凝集反應(yīng)試驗(yàn)

關(guān)于凝集反應(yīng)試驗(yàn)第一頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日凝集反應(yīng)

（agglutination）是指顆粒性抗原，例如細(xì)菌、紅細(xì)胞、螺旋體、細(xì)胞性抗原，或可溶性抗原（或抗體）與載體顆粒結(jié)合成致敏顆粒后，與相應(yīng)的抗體（或抗原）在適量的電解質(zhì)存在的條件下，經(jīng)一定時(shí)間后凝聚成肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象。第二頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日凝集反應(yīng)的特點(diǎn)顆粒性抗原致敏顆粒（可溶性抗原或抗體與載體顆粒結(jié)合）電解質(zhì)的存在肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象第三頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日凝集反應(yīng)的發(fā)生分兩階段：①抗原抗體的特異結(jié)合②出現(xiàn)可見(jiàn)的顆粒凝集第四頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日凝集反應(yīng)的類(lèi)型直接凝集試驗(yàn)玻片凝集試驗(yàn)：ABO血型試管凝集試驗(yàn)：外斐試驗(yàn)，肥達(dá)試驗(yàn)間接凝集試驗(yàn)正向間接凝集試驗(yàn)反向間接凝集試驗(yàn)間接凝集抑制試驗(yàn)協(xié)同凝集試驗(yàn)間接血凝試驗(yàn)?zāi)z乳凝集試驗(yàn)明膠凝集試驗(yàn)第五頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日根據(jù)凝集反應(yīng)中抗原的性質(zhì)，反應(yīng)的方式分為：①直接凝集反應(yīng)②間接凝集反應(yīng)第六頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日第七頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日直接凝集反應(yīng)（directagglutination）

細(xì)菌、螺旋體和紅細(xì)胞等顆?？乖?，在適當(dāng)電解質(zhì)參與下可直接與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)凝集，稱(chēng)為直接凝集反應(yīng)。參加反應(yīng)的顆粒性抗原稱(chēng)為凝集原（agglutinogen），抗體稱(chēng)為凝集素（agglutinin）。第八頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日玻片法：（定性）細(xì)菌鑒定ABO血型的鑒定試管法：（半定量）肥達(dá)試驗(yàn)（Widaltest）---傷寒外斐試驗(yàn)（Weil-Felixtest）---立克次體交叉配血試驗(yàn)第九頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日間接凝集反應(yīng)

（indirectagglutination）將可溶性抗原（或抗體）先吸附或偶聯(lián)與免疫無(wú)關(guān)大小適當(dāng)?shù)念w粒性載體的表面，使之成為致敏載體顆粒，然后與相應(yīng)抗體（或抗原）作用，在適宜的電解質(zhì)存在的條件下，出現(xiàn)特異性凝集現(xiàn)象，稱(chēng)間接凝集反應(yīng)（indirectagglutination）或被動(dòng)凝集反應(yīng)（passiveagglutination）。其敏感度高于直接凝集反應(yīng)和沉淀反應(yīng)。第十頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日常用載體：RBC聚苯乙烯膠乳（polystyrenelatex）明膠顆粒活性炭皂土（bentonite）火棉膠

第十一頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日間接凝集反應(yīng)分類(lèi)依據(jù)根據(jù)致敏載體用的是抗原（正向）或抗體（反向）根據(jù)載體（RBC，膠乳，明膠）根據(jù)凝集反應(yīng)的方式（間接凝集試驗(yàn)，間接凝集抑制試驗(yàn)，協(xié)同凝集試驗(yàn)）第十二頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日間接反應(yīng)的常見(jiàn)類(lèi)型間接凝集試驗(yàn)間接血凝試驗(yàn)?zāi)z乳凝集試驗(yàn)明膠凝集試驗(yàn)間接凝集反應(yīng)的應(yīng)用第十三頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日1、（正向）間接凝集試驗(yàn)第十四頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日2反向間接凝集試驗(yàn)第十五頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日3、間接凝集抑制試驗(yàn)第十六頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日本次實(shí)驗(yàn)內(nèi)容一、第一次加強(qiáng)免疫二、ABO血型鑒定第十七頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日目的與要求掌握凝集反應(yīng)的原理與類(lèi)型掌握玻片凝集法操作與結(jié)果判斷熟悉ABO血型鑒定的原理與操作第十八頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日玻片凝集法-ABO血型鑒定試驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^(guò)標(biāo)準(zhǔn)血清抗體鑒定紅細(xì)胞上ABO血型系統(tǒng)抗原，掌握鹽水介質(zhì)法進(jìn)行ABO血型系統(tǒng)正定型的基本操作方法和結(jié)果判斷。

第十九頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)原理根據(jù)IgM類(lèi)特異性血型抗體與紅細(xì)胞上特異性抗原結(jié)合能夠出現(xiàn)凝集反應(yīng)的原理，用已知IgM類(lèi)特異性標(biāo)準(zhǔn)抗血清與被檢紅細(xì)胞在鹽水介質(zhì)中反應(yīng)（室溫），若出現(xiàn)凝集想象，表明被檢紅細(xì)胞膜上有與血型抗體相對(duì)應(yīng)的抗原，從而判斷和鑒定被檢者的血型。第二十頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)材料與方法試劑：抗A血清，抗B血清材料：玻片，采血針，消毒干棉球，酒精棉球等第二十一頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)方法與步驟1、標(biāo)記玻片：取玻片一張，一分為二，分別標(biāo)記為抗A，抗B。2、采血：用酒精棉球消毒被檢者左手無(wú)名指或中指內(nèi)側(cè)，用采血針刺破皮膚，用干棉球擦去第一滴血，稍加擠壓，使其流出第二滴血，裝入鹽水試管，搖勻，即成血細(xì)胞懸液。3、加抗血清：滴加抗A，抗B血清于玻片標(biāo)記處、4、加RBC：在抗A，抗B血清中滴加RBC各一滴。5、混勻：前后左右搖動(dòng)，觀察有無(wú)血細(xì)胞凝集出現(xiàn)。6、結(jié)果：記錄受檢者紅細(xì)胞凝集情況及血型鑒定結(jié)果。第二十二頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日第二十三頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日ABO血型結(jié)果判斷抗B抗A血型-++-++--第二十四頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日間接乳凝試驗(yàn)檢測(cè)類(lèi)風(fēng)濕因子間接凝集反應(yīng)也稱(chēng)為被動(dòng)凝集反應(yīng)，是將可溶性抗原或抗體吸附于載體顆粒表面、再與相應(yīng)的抗體或抗原結(jié)合，出現(xiàn)凝集現(xiàn)象。間接乳凝試驗(yàn)檢測(cè)類(lèi)風(fēng)濕因子。常用類(lèi)風(fēng)濕因子檢測(cè)。第二十五頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日【操作方法】1、輕輕混勻膠乳試劑2、核對(duì)陰、陽(yáng)性對(duì)照3、在反應(yīng)板孔中加1滴未稀釋血清20ul4、然后加1滴膠乳試劑在血清中（陰陽(yáng)性對(duì)照同此法）5、輕輕搖動(dòng)其充分混勻2分鐘內(nèi)觀察結(jié)果。第二十六頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)結(jié)果二、ABO血型鑒定結(jié)果：1、A型血抗A試劑凝集為＋。2、B型血抗B試劑凝集為＋。3、O型血抗A、B試劑不凝集為－。4、AB型血抗A、B試劑都凝集為＋。第二十七頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日三、RF測(cè)定結(jié)果1、有凝集出現(xiàn)RF為陽(yáng)性。2、無(wú)凝集出現(xiàn)RF為陰性。第二十八頁(yè)，共三十頁(yè)，2022年，8月28日注意事項(xiàng)1、加強(qiáng)無(wú)菌操作、安全防范意識(shí)。2、如一次采血要求采集幾個(gè)標(biāo)本時(shí)，應(yīng)按一下順序采血：血培養(yǎng)管、無(wú)抗凝劑及添加劑管，凝血現(xiàn)象，有抗凝劑（添加劑）管。3、在做配型試驗(yàn)時(shí)，如發(fā)現(xiàn)有不配合現(xiàn)象，則取受檢者血清，用已知A或B血型