幼齡大鼠的性別鑒別方法新探

幼齡大鼠的性別鑒別方法新探【摘要】目的探討幼齡大鼠性別的最佳鑒別方法。方法將同期交配的孕鼠分為4組，針對乳鼠在不同日齡的身體發(fā)育特點，在3?4日齡采用觀察其肛門與外陰距離和相對距離的方法、對5?8日齡再附加對乳頭（乳狀突）觀察的方法進行性別鑒別對比實驗。結(jié)果B組鑒別法相對于A組準(zhǔn)確度高，D組以距離再結(jié)合乳頭觀察的方法來鑒別乳鼠的性別無誤差產(chǎn)生。結(jié)論上述兩種方法對于幼齡大鼠的性別區(qū)分效果優(yōu)于傳統(tǒng)鑒別方法。LiZhiman,WangDeli,XuePing,etal.LaboratoryAnimalCenterofJilinUniversity,Changchun130021.［Abstract］ObjectiveTostudytheoptimummethodofdiscriminatingthenepionicratssex.MethodsThepregnantratsmatinginthecorrespondingperiodweredividedintofourgroups.AsfortheNepionicRatsatthebodygrowthcharacteristicofdifferentdaysages,themethodofobservingthedistanceandtherelativedistanceoftheanusandthevulvaswhentheywerethreetofourdaysoldwasusedtodiscriminatethesex.Whentheyarefivetoeightdaysold,themethodofobservingthepapillaswasaddedtodiscriminatethesex.ResultsTheaccuracyofdiscrimi—natingmethodinGroupBwasbetterthanthatinGroupA;themethodofobservingthedistancesandpapillaswasnoterrortodiscriminatethesexofnepionicrat.ConeclusionIthasthesignificanteffectsthatthetwomethodsdistin一guishthesexofthenepionicrats.Keywordsnepionicratsexualdiscriminationdistance醫(yī)學(xué)實驗動物中，幼齡大鼠的性別區(qū)分的準(zhǔn)確程度對于某些如生殖生理、細(xì)胞生物學(xué)、制藥工程等有關(guān)生命科學(xué)實驗具有十分重要的意義。而大、小鼠與猴及狗不同，生后外生殖器未熟，雄性要3?4周齡睪丸下降，雌性4?5周齡陰道才開口，因此，隨著生后齡期的變化觀察的側(cè)重點亦異。傳統(tǒng)的鑒別方法是:看肛門與外陰間的距離，距離長的為雄性，距離短的為雌性［1］。經(jīng)筆者長期實踐發(fā)現(xiàn)，此方法有一定的局限性，以此方法區(qū)分乳鼠性別常有失誤產(chǎn)生。如結(jié)合仔鼠的幾個不同日齡段特點來鑒別則更好。1材料與方法1.1實驗動物230?270g雌性Wistar大鼠40只，290?330g雄性Wistar大鼠20只。來源于吉林大學(xué)實驗動物中心。1.2方法1.2.1將雌、雄Wistar大鼠按2:1比例交配，以托盤陰栓法［2］檢查雌鼠受孕情況，將陽性者提出。4天內(nèi)提出32只孕鼠，記住交配日期，單籠飼養(yǎng)。1.2.2把孕鼠分為A、B、C、D四組，每組8只。19?21天乳鼠出生，其中A組計66只、B組65只、C組70只、D組68只。1.2.3在3?4日齡，將A組乳鼠提出，以肛門與生殖突間距離遠(yuǎn)近判別每只乳鼠的雌雄；將B組乳鼠提出，以肛門與生殖突的相對距離（即與其他乳鼠作相對比較）的遠(yuǎn)近來判別雌雄，并觀察乳突的有無。然后，將A組“雄鼠”32只分4窩由A組的1?4號母鼠哺乳；將“雌鼠”34只分4窩由A組的5?8號母鼠哺乳。將B組的“雄鼠”34只分4窩由其1?4號哺乳，“雌鼠”31只由其5?8號哺乳。注意:在放入前一定要用沾有母鼠體液氣味的墊料與待喂養(yǎng)乳鼠混合10min左右，以使母鼠適應(yīng)。1.2.4在5?8日齡，將C組乳鼠提出，僅以肛門與生殖突（或稱外陰）距離遠(yuǎn)近為準(zhǔn)判別雌雄;對D組乳鼠以肛門與生殖突的距離相對較近且鼠蹊部至胸部間有3?4對點狀乳頭（或可稱為乳狀突）為雌性;以肛門與生殖突間距離相對較遠(yuǎn)且鼠蹊部與胸部間無點狀乳突者為雄性。然后，將C組“雄鼠”33只分4窩由C組的1?4號母鼠哺乳;將“雌鼠”37只分4窩由C組的5?8號母鼠哺乳。將D組的“雄鼠”36只分4窩由其1?4號哺乳，“雌鼠”32只由其5?8號哺乳。在放入前要用沾有母鼠尿液氣味的墊料與待喂養(yǎng)乳鼠混合15min左右，以使母鼠適應(yīng)。1.2.521日齡離乳時核查乳鼠實際性別。2結(jié)果A組中有5只失誤，B組1只;C組3只，D組0。具體情況如下：表1幼齡大鼠性別鑒別結(jié)果與實際性別的對照（略）由此可見，B組（4日齡內(nèi)的乳鼠）鑒別法相對于A組準(zhǔn)確度較高;D組（5日齡以后）以距離再結(jié)合乳頭觀察的方法來鑒別乳鼠性別無誤差產(chǎn)生。3結(jié)論與討論3.1對于1?4日齡乳鼠，由于發(fā)育時間短，其其他生理特征尚未表現(xiàn)出來，只能憑其肛門與生殖突（筆者認(rèn)為:此時此稱法較外陰或生殖器要恰當(dāng)）間的距離遠(yuǎn)近來判斷，遠(yuǎn)者為雄性，近者為雌性。但因為乳鼠的體形大小與母鼠的胎產(chǎn)仔數(shù)的多少及其在胚胎期的發(fā)育狀況有關(guān)，這兩點間的距離也是相對的，所以在觀察某胎其中1只鼠的肛門與生殖突間距離時，要參照另幾只乳鼠的距離，否則容易出現(xiàn)失誤。3.2對于5日齡以后的乳鼠，在觀察其肛門與生殖器的距離遠(yuǎn)近的同時，一定要結(jié)合其乳頭（或稱乳狀突）的有無來判斷性別。在此時期，雌性乳鼠的體毛與乳頭幾乎是同時出現(xiàn)的。此時由于體毛呈淺白色，在其較稀疏時，乳頭在皮膚上呈圓形點狀。隨著毛發(fā)逐漸濃密，乳頭部位就呈凹陷深色，很容易發(fā)現(xiàn)。值得注意的是，在此階段，要把乳頭與臍帶突加以區(qū)別:乳頭出現(xiàn)在鼠蹊部至胸部間，以腹中線為軸成對對稱排列，僅雌性有;而臍帶突僅體現(xiàn)為腹部中間的一個點，雌雄均有。3.3單一性別的乳鼠在醫(yī)學(xué)實驗中應(yīng)用較多，而清潔級和SPF動物的生產(chǎn)設(shè)施又為仔鼠性別區(qū)分帶來一定的難度。希望此方法對大家有所借鑒。參考文獻1魏泓.醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)，成都:四川科學(xué)技術(shù)出版社，1998,167-168.2李彥清，邵龍江，李森，等.大鼠陰栓的實驗觀察和孕鼠模型鑒定方法的比較.中國實驗動物學(xué)雜志，2002，12(1):17-18.作者單位:130021吉林長春吉林大學(xué)實驗動物中心小鼠和大鼠是一個道理：遠(yuǎn)公近母一般而言，比較大一點的老鼠雄性的睪丸還是比較明顯的，這很容易區(qū)分。對于比較小的，可以據(jù)以下方法：看肛門與生殖器之間的距離：雄性隔得遠(yuǎn)，雌性隔得近。雄性陰莖朝頭的方向突出，可擠壓包皮使其露出而確認(rèn)。雌性較小時可見閉合的陰道口，擠壓亦可張開?？梢哉f，這個方法是最本質(zhì)的，最能確認(rèn)的。像兔、豚鼠等這些較難辨認(rèn)雌雄的動物均可用此法。當(dāng)然，看得多了，不用如此擠壓，一眼就可看出來。將生殖器周圍皮膚稍微用力往下擠壓，可以分清柱狀和縫狀：前者雄，后者雌?？慈轭^。剛開始一定要認(rèn)真仔細(xì)地觀察，這樣會有一些經(jīng)驗。熟悉以后，可以很迅速很準(zhǔn)確的分出來。腦下垂體和腎上腺：雌性的遠(yuǎn)大于雄性腎臟鮑氏囊上皮(epitheliumofBowman'scapsuleinkidney)：雄性：立方上皮(cuboidal)雌性：鱗狀上皮(squamous)未成年的動物性器官還沒有成熟，雄鼠的睪丸還沒有墜入陰囊，所以只有看肛門和肚子上的突起部位之間的距離了。雌小鼠的肛門距離生殖器是特別近的，之間基本沒什么距離，其實有時我們看成年動物也是看這點。雄鼠除了距離要大一些外，生殖器略顯凸起。1）將老鼠小心拿