云南省楚雄州大姚縣大姚一中2023年高考生物必刷試卷含答案解析

2023學(xué)年高考生物模擬測試卷注意事項：1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、測試卷卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．化療藥物長春堿能夠與微管蛋白結(jié)合阻礙紡錘體形成，從而抑制癌細(xì)胞增殖。相關(guān)敘述錯誤的是()A．長春堿在細(xì)胞分裂間期發(fā)揮作用，阻止蛋白質(zhì)合成B．癌癥是由細(xì)胞中多個基因突變累積造成的C．癌細(xì)胞通過有絲分裂增殖，可維持遺傳物質(zhì)的相對穩(wěn)定D．長春堿不能特異性作用于癌細(xì)胞，會對機(jī)體產(chǎn)生副作用2．對如圖所示實驗的分析，正確的是（）A．子代A系鼠的漿細(xì)胞裂解了移植的B系鼠皮膚B．C系鼠的皮膚沒有引起子代A系鼠的免疫應(yīng)答C．B系鼠和C系鼠的皮膚對于子代A系鼠是抗體D．注射淋巴細(xì)胞使子代A系鼠的基因型發(fā)生改變3．如下所示為某生態(tài)系統(tǒng)中的一條完整食物鏈。下列相關(guān)敘述正確的是（）草→蚜蟲→瓢蟲→小鳥A．該生態(tài)系統(tǒng)可能存在捕食小鳥的動物B．該食物鏈中各生物的數(shù)量呈金字塔狀C．各營養(yǎng)級同化的能量最終以熱能形式散失D．各營養(yǎng)級之間的能量傳遞效率均相同4．若生態(tài)系統(tǒng)中生活著多種植食性動物，其中某一植食性動物種群個體數(shù)量的變化如下圖所示。若不考慮該系統(tǒng)內(nèi)生物個體的遷入與遷出，下列關(guān)于該種群個體數(shù)量變化的敘述，正確的是（）A．b點到c點的過程中，該種群的環(huán)境容納量下降B．該種群a點的次級生產(chǎn)量大于c點的次級生產(chǎn)量C．該種群同化量和呼吸量的差值不都用于其生長繁殖D．年齡結(jié)構(gòu)變動會導(dǎo)致該種群個體數(shù)量發(fā)生波動，波動趨勢與c-d段相似5．下圖為生物遺傳信息傳遞與表達(dá)過程示意圖，數(shù)字表示過程。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．煙草花葉病毒遺傳信息傳遞的過程與上圖表示的過程是相同的B．②、③過程中的堿基配對方式是相同的C．參與①和②過程的酶相同D．圖示③的生理過程完全可能發(fā)生在動物細(xì)胞有絲分裂間期6．如圖是細(xì)胞將物質(zhì)向細(xì)胞外運(yùn)輸?shù)囊环N方式，有關(guān)敘述正確的是（）A．不需要消耗細(xì)胞產(chǎn)生的能量B．神經(jīng)遞質(zhì)通過該方式運(yùn)輸C．依賴于膜的選擇透過性D．運(yùn)輸過程中需要載體7．如圖為神經(jīng)調(diào)節(jié)中兩個重要的結(jié)構(gòu)模式圖，下列選項中錯誤的是（）A．甲圖中③內(nèi)的物質(zhì)為神經(jīng)遞質(zhì)，它可以和⑥上的特異性受體結(jié)合B．圖甲為圖乙中結(jié)構(gòu)c的局部放大圖像C．圖乙中b受損的情況下，刺激a仍有感覺，但是肌肉不能收縮D．圖乙中的X所示神經(jīng)纖維為傳入神經(jīng)8．（10分）某研究小組進(jìn)行“制作DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型”的活動。下列敘述正確的是（）A．制作的DNA雙鏈模型中，四種堿基的顏色各不相同B．制作脫氧核苷酸模型時，每個磷酸上連接一個脫氧核糖和一個堿基C．制作DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型過程中，嘧啶數(shù)與嘌呤數(shù)相等體現(xiàn)了堿基互補(bǔ)配對原則D．選取材料時，用4種不同形狀的材料分別表示脫氧核糖、磷酸和堿基二、非選擇題9．（10分）1996年克隆羊“多莉”誕生以后，馬、牛、兔、貓、狗、駱駝等哺乳類動物的體細(xì)胞克隆相繼成功，但與人類相近的靈長類動物（如猴）的體細(xì)胞克隆一直未被攻克。2017年底兩只體細(xì)胞克隆猴“中中”和“華華”先后在中國科學(xué)院神經(jīng)科學(xué)研究所誕生，成功培育全球首個體細(xì)胞克隆猴。（1）用動物體細(xì)胞克隆動物，實際上是通過___________來實現(xiàn)的，該技術(shù)分為______________________和______________________，其中難度更大的是___________，原因是______________________，恢復(fù)其全能性十分困難。（2）體細(xì)胞克隆猴的誕生還需要___________技術(shù)和___________技術(shù)的支持。（3）體細(xì)胞克隆猴的重要意義在于，能夠在一年內(nèi)產(chǎn)生大批___________相同、可以模擬人類疾病的模型猴，將為人類疾病機(jī)理研究、干預(yù)、診治帶來光明前景。10．（14分）番茄紅素具有一定的藥用價值，但普通番茄合成的番茄紅素易發(fā)生轉(zhuǎn)化（如圖甲），科學(xué)家設(shè)計了一種重組DNA（質(zhì)粒三），該DNA能表達(dá)出雙鏈RNA（發(fā)卡），番茄細(xì)胞能識別侵入的雙鏈RNA并將該雙鏈RNA及具有相同序列的單鏈RNA一起降解，從而提高果實中番茄紅素的含量（如圖乙）。請分析回答下列問題：（1）在體外快速大量獲得目的基因或含有目的基因的“片段A”可以采用___________技術(shù)，該技術(shù)的原理是________________________。

（2）根據(jù)圖甲推知，轉(zhuǎn)錄出“發(fā)卡”的DNA片段實際上是兩個反向連接的________________基因，上述過程通過阻止該基因在細(xì)胞內(nèi)的_______________（填“轉(zhuǎn)錄”或“翻譯”），提高了果實中番茄紅素的含量。（3）為保證圖中的片段A反向連接，處理已開環(huán)質(zhì)粒所用的兩種限制酶是______________________。（4）去磷酸化是去掉黏性末端最外側(cè)游離的磷酸基團(tuán)。對已開環(huán)的質(zhì)粒二兩端去磷酸化的主要作用是阻止其_____________，該DNA分子仍可以和目的基因連接，形成缺少___________個磷酸二酯鍵的重組質(zhì)粒，隨后在細(xì)胞中被修復(fù)。（5）可利用___________________法將質(zhì)粒三導(dǎo)入植物細(xì)胞。11．（14分）斑馬魚的HuC基因在早期胚胎神經(jīng)細(xì)胞中選擇性表達(dá)，研究人員構(gòu)建了HuC基因的表達(dá)載體，并導(dǎo)入到斑馬魚細(xì)胞中研究其作用，請回答：（1）為獲取HuC基因，研究人員從早期胚胎神經(jīng)細(xì)胞中提取HuC基因的mRNA，通過_________獲得大量的DNA，進(jìn)而構(gòu)建出HuC基因的______________。（2）DraⅢ，SnaBⅠ等是質(zhì)粒上不同限制酶的切割位點。為獲得HuC基因——綠色熒光蛋白基因的表達(dá)載體，需要對HuC基因和質(zhì)粒選用圖中的____________酶進(jìn)行切割，這樣做的原因是_________。不選擇NotⅠ酶切割的原因是_____________。（3）用Ca2+處理大腸桿菌，大腸桿菌細(xì)胞即能夠______________。實驗過程中可以采用在熒光顯微鏡下觀察________________________或者在培養(yǎng)基中添加______________，篩選出導(dǎo)入表達(dá)載體的大腸桿菌。12．我國新型農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化地區(qū)充分利用土地，創(chuàng)造了一種高效人工生態(tài)系統(tǒng)，如圖所示。據(jù)圖回答有關(guān)問題。（1）該生態(tài)工程能利用沼氣池中的微生物將糞便等廢物中的有機(jī)物轉(zhuǎn)化成無機(jī)物，為農(nóng)作物的光合作用提供無機(jī)營養(yǎng)，這一過程不但實現(xiàn)了廢棄物的____________，而且體現(xiàn)了_______________的“循環(huán)經(jīng)濟(jì)”原則。（2）沼氣池中的微生物在該生態(tài)系統(tǒng)中的主要功能是______________；沼氣燃燒后生成的CO2通入大棚內(nèi)的意義是_____________。（3）禽獸糞便進(jìn)入沼氣池發(fā)酵后，產(chǎn)生的沼氣可作為生活能源，沼液和沼渣再施入農(nóng)作物，使土壤有機(jī)質(zhì)含量明顯提高，這樣做的生態(tài)學(xué)意義有_____________、和提供清潔的能源等。（4）該模式減少了投入，增加了農(nóng)民收入，其生態(tài)學(xué)原理是________________。（5）該生態(tài)系統(tǒng)與一般的自然生態(tài)系統(tǒng)相比較，________穩(wěn)定性較低，所以需要人們不斷輸入物質(zhì)與能量。

2023學(xué)年模擬測試卷參考答案（含詳細(xì)解析）（含詳細(xì)解析）一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【答案解析】

在細(xì)胞分裂過程中，紡錘體的形成發(fā)生于前期，而化療藥物長春堿能夠與微管蛋白結(jié)合阻礙紡錘體形成，說明該藥物在細(xì)胞分裂前期發(fā)揮作用，進(jìn)而抑制癌細(xì)胞的增殖?！绢}目詳解】根據(jù)以上分析已知，化療藥物長春堿在細(xì)胞分裂前期發(fā)揮作用，抑制紡錘體的形成，不能牽引染色體運(yùn)動，進(jìn)而抑制癌細(xì)胞的增殖，A錯誤；癌癥是由細(xì)胞中原癌基因和抑癌基因等多個基因突變累積造成的，B正確；癌細(xì)胞的增殖方式是有絲分裂，有絲分裂產(chǎn)生的子細(xì)胞遺傳物質(zhì)不變，C正確；長春堿不能特異性作用于癌細(xì)胞，也會作用于正常增殖的細(xì)胞，因此會對機(jī)體產(chǎn)生副作用，D正確。2、B【答案解析】

據(jù)圖分析，抽取C系鼠的淋巴細(xì)胞，注射給A系鼠的胚胎，形成的子代A系鼠，被移植C系鼠的皮膚，未出現(xiàn)免疫排斥現(xiàn)象；而移植B系鼠的皮膚，會發(fā)生免疫排斥現(xiàn)象?！绢}目詳解】A、子代A系鼠的效應(yīng)T細(xì)胞裂解了移植的B系鼠的皮膚，漿細(xì)胞不能裂解移植的皮膚細(xì)胞，A錯誤；B、子代A系鼠對C系鼠的皮膚沒有發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，說明C系鼠的皮膚沒有引起子代A系鼠的免疫應(yīng)答，B正確；C、B系鼠和C系鼠的皮膚對于子代A系鼠是抗原，C錯誤；D、注射淋巴細(xì)胞使子代A系鼠出現(xiàn)了C系鼠的淋巴細(xì)胞，但沒有改變A系鼠的基因型，D錯誤。故選B。3、C【答案解析】

（1）生態(tài)系統(tǒng)中生物的能量最終來源是太陽，有機(jī)物的最終來源是綠色植物通過光合作用能制造有機(jī)物．生態(tài)系統(tǒng)中的生物部分包括生產(chǎn)者（綠色植物），消費(fèi)者（動物），分解者（細(xì)菌和真菌等）；（2）食物鏈的起點的生產(chǎn)者，終點是不被其他動物捕食的動物，中間用箭頭表示?！绢}目詳解】A、題干中指出這是一條完整的食物鏈，則小鳥是最高營養(yǎng)級，沒有可以捕食小鳥的動物，A錯誤；B、一顆草上可能有多只蚜蟲，所以食物鏈中的數(shù)量不一定呈金字塔狀，B錯誤；C、各營養(yǎng)級同化的能量最終以熱能形式散失（包括自身呼吸作用、分解者的分解作用），C正確；D、各營養(yǎng)級之間的能量傳遞效率不一定相同，D錯誤。故選C?！敬鸢更c睛】本題需要考生識記食物鏈的結(jié)構(gòu)，理解能量傳遞的過程，特別是C選項中需要綜合分析。4、D【答案解析】

從圖中個體數(shù)量隨著季節(jié)的變化在K值附近波動可以看出，該生態(tài)系統(tǒng)是一個相對穩(wěn)定的生態(tài)系統(tǒng)，具有一定的自我調(diào)節(jié)能力?！绢}目詳解】A、從圖中個體數(shù)量在K值附近波動可以看出，該生態(tài)系統(tǒng)是一個相對成熟穩(wěn)定的生態(tài)系統(tǒng)。只要環(huán)境條件基本不變，環(huán)境對某種群的環(huán)境容納量就不會明顯改變，b點到c點過程屬于正常的波動，K值保持不變，A錯誤；B、動物和其它異養(yǎng)生物靠消耗植物的初級生產(chǎn)量制造的有機(jī)物質(zhì)或固定的能量，稱為次級生產(chǎn)量，b點的種群數(shù)量多于c點的種群數(shù)量，但該種群b點的次級生產(chǎn)量不一定大于c點的次級生產(chǎn)量，B錯誤；C、同化量=呼吸量+用于自身生長發(fā)育和繁殖的能量，所以該種群同化量和呼吸量的差值都用于其生長繁殖，C錯誤；D、年齡結(jié)構(gòu)變動導(dǎo)致該種群數(shù)量波動，但也應(yīng)該在K值附近波動，D正確。故選D?！敬鸢更c睛】本題考查種群數(shù)量的增長曲線，在熟悉各種環(huán)境因素對種群數(shù)量變化的影響基礎(chǔ)上，準(zhǔn)確理解K值的含義是解題的關(guān)鍵。5、D【答案解析】

據(jù)圖分析，①表示DNA的自我復(fù)制，形成兩個子代DNA分子；②表示轉(zhuǎn)錄，形成單鏈的RNA；③表示翻譯，形成多肽鏈。甲表示mRNA，是翻譯的模板。【題目詳解】A、煙草花葉病毒屬于RNA病毒，其遺傳信息傳遞的過程與上圖表示的過程是不同的，A錯誤；B、②表示轉(zhuǎn)錄，③表示翻譯，兩個過程都遵循堿基互補(bǔ)配對原則，但是堿基配對方式不完全相同，前者有T-A，后者有A-U，B錯誤；C、參與①和②過程的酶不相同，前者有解旋酶和DNA聚合酶，后者有RNA聚合酶，C錯誤；D、圖示③表示翻譯過程，該生理過程完全可能發(fā)生在動物細(xì)胞有絲分裂間期，合成蛋白質(zhì)，D正確。故選D。6、B【答案解析】

由圖可知，該物質(zhì)通過胞吐的形式排出細(xì)胞，借助于細(xì)胞膜的流動性來實現(xiàn)，需要消耗能量?！绢}目詳解】A、胞吐需要消耗細(xì)胞產(chǎn)生的能量，A錯誤；B、突觸前膜通過胞吐的形式釋放神經(jīng)遞質(zhì)，B正確；C、胞吐依賴于膜的流動性，C錯誤；D、胞吐運(yùn)輸過程中不需要載體，D錯誤。故選B。7、C【答案解析】

分析題甲圖中突觸的結(jié)構(gòu)組成可知，①是軸突末端，②是線粒體，③是突觸小泡，④是突觸前膜，⑤是突觸間隙，⑥是突觸后膜；圖乙是反射弧的結(jié)構(gòu)模型圖，X所在的神經(jīng)元是傳入神經(jīng)元，b所在的神經(jīng)元為傳出神經(jīng)元，c代表突觸的位置，興奮在反射弧上的傳導(dǎo)是單向的，只能是感受器→傳入神經(jīng)→神經(jīng)中樞→傳出神經(jīng)→效應(yīng)器。【題目詳解】甲圖中③是突觸小泡，突觸小泡內(nèi)含有神經(jīng)遞質(zhì)，神經(jīng)遞質(zhì)由突觸前膜釋放后，與突觸后膜上的特異性受體結(jié)合，引起突觸后膜所在的神經(jīng)元興奮或抑制，A正確；甲圖為圖乙中結(jié)構(gòu)c的局部放大圖像，B正確；由于興奮在反射弧上的傳導(dǎo)是單向的，若b受損的情況下，刺激a不會有感覺，C錯誤；圖乙中的X所示神經(jīng)纖維為傳入神經(jīng)，D正確?！敬鸢更c睛】關(guān)鍵點：判斷反射弧中傳入神經(jīng)和傳出神經(jīng)的依據(jù)——由于題圖中反射弧沒有神經(jīng)節(jié)，所以可以根據(jù)突觸的結(jié)構(gòu)模式圖（—<●―）判斷或者根據(jù)效應(yīng)器可以是傳出神經(jīng)末梢和所支配的肌肉組成判斷。8、A【答案解析】

本題考查制作DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的活動，需要制備若干四種顏色的堿基、一種顏色的脫氧核糖、一種顏色的磷酸，在制作的過程中注意堿基互補(bǔ)配對原則，即A與T配對、G與C配對?！绢}目詳解】A、制作的DNA雙鏈模型中，四種堿基的顏色應(yīng)該各不相同，A正確；B、制作脫氧核苷酸模型時，每個磷酸上連接一個脫氧核糖，但是不連接堿基，B錯誤；C、制作DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型過程中，嘧啶數(shù)與嘌呤數(shù)相等體現(xiàn)了嘧啶與嘌呤配對，但是不能體現(xiàn)堿基互補(bǔ)配對原則的全部內(nèi)容，C錯誤；D、選取材料時，用6種不同形狀的材料分別表示脫氧核糖、磷酸和四種堿基，D錯誤。故選A。二、非選擇題9、核移植胚胎細(xì)胞核移植體細(xì)胞核移植體細(xì)胞核移植動物體細(xì)胞分化程度高動物細(xì)胞培養(yǎng)胚胎移植遺傳物質(zhì)（或DNA，或基因）【答案解析】

動物體細(xì)胞核移植過程：動物核移植是指將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎。在體外將采集到的卵母細(xì)胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才成熟，可以通過顯微操作技術(shù)去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核和第一極體，使用電脈沖等方法可以激活重組細(xì)胞使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育?？寺》种委熜钥寺『蜕承钥寺?。治療性克隆指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞和組織（皮膚、神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植；生殖性克隆指將克隆技術(shù)用于生育目的，即用于產(chǎn)生人類個體?！绢}目詳解】（1）用動物體細(xì)胞克隆動物，實際上是通過核移植來實現(xiàn)的，該技術(shù)分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，動物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難，故其中體細(xì)胞核移植難度更大。（2）據(jù)分析可知，體細(xì)胞克隆猴的誕生還需要動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)的支持。（3）核移植過程遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變，體細(xì)胞克隆猴的重要意義在于，能夠在一年內(nèi)產(chǎn)生大批遺傳物質(zhì)相同、可以模擬人類疾病的模型猴，將為人類疾病機(jī)理研究、干預(yù)、診治帶來光明前景。【答案點睛】本題考查克隆動物核移植相關(guān)過程和知識點，掌握相關(guān)知識結(jié)合題意答題。10、PCRDNA雙鏈復(fù)制番茄紅素環(huán)化酶翻譯Ecl和BamH1自身成環(huán)2農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化（或基因槍、花粉管通道）【答案解析】

分析圖一：番茄紅素可以轉(zhuǎn)化為胡蘿卜素。分析圖二：圖二位重組DNA（質(zhì)粒三）的構(gòu)建過程，該質(zhì)粒能表達(dá)出雙鏈RNA（發(fā)卡），番茄細(xì)胞可以識別侵入的雙鏈RNA并將該雙鏈RNA及具有相同序列的單鏈RNA一起降解，提高了果實中番茄紅素的含量?！绢}目詳解】（1）在體外快速大量獲得目的基因或含有目的基因的“片段A”可以采用PCR技術(shù)，該技術(shù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制。（2）根據(jù)圖二可知，目的基因是番茄紅素環(huán)化酶基因，因此表達(dá)出“發(fā)卡”的DNA片段實際上是兩個反向連接的番茄紅素環(huán)化酶基因；“發(fā)卡”能導(dǎo)致雙鏈RNA、mRNA被降解，而mRNA為翻譯的模板，因此“發(fā)卡”阻止了其在細(xì)胞內(nèi)的翻譯過程，所以提高了果實中番茄紅素的含量。（3）為保證第二個目的基因片段反向連接，應(yīng)該用兩種限制酶切割。由圖可知，第二個目的基因片段兩側(cè)的限制酶識別序列為Ecl和BamHⅠ，因此處理已開環(huán)質(zhì)粒所用的兩種限制酶是Ecl和BamHⅠ。（4）去磷酸化是去掉黏性末端最外側(cè)游離的磷酸基團(tuán)。對已開環(huán)的質(zhì)粒二兩端去磷酸化的主要作用是阻止其自身成環(huán)（自身環(huán)化）；構(gòu)建重組質(zhì)粒三時，要用限制酶Ecl和BamHⅠ切割，這樣會去除黏性末端最外側(cè)缺少磷酸基團(tuán)的脫氧核苷酸，因此形成的重組質(zhì)粒缺少2個磷酸二酯鍵。（5）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞，采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，因此可利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將質(zhì)粒三導(dǎo)入植物細(xì)胞?！敬鸢更c睛】解答第（5）題，關(guān)鍵能理清將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法，總結(jié)如下：1、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞，采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。2、將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞，最常用的方法是顯微注射技術(shù)。3、將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞，最常用的原核細(xì)胞是大腸桿菌，其轉(zhuǎn)化方法是：先用Ca2+處理細(xì)胞，使其成為

感受態(tài)細(xì)胞，再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。11、逆轉(zhuǎn)錄和PCR技術(shù)擴(kuò)增cDNA文庫EcoRⅠ酶和BamHⅠ可以防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化以及目的基因與質(zhì)粒反向連接破壞標(biāo)記基因無法篩選（且沒有啟動子）吸收周圍環(huán)境中的DNA分子表達(dá)的綠色熒光蛋白菌落卡那霉素【答案解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【題目詳解】（1）從早期胚胎神經(jīng)細(xì)胞中提取HuC基因的mRNA，通過逆轉(zhuǎn)錄過程合成目的基因，并通過PCR技術(shù)在體外擴(kuò)增可獲得大量的目的基因，進(jìn)而構(gòu)建出HuC基因的cDNA文庫。（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時，不能破壞運(yùn)載體上的啟動子、復(fù)制原點，以及運(yùn)載體上需要保留標(biāo)記基因，為了防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化以及目的基因與質(zhì)粒反向連接，常用不同的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，結(jié)合圖示中各種限制酶的酶切位點可知，為獲得HuC基因——綠色熒光蛋白基因的表達(dá)載體，需要對HuC基因和質(zhì)粒選用圖中的EcoRⅠ酶和BamHⅠ酶進(jìn)行切割?？敲顾乜剐曰驗闃?biāo)記基因，若用NotⅠ酶切割，將會導(dǎo)致卡那霉素抗性基因被破壞，且切割后的質(zhì)粒會失去啟動子，使基因表達(dá)載體中缺少標(biāo)記基因無法選擇，且沒有啟動子無法轉(zhuǎn)錄，所以不選擇NotⅠ酶切割質(zhì)粒。（3）用Ca2+處理大腸桿菌使之成為感受態(tài)細(xì)胞，易于吸收周圍環(huán)境中的DNA分子。由于綠色熒