2022卵巢上皮性癌組織中l(wèi)nc-MyD88的表達(dá)及其與患者預(yù)后的關(guān)系

2022卵巢上皮性癌組織中Inc-MyD88的表達(dá)及其與患者預(yù)后的關(guān)系(全文)摘要目的探討長鏈非編碼RNA-髓樣細(xì)胞分化因子88(Inc-MyD88)在卵巢上皮性癌(卵巢癌)組織中的表達(dá)及其與患者預(yù)后的關(guān)系。方法選擇2016年1月至2019年1月在四川省腫瘤醫(yī)院接受初次腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)且術(shù)后輔以伯類藥物+紫杉醇方案化療6~8個(gè)療程的卵巢癌患者共70例，收集其新鮮癌組織標(biāo)本;另收集同期28例因婦科良性疾病行手術(shù)治療患者的新鮮正常卵巢組織標(biāo)本作為對(duì)照。采用逆轉(zhuǎn)錄(RD-實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)技術(shù)檢測卵巢癌和正常卵巢組織中Inc-MyD88、髓樣細(xì)胞分化因子88(MyD88)mRNA 的表達(dá)，并采用Pearson相關(guān)法分析卵巢癌組織中Inc-MyD88與MyD88mRNA表達(dá)的相關(guān)性;分析Inc-MyD88表達(dá)與卵巢癌患者臨床病理特征的關(guān)系;采用Kaplan-Meier法計(jì)算卵巢癌患者的生存率，單因素生存分析采用log-rank檢驗(yàn)，多因素生存分析采用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型。結(jié)果⑴RT-qPCR技術(shù)檢測顯示，卵巢癌組織中Inc-MyD88>MyD88mRNA的中位表達(dá)水平分別為0.009(0.000~0.049)、0.001(0.000~0.006),均顯著高于正常卵巢組織［分別為0.000(0.000~0.000)0.000(0.000~0.001);P均＜0.01]Pearson相關(guān)法分析顯示，卵巢癌組織中Inc-MyD88與MyD88mRNA的表達(dá)水平呈顯著正相關(guān)(r2=0.6W,P＜0.01)。⑵有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、化療耐藥的卵巢癌患者的Inc-MyD88高表達(dá)率(分別為71%、64%、70%)顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、化療耐藥者(分別為41%、40%、35%;P均＜0.05);而不同年齡、病理類型、病理分級(jí)、手術(shù)病理分期、術(shù)后殘留灶大小以及腹水有無癌細(xì)胞的卵巢癌患者的Inc-MyD88高表達(dá)率分別比較，差異則均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＞0.05)⑶單因素分析顯示,手術(shù)病理分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、術(shù)后殘留灶大小以及Inc-MyD88和MyD88mRNA高表達(dá)均為顯著影響卵巢癌患者無進(jìn)展生存時(shí)間PFS)和總生存時(shí)間(0S)的危險(xiǎn)因素(P均＜0.05),腹水有癌細(xì)胞為顯著影響卵巢癌患者PFS的危險(xiǎn)因素(%0.040);多因素分析顯示，手術(shù)病理分期以及Inc-MyD88和MyD88mRNA高表達(dá)均為影響卵巢癌患者PFS和OS的獨(dú)立因素(P均＜0.05),術(shù)后殘留灶大小為影響卵巢癌患者PFS的獨(dú)立因素(P=0.001)o結(jié)論卵巢癌組織中Inc-MyD88的表達(dá)水平顯著增高，且Inc-MyD88與MyD88mRNA表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系,皿0-1^。88可能參與乂丫口88基因表達(dá)的調(diào)控，從而影響卵麟患者的預(yù)后，有望作為預(yù)測卵巢癌不良預(yù)后的分子標(biāo)志物。、Inc-MyD88對(duì)卵巢癌MyD88基因表達(dá)的潛在調(diào)控作用近年來，對(duì)卵巢癌紫杉醇耐藥及其機(jī)制的研究不斷深入，但無論是何種機(jī)制，均與卵巢癌治療中的紫杉醇相關(guān)靶標(biāo)分子和信號(hào)通路有關(guān)口］。卵巢癌細(xì)胞通過激活TLR4/MyD88信號(hào)通路介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞逃避凋亡刺激并促進(jìn)細(xì)胞增殖，并增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移能力。基于本課題組的前期臨床和基礎(chǔ)研究，作為該信號(hào)通路重要的驅(qū)動(dòng)因子，MyD88高表達(dá)促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞的遷移和侵襲，抑制細(xì)胞凋亡，并與患者預(yù)后、免疫逃逸以及紫杉醇耐藥密切相關(guān)［8-9］o但是，卵巢癌中MyD88的轉(zhuǎn)錄表達(dá)調(diào)控機(jī)制尚不清楚，有待深入研究。生物信息學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，在同一染色體基因座中距蛋白質(zhì)編碼基因的側(cè)翼10kb之內(nèi)，存在具有順式調(diào)控該編碼基因潛在能力的IncRNA［7］。根據(jù)DNA元件百科全書(EncyclopediaofDNAElements,ENCODE)數(shù)據(jù)庫分析，Inc-MyD88位于MyD88蛋白編碼基因的上游，按照5:3,方向轉(zhuǎn)錄［7］。Inc-MyD88可能通過與MyD88基因啟動(dòng)子上游的順式元件——堿基CAAT盒子結(jié)合，調(diào)控MyD88基因的表達(dá)；另外，Inc-MyD88還可能與MyD88基因啟動(dòng)子和5'非翻譯區(qū)的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，調(diào)控MyD88基因表達(dá)。本研究結(jié)果顯示，MyD88mRNA高表達(dá)的卵巢癌患者中69%Inc-MyD88呈高表達(dá)，而正常卵巢組織幾乎不表達(dá)Inc-MyD88和MyD88mRNA,且卵巢癌組織中Inc-MyD88與MyD88mRNA的表達(dá)水平呈正相關(guān)，進(jìn)一步提示Inc-MyD88參與了MyD88基因表達(dá)的調(diào)控。在IncRNA參與調(diào)控癌基因或抑癌基因表達(dá)的各種復(fù)雜機(jī)制中，包括乙?；?、甲基化和泛素化在內(nèi)的組蛋白修飾可能是IncRNA與其相鄰蛋白質(zhì)編碼基因之間相互作用的重要調(diào)控機(jī)制［10-11］o在肝癌細(xì)胞中同樣證實(shí)，lnc~MyD88與MyD88mRNA的表達(dá)水平呈明顯正相關(guān)，且Inc-MyD88通過增加啟動(dòng)子區(qū)域組蛋白H3第27位賴氨酸乙酰化(histoneH3lysine27acetylation,H3K27Ac)富集修飾組蛋白調(diào)控MyD88的表達(dá)［7］。因此，Inc-MyD88對(duì)MyD88基因表達(dá)存在潛在調(diào)控作用，可能是卵巢癌組織中MyD88異常高表達(dá)的一個(gè)潛在因素。二、Inc-MyD88與卵巢癌不同臨床病理特征的關(guān)系IncRNA被認(rèn)為是一種重要的基因表達(dá)調(diào)控分子，參與多種實(shí)體腫瘤包括卵巢癌在內(nèi)的演變過程［12-13］o本研究分析了Inc-MyD88在卵巢癌組織中的表達(dá)及其與患者不同臨床病理特征的關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的卵巢癌患者相比，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的卵巢癌患者Inc-MyD88表達(dá)水平明顯增高，提示，Inc-MyD88與卵巢癌的侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。研究表明，過度表達(dá)或敲低Inc-MyD88表達(dá)可顯著影響肝癌細(xì)胞的增殖和凋亡能力。體外侵襲實(shí)驗(yàn)證明，過度表達(dá)Inc-MyD88明顯增強(qiáng)肝癌細(xì)胞的侵襲能力;相反，敲低Inc-MyD88表達(dá)后肝癌細(xì)胞的侵襲能力明顯下降［7］。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也同樣證明，Inc-MyD88過度表達(dá)明顯促進(jìn)腫瘤生長及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移［7］。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，Inc-Myd88通過表觀遺傳調(diào)控MyD88的表達(dá)，繼而激活核因子KB(nuclearfactor-KB,NF-KB)和磷酸酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(serine/threonrinekinase,Akt)信號(hào)通路，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移過程［5］。另一方面，本研究結(jié)果還提示，Inc-MyD88的表達(dá)與卵巢癌患者化療耐藥有關(guān)，分析其原因可能與Inc-MyD88通過調(diào)控MyD88mRNA的表達(dá)從而激活化療耐藥相關(guān)信號(hào)通路有關(guān)。綜上，本課題組將進(jìn)一步從分子'細(xì)胞、組織以及動(dòng)物水平探索Inc-MyD88調(diào)控MyD88表達(dá)介導(dǎo)卵巢癌轉(zhuǎn)移'增殖、化療耐藥的分子機(jī)制。三、Inc-MyD88與卵巢癌患者預(yù)后的關(guān)系卵巢癌細(xì)胞紫杉醇耐藥需要完整TLR4/MyD88信號(hào)通路的參與，阻斷TLR4/MyD88信號(hào)通路的任何一個(gè)環(huán)節(jié)即可能消除其介導(dǎo)的紫杉醇耐藥，從而改善卵巢癌患者的預(yù)后［8-9,14 本課題組的前期研究，將中藥提取物6-姜烯酚裝載到靶向MyD88陽性卵巢癌細(xì)胞的相變型納米粒遞藥系統(tǒng)，在超聲控釋下成功實(shí)現(xiàn)對(duì)靶腫瘤細(xì)胞定向釋藥，顯著增強(qiáng)紫杉醇對(duì)MyD88陽性卵巢癌裸鼠移植瘤生長的抑制作用，并延長裸鼠的生存時(shí)間［15］o本研究結(jié)果表明，lnc-MyD88高表達(dá)的卵巢癌患者的PFS和OS均較短，而Inc-MyD88低表達(dá)的卵巢癌患者呈現(xiàn)出較好的預(yù)后;Inc-MyD88高表達(dá)是影響卵巢癌患者PFS和OS的獨(dú)立因素。目前，已進(jìn)入根據(jù)卵巢癌特征性分子如MyD88表達(dá)進(jìn)行分型并開展深入研究'監(jiān)測和管理的新時(shí)代，應(yīng)充分重視卵巢癌分子分型、選擇靶向治療方案、優(yōu)化并規(guī)避化療耐藥。lnc-MyD88可能是影響MyD88表達(dá)的重要調(diào)控因子，其在卵巢癌組織中的表達(dá)與患者預(yù)后的關(guān)系密切，因此，有望成為新的腫瘤標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)。綜上所述，Inc-MyD88與鄰近的卵巢癌紫杉耐藥基因MyD88的表達(dá)呈正相關(guān)。Inc-MyD88高表達(dá)與卵巢癌侵襲、轉(zhuǎn)移和患者預(yù)后差密切相關(guān),將其納入卵巢癌紫杉醇耐藥、