生物醫(yī)學(xué)研究課題中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇和應(yīng)用1-課件

生物醫(yī)學(xué)研究課題中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇和應(yīng)用和應(yīng)用生物醫(yī)學(xué)研究課題中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇和應(yīng)用和應(yīng)用2前言任何科學(xué)研究、醫(yī)療實(shí)踐、生物制品的生產(chǎn)和檢定都離不開(kāi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)性、重復(fù)性，必須選擇標(biāo)準(zhǔn)化及與實(shí)驗(yàn)?zāi)康南噙m應(yīng)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。在某種意義上講，選擇適宜的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，是科學(xué)研究成功的關(guān)鍵。

2前言任何科學(xué)研究、醫(yī)療實(shí)踐、生3第一節(jié)選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的原則

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種類繁多，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇是一個(gè)內(nèi)容復(fù)雜的問(wèn)題，不同的實(shí)驗(yàn)有不同的目

的、要求，而各種動(dòng)物又有各自的生物學(xué)特性和解剖生理特征，因而不能隨便選一種動(dòng)物來(lái)進(jìn)行某項(xiàng)實(shí)驗(yàn)研究。事實(shí)上，每項(xiàng)科學(xué)實(shí)驗(yàn)都有其最適合的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，如果選擇得當(dāng)，則可節(jié)約人力、動(dòng)物和時(shí)間，以最小的代價(jià)最大限度地獲得可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。否則，不僅會(huì)造成不必要的浪費(fèi)，而且會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判斷。因此，掌握正確的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇方法非常重要。對(duì)于生物醫(yī)學(xué)研究而言，正確選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)遵循以下基本原則。

3第一節(jié)選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的原則實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種類繁多，實(shí)驗(yàn)動(dòng)4

一、相似性原則

在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，動(dòng)物的選擇通常依據(jù)對(duì)試驗(yàn)品的敏感程度，或試驗(yàn)品在體內(nèi)的代謝轉(zhuǎn)化與人體的相似性來(lái)確定。

利用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物某些與人類相近似的特性，通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)人類的疾病發(fā)生和發(fā)展的規(guī)律進(jìn)行推斷和探索。

4一、相似性原則在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，動(dòng)物51．結(jié)構(gòu)、功能及代謝的相似性

一般來(lái)說(shuō)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)化層次愈高，其功能、結(jié)構(gòu)愈復(fù)雜，反應(yīng)也愈接近人類。猴、猩猩、狒狒、長(zhǎng)臂猿等靈長(zhǎng)類動(dòng)物是最類似人的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。它們是研究人類脊髓灰質(zhì)炎、腦炎、痢疾、肝炎、麻疹等傳染病的理想動(dòng)物，也是放射醫(yī)學(xué)、牙科學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、營(yíng)養(yǎng)學(xué)的良好動(dòng)物模型。獼猴生殖生理和人非常相似，是人類生殖課題研究的首選動(dòng)物。

51．結(jié)構(gòu)、功能及代謝的相似性一般來(lái)說(shuō)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)化層次愈62．年齡的近似性

不同種屬實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的壽命長(zhǎng)短不一，但大多數(shù)比人的壽命短。選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物時(shí)必須了解有關(guān)動(dòng)物的壽命，并安排與人的某年齡時(shí)期相應(yīng)的動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。

62．年齡的近似性不同種屬實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的壽命長(zhǎng)短不一，但大多7常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的壽命動(dòng)物種類

最長(zhǎng)壽命(年)平均壽命(年)

猩猩3720

狒狒2415

猴3010

犬2010

貓3012

家兔158

豚鼠75

大鼠53

小鼠32

豬2716

山羊189

田鼠327常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的壽命8人和各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的年齡對(duì)應(yīng)

8人和各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的年齡對(duì)應(yīng)

93.疾病特點(diǎn)的相似性

許多自發(fā)或誘發(fā)性疾病模型能局部或全部地反映出與人類相似的疾病過(guò)程臨床表現(xiàn)。其疾病特點(diǎn)，有些可經(jīng)遺傳育種方法逐漸固定于動(dòng)物品系之中；有些則可用各種手段在動(dòng)物身上誘發(fā)復(fù)制?？筛鶕?jù)研究目的，選擇合適的疾病動(dòng)物模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。93.疾病特點(diǎn)的相似性許多自發(fā)或誘發(fā)性疾病模型能局104.操作實(shí)感的相似性

為臨床操作打基礎(chǔ)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，應(yīng)選用與臨床操作較接近的動(dòng)物。如模擬人類心臟移植，練習(xí)手術(shù)操作的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，可選擇豬器官作實(shí)驗(yàn)材料，因?yàn)樨i的心臟形態(tài)大小與人很接近。104.操作實(shí)感的相似性為臨床操作打基礎(chǔ)的11

二、差異性原則

利用各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在基因型、組織型、代謝型、易感性等特點(diǎn)上的差別，選用不同種系實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的某些特殊反應(yīng)，更適合于不同研究目的的需求。如：家兔頸部的交感神經(jīng)、迷走神經(jīng)、減壓神經(jīng)是分別存在、獨(dú)立行走的，而人、豬、犬、貓等減壓神經(jīng)并不單獨(dú)行走，如果要觀察減壓神經(jīng)對(duì)心臟的作用，選擇家兔更合適。11

二、差異性原則利用各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在基因型、組12

家犬是紅綠色盲，不能以紅綠為刺激條件進(jìn)行條件反射實(shí)驗(yàn)；其汗腺不發(fā)達(dá)，不宜選作發(fā)汗實(shí)驗(yàn)；胰腺小，適宜作胰腺摘除術(shù)；胃小，易作胃導(dǎo)管，便于進(jìn)行胃腸道生理的研究。大鼠無(wú)膽囊，不會(huì)嘔吐，不能做膽功能觀察或催吐實(shí)驗(yàn)。狗、貓、猴等動(dòng)物嘔吐反應(yīng)敏感，則宜選用。家兔對(duì)體溫變化十分敏感，宜選做發(fā)熱、解熱和檢查熱原的實(shí)驗(yàn)研究，大鼠、小鼠體溫調(diào)節(jié)不穩(wěn)定，不宜選用。一般動(dòng)物可自身合成維生素C，豚鼠則不能合成，因而可用來(lái)做Vc缺乏試驗(yàn)。二、差異性原則12

家犬是紅綠色盲，不能以紅綠為刺激條件進(jìn)行條件13

三、易化性原則

在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，進(jìn)化程度高、結(jié)構(gòu)功能復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，有時(shí)會(huì)給實(shí)驗(yàn)條件控制和實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析帶來(lái)難以預(yù)料的困難。因此，在確保研究目標(biāo)的前提下，可選擇結(jié)構(gòu)、功能較簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

13三、易化性原則在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，進(jìn)化程度14四、相容或相匹配原則

在設(shè)計(jì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，所選用的動(dòng)物質(zhì)量等級(jí)要與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)條件、實(shí)驗(yàn)者的技術(shù)、方法及試劑性能等相匹配。避免應(yīng)用高精儀器、先進(jìn)的技術(shù)方法、高純度的試劑與低質(zhì)量、非標(biāo)準(zhǔn)化、反應(yīng)性能低的動(dòng)物相匹配，或利用低性能的測(cè)試手段、非標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)設(shè)施與高質(zhì)量、高反應(yīng)性能的動(dòng)物相匹配。如果將經(jīng)過(guò)微生物控制的SPF動(dòng)物或無(wú)菌動(dòng)物購(gòu)回后，飼養(yǎng)在普通環(huán)境中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，無(wú)疑也是對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源的一種浪費(fèi)。14四、相容或相匹配原則在設(shè)計(jì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，所選15五、可獲性原則

實(shí)驗(yàn)大鼠、小鼠是在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域用量多，用途最廣的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。而靈長(zhǎng)類大型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，雖然在許多方面有著不可替代的優(yōu)越性，但由于繁殖周期長(zhǎng)，繁殖率低，飼養(yǎng)管理困難，價(jià)格昂貴等因素而影響了其易獲性，不能得到普及使用。在不影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量的前提下，選用最易獲得、最經(jīng)濟(jì)、最易飼養(yǎng)管理的動(dòng)物是實(shí)驗(yàn)研究時(shí)必須堅(jiān)持的原則。15五、可獲性原則實(shí)驗(yàn)大鼠、小鼠是在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域用16六、重復(fù)性和均一性原則

重復(fù)性和均一性是實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠、穩(wěn)定的重要保證。生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)應(yīng)選用標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，才能排除因遺傳上的不均質(zhì)引起的個(gè)體反應(yīng)差異，排除動(dòng)物所攜帶微生物、寄生蟲(chóng)和潛在疾病對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，獲得可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并便于在國(guó)際上與同類研究進(jìn)行比較和交流。在標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中，近交系n代動(dòng)物、突變系動(dòng)物均有很好的遺傳均質(zhì)性，個(gè)體差異小，而SPF動(dòng)物則是排除了一切疾病影響的健康動(dòng)物。醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中應(yīng)杜絕使用隨意交配而來(lái)的雜種動(dòng)物或未經(jīng)任何微生物控制的非標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物。16六、重復(fù)性和均一性原則重復(fù)性和均一性是實(shí)驗(yàn)結(jié)果可17第二節(jié)

選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)注意的問(wèn)題

動(dòng)物對(duì)外界刺激的反應(yīng)存在著個(gè)體差異。為了減少實(shí)驗(yàn)誤差，在動(dòng)物的選擇上還應(yīng)注意動(dòng)物年齡、體重、性別、生理狀態(tài)、健康狀況及動(dòng)物品系、等級(jí)等因素。

17第二節(jié)選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)注意的問(wèn)題動(dòng)物對(duì)18一、年齡與體重

年齡是一個(gè)重要的生物量，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的機(jī)體反應(yīng)性隨年齡而有明顯變化。幼年動(dòng)物往往較成年動(dòng)物敏感。不同年齡尤其是年齡差距較大的動(dòng)物，對(duì)藥物的毒性反應(yīng)亦有差異。因此，急性毒性試驗(yàn)規(guī)定小鼠體重在18—22g，其目的在于減少由體重、年齡差距造成的影響。同一實(shí)驗(yàn)中，動(dòng)物體重應(yīng)盡可能一致，若相差懸殊，則易增加動(dòng)物反應(yīng)的個(gè)體差異，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的正確性。18一、年齡與體重年齡是一個(gè)重要的生物量，實(shí)驗(yàn)動(dòng)19二、性別

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)藥物的毒性反應(yīng)有性別差異，并主要表現(xiàn)在成年動(dòng)物。一般而言，雌性動(dòng)物對(duì)藥物的敏感性高于雄性，但隨著受試物不同而異。在醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中，通常選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)雌雄各半。若發(fā)現(xiàn)有明顯的性別差異時(shí)，則應(yīng)分別測(cè)定不同性別實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的LD50值。19二、性別實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)藥物的毒性反應(yīng)有性別20三、生理及功能狀態(tài)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在處于特殊的生理狀態(tài)如懷孕、哺乳時(shí)，其體重及某些生理生化指標(biāo)將有所不同。一般實(shí)驗(yàn)研究不宜采用懷孕、哺乳的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。但為了某種特定的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，如為了闡明藥物對(duì)妊娠及產(chǎn)前胎兒的影響時(shí)，就必須選用妊娠和哺乳期的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

環(huán)境條件可影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生化指標(biāo)。如：在15～17℃溫度下禁食12h的成年大鼠，腎上腺的維生素C含量為306mg／100g，但在20～22℃狀態(tài)下飼養(yǎng)10d，腎上腺的維生素C含量則升為456mg／100g20三、生理及功能狀態(tài)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在處于特殊的生理狀態(tài)21四、健康狀況

動(dòng)物健康狀況對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果正確與否有直接的影響?；疾?dòng)物對(duì)藥物的耐受性較健康動(dòng)物小，因而患病動(dòng)物容易在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中中毒死亡。為確保實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康，要做好實(shí)驗(yàn)前的動(dòng)物健康檢查工作。對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物疾病，原則上只作預(yù)防，不作治療。但對(duì)于一些珍貴的動(dòng)物，發(fā)現(xiàn)異常表現(xiàn)時(shí)，應(yīng)確診其疾病，并采取相應(yīng)的防治措施。

21四、健康狀況動(dòng)物健康狀況對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果正確與否有直22五、品系與等級(jí)

品系和等級(jí)能分別表示實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按遺傳學(xué)控制和微生物控制的標(biāo)準(zhǔn)化條件。

22五、品系與等級(jí)品系和等級(jí)能分別表示實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按遺傳學(xué)23第三節(jié)

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備與描述

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備是決定動(dòng)物實(shí)驗(yàn)成敗的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，而動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述則關(guān)系到研究論文質(zhì)量高低。

23第三節(jié)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備與描述動(dòng)物24

一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備與管理

1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室(實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)規(guī)模、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)周期）2.實(shí)驗(yàn)室面積（動(dòng)物種類、數(shù)量和飼養(yǎng)時(shí)間，對(duì)室內(nèi)溫度、濕度、氨濃度等環(huán)境條件的調(diào)控）3.標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室（實(shí)驗(yàn)前的徹底清洗與消毒）4.動(dòng)物的器具、器材（飲水瓶籠盒及蓋至少準(zhǔn)備2套，準(zhǔn)備好籠卡、記錄本、墊料、飼料、臺(tái)秤、溫度計(jì)、濕度計(jì)等必需物品）

5.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)按設(shè)計(jì)要求和飼養(yǎng)操作規(guī)程進(jìn)行飼養(yǎng)管理

24一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備與管理1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室(實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?5二、動(dòng)物的購(gòu)入

從具有相應(yīng)質(zhì)量合格證的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物供應(yīng)單位訂購(gòu)所需要的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。購(gòu)人時(shí)，應(yīng)向供應(yīng)單位及時(shí)索取動(dòng)物的遺傳背景、微生物背景、質(zhì)量合格證、動(dòng)物年齡、體重、健康營(yíng)養(yǎng)狀況等資料，必要時(shí)要求對(duì)方提供方便運(yùn)輸?shù)挠嘘P(guān)證明材料。購(gòu)入動(dòng)物回本單位后，檢測(cè)動(dòng)物運(yùn)輸容器是否完好，驗(yàn)收確認(rèn)動(dòng)物是否與訂購(gòu)要求一致，發(fā)現(xiàn)并剔除異常動(dòng)物。雌雄分開(kāi)，隔離飼養(yǎng)一段時(shí)間，使購(gòu)入動(dòng)物適應(yīng)新的飼養(yǎng)環(huán)境。

25二、動(dòng)物的購(gòu)入從具有相應(yīng)質(zhì)量合格證的實(shí)驗(yàn)動(dòng)26三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究報(bào)告或論文中關(guān)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述主要有以下內(nèi)容。

1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種名

論文題目應(yīng)標(biāo)明實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種名2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的品種(系)3.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來(lái)源、遺傳背景、微生物背景4.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施合格證

5.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重、性別、年齡。

26三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究報(bào)告或27三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述6.實(shí)驗(yàn)室環(huán)境

溫度、濕度、照度、噪聲、光照周期、氨濃度、季節(jié)等應(yīng)描述清楚。如果使用的是清潔級(jí)以上環(huán)境，還應(yīng)敘述換氣次數(shù)、壓差、潔凈等級(jí)等內(nèi)容。7.動(dòng)物飼養(yǎng)方式（密度、墊料、飼料飲水、籠盒等）8.技術(shù)路線方式（給藥方式，腹腔注射，手術(shù)過(guò)程等）9.其他說(shuō)明的內(nèi)容（麻醉和麻醉方法，取材方法，材料固定液，動(dòng)物處死方法等）27三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述6.實(shí)驗(yàn)室環(huán)境溫度、濕度、照度、噪28三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述總之，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述應(yīng)全面、詳細(xì)、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)練。對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)描述清楚的研究論文，不僅可避免學(xué)術(shù)交流中爭(zhēng)論，而且可提高論文質(zhì)量，對(duì)于從事系列研究和高、精、尖的研究尤為重要。28三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述總之，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述應(yīng)全29第四節(jié)生物醫(yī)學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)用

一、免疫學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

(一)大鼠:大鼠對(duì)綿羊紅細(xì)胞和牛r球蛋白的免疫反應(yīng)有品系差異。大鼠有抗體IgE,蠕蟲(chóng)感染常能誘發(fā)大量的IgE抗體，它們存在于血液循環(huán)中,常規(guī)的免疫法只能使大鼠產(chǎn)生少量的抗體，在體內(nèi)存在的時(shí)間較短。百日咳桿菌免疫大鼠主要產(chǎn)生IgE,如在此抗原中加入福氏完全佐劑，免疫大鼠則產(chǎn)生IgG。29第四節(jié)生物醫(yī)學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)用

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(二)小鼠：小鼠的免疫球蛋白有IgM、IgA、IgE、IgGI、IgG2a和IgG2b。小鼠很少見(jiàn)到典型的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，也不象其它動(dòng)物那樣有規(guī)律。能誘發(fā)速發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，其全身性過(guò)敏反應(yīng)的特點(diǎn)是循環(huán)不暢，循環(huán)性虛脫，常在幾小時(shí)甚至10到20分鐘死亡。BALB/c小鼠常用于制備單克隆抗體。30(二)小鼠：31(三)豚鼠：豚鼠中已確定的免疫球蛋白有：IgG(IgGI、IgG2)、IgA和IgE。IgGI是變態(tài)反應(yīng)的媒介，IgG2在抗原抗體的反應(yīng)中起結(jié)合補(bǔ)體的作用。

豚鼠除作為補(bǔ)體的來(lái)源外，還被用于結(jié)核菌素的皮內(nèi)試驗(yàn)和接觸過(guò)敏物質(zhì)的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的研究。豚鼠和人的結(jié)核菌素反應(yīng)差別是有無(wú)細(xì)胞浸潤(rùn)，另外豚鼠的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)在24-48h達(dá)到高峰，人在48-96h達(dá)到高峰。

31(三)豚鼠：32(四)兔：新西蘭白兔常用于實(shí)驗(yàn)室制備抗體，及被用來(lái)作過(guò)敏反應(yīng)的研究。由IgG和IgE引出的過(guò)敏反應(yīng)臨床癥狀相似,機(jī)理都是抗原抗體結(jié)合和血小板－白細(xì)胞凝集形成沉淀物，釋放藥理活性物質(zhì)(組織胺和5-羥色胺)進(jìn)入肺循環(huán)，在右心的流出道中產(chǎn)生一種機(jī)械和藥理的聯(lián)合作用，導(dǎo)致循環(huán)性虛脫。32(四)兔：33

(五)狗：狗的免疫球蛋白有IgG、IgM、IgA、IgG1、IgG2。在狗花粉病和各種蠕蟲(chóng)感染中發(fā)現(xiàn)IgE。

Lewis等認(rèn)為狗對(duì)顆粒性抗原能較好地產(chǎn)生抗體,但新生狗初次免疫反應(yīng)所產(chǎn)生的抗體幾乎是IgM類,成年狗產(chǎn)生的抗體幾乎是IgM和IgG,這兩種球蛋白的數(shù)量與初生狗的IgM幾乎相等。新生狗在再次反應(yīng)中能合成IgG和IgM。

除人之外，狗是研究人的變態(tài)反應(yīng)和氣喘的適宜的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。狗由豚草花?Raweedpillens)致敏后，血液和皮膚中出現(xiàn)IgE抗體。

33(五)狗：34二、腫瘤學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇(一)昆明小鼠

肉瘤180（S180)、肉瘤37(S37)、艾氏癌腹水型(EAC)、艾氏癌實(shí)體型(EC)、肝癌實(shí)體型(Heps)、Harding-Passey黑色素瘤等，可接種昆明小鼠制備實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤模型。(二)615小鼠:

用于小鼠網(wǎng)織細(xì)胞白血病L615的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?三)DBA/2小鼠:用于小鼠淋巴細(xì)胞白血病L1210的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?四)C57BL/6小鼠:用于Lewis肺癌，黑色素瘤B16，小鼠乳腺癌M5076的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?五)Wistar大鼠:用于瓦克癌肉瘤W256，軟骨肉瘤，吉田肉瘤腹水型的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?4二、腫瘤學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇(一)昆明小鼠

35三、藥理學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

藥理學(xué)研究中一般選用小鼠、大鼠、豚鼠、家兔等。

(一)急性毒性試驗(yàn)

常用小鼠，體重18～22g，雌雄均可。每次5～10只，尾靜脈注射或腹腔注射一定劑量藥液，觀察有無(wú)不良反應(yīng)(如驚厥、四肢癱瘓、步伐不穩(wěn)、豎毛、呼吸抑制等)或死亡現(xiàn)象。一般觀察24～48小時(shí)。35三、藥理學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

36(二)亞急性和慢性毒性試驗(yàn)

可選小鼠，方法和急性毒性試驗(yàn)基本相似，但劑量小，小鼠按體重計(jì)算每天用人用劑量的20～50倍口服或腹腔注射，連續(xù)觀察1～8周。慢性毒性試驗(yàn)則需3～6個(gè)月。觀察體重、進(jìn)食量、進(jìn)水量的變化，以及有無(wú)其它不良反應(yīng)或死亡(包括內(nèi)臟肉眼觀察或組織切片檢查)。必要時(shí)作血象、肝腎功能化驗(yàn)檢查。該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)也常用大鼠。36(二)亞急性和慢性毒性試驗(yàn)

可選小鼠，方37(三)半數(shù)致死量的測(cè)定

簡(jiǎn)稱LD50.表示藥物的毒性時(shí)比較靈敏準(zhǔn)確。一般以每Kg多少mg表示(藥物劑量/體重)。臨床應(yīng)用時(shí)一般取1/5～1/10LD50開(kāi)始試用，觀察毒性和療效。由小劑量，到大劑量逐步試用至不能耐受為止。

測(cè)定LD50時(shí)常選用小鼠，體重18～22g,雌雄均可,每次實(shí)驗(yàn)需30-60只，一般分5～6組，每組6～10只。給藥途徑與臨床應(yīng)用相同，有口服、腹腔注射、靜脈注射。給藥容量以每鼠0.5ml左右為宜。根據(jù)藥物出現(xiàn)作用的快慢，一般觀察1～4d或24～72小時(shí)。以死亡為主要指標(biāo)。37(三)半數(shù)致死量的測(cè)定

簡(jiǎn)稱LD50.表示藥物的38(四)過(guò)敏試驗(yàn)取豚鼠6只，體重250～350g，隔日腹腔注射藥液0.5ml，共注射3次。然后分成2組，分別在第一次注射藥物的第14天及21天再?gòu)念i靜脈注射原藥液1ml。如有過(guò)敏反應(yīng),則在注射藥物后幾分鐘內(nèi)，豚鼠表現(xiàn)興奮不安，呼吸困難，迅速窒息死亡。38(四)過(guò)敏試驗(yàn)取豚鼠6只，體重25039(五)熱原檢查熱原是由細(xì)菌產(chǎn)生的一種毒素。注射劑中若含有熱原，會(huì)使人發(fā)燒。

檢查熱原使用的動(dòng)物是家兔，一般選用3只，體重1.5kg以上，注射藥物前測(cè)量肛門體溫3次,取平均值(家兔的正常體溫38.5～39.6℃)。然后耳靜脈注射藥液(1～2ml/Kg),注射藥物后1小時(shí)、2小時(shí)、3小時(shí)各測(cè)體溫1次。如3兔體溫升高均不超過(guò)0.6℃,即合格,說(shuō)明無(wú)熱原。39(五)熱原檢查熱原是由細(xì)菌產(chǎn)生的一種毒40四、其它醫(yī)學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

(一)計(jì)劃生育中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

常選用成年大白鼠，靈長(zhǎng)類動(dòng)物等，如觀察藥物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生殖率、精子數(shù)、精子活動(dòng)力以及對(duì)雄性激素的影響，和雌性的生殖與避孕以及雌性激素的影響。40四、其它醫(yī)學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

(一)計(jì)劃生育中41(二)病毒學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

病毒學(xué)研究中常選用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有金黃地鼠、小白鼠、豚鼠、家兔、綿羊、禽類、猴等。分離病毒廣泛使用的是乳鼠，它對(duì)柯薩琪病毒、呼吸道病毒和蟲(chóng)媒病毒感染有很高的易感性。

選用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物不僅考慮它的易感性，還考慮接種途徑，例單純皰疹病毒的易感動(dòng)物為家兔、豚鼠，接種途徑分別是角膜、腦內(nèi)和肉趾。41(二)病毒學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

病毒42實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在人類病毒學(xué)發(fā)展史上起重要作用,主要用作分離病毒、抑制病毒的藥物篩選、疫苗效果及安全性鑒定、制備病毒診斷試劑等。42實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在人類病毒學(xué)發(fā)展史上起重要作用,431.黃熱病毒靈長(zhǎng)類動(dòng)物都易感，最為敏感的動(dòng)物是恒河猴。小鼠對(duì)黃熱病毒也敏感，純血清接種的小白鼠尚能存活，而以稀釋血清接種的小白鼠卻于較短時(shí)間死亡。這一奇特現(xiàn)象的理由，可能是由于病人體內(nèi)血清抗體早期出現(xiàn)之故。應(yīng)用純血清時(shí)，這些抗體中和了病毒的作用，而當(dāng)應(yīng)用稀釋血清時(shí)，抗體濃度不足，但病毒在稀釋后仍然具有活力。

431.黃熱病毒靈長(zhǎng)類動(dòng)物都易感，最為敏感的44

2.乙腦病毒乙腦病毒屬于披蓋病毒的B組蟲(chóng)蝶病毒。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，乳鼠和成年小白鼠腦內(nèi)接種后發(fā)生致死性腦炎，腹腔內(nèi)接種后乳鼠發(fā)生致死性腦炎。恒河猴、食蟹猴和成年倉(cāng)鼠腦內(nèi)接種后發(fā)生致死性腦炎，但周圍途徑接種時(shí)只發(fā)生無(wú)癥狀的病毒血癥。豚鼠和兔腦內(nèi)或周圍接種，蝙蝠、小雞、和蒼鷺周圍接種后都只發(fā)生無(wú)癥狀的病毒血癥。蝙蝠可保持感染，經(jīng)過(guò)冬眠后重新發(fā)生病毒血癥。442.乙腦病毒乙腦病毒屬于披蓋病毒的453.脊髓灰質(zhì)炎病毒恒河猴、長(zhǎng)尾猴類以及狒狒類對(duì)脊髓灰質(zhì)炎病毒較敏感。模型動(dòng)物的接種方法可用腹腔注射、坐骨神經(jīng)附近的深部肌肉注射、鼻腔滴注。實(shí)際操作中最好以不同方法混合接種。453.脊髓灰質(zhì)炎病毒恒河猴、長(zhǎng)尾猴類以464.流感病毒屬于正粘液病毒屬。動(dòng)物模型最好選用雪貂，也可用小白鼠、金黃地鼠、豚鼠、猴及豬。464.流感病毒屬于正粘液病毒屬。動(dòng)物475.麻疹病毒除靈長(zhǎng)類外，一般動(dòng)物均不易感。1911年首次成功的傳給獼猴。以后證明，除了接種和吸入外，其它種類的猴，如：猿類、恒河猴、崇猴、爪哇猴、矮猴等，對(duì)各種不同接種途徑也易感染。其癥狀類似人類麻疹。潛伏期為3-22天，病毒血癥期為4-15天，約一半動(dòng)物有皮疹、結(jié)膜炎、卡它和發(fā)熱。475.麻疹病毒除靈長(zhǎng)類外，一般動(dòng)物均不易感486.甲型和乙型肝炎病毒狨猴、黑猩猩、紅面猴對(duì)HAV均易感，經(jīng)口或靜脈注射接種病毒后，可產(chǎn)生肝炎。黑猩猩是HBV的易感動(dòng)物,狨猴雖可感染但不如前者敏感。因此用黑猩猩研究HBV的發(fā)病機(jī)理、檢測(cè)自動(dòng)免疫、被動(dòng)免疫的效果以及HBV疫苗的安全性。

486.甲型和乙型肝炎病毒狨猴、黑猩猩、紅49

(三)老年病研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

用于老年醫(yī)學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物以哺乳類動(dòng)物為主體，有小鼠、大鼠、豚鼠、兔、狗、豬、猴等，其中大鼠使用最多，并廣泛用于各種項(xiàng)目的研究，其中以細(xì)胞生化學(xué)、消化器、激素、酶等的研究為主。小鼠的使用率雖比大鼠低，但用途廣泛，以放射線、消化器、免疫、酶的研究為主。魚(yú)類、兩棲類、爬蟲(chóng)類以及無(wú)脊椎動(dòng)物等，絕大多數(shù)被用以比較生物學(xué)的研究。49

(三)老年病研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

用

第五節(jié)常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的應(yīng)用價(jià)值一、小鼠安全和毒性試驗(yàn)生物效應(yīng)和藥物效價(jià)測(cè)定藥物篩選微生物、寄生蟲(chóng)病學(xué)研究放射學(xué)研究腫瘤學(xué)研究計(jì)劃生育研究遺傳性疾病研究免疫學(xué)研究老年病學(xué)研究….….50第五節(jié)常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的應(yīng)用價(jià)值一、小鼠50

二、大鼠生理學(xué)研究營(yíng)養(yǎng)學(xué)研究代謝性疾病研究藥物學(xué)研究腫瘤研究遺傳學(xué)研究傳染病研究牙科學(xué)研究計(jì)劃生育的畸胎學(xué)、避孕藥研究放射學(xué)研究……51二、大鼠51

三、豚鼠免疫學(xué)中的過(guò)敏反應(yīng)研究血清學(xué)研究營(yíng)養(yǎng)學(xué)研究傳染病學(xué)研究毒理學(xué)研究……52三、豚鼠52

四、家兔免疫學(xué)研究－－抗血清制備各種藥品及生物制品的檢定－－熱原皮膚反應(yīng)試驗(yàn)急性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)眼科研究生殖生理和避孕藥研究代謝性疾病研究微生物學(xué)、寄生蟲(chóng)學(xué)病研究心血管和冠心病研究遺傳性疾病研究……53四、家兔53

五、犬實(shí)驗(yàn)外科學(xué)研究基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究藥理、毒理學(xué)研究行為學(xué)研究腫瘤學(xué)研究放射學(xué)研究……54五、犬54六、貓生理學(xué)研究－－腦神經(jīng)生理藥理學(xué)研究－－血壓傳染性疾?。烤也」误w病研究……55六、貓55七、獼猴生理學(xué)研究傳染病研究疫苗研究疾病動(dòng)物模型研究藥理、毒理學(xué)研究器官移植研究行為學(xué)及神經(jīng)生物學(xué)研究畸胎學(xué)研究腫瘤學(xué)研究代謝性疾病研究……56七、獼猴5657謝謝57謝謝58復(fù)習(xí)題1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇的基本原則2.選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)注意的問(wèn)題3.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前應(yīng)注意哪些準(zhǔn)備4.研究論文中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的描述包括哪些內(nèi)

容58復(fù)習(xí)題1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇的基本原則生物醫(yī)學(xué)研究課題中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇和應(yīng)用和應(yīng)用生物醫(yī)學(xué)研究課題中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇和應(yīng)用和應(yīng)用60前言任何科學(xué)研究、醫(yī)療實(shí)踐、生物制品的生產(chǎn)和檢定都離不開(kāi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)性、重復(fù)性，必須選擇標(biāo)準(zhǔn)化及與實(shí)驗(yàn)?zāi)康南噙m應(yīng)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。在某種意義上講，選擇適宜的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，是科學(xué)研究成功的關(guān)鍵。

2前言任何科學(xué)研究、醫(yī)療實(shí)踐、生61第一節(jié)選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的原則

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種類繁多，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇是一個(gè)內(nèi)容復(fù)雜的問(wèn)題，不同的實(shí)驗(yàn)有不同的目

的、要求，而各種動(dòng)物又有各自的生物學(xué)特性和解剖生理特征，因而不能隨便選一種動(dòng)物來(lái)進(jìn)行某項(xiàng)實(shí)驗(yàn)研究。事實(shí)上，每項(xiàng)科學(xué)實(shí)驗(yàn)都有其最適合的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，如果選擇得當(dāng)，則可節(jié)約人力、動(dòng)物和時(shí)間，以最小的代價(jià)最大限度地獲得可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。否則，不僅會(huì)造成不必要的浪費(fèi)，而且會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判斷。因此，掌握正確的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇方法非常重要。對(duì)于生物醫(yī)學(xué)研究而言，正確選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)遵循以下基本原則。

3第一節(jié)選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的原則實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種類繁多，實(shí)驗(yàn)動(dòng)62

一、相似性原則

在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，動(dòng)物的選擇通常依據(jù)對(duì)試驗(yàn)品的敏感程度，或試驗(yàn)品在體內(nèi)的代謝轉(zhuǎn)化與人體的相似性來(lái)確定。

利用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物某些與人類相近似的特性，通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)人類的疾病發(fā)生和發(fā)展的規(guī)律進(jìn)行推斷和探索。

4一、相似性原則在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，動(dòng)物631．結(jié)構(gòu)、功能及代謝的相似性

一般來(lái)說(shuō)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)化層次愈高，其功能、結(jié)構(gòu)愈復(fù)雜，反應(yīng)也愈接近人類。猴、猩猩、狒狒、長(zhǎng)臂猿等靈長(zhǎng)類動(dòng)物是最類似人的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。它們是研究人類脊髓灰質(zhì)炎、腦炎、痢疾、肝炎、麻疹等傳染病的理想動(dòng)物，也是放射醫(yī)學(xué)、牙科學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、營(yíng)養(yǎng)學(xué)的良好動(dòng)物模型。獼猴生殖生理和人非常相似，是人類生殖課題研究的首選動(dòng)物。

51．結(jié)構(gòu)、功能及代謝的相似性一般來(lái)說(shuō)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)化層次愈642．年齡的近似性

不同種屬實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的壽命長(zhǎng)短不一，但大多數(shù)比人的壽命短。選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物時(shí)必須了解有關(guān)動(dòng)物的壽命，并安排與人的某年齡時(shí)期相應(yīng)的動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。

62．年齡的近似性不同種屬實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的壽命長(zhǎng)短不一，但大多65常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的壽命動(dòng)物種類

最長(zhǎng)壽命(年)平均壽命(年)

猩猩3720

狒狒2415

猴3010

犬2010

貓3012

家兔158

豚鼠75

大鼠53

小鼠32

豬2716

山羊189

田鼠327常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的壽命66人和各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的年齡對(duì)應(yīng)

8人和各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的年齡對(duì)應(yīng)

673.疾病特點(diǎn)的相似性

許多自發(fā)或誘發(fā)性疾病模型能局部或全部地反映出與人類相似的疾病過(guò)程臨床表現(xiàn)。其疾病特點(diǎn)，有些可經(jīng)遺傳育種方法逐漸固定于動(dòng)物品系之中；有些則可用各種手段在動(dòng)物身上誘發(fā)復(fù)制?？筛鶕?jù)研究目的，選擇合適的疾病動(dòng)物模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。93.疾病特點(diǎn)的相似性許多自發(fā)或誘發(fā)性疾病模型能局684.操作實(shí)感的相似性

為臨床操作打基礎(chǔ)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，應(yīng)選用與臨床操作較接近的動(dòng)物。如模擬人類心臟移植，練習(xí)手術(shù)操作的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，可選擇豬器官作實(shí)驗(yàn)材料，因?yàn)樨i的心臟形態(tài)大小與人很接近。104.操作實(shí)感的相似性為臨床操作打基礎(chǔ)的69

二、差異性原則

利用各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在基因型、組織型、代謝型、易感性等特點(diǎn)上的差別，選用不同種系實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的某些特殊反應(yīng)，更適合于不同研究目的的需求。如：家兔頸部的交感神經(jīng)、迷走神經(jīng)、減壓神經(jīng)是分別存在、獨(dú)立行走的，而人、豬、犬、貓等減壓神經(jīng)并不單獨(dú)行走，如果要觀察減壓神經(jīng)對(duì)心臟的作用，選擇家兔更合適。11

二、差異性原則利用各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在基因型、組70

家犬是紅綠色盲，不能以紅綠為刺激條件進(jìn)行條件反射實(shí)驗(yàn)；其汗腺不發(fā)達(dá)，不宜選作發(fā)汗實(shí)驗(yàn)；胰腺小，適宜作胰腺摘除術(shù)；胃小，易作胃導(dǎo)管，便于進(jìn)行胃腸道生理的研究。大鼠無(wú)膽囊，不會(huì)嘔吐，不能做膽功能觀察或催吐實(shí)驗(yàn)。狗、貓、猴等動(dòng)物嘔吐反應(yīng)敏感，則宜選用。家兔對(duì)體溫變化十分敏感，宜選做發(fā)熱、解熱和檢查熱原的實(shí)驗(yàn)研究，大鼠、小鼠體溫調(diào)節(jié)不穩(wěn)定，不宜選用。一般動(dòng)物可自身合成維生素C，豚鼠則不能合成，因而可用來(lái)做Vc缺乏試驗(yàn)。二、差異性原則12

家犬是紅綠色盲，不能以紅綠為刺激條件進(jìn)行條件71

三、易化性原則

在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，進(jìn)化程度高、結(jié)構(gòu)功能復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，有時(shí)會(huì)給實(shí)驗(yàn)條件控制和實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析帶來(lái)難以預(yù)料的困難。因此，在確保研究目標(biāo)的前提下，可選擇結(jié)構(gòu)、功能較簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

13三、易化性原則在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，進(jìn)化程度72四、相容或相匹配原則

在設(shè)計(jì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，所選用的動(dòng)物質(zhì)量等級(jí)要與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)條件、實(shí)驗(yàn)者的技術(shù)、方法及試劑性能等相匹配。避免應(yīng)用高精儀器、先進(jìn)的技術(shù)方法、高純度的試劑與低質(zhì)量、非標(biāo)準(zhǔn)化、反應(yīng)性能低的動(dòng)物相匹配，或利用低性能的測(cè)試手段、非標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)設(shè)施與高質(zhì)量、高反應(yīng)性能的動(dòng)物相匹配。如果將經(jīng)過(guò)微生物控制的SPF動(dòng)物或無(wú)菌動(dòng)物購(gòu)回后，飼養(yǎng)在普通環(huán)境中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，無(wú)疑也是對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源的一種浪費(fèi)。14四、相容或相匹配原則在設(shè)計(jì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，所選73五、可獲性原則

實(shí)驗(yàn)大鼠、小鼠是在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域用量多，用途最廣的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。而靈長(zhǎng)類大型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，雖然在許多方面有著不可替代的優(yōu)越性，但由于繁殖周期長(zhǎng)，繁殖率低，飼養(yǎng)管理困難，價(jià)格昂貴等因素而影響了其易獲性，不能得到普及使用。在不影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量的前提下，選用最易獲得、最經(jīng)濟(jì)、最易飼養(yǎng)管理的動(dòng)物是實(shí)驗(yàn)研究時(shí)必須堅(jiān)持的原則。15五、可獲性原則實(shí)驗(yàn)大鼠、小鼠是在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域用74六、重復(fù)性和均一性原則

重復(fù)性和均一性是實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠、穩(wěn)定的重要保證。生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)應(yīng)選用標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，才能排除因遺傳上的不均質(zhì)引起的個(gè)體反應(yīng)差異，排除動(dòng)物所攜帶微生物、寄生蟲(chóng)和潛在疾病對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，獲得可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并便于在國(guó)際上與同類研究進(jìn)行比較和交流。在標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中，近交系n代動(dòng)物、突變系動(dòng)物均有很好的遺傳均質(zhì)性，個(gè)體差異小，而SPF動(dòng)物則是排除了一切疾病影響的健康動(dòng)物。醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中應(yīng)杜絕使用隨意交配而來(lái)的雜種動(dòng)物或未經(jīng)任何微生物控制的非標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物。16六、重復(fù)性和均一性原則重復(fù)性和均一性是實(shí)驗(yàn)結(jié)果可75第二節(jié)

選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)注意的問(wèn)題

動(dòng)物對(duì)外界刺激的反應(yīng)存在著個(gè)體差異。為了減少實(shí)驗(yàn)誤差，在動(dòng)物的選擇上還應(yīng)注意動(dòng)物年齡、體重、性別、生理狀態(tài)、健康狀況及動(dòng)物品系、等級(jí)等因素。

17第二節(jié)選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)注意的問(wèn)題動(dòng)物對(duì)76一、年齡與體重

年齡是一個(gè)重要的生物量，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的機(jī)體反應(yīng)性隨年齡而有明顯變化。幼年動(dòng)物往往較成年動(dòng)物敏感。不同年齡尤其是年齡差距較大的動(dòng)物，對(duì)藥物的毒性反應(yīng)亦有差異。因此，急性毒性試驗(yàn)規(guī)定小鼠體重在18—22g，其目的在于減少由體重、年齡差距造成的影響。同一實(shí)驗(yàn)中，動(dòng)物體重應(yīng)盡可能一致，若相差懸殊，則易增加動(dòng)物反應(yīng)的個(gè)體差異，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的正確性。18一、年齡與體重年齡是一個(gè)重要的生物量，實(shí)驗(yàn)動(dòng)77二、性別

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)藥物的毒性反應(yīng)有性別差異，并主要表現(xiàn)在成年動(dòng)物。一般而言，雌性動(dòng)物對(duì)藥物的敏感性高于雄性，但隨著受試物不同而異。在醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中，通常選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)雌雄各半。若發(fā)現(xiàn)有明顯的性別差異時(shí)，則應(yīng)分別測(cè)定不同性別實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的LD50值。19二、性別實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)藥物的毒性反應(yīng)有性別78三、生理及功能狀態(tài)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在處于特殊的生理狀態(tài)如懷孕、哺乳時(shí)，其體重及某些生理生化指標(biāo)將有所不同。一般實(shí)驗(yàn)研究不宜采用懷孕、哺乳的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。但為了某種特定的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，如為了闡明藥物對(duì)妊娠及產(chǎn)前胎兒的影響時(shí)，就必須選用妊娠和哺乳期的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

環(huán)境條件可影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生化指標(biāo)。如：在15～17℃溫度下禁食12h的成年大鼠，腎上腺的維生素C含量為306mg／100g，但在20～22℃狀態(tài)下飼養(yǎng)10d，腎上腺的維生素C含量則升為456mg／100g20三、生理及功能狀態(tài)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在處于特殊的生理狀態(tài)79四、健康狀況

動(dòng)物健康狀況對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果正確與否有直接的影響。患病動(dòng)物對(duì)藥物的耐受性較健康動(dòng)物小，因而患病動(dòng)物容易在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中中毒死亡。為確保實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康，要做好實(shí)驗(yàn)前的動(dòng)物健康檢查工作。對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物疾病，原則上只作預(yù)防，不作治療。但對(duì)于一些珍貴的動(dòng)物，發(fā)現(xiàn)異常表現(xiàn)時(shí)，應(yīng)確診其疾病，并采取相應(yīng)的防治措施。

21四、健康狀況動(dòng)物健康狀況對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果正確與否有直80五、品系與等級(jí)

品系和等級(jí)能分別表示實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按遺傳學(xué)控制和微生物控制的標(biāo)準(zhǔn)化條件。

22五、品系與等級(jí)品系和等級(jí)能分別表示實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按遺傳學(xué)81第三節(jié)

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備與描述

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備是決定動(dòng)物實(shí)驗(yàn)成敗的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，而動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述則關(guān)系到研究論文質(zhì)量高低。

23第三節(jié)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備與描述動(dòng)物82

一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備與管理

1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室(實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)規(guī)模、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)周期）2.實(shí)驗(yàn)室面積（動(dòng)物種類、數(shù)量和飼養(yǎng)時(shí)間，對(duì)室內(nèi)溫度、濕度、氨濃度等環(huán)境條件的調(diào)控）3.標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室（實(shí)驗(yàn)前的徹底清洗與消毒）4.動(dòng)物的器具、器材（飲水瓶籠盒及蓋至少準(zhǔn)備2套，準(zhǔn)備好籠卡、記錄本、墊料、飼料、臺(tái)秤、溫度計(jì)、濕度計(jì)等必需物品）

5.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)按設(shè)計(jì)要求和飼養(yǎng)操作規(guī)程進(jìn)行飼養(yǎng)管理

24一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備與管理1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室(實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?3二、動(dòng)物的購(gòu)入

從具有相應(yīng)質(zhì)量合格證的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物供應(yīng)單位訂購(gòu)所需要的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。購(gòu)人時(shí)，應(yīng)向供應(yīng)單位及時(shí)索取動(dòng)物的遺傳背景、微生物背景、質(zhì)量合格證、動(dòng)物年齡、體重、健康營(yíng)養(yǎng)狀況等資料，必要時(shí)要求對(duì)方提供方便運(yùn)輸?shù)挠嘘P(guān)證明材料。購(gòu)入動(dòng)物回本單位后，檢測(cè)動(dòng)物運(yùn)輸容器是否完好，驗(yàn)收確認(rèn)動(dòng)物是否與訂購(gòu)要求一致，發(fā)現(xiàn)并剔除異常動(dòng)物。雌雄分開(kāi)，隔離飼養(yǎng)一段時(shí)間，使購(gòu)入動(dòng)物適應(yīng)新的飼養(yǎng)環(huán)境。

25二、動(dòng)物的購(gòu)入從具有相應(yīng)質(zhì)量合格證的實(shí)驗(yàn)動(dòng)84三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究報(bào)告或論文中關(guān)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述主要有以下內(nèi)容。

1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種名

論文題目應(yīng)標(biāo)明實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種名2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的品種(系)3.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來(lái)源、遺傳背景、微生物背景4.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施合格證

5.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重、性別、年齡。

26三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究報(bào)告或85三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述6.實(shí)驗(yàn)室環(huán)境

溫度、濕度、照度、噪聲、光照周期、氨濃度、季節(jié)等應(yīng)描述清楚。如果使用的是清潔級(jí)以上環(huán)境，還應(yīng)敘述換氣次數(shù)、壓差、潔凈等級(jí)等內(nèi)容。7.動(dòng)物飼養(yǎng)方式（密度、墊料、飼料飲水、籠盒等）8.技術(shù)路線方式（給藥方式，腹腔注射，手術(shù)過(guò)程等）9.其他說(shuō)明的內(nèi)容（麻醉和麻醉方法，取材方法，材料固定液，動(dòng)物處死方法等）27三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述6.實(shí)驗(yàn)室環(huán)境溫度、濕度、照度、噪86三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述總之，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述應(yīng)全面、詳細(xì)、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)練。對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)描述清楚的研究論文，不僅可避免學(xué)術(shù)交流中爭(zhēng)論，而且可提高論文質(zhì)量，對(duì)于從事系列研究和高、精、尖的研究尤為重要。28三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述總之，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的描述應(yīng)全87第四節(jié)生物醫(yī)學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)用

一、免疫學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

(一)大鼠:大鼠對(duì)綿羊紅細(xì)胞和牛r球蛋白的免疫反應(yīng)有品系差異。大鼠有抗體IgE,蠕蟲(chóng)感染常能誘發(fā)大量的IgE抗體，它們存在于血液循環(huán)中,常規(guī)的免疫法只能使大鼠產(chǎn)生少量的抗體，在體內(nèi)存在的時(shí)間較短。百日咳桿菌免疫大鼠主要產(chǎn)生IgE,如在此抗原中加入福氏完全佐劑，免疫大鼠則產(chǎn)生IgG。29第四節(jié)生物醫(yī)學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)用

88

(二)小鼠：小鼠的免疫球蛋白有IgM、IgA、IgE、IgGI、IgG2a和IgG2b。小鼠很少見(jiàn)到典型的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，也不象其它動(dòng)物那樣有規(guī)律。能誘發(fā)速發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，其全身性過(guò)敏反應(yīng)的特點(diǎn)是循環(huán)不暢，循環(huán)性虛脫，常在幾小時(shí)甚至10到20分鐘死亡。BALB/c小鼠常用于制備單克隆抗體。30(二)小鼠：89(三)豚鼠：豚鼠中已確定的免疫球蛋白有：IgG(IgGI、IgG2)、IgA和IgE。IgGI是變態(tài)反應(yīng)的媒介，IgG2在抗原抗體的反應(yīng)中起結(jié)合補(bǔ)體的作用。

豚鼠除作為補(bǔ)體的來(lái)源外，還被用于結(jié)核菌素的皮內(nèi)試驗(yàn)和接觸過(guò)敏物質(zhì)的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的研究。豚鼠和人的結(jié)核菌素反應(yīng)差別是有無(wú)細(xì)胞浸潤(rùn)，另外豚鼠的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)在24-48h達(dá)到高峰，人在48-96h達(dá)到高峰。

31(三)豚鼠：90(四)兔：新西蘭白兔常用于實(shí)驗(yàn)室制備抗體，及被用來(lái)作過(guò)敏反應(yīng)的研究。由IgG和IgE引出的過(guò)敏反應(yīng)臨床癥狀相似,機(jī)理都是抗原抗體結(jié)合和血小板－白細(xì)胞凝集形成沉淀物，釋放藥理活性物質(zhì)(組織胺和5-羥色胺)進(jìn)入肺循環(huán)，在右心的流出道中產(chǎn)生一種機(jī)械和藥理的聯(lián)合作用，導(dǎo)致循環(huán)性虛脫。32(四)兔：91

(五)狗：狗的免疫球蛋白有IgG、IgM、IgA、IgG1、IgG2。在狗花粉病和各種蠕蟲(chóng)感染中發(fā)現(xiàn)IgE。

Lewis等認(rèn)為狗對(duì)顆粒性抗原能較好地產(chǎn)生抗體,但新生狗初次免疫反應(yīng)所產(chǎn)生的抗體幾乎是IgM類,成年狗產(chǎn)生的抗體幾乎是IgM和IgG,這兩種球蛋白的數(shù)量與初生狗的IgM幾乎相等。新生狗在再次反應(yīng)中能合成IgG和IgM。

除人之外，狗是研究人的變態(tài)反應(yīng)和氣喘的適宜的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。狗由豚草花?Raweedpillens)致敏后，血液和皮膚中出現(xiàn)IgE抗體。

33(五)狗：92二、腫瘤學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇(一)昆明小鼠

肉瘤180（S180)、肉瘤37(S37)、艾氏癌腹水型(EAC)、艾氏癌實(shí)體型(EC)、肝癌實(shí)體型(Heps)、Harding-Passey黑色素瘤等，可接種昆明小鼠制備實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤模型。(二)615小鼠:

用于小鼠網(wǎng)織細(xì)胞白血病L615的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?三)DBA/2小鼠:用于小鼠淋巴細(xì)胞白血病L1210的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?四)C57BL/6小鼠:用于Lewis肺癌，黑色素瘤B16，小鼠乳腺癌M5076的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?五)Wistar大鼠:用于瓦克癌肉瘤W256，軟骨肉瘤，吉田肉瘤腹水型的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?4二、腫瘤學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇(一)昆明小鼠

93三、藥理學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

藥理學(xué)研究中一般選用小鼠、大鼠、豚鼠、家兔等。

(一)急性毒性試驗(yàn)

常用小鼠，體重18～22g，雌雄均可。每次5～10只，尾靜脈注射或腹腔注射一定劑量藥液，觀察有無(wú)不良反應(yīng)(如驚厥、四肢癱瘓、步伐不穩(wěn)、豎毛、呼吸抑制等)或死亡現(xiàn)象。一般觀察24～48小時(shí)。35三、藥理學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

94(二)亞急性和慢性毒性試驗(yàn)

可選小鼠，方法和急性毒性試驗(yàn)基本相似，但劑量小，小鼠按體重計(jì)算每天用人用劑量的20～50倍口服或腹腔注射，連續(xù)觀察1～8周。慢性毒性試驗(yàn)則需3～6個(gè)月。觀察體重、進(jìn)食量、進(jìn)水量的變化，以及有無(wú)其它不良反應(yīng)或死亡(包括內(nèi)臟肉眼觀察或組織切片檢查)。必要時(shí)作血象、肝腎功能化驗(yàn)檢查。該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)也常用大鼠。36(二)亞急性和慢性毒性試驗(yàn)

可選小鼠，方95(三)半數(shù)致死量的測(cè)定

簡(jiǎn)稱LD50.表示藥物的毒性時(shí)比較靈敏準(zhǔn)確。一般以每Kg多少mg表示(藥物劑量/體重)。臨床應(yīng)用時(shí)一般取1/5～1/10LD50開(kāi)始試用，觀察毒性和療效。由小劑量，到大劑量逐步試用至不能耐受為止。

測(cè)定LD50時(shí)常選用小鼠，體重18～22g,雌雄均可,每次實(shí)驗(yàn)需30-60只，一般分5～6組，每組6～10只。給藥途徑與臨床應(yīng)用相同，有口服、腹腔注射、靜脈注射。給藥容量以每鼠0.5ml左右為宜。根據(jù)藥物出現(xiàn)作用的快慢，一般觀察1～4d或24～72小時(shí)。以死亡為主要指標(biāo)。37(三)半數(shù)致死量的測(cè)定

簡(jiǎn)稱LD50.表示藥物的96(四)過(guò)敏試驗(yàn)取豚鼠6只，體重250～350g，隔日腹腔注射藥液0.5ml，共注射3次。然后分成2組，分別在第一次注射藥物的第14天及21天再?gòu)念i靜脈注射原藥液1ml。如有過(guò)敏反應(yīng),則在注射藥物后幾分鐘內(nèi)，豚鼠表現(xiàn)興奮不安，呼吸困難，迅速窒息死亡。38(四)過(guò)敏試驗(yàn)取豚鼠6只，體重25097(五)熱原檢查熱原是由細(xì)菌產(chǎn)生的一種毒素。注射劑中若含有熱原，會(huì)使人發(fā)燒。

檢查熱原使用的動(dòng)物是家兔，一般選用3只，體重1.5kg以上，注射藥物前測(cè)量肛門體溫3次,取平均值(家兔的正常體溫38.5～39.6℃)。然后耳靜脈注射藥液(1～2ml/Kg),注射藥物后1小時(shí)、2小時(shí)、3小時(shí)各測(cè)體溫1次。如3兔體溫升高均不超過(guò)0.6℃,即合格,說(shuō)明無(wú)熱原。39(五)熱原檢查熱原是由細(xì)菌產(chǎn)生的一種毒98四、其它醫(yī)學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

(一)計(jì)劃生育中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

常選用成年大白鼠，靈長(zhǎng)類動(dòng)物等，如觀察藥物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生殖率、精子數(shù)、精子活動(dòng)力以及對(duì)雄性激素的影響，和雌性的生殖與避孕以及雌性激素的影響。40四、其它醫(yī)學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

(一)計(jì)劃生育中99(二)病毒學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

病毒學(xué)研究中常選用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有金黃地鼠、小白鼠、豚鼠、家兔、綿羊、禽類、猴等。分離病毒廣泛使用的是乳鼠，它對(duì)柯薩琪病毒、呼吸道病毒和蟲(chóng)媒病毒感染有很高的易感性。

選用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物不僅考慮它的易感性，還考慮接種途徑，例