉(zhuǎn)染:iPS
OCT4,SOX2,KLF4,c-MYC小分子化合物誘導(dǎo):5編輯ppt干細(xì)胞的再編程核移植如克隆羊多莉5編輯ppt多能干細(xì)胞多向分化圖
橫向分化亞全能干細(xì)胞?6編輯ppt多能干細(xì)胞多向分化圖腫瘤的異質(zhì)性—腫瘤干細(xì)胞Reya,T.,etal.Nature.2001.414.105-1117編輯ppt腫瘤的異質(zhì)性—腫瘤干細(xì)胞Reya,T.,etal.Nat腫瘤干細(xì)胞的起源由正常干細(xì)胞經(jīng)多基因多步驟突變累積而來由骨髓來源的干細(xì)胞與基因發(fā)生改變的組織細(xì)胞融合而來由基因發(fā)生改變已分化的細(xì)胞逆轉(zhuǎn)化而來8編輯ppt腫瘤干細(xì)胞的起源由正常干細(xì)胞經(jīng)多基因多步驟突變累積而來8編輯CancerstemcellsshouldbethetherapytargetReya,T.,etal.Nature.2001.414.105-1119編輯pptCancerstemcellsshouldbeth腫瘤干細(xì)胞的特性維持腫瘤生長(zhǎng)的基礎(chǔ)具有自我更新和多向分化的能力腫瘤組織中含量極低對(duì)常用的治療方法耐藥:如化療、放療、分子靶向治療。免疫治療如何?10編輯ppt腫瘤干細(xì)胞的特性維持腫瘤生長(zhǎng)的基礎(chǔ)10編輯pptABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在腫瘤干細(xì)胞多藥耐藥中的作用ABC轉(zhuǎn)運(yùn)子示意圖(通過水解ATP將多種化療藥物泵出細(xì)胞外)
11編輯pptABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在腫瘤干細(xì)胞多藥耐藥中的作用ABC轉(zhuǎn)運(yùn)子示意圖腫瘤干細(xì)胞的可變性易于轉(zhuǎn)化為間質(zhì)樣細(xì)胞,表達(dá)許多成纖維細(xì)胞的特性非腫瘤干細(xì)胞可通過EMT轉(zhuǎn)變?yōu)槟[瘤干細(xì)胞12編輯ppt腫瘤干細(xì)胞的可變性易于轉(zhuǎn)化為間質(zhì)樣細(xì)胞,表達(dá)許多成纖維細(xì)胞的EMT-表皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化
MET-間質(zhì)細(xì)胞向表皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化13編輯pptEMT-表皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化
MET-間質(zhì)細(xì)胞向表皮細(xì)胞轉(zhuǎn)腫瘤干細(xì)胞的間質(zhì)細(xì)胞學(xué)特性EMT(表皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化)是腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的主要機(jī)制之一,腫瘤干細(xì)胞易于侵襲和轉(zhuǎn)移。多個(gè)實(shí)驗(yàn)證實(shí)腫瘤干細(xì)胞具有間質(zhì)細(xì)胞的生物學(xué)特性。乳腺上皮細(xì)胞系通過EMT可產(chǎn)生乳腺癌干細(xì)胞。14編輯ppt腫瘤干細(xì)胞的間質(zhì)細(xì)胞學(xué)特性EMT(表皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化)是腫瘤干細(xì)胞的表面分子標(biāo)記CD44:乳腺癌,頭頸部鱗癌,胰腺癌,肺癌,卵巢癌,前列腺癌,大腸癌
CD133:腦膠質(zhì)瘤,大腸癌,胰腺癌,肺癌,肝癌,惡性黑色素瘤,卵巢癌CD90:肝癌,肺癌CD24:胰腺癌陽(yáng)性,乳腺癌陰性CD117:卵巢癌CD278:惡性黑色素瘤15編輯ppt腫瘤干細(xì)胞的表面分子標(biāo)記CD44:乳腺癌,頭頸部鱗癌,胰腺癌腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)記與預(yù)后CD44:頭頸部鱗癌的預(yù)后不良標(biāo)記。乳腺癌中12個(gè)研究中的898例meta分析,CD44為預(yù)后不良的標(biāo)記。大腸癌中存在爭(zhēng)議。CD133:腦膠質(zhì)瘤高表達(dá)預(yù)后差。大腸癌高表達(dá)預(yù)后差,肺癌有爭(zhēng)議。外周血CD133mRNA的表達(dá)水平與預(yù)后相關(guān)(JClinOncol,201129(12):1547-55).
16編輯ppt腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)記與預(yù)后CD44:頭頸部鱗癌的預(yù)后不良標(biāo)記。腫瘤干細(xì)胞高表達(dá)胚胎干細(xì)胞相關(guān)基因Oct4Sox2NANOGKlfBmi1C-Myc17編輯ppt腫瘤干細(xì)胞高表達(dá)胚胎干細(xì)胞相關(guān)基因Oct417編輯ppt胚胎干細(xì)胞基因與腫瘤預(yù)后的關(guān)系Oct4:肺癌及乳腺癌中高表達(dá)分化差,預(yù)后差Sox2:口腔鱗癌、食管癌高表達(dá)預(yù)后差,而肺鱗癌中高表達(dá)預(yù)后良好的指標(biāo)。NANOG:口腔鱗癌中高表達(dá)預(yù)后差,大腸癌中的表達(dá)與預(yù)后無(wú)關(guān)。c-Myc:與多種腫瘤的預(yù)后不良相關(guān)。18編輯ppt胚胎干細(xì)胞基因與腫瘤預(yù)后的關(guān)系Oct4:肺癌及乳腺癌中高表達(dá)EMT相關(guān)基因與腫瘤的預(yù)后的關(guān)系E-cadherinN-cadherinVimentin盡管存在爭(zhēng)議,一些文章支持與腫瘤的預(yù)后相關(guān)19編輯pptEMT相關(guān)基因與腫瘤的預(yù)后的關(guān)系E-cadherin19編輯腫瘤干細(xì)胞其它功能基因與預(yù)后ALDH1(乙醛脫氫酶1):ALDEFLUOR的試劑來分選ALDH-1陽(yáng)性細(xì)胞。其表達(dá)與多種腫瘤的預(yù)后明顯相關(guān)。ABC轉(zhuǎn)運(yùn)子家族蛋白:MDR1,ABCG2,ABCB5等,其功能與SP細(xì)胞相關(guān)。其表達(dá)于預(yù)后的關(guān)系不明確。20編輯ppt腫瘤干細(xì)胞其它功能基因與預(yù)后20編輯ppt腫瘤干細(xì)胞是否存在的爭(zhēng)議正常組織的干細(xì)胞所占比例很低,而某些腫瘤含有很高比例的腫瘤干細(xì)胞。非腫瘤干細(xì)胞很容易通過EMT轉(zhuǎn)變?yōu)槟[瘤干細(xì)胞。21編輯ppt腫瘤干細(xì)胞是否存在的爭(zhēng)議正常組織的干細(xì)胞所占比例很低,而某些免疫標(biāo)記技術(shù)22編輯ppt免疫標(biāo)記技術(shù)22編輯ppt抗原抗體反應(yīng)23編輯ppt抗原抗體反應(yīng)23編輯ppt免疫組化技術(shù)基本原理常用酶標(biāo)抗體間接法24編輯ppt免疫組化技術(shù)基本原理24編輯ppt免疫組化的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn):特異性敏感性定位性缺點(diǎn):假陽(yáng)性率高設(shè)計(jì)好對(duì)照是關(guān)鍵:陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、自身對(duì)照25編輯ppt免疫組化的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn):特異性敏感性定位性25編輯ppt26編輯ppt26編輯ppt免疫熒光基本原理27編輯ppt免疫熒光基本原理27編輯ppt28編輯ppt28編輯ppt流式細(xì)胞儀的工作原理29編輯ppt流式細(xì)胞儀的工作原理29編輯ppt流式細(xì)胞儀30編輯ppt流式細(xì)胞儀30編輯ppt流式細(xì)胞儀的應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)腫瘤些免疫學(xué)血液學(xué)藥物學(xué)31編輯ppt流式細(xì)胞儀的應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)31編輯ppt流式細(xì)胞結(jié)果分析(散點(diǎn)圖)32編輯ppt流式細(xì)胞結(jié)果分析(散點(diǎn)圖)32編輯ppt33編輯ppt33編輯ppt流式細(xì)胞分析34編輯ppt流式細(xì)胞分析34編輯ppt肺癌干細(xì)胞的分離鑒定
35編輯ppt肺癌干細(xì)胞的分離鑒定35編輯pptTUMORSAMPLEDIGESTION:-CollagenaseI37oC-2hours-Washing
SINGLECELLSUSPENSIONCULTURING:Serumfreemedium原代肺癌細(xì)胞培養(yǎng)36編輯pptTUMORSAMPLEDIGESTION:SINGLEC原代培養(yǎng)建立的肺癌細(xì)胞系
Wehaveestablished5squamouscarcinoma(B),4adenocarcinoma(D),1largecelllungcancer(C),1smallcelllungcancer(A),and1lungcarcinoidcelllines.37編輯ppt原代培養(yǎng)建立的肺癌細(xì)胞系37編輯ppt原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞在NOD/SCID小鼠能形成腫瘤38編輯ppt原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞在NOD/SCID小鼠能形成腫瘤38編輯原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞中含有一小群CD44強(qiáng)陽(yáng)性的細(xì)胞Smallcelllungcancer(LC004),largecelllungcancer(LC006)havecd44strongpositivepopulationcells.39編輯ppt原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞中含有一小群CD44強(qiáng)陽(yáng)性的細(xì)胞39編CD44強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞具有較強(qiáng)的增值能力
Whenseeded500cells/well,therewasnoobviousdifferencebetweentheCD44++andCD44+/-cells(figureA),butwhenseeded150cells/well,CD44++cellsmuchstrongerproliferativeability(figureB).40編輯pptCD44強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞具有較強(qiáng)的增值能力40編輯pptCD44++細(xì)胞具有較強(qiáng)的克隆形成能力A:largecelllungcancercellline(LC006)B:smallcelllinecellline(LC004)41編輯pptCD44++細(xì)胞具有較強(qiáng)的克隆形成能力41編輯ppt只有CD44++的細(xì)胞可以形成holocloneWhensinglecellseededinto96wellplate,onlyCD44++CD+cellscouldformholoclone,100CD44++CD90+cellscouldformabout1-3holoclones.42編輯ppt只有CD44++的細(xì)胞可以形成holoclone42編輯pp只有CD44++的細(xì)胞在超低粘附的培養(yǎng)板中形成細(xì)胞球A&C:cellspheresformedbyCD44++cellsofLC-006andLC021.B&D:
no
cellsphereformedbyCD44++cellsofLC-006andLC021.43編輯ppt只有CD44++的細(xì)胞在超低粘附的培養(yǎng)板中形成細(xì)胞球43編輯部分原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞表達(dá)CD90A:watchedbybluefluorescentlight,B:watchedbyredfluorescentlight,C:watchedbywhitelight,D:overlapofAandB44編輯ppt部分原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞表達(dá)CD90A:watchedby肺癌細(xì)胞表達(dá)CD44++CD90+4maintypesoflungcancer,adenocarcinoma(LC007),squamouscarcinoma(LC021),smallcelllungcancer(LC004)andlargecelllungcancer(LC006)allhadtheCD44++CD90+smallpopulationcells.45編輯ppt肺癌細(xì)胞表達(dá)CD44++CD90+45編輯ppt大細(xì)胞肺癌中的CD44++CD90+和CD44++CD90-細(xì)胞具有間質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)A:CD44++CD90+.B:CD44++CD90-C:CD44+CD90+D:CD44+CD90-46編輯ppt大細(xì)胞肺癌中的CD44++CD90+和CD44++CD9大細(xì)胞肺癌中的CD44++CD90+細(xì)胞高表達(dá)胚胎干細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞相關(guān)的基因47編輯ppt大細(xì)胞肺癌中的CD44++CD90+細(xì)胞高表達(dá)胚胎干細(xì)胞和間鱗癌細(xì)胞CD44++CD90+和CD44++CD90-具有間質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)A:LC021-P3beforesorting.B:CD44++CD90+.C:CD44++CD90-.D:CD44+CD90+.E:CD44+CD90-.48編輯ppt鱗癌細(xì)胞CD44++CD90+和CD44++CD90-具CD44++CD90+的鱗癌細(xì)胞具有最強(qiáng)的細(xì)胞球形成能力和X線抵抗能力
49編輯pptCD44++CD90+的鱗癌細(xì)胞具有最強(qiáng)的細(xì)胞球形成能力和X
CD44++CD90+的大細(xì)胞肺癌具有最強(qiáng)的細(xì)胞球形成能力和X線抵抗能力50編輯pptCD44++CD90+的大細(xì)胞肺癌具有最強(qiáng)的細(xì)胞球形成能力TGF-β1對(duì)腫瘤細(xì)胞的作用
抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。使腫瘤細(xì)胞惡性程度增強(qiáng)。誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生EMT。51編輯pptTGF-β1對(duì)腫瘤細(xì)胞的作用抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。51編輯
TGF-β1對(duì)CD44++CD90+大細(xì)胞肺癌抑制能力最弱52編輯pptTGF-β1對(duì)CD44++CD90+大細(xì)胞肺癌抑制能TGF-β1誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞產(chǎn)生EMT53編輯pptTGF-β1誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞產(chǎn)生EMT53編輯pptTGF-β1增加CD44++CD90+大細(xì)胞肺癌細(xì)胞的比例54編輯pptTGF-β1增加CD44++CD90+大細(xì)胞肺癌細(xì)胞的比例5TGF-β1處理過的CD44++CD90+同樣具有最強(qiáng)的X線照射抵抗能力
55編輯pptTGF-β1處理過的CD44++CD90+同樣具有最強(qiáng)的XlungcancercellscouldpartlyreturnoriginalcharactersafterretreatingTGF-β156編輯pptlungcancercellscouldpartlyTGF-β1對(duì)CD44++CD90+的鱗癌細(xì)胞抑制能力最弱57編輯pptTGF-β1對(duì)CD44++CD90+的鱗癌細(xì)胞抑制能力TGF-β1選擇性地增加CD44++CD90+鱗癌細(xì)胞的比例58編輯pptTGF-β1選擇性地增加CD44++CD90+鱗癌細(xì)胞Tumorcellsformedby“Tip-SP”cellsinNOD/SCIDmicemaintainstableSPratio59編輯pptTumorcellsformedby“Tip-SP”60編輯ppt60編輯ppt腫瘤干細(xì)胞高全立河南省腫瘤醫(yī)院生物治療科61編輯ppt腫瘤干細(xì)胞1編輯ppt干細(xì)胞生物學(xué)特性干細(xì)胞有自我復(fù)制更新能力:通常情況下只有干細(xì)胞具有分裂產(chǎn)生子代干細(xì)胞的能力干細(xì)胞有定向分化為功能細(xì)胞能力已經(jīng)定向分化的細(xì)胞一般情況下不能逆轉(zhuǎn)化為干細(xì)胞62編輯ppt干細(xì)胞生物學(xué)特性2編輯ppt干細(xì)胞分類根據(jù)來源分類
胚胎干細(xì)胞成體干細(xì)胞根據(jù)分化潛能分類:全能干細(xì)胞多能干細(xì)胞單能干細(xì)胞63編輯ppt干細(xì)胞分類根據(jù)來源分類3編輯ppt胚胎干細(xì)胞培育過程64編輯ppt胚胎干細(xì)胞培育過程4編輯ppt干細(xì)胞的再編程核移植如克隆羊多莉細(xì)胞融合基因轉(zhuǎn)染:iPS
OCT4,SOX2,KLF4,c-MYC小分子化合物誘導(dǎo):65編輯ppt干細(xì)胞的再編程核移植如克隆羊多莉5編輯ppt多能干細(xì)胞多向分化圖
橫向分化亞全能干細(xì)胞?66編輯ppt多能干細(xì)胞多向分化圖腫瘤的異質(zhì)性—腫瘤干細(xì)胞Reya,T.,etal.Nature.2001.414.105-11167編輯ppt腫瘤的異質(zhì)性—腫瘤干細(xì)胞Reya,T.,etal.Nat腫瘤干細(xì)胞的起源由正常干細(xì)胞經(jīng)多基因多步驟突變累積而來由骨髓來源的干細(xì)胞與基因發(fā)生改變的組織細(xì)胞融合而來由基因發(fā)生改變已分化的細(xì)胞逆轉(zhuǎn)化而來68編輯ppt腫瘤干細(xì)胞的起源由正常干細(xì)胞經(jīng)多基因多步驟突變累積而來8編輯CancerstemcellsshouldbethetherapytargetReya,T.,etal.Nature.2001.414.105-11169編輯pptCancerstemcellsshouldbeth腫瘤干細(xì)胞的特性維持腫瘤生長(zhǎng)的基礎(chǔ)具有自我更新和多向分化的能力腫瘤組織中含量極低對(duì)常用的治療方法耐藥:如化療、放療、分子靶向治療。免疫治療如何?70編輯ppt腫瘤干細(xì)胞的特性維持腫瘤生長(zhǎng)的基礎(chǔ)10編輯pptABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在腫瘤干細(xì)胞多藥耐藥中的作用ABC轉(zhuǎn)運(yùn)子示意圖(通過水解ATP將多種化療藥物泵出細(xì)胞外)
71編輯pptABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在腫瘤干細(xì)胞多藥耐藥中的作用ABC轉(zhuǎn)運(yùn)子示意圖腫瘤干細(xì)胞的可變性易于轉(zhuǎn)化為間質(zhì)樣細(xì)胞,表達(dá)許多成纖維細(xì)胞的特性非腫瘤干細(xì)胞可通過EMT轉(zhuǎn)變?yōu)槟[瘤干細(xì)胞72編輯ppt腫瘤干細(xì)胞的可變性易于轉(zhuǎn)化為間質(zhì)樣細(xì)胞,表達(dá)許多成纖維細(xì)胞的EMT-表皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化
MET-間質(zhì)細(xì)胞向表皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化73編輯pptEMT-表皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化
MET-間質(zhì)細(xì)胞向表皮細(xì)胞轉(zhuǎn)腫瘤干細(xì)胞的間質(zhì)細(xì)胞學(xué)特性EMT(表皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化)是腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的主要機(jī)制之一,腫瘤干細(xì)胞易于侵襲和轉(zhuǎn)移。多個(gè)實(shí)驗(yàn)證實(shí)腫瘤干細(xì)胞具有間質(zhì)細(xì)胞的生物學(xué)特性。乳腺上皮細(xì)胞系通過EMT可產(chǎn)生乳腺癌干細(xì)胞。74編輯ppt腫瘤干細(xì)胞的間質(zhì)細(xì)胞學(xué)特性EMT(表皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化)是腫瘤干細(xì)胞的表面分子標(biāo)記CD44:乳腺癌,頭頸部鱗癌,胰腺癌,肺癌,卵巢癌,前列腺癌,大腸癌
CD133:腦膠質(zhì)瘤,大腸癌,胰腺癌,肺癌,肝癌,惡性黑色素瘤,卵巢癌CD90:肝癌,肺癌CD24:胰腺癌陽(yáng)性,乳腺癌陰性CD117:卵巢癌CD278:惡性黑色素瘤75編輯ppt腫瘤干細(xì)胞的表面分子標(biāo)記CD44:乳腺癌,頭頸部鱗癌,胰腺癌腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)記與預(yù)后CD44:頭頸部鱗癌的預(yù)后不良標(biāo)記。乳腺癌中12個(gè)研究中的898例meta分析,CD44為預(yù)后不良的標(biāo)記。大腸癌中存在爭(zhēng)議。CD133:腦膠質(zhì)瘤高表達(dá)預(yù)后差。大腸癌高表達(dá)預(yù)后差,肺癌有爭(zhēng)議。外周血CD133mRNA的表達(dá)水平與預(yù)后相關(guān)(JClinOncol,201129(12):1547-55).
76編輯ppt腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)記與預(yù)后CD44:頭頸部鱗癌的預(yù)后不良標(biāo)記。腫瘤干細(xì)胞高表達(dá)胚胎干細(xì)胞相關(guān)基因Oct4Sox2NANOGKlfBmi1C-Myc77編輯ppt腫瘤干細(xì)胞高表達(dá)胚胎干細(xì)胞相關(guān)基因Oct417編輯ppt胚胎干細(xì)胞基因與腫瘤預(yù)后的關(guān)系Oct4:肺癌及乳腺癌中高表達(dá)分化差,預(yù)后差Sox2:口腔鱗癌、食管癌高表達(dá)預(yù)后差,而肺鱗癌中高表達(dá)預(yù)后良好的指標(biāo)。NANOG:口腔鱗癌中高表達(dá)預(yù)后差,大腸癌中的表達(dá)與預(yù)后無(wú)關(guān)。c-Myc:與多種腫瘤的預(yù)后不良相關(guān)。78編輯ppt胚胎干細(xì)胞基因與腫瘤預(yù)后的關(guān)系Oct4:肺癌及乳腺癌中高表達(dá)EMT相關(guān)基因與腫瘤的預(yù)后的關(guān)系E-cadherinN-cadherinVimentin盡管存在爭(zhēng)議,一些文章支持與腫瘤的預(yù)后相關(guān)79編輯pptEMT相關(guān)基因與腫瘤的預(yù)后的關(guān)系E-cadherin19編輯腫瘤干細(xì)胞其它功能基因與預(yù)后ALDH1(乙醛脫氫酶1):ALDEFLUOR的試劑來分選ALDH-1陽(yáng)性細(xì)胞。其表達(dá)與多種腫瘤的預(yù)后明顯相關(guān)。ABC轉(zhuǎn)運(yùn)子家族蛋白:MDR1,ABCG2,ABCB5等,其功能與SP細(xì)胞相關(guān)。其表達(dá)于預(yù)后的關(guān)系不明確。80編輯ppt腫瘤干細(xì)胞其它功能基因與預(yù)后20編輯ppt腫瘤干細(xì)胞是否存在的爭(zhēng)議正常組織的干細(xì)胞所占比例很低,而某些腫瘤含有很高比例的腫瘤干細(xì)胞。非腫瘤干細(xì)胞很容易通過EMT轉(zhuǎn)變?yōu)槟[瘤干細(xì)胞。81編輯ppt腫瘤干細(xì)胞是否存在的爭(zhēng)議正常組織的干細(xì)胞所占比例很低,而某些免疫標(biāo)記技術(shù)82編輯ppt免疫標(biāo)記技術(shù)22編輯ppt抗原抗體反應(yīng)83編輯ppt抗原抗體反應(yīng)23編輯ppt免疫組化技術(shù)基本原理常用酶標(biāo)抗體間接法84編輯ppt免疫組化技術(shù)基本原理24編輯ppt免疫組化的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn):特異性敏感性定位性缺點(diǎn):假陽(yáng)性率高設(shè)計(jì)好對(duì)照是關(guān)鍵:陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、自身對(duì)照85編輯ppt免疫組化的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn):特異性敏感性定位性25編輯ppt86編輯ppt26編輯ppt免疫熒光基本原理87編輯ppt免疫熒光基本原理27編輯ppt88編輯ppt28編輯ppt流式細(xì)胞儀的工作原理89編輯ppt流式細(xì)胞儀的工作原理29編輯ppt流式細(xì)胞儀90編輯ppt流式細(xì)胞儀30編輯ppt流式細(xì)胞儀的應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)腫瘤些免疫學(xué)血液學(xué)藥物學(xué)91編輯ppt流式細(xì)胞儀的應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)31編輯ppt流式細(xì)胞結(jié)果分析(散點(diǎn)圖)92編輯ppt流式細(xì)胞結(jié)果分析(散點(diǎn)圖)32編輯ppt93編輯ppt33編輯ppt流式細(xì)胞分析94編輯ppt流式細(xì)胞分析34編輯ppt肺癌干細(xì)胞的分離鑒定
95編輯ppt肺癌干細(xì)胞的分離鑒定35編輯pptTUMORSAMPLEDIGESTION:-CollagenaseI37oC-2hours-Washing
SINGLECELLSUSPENSIONCULTURING:Serumfreemedium原代肺癌細(xì)胞培養(yǎng)96編輯pptTUMORSAMPLEDIGESTION:SINGLEC原代培養(yǎng)建立的肺癌細(xì)胞系
Wehaveestablished5squamouscarcinoma(B),4adenocarcinoma(D),1largecelllungcancer(C),1smallcelllungcancer(A),and1lungcarcinoidcelllines.97編輯ppt原代培養(yǎng)建立的肺癌細(xì)胞系37編輯ppt原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞在NOD/SCID小鼠能形成腫瘤98編輯ppt原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞在NOD/SCID小鼠能形成腫瘤38編輯原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞中含有一小群CD44強(qiáng)陽(yáng)性的細(xì)胞Smallcelllungcancer(LC004),largecelllungcancer(LC006)havecd44strongpositivepopulationcells.99編輯ppt原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞中含有一小群CD44強(qiáng)陽(yáng)性的細(xì)胞39編CD44強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞具有較強(qiáng)的增值能力
Whenseeded500cells/well,therewasnoobviousdifferencebetweentheCD44++andCD44+/-cells(figureA),butwhenseeded150cells/well,CD44++cellsmuchstrongerproliferativeability(figureB).100編輯pptCD44強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞具有較強(qiáng)的增值能力40編輯pptCD44++細(xì)胞具有較強(qiáng)的克隆形成能力A:largecelllungcancercellline(LC006)B:smallcelllinecellline(LC004)101編輯pptCD44++細(xì)胞具有較強(qiáng)的克隆形成能力41編輯ppt只有CD44++的細(xì)胞可以形成holocloneWhensinglecellseededinto96wellplate,onlyCD44++CD+cellscouldformholoclone,100CD44++CD90+cellscouldformabout1-3holoclones.102編輯ppt只有CD44++的細(xì)胞可以形成holoclone42編輯pp只有CD44++的細(xì)胞在超低粘附的培養(yǎng)板中形成細(xì)胞球A&C:cellspheresformedbyCD44++cellsofLC-006andLC021.B&D:
no
cellsphereformedbyCD44++cellsofLC-006andLC021.103編輯ppt只有CD44++的細(xì)胞在超低粘附的培養(yǎng)板中形成細(xì)胞球43編輯部分原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞表達(dá)CD90A:watchedbybluefluorescentlight,B:watchedbyredfluorescentlight,C:watchedbywhitelight,D:overlapofAandB104編輯ppt部分原代培養(yǎng)的肺癌細(xì)胞表達(dá)CD90A:watchedby肺癌細(xì)胞表達(dá)CD44++CD90+4maintypesoflungcancer,adenocarcinoma(LC007),squamouscarcinoma(LC021),smallcelllungcancer(LC004)andlargecelllungcancer(LC006)allhadtheCD44++CD90+smallpopulationcells.105編輯ppt肺癌細(xì)胞表達(dá)CD44++CD90+45編輯ppt大細(xì)胞肺癌中的CD44++CD90+和CD44++CD90-細(xì)胞具有間質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)A:CD44++CD90+.B:CD44++CD90-C:CD44+CD90+D:CD44+CD
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