植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物的影響

植物細(xì)胞培養(yǎng)條件溫度：培養(yǎng)溫度對(duì)植物細(xì)胞生長(zhǎng)及二次代謝產(chǎn)物生成有重要影響。通常，植物細(xì)胞培養(yǎng)采用25°C。攪拌：在搖瓶實(shí)驗(yàn)中，通常搖床的轉(zhuǎn)速取90—120r/min。pH值：通過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)行的H+離子傳遞對(duì)細(xì)胞的生育環(huán)境、生理活性來(lái)說(shuō)無(wú)疑是重要的。在培養(yǎng)過(guò)程中，通常pH作為一個(gè)重要參數(shù)被控制在一定范圍內(nèi)。植物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH值一般為5—6。通氣：通氣是細(xì)胞液體深層培養(yǎng)重要的物理化學(xué)因子。好氣培養(yǎng)系統(tǒng)的通氣與混合及攪拌是相互關(guān)聯(lián)的。對(duì)搖瓶試驗(yàn)，通常500m1的三角瓶?jī)?nèi)裝80—200m1的植物細(xì)胞培養(yǎng)液較適宜。當(dāng)然，氣液傳質(zhì)還與瓶塞的材料有關(guān)。試驗(yàn)表明，從溶氧速率考慮，以棉花塞最好，微孔硅橡膠塞次之，鋁箔塞最差。光：光對(duì)植物有著特殊的作用。光照射條件不僅通過(guò)光照周期、光的質(zhì)量（即種類、波長(zhǎng)）而且通過(guò)光照量（光強(qiáng)度）的調(diào)節(jié)來(lái)影響植物細(xì)胞的生理特性和培養(yǎng)特性。研究表明，光調(diào)節(jié)著細(xì)胞中的關(guān)鍵酶的活性，有時(shí)光能大大促進(jìn)代謝產(chǎn)物的生成，有時(shí)卻起著阻害作用。細(xì)胞齡：在培養(yǎng)過(guò)程的不同時(shí)期，細(xì)胞的生理狀況、生長(zhǎng)與物質(zhì)生產(chǎn)能力差異顯著。而且，使用不同細(xì)胞齡的種細(xì)胞，其后代的生長(zhǎng)與物質(zhì)生產(chǎn)狀況也會(huì)大不一樣。通常，使用處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后期或穩(wěn)定期前期的細(xì)胞作為接種細(xì)胞較合適。接種量：在植物細(xì)胞培養(yǎng)中，接種量也是一個(gè)影響因素。在再次培養(yǎng)中，往往取前次培養(yǎng)液的5—20%作為種液，也以接種細(xì)胞濕重為基準(zhǔn)，其接種濃度為15—50g（濕細(xì)胞）/L。由于接種量對(duì)細(xì)胞產(chǎn)率及二次代謝物質(zhì)的生產(chǎn)有一定影響，故應(yīng)根據(jù)不同的培養(yǎng)對(duì)象通過(guò)試驗(yàn)，確定其最大接種量。影響植物細(xì)胞培養(yǎng)的因素植物細(xì)胞生長(zhǎng)和產(chǎn)物合成動(dòng)力學(xué)也可分為三種類型：①生長(zhǎng)偶聯(lián)型，產(chǎn)物的合成與細(xì)胞的生長(zhǎng)呈正比；②中間型，產(chǎn)物僅在細(xì)胞生長(zhǎng)一段時(shí)間后才能合成，但細(xì)胞生長(zhǎng)停止時(shí)，產(chǎn)物合成也停止；③非生長(zhǎng)偶聯(lián)型，產(chǎn)物只有在細(xì)胞生長(zhǎng)停止時(shí)才能合成。事實(shí)上，由于細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程較復(fù)雜，細(xì)胞生長(zhǎng)和次級(jí)代謝物的合成很少符合以上模式，特別是在較大的細(xì)胞群體中，由于各細(xì)胞所處的生理階段不同，細(xì)胞生長(zhǎng)和產(chǎn)物合成也許是群體中部分細(xì)胞代謝的結(jié)果。此外，不同的環(huán)境條件對(duì)產(chǎn)物合成的動(dòng)力學(xué)也有很大的影響。1、細(xì)胞的遺傳特性從理論上講，所有的植物細(xì)胞都可看做是一個(gè)有機(jī)體，具有構(gòu)成一個(gè)完整植物的全部遺傳信息。在生化特征上，單個(gè)細(xì)胞也具有產(chǎn)生其親本所能產(chǎn)生的次生代謝物的遺傳基礎(chǔ)和生理功能。但是，這一概念決不能與個(gè)別植株的組織部位相混淆，因?yàn)槟承┙M織部位所具有的高含量的次生代謝物并不一定就是該部位合成的，而有可能是在其他部位合成后通過(guò)運(yùn)輸在該部位上積累的。有的植物在某一部位合成了某一產(chǎn)物的直接前體而轉(zhuǎn)運(yùn)到另一部位，通過(guò)該部位上的酶或其他因子轉(zhuǎn)化。如尼古丁是在煙草根部細(xì)胞內(nèi)合成后輸送到葉部細(xì)胞內(nèi)的，另外有些次生物在植物某一部位形成中間體，然后再轉(zhuǎn)移另一部位經(jīng)酶轉(zhuǎn)化而成。因此，在進(jìn)行植物細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)，必須弄清楚產(chǎn)物的合成部位。同時(shí)，在注意到整體植物的遺傳性時(shí)，還必須考慮到各種不同的細(xì)胞。細(xì)胞種質(zhì)影響2、培養(yǎng)環(huán)境由于各類代謝產(chǎn)物是在代謝過(guò)程的不同階段產(chǎn)生的，因此通過(guò)植物細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行次生代謝產(chǎn)物生產(chǎn)所受的限制因子是比較復(fù)雜的。各種影響代謝過(guò)程的因素都可能對(duì)它們發(fā)生影響，這些因素主要有光、溫度、攪拌、通氣、營(yíng)養(yǎng)、pH值、前體和調(diào)節(jié)因子等。溫度植物細(xì)胞培養(yǎng)通常是在25°C左右進(jìn)行的，因此一般來(lái)說(shuō)在進(jìn)行植物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)很少考慮溫度對(duì)培養(yǎng)影響。但是實(shí)際上，無(wú)論是細(xì)胞培養(yǎng)物的生長(zhǎng)或是次生代謝物的合成和積累，溫度都是起著一定的作用，需要引起一定的重視。pH值植物細(xì)胞培養(yǎng)的最適pH值一般在5?6。但由于在培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)基的pH值可能有很大的變化，對(duì)培養(yǎng)物的生長(zhǎng)和次生代謝產(chǎn)物的積累十分不利，因此需要不斷調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH值，以滿足細(xì)胞的生長(zhǎng)和產(chǎn)物代謝、積累的需要。營(yíng)養(yǎng)成分盡管植物細(xì)胞能在簡(jiǎn)單的合成培養(yǎng)基生長(zhǎng)，但營(yíng)養(yǎng)成分對(duì)植物細(xì)胞培養(yǎng)和次生代謝產(chǎn)物的生成仍有很大的影響。營(yíng)養(yǎng)成分一方面要滿足植物細(xì)胞的生生長(zhǎng)所需，另一方面要使每個(gè)細(xì)胞都能合成和積累次生代謝產(chǎn)物。普通的培養(yǎng)基主要是為了促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)而設(shè)計(jì)的，它對(duì)次生代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生并不一定最合適。一般地說(shuō)增加氮、磷和鉀的含量會(huì)使細(xì)胞的生長(zhǎng)加快，增加培養(yǎng)基中的蔗糖含量可以增加細(xì)胞培養(yǎng)物的次生代謝物。光光照時(shí)間的長(zhǎng)短、光的強(qiáng)度對(duì)次生代謝產(chǎn)物的合成都具有一定的作用。一般來(lái)說(shuō)愈傷組織和細(xì)胞生長(zhǎng)不需要光照，但是光對(duì)細(xì)胞代謝產(chǎn)物的合成有很重要的影響。有人研究了光對(duì)黃酮化合物形成的影響，結(jié)果表明，培養(yǎng)物在光照特別是紫外光下黃酮及黃酮類醇糖苷積累的所有酶活性均增加。通常光照采用熒光燈，或者熒光燈和白熾燈混合，其光強(qiáng)度是300?100001x(6?100〃m/m2程)可以連續(xù)光照，也可以每天光照12?18h。攪拌和通氣植物細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中需要通入無(wú)菌空氣，適當(dāng)控制攪拌程度和通氣量。在懸浮培養(yǎng)中更要如此。在煙草細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)，如果KaW5h-1。，對(duì)生物產(chǎn)量有明顯抑制作用。當(dāng)仲5?1g，初始的*和生物產(chǎn)量之間有線性關(guān)系。當(dāng)然不同的細(xì)胞系，對(duì)氧的需求量是不相同的。為了加強(qiáng)氣-液-固之間的傳質(zhì)，細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí)，需要攪動(dòng)。植物細(xì)胞雖然有較硬的細(xì)胞壁，但是細(xì)胞壁很脆，對(duì)攪拌的剪切力很敏感，在搖瓶培養(yǎng)時(shí)，搖瓶機(jī)振蕩范圍在100?150r/min。由于搖瓶培養(yǎng)細(xì)胞受到剪切比較小，因此植物細(xì)胞很適合在此環(huán)境生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)室中采用六平葉渦輪攪拌槳反應(yīng)器培養(yǎng)植物細(xì)胞，由于剪切太劇烈，細(xì)胞會(huì)自溶，次生代謝產(chǎn)物合成會(huì)降低。各種植物細(xì)胞耐剪切的能力不盡相同，細(xì)胞越老遭受的破壞也越大。煙草的細(xì)胞和長(zhǎng)春花的細(xì)胞在渦輪攪拌器轉(zhuǎn)速150r/min和300r/min時(shí)，一般還能保持生長(zhǎng)。培養(yǎng)雞眼藤的細(xì)胞時(shí)，渦輪攪拌器的轉(zhuǎn)速應(yīng)低于20r/min。因此培養(yǎng)植物細(xì)胞，氣升式反應(yīng)器更為合適。前體在植物細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程中，有時(shí)培養(yǎng)細(xì)胞不能很理想地把所需的代謝產(chǎn)物按所想像的得率進(jìn)行合成，其中一個(gè)可能的原因就是缺少合成這種代謝物所必須的前體，此時(shí)如在培養(yǎng)物中加入外源前體將會(huì)使目的產(chǎn)物產(chǎn)量增加。因此，在植物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，選擇適當(dāng)?shù)那绑w是相當(dāng)重要的。對(duì)于所選擇的前體除了有增加產(chǎn)物產(chǎn)量的外，還要求是無(wú)毒和廉價(jià)。但是，尋找能使目的產(chǎn)物含量增加最有效的前體是有一定難度的。雖然前體的作用在植物細(xì)胞培養(yǎng)中未完全清楚，可能是外源前體激發(fā)了細(xì)胞中特定酶的作用，促使次生代謝產(chǎn)物量的增加。有人在三角葉薯蕷細(xì)胞培養(yǎng)液中加人100mg/L膽甾醇，可使次生代謝產(chǎn)物薯蕷皂甙配基產(chǎn)量增加一倍。在紫草細(xì)胞培養(yǎng)中加入L-苯丙氨酸使右旋紫草素產(chǎn)量增加三倍。在雷公藤細(xì)胞培養(yǎng)中加入萜烯類化合物中的一個(gè)中間體，可使雷公藤羥內(nèi)酯產(chǎn)量增加三倍以上。但同樣一種前體，在細(xì)胞的不同生長(zhǎng)時(shí)期加入，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和次生代謝產(chǎn)物合成的作用極不相同，有時(shí)甚至還起抑制作用。如在洋紫蘇細(xì)胞的培養(yǎng)中，一開(kāi)始就加入色胺，無(wú)論對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和生物堿的合成都起抑制作用，但在培養(yǎng)的第二星期或第三星期加入色胺卻能刺激細(xì)胞的生長(zhǎng)和生物堿的合成。生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑在細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類和數(shù)量對(duì)次生代謝產(chǎn)物的合成起著十分重要的作用。植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑不僅會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化，而且也會(huì)影響到次生代謝產(chǎn)物的合成。生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素有使細(xì)胞分裂保持一致的作用，不同類型的生長(zhǎng)素對(duì)次生代謝產(chǎn)物的合成有著不同的影響。生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)次級(jí)代謝的影響隨著代謝產(chǎn)物的種類的不同而有很大的變化，對(duì)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的應(yīng)用需要非常慎重。目前，在大規(guī)模植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)中，為了提高生物量和次生代謝產(chǎn)物量，一般采用二階段法。第一階段盡可能快地使細(xì)胞量增長(zhǎng)，可通過(guò)生長(zhǎng)培養(yǎng)基來(lái)完成。第二階段是誘發(fā)和保持次生代謝旺盛，可通過(guò)生產(chǎn)培養(yǎng)基來(lái)調(diào)節(jié)。因此在細(xì)胞培養(yǎng)整個(gè)過(guò)程中，要更換含有不同品種和濃度的植物生長(zhǎng)激素和前體的液體培養(yǎng)基。為了獲得能適合大規(guī)模懸浮培養(yǎng)和生長(zhǎng)快速的細(xì)胞系，首先要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行馴化和篩選，把愈傷組織轉(zhuǎn)移到搖瓶中進(jìn)行液體培養(yǎng)，待細(xì)胞增殖后，再把它們轉(zhuǎn)移到瓊脂培養(yǎng)基上。經(jīng)過(guò)反復(fù)多次馴化篩選得到的細(xì)胞株，比未經(jīng)過(guò)馴化、篩選的原始愈傷組織在懸浮培養(yǎng)中生長(zhǎng)快得多。毋庸置疑，在過(guò)去幾十年中，植物生物技術(shù)方面已取得了相當(dāng)巨大的進(jìn)展，大大縮短了向工業(yè)化邁進(jìn)的距離。國(guó)內(nèi)有關(guān)單位對(duì)藥用植物，人參、三七、紫草、黃連、薯蕷、蘆筍等已展開(kāi)了大規(guī)模的細(xì)胞懸浮培養(yǎng)，并對(duì)植物細(xì)胞培養(yǎng)專用反應(yīng)器進(jìn)行研制。國(guó)外，培養(yǎng)植物細(xì)胞用的反應(yīng)器已從實(shí)驗(yàn)規(guī)模1?30L，放大到工業(yè)性試驗(yàn)規(guī)模130?20000L，如希臘毛地黃轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)規(guī)模為2m3,煙草細(xì)胞培養(yǎng)的規(guī)模最大已達(dá)到20m3。值得注意的是影響植物細(xì)胞培養(yǎng)物的生物量增長(zhǎng)和次生代謝產(chǎn)物積累的因素是錯(cuò)綜復(fù)雜的，往往一個(gè)因素的調(diào)整會(huì)影響到其他因素的變化，所以，需要在培養(yǎng)過(guò)程中不斷加以調(diào)整，同時(shí)，由于不同的植物有機(jī)體有自身的特殊性。因此，對(duì)于一種植物或一種次生代謝物適合的培養(yǎng)條件，不一定對(duì)其他的細(xì)胞或次生代謝作用適合。植物細(xì)胞培養(yǎng)是指在離體條件下培養(yǎng)植物細(xì)胞的方法。將愈傷組織或其他易分散的組織置于液體培養(yǎng)基中，進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，使組織分散成游離的懸浮細(xì)胞，通過(guò)繼代培養(yǎng)使細(xì)胞增殖，獲得大量的細(xì)胞群體。小規(guī)模的懸浮培養(yǎng)在培養(yǎng)瓶中進(jìn)行，大規(guī)模者可利用發(fā)酵罐生產(chǎn)。.利用植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)代謝產(chǎn)物具有十分廣闊的前景。.植物細(xì)胞培養(yǎng)條件優(yōu)化目前植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)的化合物很多，包括糖類、酚類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸以及帖類和生物堿等初生和次生代謝產(chǎn)物，植物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用主要包括以下3個(gè)方面：有用物質(zhì)（次生代謝產(chǎn)物）的生產(chǎn)；植物無(wú)性系的快速繁殖和遺傳突變體的篩選；植物細(xì)胞遺傳、生理、生化和病毒方面的深入研究。但是由于植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)的局限性使得植物細(xì)胞仍難以實(shí)現(xiàn)大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)，迫切需要進(jìn)一步研究和發(fā)展細(xì)胞培養(yǎng)條件的優(yōu)化控制及其工藝。1植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)條件的優(yōu)化1.1植物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中物理因素的優(yōu)化控制對(duì)于植物細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)說(shuō)，環(huán)境中的許多物理因素對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)以及目標(biāo)次生代謝產(chǎn)物的合成具有很大的影響。如通過(guò)溫度、光照、電場(chǎng)、磁場(chǎng)電磁輻射、機(jī)械力以及超聲波等對(duì)于植物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程都有著十分重要的作用。植物細(xì)胞的生長(zhǎng)、繁殖和次生代謝物的生產(chǎn)需要一定的溫度條件，在一定的溫度范圍內(nèi)細(xì)胞才能正常生長(zhǎng)、繁殖和維持正常的新陳代謝，植物細(xì)胞培養(yǎng)的最適溫度一般為25r，但不同的植物種類略有差異，而且植物細(xì)胞生長(zhǎng)和次生代謝產(chǎn)物的合成所需的溫度并不一致，因此選擇合理的培養(yǎng)溫度并進(jìn)行相應(yīng)的調(diào)控對(duì)于細(xì)胞生長(zhǎng)以及產(chǎn)物合成十分關(guān)鍵1.2植物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中化學(xué)因素的優(yōu)化控制植物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的一些化學(xué)因素如培養(yǎng)基組成、溶氧、其它添加物等對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)也具有十分重要的意義。合理的培養(yǎng)基組分、適當(dāng)?shù)娜苎跻约捌渌T導(dǎo)子及其前體等物質(zhì)的有效調(diào)控能夠在很大程度上促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)以及次生代謝物的合成。培養(yǎng)基中的碳源、氮源及其一些微量的金屬離子以及一些有機(jī)物質(zhì)不僅是細(xì)胞生長(zhǎng)以及合成的物質(zhì)基礎(chǔ)，而且很多都能夠促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或者是有利于產(chǎn)物的形成。植物細(xì)胞培養(yǎng)通常使用蔗糖作為碳源，研究表明，一定濃度的蔗糖不僅能夠促進(jìn)植物細(xì)胞的生長(zhǎng)，還能夠刺激次生物質(zhì)的合成，2植物細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)模型的研究進(jìn)展利用植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)藥物，已發(fā)展成植物細(xì)胞培養(yǎng)在生產(chǎn)運(yùn)用中的主流之一。目前全世界約有四分之三的人以植物作為預(yù)防疾病的藥物來(lái)源。因葡萄球菌、大腸桿菌、結(jié)核桿菌等都表現(xiàn)出對(duì)由微生物來(lái)源的各種抗生素的耐藥性，人們對(duì)抗生素類藥的局限性已有了深刻的認(rèn)識(shí)。植物產(chǎn)生的藥物在微生物中很少發(fā)現(xiàn)，而且植物產(chǎn)生的藥能克服微生物來(lái)源藥物的諸多不足，而化學(xué)合成藥物的難度又遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)了從植物中獲得天然產(chǎn)物。然而由于藥用植物的過(guò)度采伐，其資源日趨貧乏，同時(shí)對(duì)環(huán)境也造成了極大的破壞，因此為了解決植物資源短缺、環(huán)境保護(hù)等問(wèn)題，藥用植物細(xì)胞的大量培養(yǎng)顯得十分重要。目前國(guó)內(nèi)外在藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)方面的研究取得了很大進(jìn)展，特別是運(yùn)用生物反應(yīng)器進(jìn)行藥用植物細(xì)胞大量培養(yǎng)的技術(shù)正日趨成熟。在植物細(xì)胞放大培養(yǎng)的過(guò)程中最關(guān)鍵的問(wèn)題是建立對(duì)培養(yǎng)過(guò)程中各種現(xiàn)象進(jìn)行合理描述的模型，為細(xì)胞的大量培養(yǎng)奠定基礎(chǔ)。目前國(guó)內(nèi)外在植物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程動(dòng)力學(xué)模型的研究方面取得了很大的進(jìn)展。植物細(xì)胞培養(yǎng)始于20世紀(jì)初，運(yùn)用生物反應(yīng)器對(duì)植物細(xì)胞進(jìn)行大量培養(yǎng)的報(bào)道最初始于1960年，Tuleche和Nickel運(yùn)用134L的生物反應(yīng)器成功培養(yǎng)了不同種類的植物。但由于植物細(xì)胞固有的性質(zhì)代謝途徑和代謝產(chǎn)物與細(xì)胞生長(zhǎng)關(guān)系的復(fù)雜性，細(xì)胞與培養(yǎng)環(huán)境相互作用，使得對(duì)植物細(xì)胞的放大培養(yǎng)變得難以實(shí)現(xiàn)，只有針對(duì)不同的植物細(xì)胞，采用相應(yīng)的簡(jiǎn)化策略建立細(xì)胞培養(yǎng)模型，逐級(jí)模擬和優(yōu)化培養(yǎng)過(guò)程才能夠最終實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的大量培養(yǎng)。現(xiàn)分別就近幾年關(guān)于植物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程的動(dòng)力學(xué)模型的研究進(jìn)展進(jìn)行歸納。2.1植物細(xì)胞培養(yǎng)非結(jié)構(gòu)化動(dòng)力學(xué)模型最初植物細(xì)胞培養(yǎng)的數(shù)學(xué)模型的建立是在細(xì)菌等微生物培養(yǎng)過(guò)程動(dòng)力學(xué)模型的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的。在傳統(tǒng)的微生物發(fā)酵過(guò)程中通常都是以一個(gè)簡(jiǎn)單的生物量組分來(lái)進(jìn)行模型化，因此都是非結(jié)構(gòu)化的，如Monod模型、Nyholm模型及其Leudeking-piret模型等，這些類型的模型通常都只能夠考慮一些單組分的變化情況，而不能夠考慮到植物細(xì)胞組分的多樣性和細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程及其代謝過(guò)程中變化的復(fù)雜性，如次生代謝產(chǎn)物的生成和細(xì)胞生長(zhǎng)以及細(xì)胞在代謝過(guò)程中其它中間物質(zhì)之間的相互轉(zhuǎn)化的復(fù)雜關(guān)系等。因此這類模型不能夠預(yù)測(cè)植物細(xì)胞