豬繁殖與呼吸綜合征病毒-課件

豬繁殖與呼吸綜合征病毒

（Porcinereproductiveandrespiratorysyndrome

virus，PRRSV）

豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)能引起豬的一種高度傳染性疾病，又稱“豬藍(lán)耳病”。癥狀:

妊娠母豬的繁殖障礙(流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎)。

各種年齡豬特別是仔豬的呼吸道疾病。一、PRRSV的形態(tài)特征1、套式病毒目動脈炎病毒科動脈炎病毒屬

2、基本形態(tài)及核酸病毒粒子呈卵圓形，直徑50～65nm。

核衣殼直徑30～35nm，呈二十面體對稱。

有囊膜。

單分子線狀單股正鏈RNA病毒。3、病毒蛋白有核衣殼蛋白（N，分子質(zhì)量120000u）和兩種主要囊膜蛋白（M和GP5）。M是非糖基化的嵌膜蛋白，分子質(zhì)量160000u。GP5為糖蛋白，分子質(zhì)量約25000u。GP5與M通過二硫鍵形成二聚體，對病毒的感染力及中和作用至關(guān)重要。此外，還有4種次要囊膜蛋白（GP2、GP3、GP4及E）及兩種大分子非結(jié)構(gòu)蛋白（NSP）。

二、PRRSV的增殖與變異

1、病毒的增殖病毒增殖的細(xì)胞：豬的單核細(xì)胞-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)內(nèi)增殖豬肺泡巨噬細(xì)胞外周單核細(xì)胞肺間質(zhì)巨噬細(xì)胞最為敏感在宿主細(xì)胞漿的空泡膜及滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)小池膜上“出芽”，成熟的病毒粒子多蓄積在空泡腔內(nèi)。

病毒增殖數(shù)量與其適應(yīng)宿主細(xì)胞程度有密切關(guān)系。

病毒增殖的過程：

鼻黏膜或上呼吸道系統(tǒng)(巨噬細(xì)胞)血液循環(huán)初級復(fù)制部位

病毒增殖的特點(diǎn)：增殖的特點(diǎn)有嚴(yán)格的宿主專一性

對巨噬細(xì)胞有專嗜性。

抗體依賴性增強(qiáng)作用即在亞中和抗體水平存在的情況下，在細(xì)胞上的復(fù)制能力反而得到增強(qiáng)。2、病毒的變異PRRSV分為兩個型：（1）以Lelystadvirus(LV株)為代表的歐洲型（簡稱A亞群）。（2）以ATCCVR-2332毒株為代表的美洲型（簡稱B亞群）。

兩者在抗原上有顯著差異，只有很少的交叉反應(yīng)。

A亞群：廣泛的基因組變異。

B亞群：呈較為保守性。不同毒株之間在毒力和致病力上有明顯的差異。

我國的PRRSV均屬美洲型，迄今還沒有發(fā)現(xiàn)歐洲型株，同時我國的分離毒株也存在變異現(xiàn)象，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)有缺失變異毒株的存在。四、PRRSV的抵抗力1、病毒的穩(wěn)定性受pH和溫度的影響比較大。在pH﹤5或pH﹥7的條件下，其感染力降低95%以上。病毒在-70℃可保存18個月，4℃保存1個月，37℃48h，56℃45min完全失去感染力。

2、干燥可很快使病毒失活。3、對有機(jī)溶劑十分敏感，經(jīng)氯仿處理后，其感染性可下降99.99％。4、對常用的化學(xué)消毒劑的抵抗力不強(qiáng)。

4、傳播途徑PRRSV主要傳播途徑是接觸感染、空氣傳播，也可通過胎盤垂直傳播。易感豬可經(jīng)以下幾種途徑而感染病毒：經(jīng)口、鼻腔、肌肉、腹腔、靜脈及子宮內(nèi)接種。與帶毒豬直接接觸。與污染有PRRSV的運(yùn)輸工具、器械接觸。感染豬的流動也是本病的重要傳播方式。六、PRRSV的實驗室診斷該病毒確切診斷需依賴實驗室診斷技術(shù)，包括病毒分離鑒定、血清學(xué)診斷和分子生物學(xué)診斷技術(shù)。（一）病毒分離鑒定病毒分離鑒定是診斷PRRSV最確切的方法1、病料首選材料：肺、扁桃體、脾、淋巴結(jié)和血清。適宜的檢驗材料：死產(chǎn)和流產(chǎn)胎兒的脾肺血清和胸水。檢出率最高：弱胎豬和有呼吸道癥狀的急性感染豬。2、分離病毒的細(xì)胞

原代細(xì)胞：PAM。

傳代細(xì)胞：CL2621、MAl04、Marcl45等細(xì)胞系。但就臨診分離率而言，PAM的敏感性要高于傳代細(xì)胞。注意：（1）一般來說日齡小的豬對病毒的敏感性更高些。（2）首次傳代有時可能無CPE，需盲傳2～3代。（3）

不同的毒株可能適應(yīng)不同的細(xì)胞系。有些毒株僅能在PAM或僅能在CL2621細(xì)胞中生長。歐洲株在PAM上的復(fù)制速度更快、效率更高。北美毒株在CL2621上更有利于分離。

3、病毒鑒定的技術(shù)（1）單克隆抗體或多克隆抗體免疫熒光抗體技術(shù)（2）單層過氧化物酶試驗（3）RT-PCR技術(shù)（4）電鏡技術(shù)（二）血清學(xué)診斷采用血清學(xué)抗體檢測技術(shù)是應(yīng)用最為廣泛的實驗室診斷方法。目前有4種不同的方法用于檢測血清中的PRRSV抗體，包括：方法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)間接免疫熒光抗體試驗

（IFA）特異性高早期診斷抗原變異會影響結(jié)果結(jié)果主觀判定免疫過氧化物酶單層試驗（IPMA）

特異性高敏感性高早期診斷結(jié)果主觀判定高背景抗原變異會影響結(jié)果

血清中和試驗（SN）可檢測期長敏感性低耗時抗原變異會影響結(jié)果酶聯(lián)免疫吸附試驗

（ELISA）自動化操作高品質(zhì)控制高背景（三）分子生物學(xué)診斷技術(shù)1、RT-PCR2、巢式PCR3、原位PCR4、RT-PCR-RFLP5、