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文檔簡介

第二節(jié)抗原抗體反應抗原抗體反應的化學本質抗原抗體反應的特點影響抗原抗體反應的因素第二節(jié)抗原抗體反應抗原抗體反應的化學本質抗原抗體反應的化學本質結構基礎抗原抗體的結合力反應過程抗原抗體反應的化學本質結構基礎抗原抗體反應的特點課件抗原抗體反應的特點課件抗原和抗體的結合是互補性的特異性結合不形成牢固的共價鍵,通過非共價鍵結合這種弱的結合力涉及幾種分子間的作用力

一、抗原抗體結合力一、抗原抗體結合力*1.靜電引力*2.范德華引力*3.氫鍵結合力*4.疏水作用力抗原和抗體的結合是互補性的特異性結合一、抗原抗體結合力

靜電引力(庫倫引力)

(electrostaticforces)(coulombicforces)

概念:抗原和抗體分子帶有相反電荷的氨基和羧基基團之間相互的引力。

引力的大小與兩個相互作用基團間的距離的平方成反比;平均鍵能約為20.9kJ/mo1。靜電引力(庫倫引力)(elect范德華引力(VanderWaalsforces)概念:抗原和抗體相互接近時,由于分子的極化作用而出現的引力。結合力的大小與兩個相互作用基團的極化程度的乘積成正比、與它們之間距離的7次方成反比,鍵能約為4.2~12.5kJ/mol。這種引力的能量小于靜電引力。具有特異性。范德華引力(VanderWaalsforces

概念:供氫體上的氫原子與受氫體原子間的引力。氫鍵結合力(hydregenbondforces)

供氫體:羧基、氨基和羥基受氫體:羧基氧、羧基碳和肽鍵氧等能的大小取決于氫鍵的方向:氫鍵具有高度的方向性。氫鍵結合力與供氫體和受氫體之間距離的6次方成反比,鍵能約20.9kJ/mol。概念:供氫體上的氫原子與受氫體原子氫鍵結合力(hydreg

疏水作用力(疏水鍵)

概念:兩個疏水基團在水溶液中相互接觸時,由于對水分子排斥而趨向聚集的力??乖瓫Q定簇與抗體上的結合點靠近,互相間正、負極性消失,親水層立即失去。此力在抗原抗體反應中的結合是很重要的。提供的作用力最大,約占總結合力的50%。疏水作用力(疏水鍵)概念:兩個疏水基團在

抗原抗體結合力示意圖抗原抗體氫鍵結合力

ONONHH靜電引力--++范得華力-++-+--+疏水作用力排斥的水抗原抗體結合力示意圖抗原抗體氫鍵結合力

二、抗原抗體親和性(affinity)*親和性是抗體分子上一個抗原結合點與對應的抗原決定簇之間的相適應性而存在著的引力,這是抗原與抗體之間固有的結合力。*親和力(avidity)是指反應系統(tǒng)中復雜抗原與相應抗體之間的結合能力。親和力與親和性、抗體的結合價和抗原的有效決定簇數目相關。親和力越大,抗原抗體結合越牢固。二、抗原抗體親和性(affinity)*親和性

親和常數親和常數K=

K值大的抗體與抗原牢固結合,不易解離,說明該抗體有高親和力??贵w與抗原結合是可逆的反應,在平衡時其親和常數親和常數K=抗體與抗原結合是可逆的血清學反應條件下,抗原抗體均帶負電荷,使極化的水分子在其周圍形成水化層,成為親水膠體。

三、親水膠體轉化為疏水膠體

當抗原與抗體結合后,表面電荷減少,水化層變??;而且由于抗原抗體復合物形成后,與水接觸的表面積減少,由親水膠體轉化為疏水膠體。在電解質作用下,各疏水膠體之間靠攏,形成可見的抗原抗體復合物。血清學反應條件下,抗原抗體均帶負電荷,三、親水

親水膠體轉化為疏水膠體示意圖親水膠體疏水膠體轉化NaCl可見反應親水膠體轉化為疏水膠體示意圖親水膠體疏水膠體轉化NaC抗原抗體反應的特點*1.特異性*2.比例性*3.可逆性

抗原抗體反應的特點*1.特異性*2.比例性

一、特異性(specificity)*概念:抗原分子,只能與由它刺激所產生的抗體結合而起反應的專一性能。一、特異性*決定因素:由抗原決定簇和抗體分子超變區(qū)之間空間結構的互補性決定的。抗體分子N端可變區(qū)形成3nm×1.5nm×0.7nm的槽溝,只有與其空間結構互補的抗原決定簇才能如楔狀嵌入。*交叉反應(crossreaction)兩種不同的抗原物質具有部分相同或類似結構的抗原決定簇,則可與彼此相應的抗體反應。一、特異性(specificity)*概念:抗特異性示意圖特異性示意圖*最適比(optimalratio)或等價點(equivzlencepoint)最迅速出現沉淀時的抗原抗體的濃度比或量比。

二、比例性(proportionality)等價帶(equivalencezone)抗原與抗體分子比例合適的范圍。帶現象:Ag與Ab比例不適而不出現可見反應。*前帶(prozone)抗體過量時。*后帶(postzone)

抗原過量時。*最適比(optimalratio)或等價點(equivz比例性示意圖抗體過量比例合適抗原的量抗原過量抗體沉淀的量前帶等價帶后帶比例性示意圖抗體過量比例合適抗原的

三、可逆性(reversibility)概念:是指抗原與抗體結合成復合物后,在一定條件下可解離為游離抗原與抗體的特性。

解離后抗原抗體仍保持原有特性。一定條件:低pH、高濃度鹽等。常用于解離抗原抗體復合物的物質有:3mol/L硫氰化鉀、pH2.40.1mol/L甘氨酸、7mol/L尿素等。三、可逆性(reversibility)概念:是抗體混有SPAg抗體-SPAg抗體-SPAg分離劑一、抗原抗體結合二、分離抗體

可逆性示意圖抗體抗體混有SPAg抗體-SPAg抗體-SPAg分離劑一、抗原抗抗原抗體反應影響因素一、反應物自身因素*抗原:1.理化特性2.Ag決定簇數量3.Ag決定簇種類*抗體:1.來源2.特異性與親和力3.濃度抗原抗體反應影響因素一、反應物自身因素二、環(huán)境條件:*電解質:0.85%NaCl*酸堿度:pH6~9*溫度:15~40℃二、環(huán)境條件:第三節(jié)抗原抗體反應類型1.沉淀反應2.凝集反應3.補體參與的反應4.中和反應5.免疫標記第三節(jié)抗原抗體反應類型1.沉淀反應表

抗原抗體反應的基本類型表反應類型實驗技術檢測方法敏感度沉淀反應液相沉淀試驗觀察沉淀、檢測濁度+,++++瓊脂凝膠擴散觀察掃描沉淀線或環(huán)+凝膠電泳技術或峰或弧++補體參與反應補體溶血試驗以裸眼或光電比色儀++補體結合試驗觀察測定溶血現象+++免疫標記技術熒光免疫技術檢測熒光現象++++放射免疫技術檢測放射性++++酶標免疫技術檢測酶底物顯色++++發(fā)光免疫技術測定發(fā)光強度++++生物素-親合素技術結合其它標記技術++++金標免疫技術檢測金顆粒沉淀++++凝集反應

直接凝集試驗用裸眼、放大鏡或顯+間接凝集試驗微鏡觀察紅細胞或膠++凝集抑制試驗乳等顆粒和各種凝集+++協同凝集試驗現象+++抗球蛋白試驗+++中和反應病毒中和試驗病毒感染性喪失+毒素中和試驗外毒素毒性丟失++表抗原抗體反應的特點課件第二節(jié)抗原抗體反應抗原抗體反應的化學本質抗原抗體反應的特點影響抗原抗體反應的因素第二節(jié)抗原抗體反應抗原抗體反應的化學本質抗原抗體反應的化學本質結構基礎抗原抗體的結合力反應過程抗原抗體反應的化學本質結構基礎抗原抗體反應的特點課件抗原抗體反應的特點課件抗原和抗體的結合是互補性的特異性結合不形成牢固的共價鍵,通過非共價鍵結合這種弱的結合力涉及幾種分子間的作用力

一、抗原抗體結合力一、抗原抗體結合力*1.靜電引力*2.范德華引力*3.氫鍵結合力*4.疏水作用力抗原和抗體的結合是互補性的特異性結合一、抗原抗體結合力

靜電引力(庫倫引力)

(electrostaticforces)(coulombicforces)

概念:抗原和抗體分子帶有相反電荷的氨基和羧基基團之間相互的引力。

引力的大小與兩個相互作用基團間的距離的平方成反比;平均鍵能約為20.9kJ/mo1。靜電引力(庫倫引力)(elect范德華引力(VanderWaalsforces)概念:抗原和抗體相互接近時,由于分子的極化作用而出現的引力。結合力的大小與兩個相互作用基團的極化程度的乘積成正比、與它們之間距離的7次方成反比,鍵能約為4.2~12.5kJ/mol。這種引力的能量小于靜電引力。具有特異性。范德華引力(VanderWaalsforces

概念:供氫體上的氫原子與受氫體原子間的引力。氫鍵結合力(hydregenbondforces)

供氫體:羧基、氨基和羥基受氫體:羧基氧、羧基碳和肽鍵氧等能的大小取決于氫鍵的方向:氫鍵具有高度的方向性。氫鍵結合力與供氫體和受氫體之間距離的6次方成反比,鍵能約20.9kJ/mol。概念:供氫體上的氫原子與受氫體原子氫鍵結合力(hydreg

疏水作用力(疏水鍵)

概念:兩個疏水基團在水溶液中相互接觸時,由于對水分子排斥而趨向聚集的力??乖瓫Q定簇與抗體上的結合點靠近,互相間正、負極性消失,親水層立即失去。此力在抗原抗體反應中的結合是很重要的。提供的作用力最大,約占總結合力的50%。疏水作用力(疏水鍵)概念:兩個疏水基團在

抗原抗體結合力示意圖抗原抗體氫鍵結合力

ONONHH靜電引力--++范得華力-++-+--+疏水作用力排斥的水抗原抗體結合力示意圖抗原抗體氫鍵結合力

二、抗原抗體親和性(affinity)*親和性是抗體分子上一個抗原結合點與對應的抗原決定簇之間的相適應性而存在著的引力,這是抗原與抗體之間固有的結合力。*親和力(avidity)是指反應系統(tǒng)中復雜抗原與相應抗體之間的結合能力。親和力與親和性、抗體的結合價和抗原的有效決定簇數目相關。親和力越大,抗原抗體結合越牢固。二、抗原抗體親和性(affinity)*親和性

親和常數親和常數K=

K值大的抗體與抗原牢固結合,不易解離,說明該抗體有高親和力??贵w與抗原結合是可逆的反應,在平衡時其親和常數親和常數K=抗體與抗原結合是可逆的血清學反應條件下,抗原抗體均帶負電荷,使極化的水分子在其周圍形成水化層,成為親水膠體。

三、親水膠體轉化為疏水膠體

當抗原與抗體結合后,表面電荷減少,水化層變?。欢矣捎诳乖贵w復合物形成后,與水接觸的表面積減少,由親水膠體轉化為疏水膠體。在電解質作用下,各疏水膠體之間靠攏,形成可見的抗原抗體復合物。血清學反應條件下,抗原抗體均帶負電荷,三、親水

親水膠體轉化為疏水膠體示意圖親水膠體疏水膠體轉化NaCl可見反應親水膠體轉化為疏水膠體示意圖親水膠體疏水膠體轉化NaC抗原抗體反應的特點*1.特異性*2.比例性*3.可逆性

抗原抗體反應的特點*1.特異性*2.比例性

一、特異性(specificity)*概念:抗原分子,只能與由它刺激所產生的抗體結合而起反應的專一性能。一、特異性*決定因素:由抗原決定簇和抗體分子超變區(qū)之間空間結構的互補性決定的??贵w分子N端可變區(qū)形成3nm×1.5nm×0.7nm的槽溝,只有與其空間結構互補的抗原決定簇才能如楔狀嵌入。*交叉反應(crossreaction)兩種不同的抗原物質具有部分相同或類似結構的抗原決定簇,則可與彼此相應的抗體反應。一、特異性(specificity)*概念:抗特異性示意圖特異性示意圖*最適比(optimalratio)或等價點(equivzlencepoint)最迅速出現沉淀時的抗原抗體的濃度比或量比。

二、比例性(proportionality)等價帶(equivalencezone)抗原與抗體分子比例合適的范圍。帶現象:Ag與Ab比例不適而不出現可見反應。*前帶(prozone)抗體過量時。*后帶(postzone)

抗原過量時。*最適比(optimalratio)或等價點(equivz比例性示意圖抗體過量比例合適抗原的量抗原過量抗體沉淀的量前帶等價帶后帶比例性示意圖抗體過量比例合適抗原的

三、可逆性(reversibility)概念:是指抗原與抗體結合成復合物后,在一定條件下可解離為游離抗原與抗體的特性。

解離后抗原抗體仍保持原有特性。一定條件:低pH、高濃度鹽等。常用于解離抗原抗體復合物的物質有:3mol/L硫氰化鉀、pH2.40.1mol/L甘氨酸、7mol/L尿素等。三、可逆性(reversibility)概念:是抗體混有SPAg抗體-SPAg抗體-SPAg分離劑一、抗原抗體結合二、分離抗體

可逆性示意圖抗體抗體混有SPAg抗體-SPAg抗體-SPAg分離劑一、抗原抗抗原抗體反應影響因素一、反應物自身因素*抗原:1.理化特性2.Ag決定簇數量3.Ag決定簇種類*抗體:1.來源2.特異性與親和力3.濃度抗原抗體反應影響因素一、反應物自身因素二、環(huán)境條件:*電解質:0.85%NaCl*酸堿度:pH6~9*溫度:15~40℃二、環(huán)境條件:第三節(jié)抗原抗體反應類型1.沉淀反應2.凝集反應3.補體參與的反應4.中和反應5.免疫標記第三節(jié)抗原抗體反應類型1.沉淀反應表

抗原抗體反應的基本類型

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