動物生理學(xué)實驗指導(dǎo)(生院)

PAGEPAGE25動物生理學(xué)實驗指導(dǎo)張素華編動物科技學(xué)院生理實驗室第一部分實驗總論第一節(jié)緒論一、實驗?zāi)繕?biāo)與要求

通過實驗使學(xué)生初步掌握生理學(xué)實驗的一些基本操作技能，學(xué)會檢查人體功能活動的一些測試方法，驗證和鞏固某些基本理論知識，培養(yǎng)認(rèn)真、負(fù)責(zé)、嚴(yán)謹(jǐn)求實的態(tài)度和團(tuán)結(jié)協(xié)作的良好作風(fēng)，增強對事物進(jìn)行觀察、比較、分析和綜合的能力。為此要求：1.實驗前應(yīng)仔細(xì)閱讀實驗指導(dǎo)，了解本次實驗的目標(biāo)、原理、步驟等，并復(fù)習(xí)有關(guān)理論知識。2.實驗時要按照實驗指導(dǎo)及教師的指示進(jìn)行操作和觀察，客觀、及時地記錄實驗現(xiàn)象或結(jié)果，并聯(lián)系講授內(nèi)容進(jìn)行思考。3.實驗后須及時整理實驗記錄，分析實驗結(jié)果，按照規(guī)定格式書寫實驗報告，按時交負(fù)責(zé)教師評閱。

二、實驗報告書寫要求

因?qū)嶒瀮?nèi)容不同，可以填表、敘述等形式寫出報告。書寫要整潔，文字應(yīng)簡練、通順。首先注明班級、組別、姓名、實驗日期，寫出實驗題目、實驗?zāi)繕?biāo)等項目，然后著重書寫實驗結(jié)果以及分析和討論。并要求：1.實驗結(jié)果必須憑自己觀察，隨時記錄，如實填寫。有曲線記錄的，經(jīng)必要注明后，剪貼在實驗報告上。2.分析和結(jié)論實驗結(jié)果的分析，是根據(jù)學(xué)過的理論知識對結(jié)果進(jìn)行解釋。如果出現(xiàn)非預(yù)期的結(jié)果時，應(yīng)分析其可能的原因。實驗結(jié)論，是從實驗結(jié)果中歸納出概括性的判斷，即本次實驗所驗證的理論概要。

三、生理實驗室規(guī)則

1.須攜帶實驗指導(dǎo)、記錄本等文具準(zhǔn)時進(jìn)實驗室，并穿戴實驗衣帽。2.遵守學(xué)習(xí)紀(jì)律，保持實驗室安靜；嚴(yán)肅、認(rèn)真、安全地進(jìn)行實驗，不做與本實驗無關(guān)的事情。3.實驗室的一切物品，未經(jīng)教師許可，不得擅自取用或帶出。4.各組應(yīng)用的實驗器材、物品，在使用前應(yīng)查點清楚，不得隨意與別組調(diào)換；如遇機(jī)件不靈或損壞時，應(yīng)報告教師，以便及時修理或更換。5.節(jié)約水電及一切消耗性物品，愛護(hù)儀器和用具。損壞物品應(yīng)賠償。6.保持實驗室整潔。公共器材和藥品用畢后立即歸還原處，動物尸體和廢棄物應(yīng)放到指定地點。7.實驗完畢，應(yīng)將實驗器材、用品和實驗臺收拾干凈，查點清楚，放還原處。各小組輪流搞好實驗室的清潔衛(wèi)生，關(guān)好窗戶、水電，經(jīng)教師檢查無誤后，方可離開。四、常用生理鹽溶液的配制1．常用生理鹽溶液生理學(xué)實驗中常用的生理鹽溶液有數(shù)種，其成分和用途各異，如下表所示。藥品名稱任氏溶液(Ringer，s)用于兩棲類樂氏溶液（Locke，s）用于哺乳類臺氏溶液（Tyrode，s）用于哺乳類（小腸）生理鹽水兩棲類哺乳類氯化鈉（NaCl）6.5克9.0克8.0克6.5克9.0克氯化鉀（KCl）0.14克0.42克0.2克——氯化鈣（CaCl2）0.12克0.24克0.2克——碳酸氫鈉（NaHCO3）0.20克0.1～0.3克1.0克——磷酸二氫鈉(NaH2PO4)0.01克—0.05克——氯化鎂(MgCl2)——0.1克——葡萄糖2.0克（可不加）1.0～2.5克1.0克——蒸餾水加至1000毫升1000毫升1000毫升1000毫升1000毫升配制生理鹽溶液的方法，是先將各成份分別配成一定濃度的基礎(chǔ)溶液(見下表)，然后按表所載份量混合之。成份濃度(％)任氏溶液樂氏溶液臺氏溶液氯化鈉(NaCl)2032.5毫升45.6毫升40.0毫升氯化鉀(KCl)101.4毫升4.2毫升2.0毫升氯化鈣(CaCl2)101.2毫升2.4毫升2.0毫升磷酸二氫鈉(NaH2PO4)11.0毫升—5.0毫升氯化鎂(MgCl2)5——2.0毫升碳酸氫鈉(NaHCO3)54.0毫升2.0毫升20.0毫升葡萄糖

2.0克(可不加)1.0～2.5克1.0克加蒸餾水至

1000毫升1000毫升1000毫升應(yīng)當(dāng)注意的是，氯化鈣溶液須在其它基礎(chǔ)溶液混合并加蒸餾水稀釋之后，方可一面攪拌一面逐滴加入，否則將生成鈣鹽沉淀．葡萄糖應(yīng)在臨用時加入，加入葡萄糖的溶液不能久置。2．氨基甲酸乙酯常用于兔、貓、狗、蛙的全身麻醉藥，使用方便，一次給藥可維持4-5小時。劑量為1克／公斤體重．即20％的溶液5ml。第二節(jié)動物生理學(xué)常用動物及基本操作技術(shù)一．實驗動物生理學(xué)實驗主要以活的動物為對象，如魚、蛙、家兔、小白鼠、大白鼠、羊、雞等。實驗動物的選擇必須根據(jù)不同的實驗?zāi)康摹Ｈ缧呐K生理實驗要求心臟標(biāo)本存活期長，所需條件簡單——可以選蛙類等。接近保定動物必須遵守操作規(guī)程，密切注意動物反應(yīng)。保證人和動物的安全。1.兩棲類生物醫(yī)學(xué)中常用蟾蜍和青蛙，分別屬于兩棲綱無尾目的蟾蜍科和蛙科。它們皮膚光滑、濕潤、有腺體無鱗片。蛙類的心臟在離體情況下仍有節(jié)奏地搏動很久，常用來研究心臟的生理、藥物對心臟的作用。腓腸肌和坐骨神經(jīng)可用來觀察外周神經(jīng)的生理功能和骨骼肌的收縮。蛙的制動一般采用損毀腦及脊髓的辦法。左手握蛙，用食指將蛙頭下壓成直角，右手指可觸摸到柔軟凹陷的枕骨大孔，用蛙針刺入向前攪動搗毀腦。2.家兔屬哺乳動物兔型目。解剖學(xué)上，家兔頸部有降壓神經(jīng)獨立分支，屬于傳入性神經(jīng)，適合做急性心血管實驗。家兔較馴服，一般不會咬人。但有的品種（如長毛兔）或在哺乳、剛產(chǎn)仔和有咬癖時也會咬人，所以必須防備。家兔的腳爪銳利，若不小心或方法不當(dāng)易被其抓傷，或造成兔子的創(chuàng)傷甚至導(dǎo)致流產(chǎn)等。正確的捉兔方法是，一只手在兔子頭前擋住，當(dāng)它匍匐在地時，順勢大把抓住雙耳及頸部皮毛，承重在頸部皮毛上，迅速提起，另一只手托住臀部和下腹，抱在胸前。二．常用麻醉劑臨床手術(shù)以及術(shù)前捕捉制動等，都會引起動物的疼痛、不適、恐懼等對身心的惡性刺激，還會在動物體內(nèi)引起實質(zhì)性的變化，從而影響實驗結(jié)果的質(zhì)量。因此實驗常在手術(shù)前對動物進(jìn)行毀腦或麻醉。麻醉措施也會在動物體內(nèi)造成變化，但這些變化是能夠預(yù)見和可以控制的，并且任何一項手術(shù)都能引起比麻醉時更大的不適。鼠等效果也好。由于戊巴比妥鈉對心肌、血管平滑肌和呼吸中樞有抑制作用，一般不用于心.血管和呼吸機(jī)能方面的研究。麻醉時需有尼克剎米備用。烏拉坦(氨基甲酸乙酯)可導(dǎo)致較持久的淺麻醉，對呼吸無明顯影響，安全系數(shù)大。兔對其較敏感，狗、貓、鳥類（1.25g/kg）、蛙類（2g/kg）等均可用。兔狗貓用量每公斤體量0.75～1g，配成20%或25%溶液耳緣靜脈注射。

三．手術(shù)器械與使用手術(shù)器械是施行手術(shù)的必需工具，雖然手術(shù)器械的種類、樣式很多，但其中有一些是各類手術(shù)所必須使用的基本器械，正確和熟練地掌握這些器械的使用方法，對于保證手術(shù)操作的順利進(jìn)行關(guān)系很大。1.蛙類解剖器材（1）剪刀：粗剪刀用于剪骨骼和皮膚等粗硬組織；手術(shù)剪用于剪肌肉、腱膜等一般軟組織；眼科剪刀用于剪神經(jīng)、血管、心包膜等細(xì)軟組織。（2）鑷子：手術(shù)鑷用于牽提皮膚夾捏肌肉等組織；眼科鑷用于夾捏細(xì)軟組織。（3）探針：用于破壞腦和脊髓。（4）玻鉤：用于分離神經(jīng)、血管。（5）鋅銅弓：用于對神經(jīng)肌肉標(biāo)本施加刺激，以檢查其興奮性。（6）蛙心夾：用于夾住心尖，另一端借縛線連于杠桿，以描記心臟舒縮。（7）蛙板和蛙釘：用蛙釘將蛙腿固定于一約20cm×15cm的木板上。制備神經(jīng)肌肉標(biāo)本，應(yīng)在清潔的玻璃板上操作，為此可在板中央嵌一玻璃板。2.哺乳類動物手術(shù)器材（1）手術(shù)刀：用于切開皮膚和器官。（2）剪刀：剪毛用粗剪刀；剪線及一般軟組織用手術(shù)剪刀；剪破血管、輸尿管以便插管時使用眼科剪刀。（3）鑷子：圓頭鑷子用于夾捏組織和牽提切口處的皮膚；眼科鑷子用于夾捏細(xì)軟組織。（4）止血鉗：用于提起皮膚切口、分離皮下組織和夾鉗血管止血。蚊式止血鉗適用于分離小血管及神經(jīng)周圍的結(jié)締組織。（5）動脈夾：用于阻斷動脈血流。（6）氣管插管：急性動物實驗時插入氣管，以保證呼吸道通暢。（7）動脈插管：急性動物實驗時插入動脈，另一端接水銀檢壓計或血壓換能器。（8）解剖臺：固定動物，以便實驗操作。有兔解剖臺、狗解剖臺。（9）注射器：用于注射各種藥物和溶液。（10）搪瓷盆、杯等：用于放置手術(shù)器械、溶液、兔毛等。四．生理手術(shù)的組織與實施生理手術(shù)由密切相關(guān)的術(shù)前準(zhǔn)備、手術(shù)實施和術(shù)后工作等三部分組成。1.術(shù)前準(zhǔn)備包括人員、器具和實驗動物準(zhǔn)備三個方面。術(shù)者：是手術(shù)的執(zhí)行者。應(yīng)全面負(fù)責(zé)術(shù)前診斷，擬定手術(shù)計劃和總結(jié)工作。手術(shù)助手：是協(xié)助術(shù)者完成手術(shù)工作，所以應(yīng)當(dāng)了解手術(shù)進(jìn)程及術(shù)中術(shù)者的意圖，從擴(kuò)創(chuàng)固定、結(jié)扎止血、組織縫合都應(yīng)使術(shù)者感到“得心應(yīng)手”，如果不能很好地同術(shù)者配合，將影響手術(shù)進(jìn)行。器械助手：負(fù)責(zé)器械、術(shù)中負(fù)責(zé)傳遞器械、紗布及準(zhǔn)備縫針、縫線。術(shù)后做好清理工作。麻醉助手：除努力做到術(shù)中麻醉平穩(wěn)和安全外，并負(fù)責(zé)對實驗動物的全身檢查、并作好記錄。監(jiān)測動物生理狀況，有特殊情況及時報告術(shù)者，做好急救工作。保定助手：負(fù)責(zé)動物的保定，注意人畜安全；協(xié)助麻醉助手。凡參加手術(shù)的人員應(yīng)分工明確，密切協(xié)作，同心協(xié)力，確保手術(shù)順利完成。實驗完成后，要及時處理動物。急性實驗后處死動物，要考慮簡便快速的方法，以減輕動物掙扎的痛苦。可根據(jù)動物大小選擇采用頸椎脫臼法（如小鼠）、空氣栓塞法（如兔）、打擊法、急性大量放血法、藥物致死法和斷頭法等。五．基本生理手術(shù)操作雖然生理手術(shù)的種類多樣，手術(shù)的范圍、大小和復(fù)雜程度也有很大的不同，但手術(shù)的基本操作，如組織分離、止血、打結(jié)和縫合的技術(shù)是基本相同的。因此，掌握手術(shù)基本操作技術(shù)是做好一切手術(shù)的基礎(chǔ)。在學(xué)習(xí)生理手術(shù)過程中，必須認(rèn)真作好基本功的訓(xùn)練，做到正確、熟練地掌握基本操作，才能逐步做到動作穩(wěn)健、敏捷、準(zhǔn)確、輕柔，縮短手術(shù)時間，提高手術(shù)的效率和成功率。1.組織分離組織分離包括使用帶刃器械（刀、剪）作銳性切開和使用止血鉗、手術(shù)刀柄或手指等作鈍性分離。鈍性分離是將有關(guān)器械或手指插入組織間隙內(nèi)，用適當(dāng)?shù)牧α糠蛛x或推開組織。這種方法適用于肌肉、皮下結(jié)締組織、筋膜、骨膜和腹膜下間隙等。優(yōu)點是迅速省時，且不致誤傷血管和神經(jīng)。但不應(yīng)粗暴勉強進(jìn)行，否則造成重要血管和神經(jīng)的撕裂或器械穿過鄰近的空腔臟器或組織，將導(dǎo)致嚴(yán)重后果。銳性切開和鈍性分離各有優(yōu)點，在手術(shù)過程中可以根據(jù)具體情況，選擇使用?？偟哪康氖浅浞诛@露深部組織和器官，同時又不致造成過多組織的損傷。為此，必須注意確定準(zhǔn)確切開的部位，控制切口大小以滿足實驗需要為度，切開時按解剖層次分層進(jìn)行等。2.止血在手術(shù)過程中，組織的切開、切除等都可造成不同程度的出血。因此，在手術(shù)操作中，完善而徹底地止血，不但能防止嚴(yán)重的失血，而且能保證術(shù)部清晰，便于手術(shù)順利地進(jìn)行，避免損傷重要的器官，有利于切口的愈合。小血管出血或靜脈滲血，可使用紗布或干棉球壓迫止血法，是按壓，不可擦拭，以免損傷組織和使血栓脫落。若未能確切止血，用此法也可清除術(shù)部血液，辨清組織及出血點以進(jìn)行其他有效的止血方法。較大的出血，特別是小動脈出血時，先用止血鉗準(zhǔn)確夾閉血管斷端，結(jié)扎后除去止血鉗。較大的血管應(yīng)盡量避開，或先作雙重結(jié)扎后剪斷。3.頸部分離血管神經(jīng)將麻醉好的家兔仰臥保定在手術(shù)臺上。剪去頸部被毛，于甲狀軟骨下方縱行剪（切）開皮膚約5cm。用止血鉗等器械鈍性分離皮下組織和肌肉，直至暴露氣管。左手拇指和食指捏住切口緣的皮膚和肌肉，其余三指從皮膚外側(cè)向上頂，右手持玻璃分針。在氣管一側(cè)找到頸部血管神經(jīng)束，粗壯搏動的是頸動脈，與頸動脈伴行的神經(jīng)中最細(xì)的為降壓神經(jīng)（又稱主動脈神經(jīng)），最粗的為迷走神經(jīng)，交感神經(jīng)居中。辨認(rèn)清楚后，才能分離，避免先分離搞亂位置后使神經(jīng)與筋膜難以辨認(rèn)。分離時根據(jù)需要先將較細(xì)的神經(jīng)分離出來，再分離其它神經(jīng)和血管，并隨即在各血管神經(jīng)下穿埋粗細(xì)顏色不同的絲線以標(biāo)記。在類似的分離操作中，盡量避免用金屬器械刺激神經(jīng)，更要防止刃器或帶齒的器械損傷血管神經(jīng)，多用燒制好的玻璃分針或玻璃鉤順血管神經(jīng)的走向剝離。4.插管術(shù)

動物插管是為了保證動物的正常生理狀態(tài)而常用的一種處理方法，如為了保證動物的肺通氣通暢，需做氣管插管，使動物通過氣管插管進(jìn)行呼吸；為了測定血壓或放血；注射、取血、輸液等需采用血管插管。

(1)插管的一般原則：動作要輕，創(chuàng)面要小，盡量避免對周圍組織的損傷，減少對動物的傷害；所有插管要與所在組織扎牢，以免脫落；保持所裸露組織的濕潤；經(jīng)常觀察插管部位，以防意外情況出現(xiàn)。

(2)氣管插管

動物（以家兔為例）暴露、游離出氣管，并在氣管下穿一較粗的線。用剪刀或?qū)Ｓ秒姛峤z于喉頭下2～3cm處的兩軟骨環(huán)之間，橫向切開氣管前壁約1/3的氣管直徑，再于切口上緣向頭側(cè)剪開約0.5cm長的縱向切口，整個切口呈”┴”

。若氣管內(nèi)有分泌物或血液要用小干棉球拭凈。然后一手提起氣管下面的縛線，一手將一適當(dāng)口徑的“Y”氣管插管斜口朝下,由切口向肺插入氣管腔內(nèi)，再轉(zhuǎn)動插管使其斜口面朝上，用線镈結(jié)于套管的分叉處,加以固定

(3)頸動脈插管

事先準(zhǔn)備好插管導(dǎo)管，取適當(dāng)長度的塑料管或硅膠管，插入端剪一斜面，另一端連接于裝有抗凝溶液（或生理鹽水）的血壓換能器或輸液裝置上，讓導(dǎo)管內(nèi)充滿溶液。

給動物靜脈注射肝素（500U/kg），使全身肝素化(也可不進(jìn)行此操作),分離出一段頸總動脈，在其下穿兩根線備用。將動脈遠(yuǎn)心端的線結(jié)扎，用動脈夾夾住近心端，兩端間的距離盡可能長。用眼科剪在靠遠(yuǎn)心端結(jié)扎線處的動脈上呈45o度剪一小口，約為管徑的1/3或1/2，向心臟方向插入動脈導(dǎo)管，用近心端的備用線，在插入口處將導(dǎo)管與血管結(jié)扎在一起，其松緊以開放動脈夾后不致出血為度。小心緩慢放開動脈夾，如有出血，即將線再扎緊些，但仍以導(dǎo)管能抽動為宜。將導(dǎo)管再送入2～3cm，并使結(jié)扎更緊些,以使導(dǎo)管不致脫落。用遠(yuǎn)心處的備用線圍繞導(dǎo)管打結(jié)、固定。操作完畢后將血管放回原處。

5.腹壁切開法第三節(jié)計算機(jī)生物信號采集處理系統(tǒng)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實驗手段和設(shè)備的不斷更新，促進(jìn)了機(jī)能學(xué)實驗研究的發(fā)展。計算機(jī)是一種現(xiàn)代化、高科技的自動信息分析、處理設(shè)備。利用計算機(jī)采集、處理生物信息，讓計算機(jī)進(jìn)入機(jī)能學(xué)實驗室已成為必然趨勢。一、計算機(jī)在機(jī)能學(xué)實驗中的應(yīng)用一）計算機(jī)應(yīng)用的一般過程通常人們把電子的、機(jī)械的以及磁性的各種部件所組成的計算機(jī)實體稱為硬件，如輸入設(shè)備、中央處理器(CPU)、內(nèi)存儲器、外存儲器、輸出設(shè)備等。而把指揮計算機(jī)工作的各種程序和數(shù)據(jù)稱為“軟件”。在實際使用時，首先從輸入設(shè)備鍵盤、鼠標(biāo)、磁盤將程序及數(shù)據(jù)送入內(nèi)存，再輸入讓程序運行的命令，這時中央處理器就按照內(nèi)存中程序的安排，從中取出數(shù)據(jù)到運算器內(nèi)進(jìn)行運算、處理，并將結(jié)果送回內(nèi)存中保存。同時將運行的結(jié)果按照要求通過輸出設(shè)備顯示、打印出來，也可以送到磁盤上儲存起來。由此可見，計算機(jī)是按照人們的要求來完成程序規(guī)定的任務(wù)。二）生物信息的采集、處理過程計算機(jī)采集、處理生物信息的一般過程如圖20。數(shù)據(jù)分析、處理換能器顯示生物體電信號放大器A/D轉(zhuǎn)換器計算機(jī)儲存打印等二BL-420生物機(jī)能實驗系統(tǒng)介紹一）BL-420生物機(jī)能實驗系統(tǒng)功能特點1．采用12位A/D轉(zhuǎn)換器，最高采樣速率可達(dá)60kHz。2．四通道高增益(2～50000倍)，低噪聲，程控的生物電放大器。各通道掃描速度分別可調(diào)。3．程控電刺激器，包括電壓輸出(0V～35V，步長最小達(dá)5mV)和電流輸出(0mA～10mA，步長最小達(dá)1μA)兩種模式。4．程控全導(dǎo)聯(lián)心電選擇。5．以中文win98為軟件平臺，全中文圖形化操作界面。6．網(wǎng)絡(luò)控制功能，可實現(xiàn)教師與學(xué)生在計算機(jī)上直接對話。7．以生理實驗為基礎(chǔ)，預(yù)設(shè)置了8個系統(tǒng)共32個實驗?zāi)K。8．獨特的雙視顯示功能，可實現(xiàn)實時實驗生物波形與實驗記錄波形同時對比觀察的功能。9．?dāng)?shù)據(jù)分析功能，可實時地對原始生物信號以及儲存在磁盤上的反演信號進(jìn)行積分、微分、頻譜、頻率直方等運算、分析；并同步顯示該處理后的圖形。10．測量功能對信號進(jìn)行實時測量、光標(biāo)測量、兩點測量以及區(qū)間測量，可測量出多項生物指標(biāo)，如：最大、最小以及平均值，信號的頻率、面積、變化率以及持續(xù)時間等，且可將測量結(jié)果數(shù)據(jù)或原始數(shù)據(jù)導(dǎo)出到Excel或txt文件中。11．?dāng)?shù)據(jù)反演功能，在反演數(shù)據(jù)過程中，可用鼠標(biāo)拖動數(shù)據(jù)查找滾動條進(jìn)行快速查找；并可對反演信號進(jìn)行數(shù)據(jù)、圖形剪輯。12．有打印單、多通道的實驗數(shù)據(jù)功能；在打印時，還可進(jìn)行圖形比例壓縮，確定打印位置。二）使用指南1．主界面BL-NewCentury.exeBL-NewCentury.exe操作主界面主界面從上到下依次主要分為：標(biāo)題條、菜單條、工具條、波形顯示窗口、數(shù)據(jù)滾動條及反演按鈕區(qū)、狀態(tài)條等6個部分。主界面從左到右主要分為：標(biāo)尺調(diào)節(jié)區(qū)、波形顯示窗口和分時復(fù)用區(qū)三個部分。波形顯示窗口可以通過鼠標(biāo)左、右視分隔條，同時顯示反演波形和實時觀察的生物波形（左視顯示實時記錄下來的生物波形，右視顯示實時的生物波形）。在標(biāo)尺調(diào)節(jié)區(qū)的上方是刺激器調(diào)節(jié)區(qū)，其下方則是Mark標(biāo)志區(qū)。分時復(fù)用區(qū)包括：控制參數(shù)調(diào)節(jié)區(qū)、顯示參數(shù)調(diào)節(jié)區(qū)、通用信息顯示區(qū)和專用信息顯示區(qū)四個分區(qū)，它們分時占用屏幕右邊相同的一塊顯示區(qū)域，可以通過分時復(fù)用區(qū)頂端的4個切換按鈕在這4個不同用途的區(qū)域之間進(jìn)行切換。分時復(fù)用區(qū)的下方是特殊實驗標(biāo)記選擇區(qū)。各部分功能詳見表1-1。表1-lBL-NewCentury軟件主界面上各部分功能名稱功能備注標(biāo)題條顯示BL-NewCentury軟件的名稱以及實驗標(biāo)題等信息菜單條顯示所有的頂層菜單項，您可以選擇其中的某一菜單項以彈出其子菜單。最底層的菜單項代表一條可執(zhí)行命令菜單條中一共有8個頂層菜單項工具條一些最常用命令的圖形表示集合，它們使常用命令的使用變得方便與直觀，可直接點擊執(zhí)行共有21個工具條命令刺激器調(diào)節(jié)區(qū)調(diào)節(jié)刺激器參數(shù)及啟動、停止刺激包括兩個按鈕左、右視分隔條用于分隔左、右視，也是調(diào)節(jié)左、右視大小的調(diào)節(jié)器左、右視面積之和相等時間顯示窗口顯示記錄數(shù)據(jù)的時間在數(shù)據(jù)記錄和反演時顯示4個切換按鈕用于在4個分時顯示復(fù)用區(qū)中進(jìn)行切換增益、標(biāo)尺調(diào)節(jié)區(qū)在實驗過程中調(diào)節(jié)硬件增益，在數(shù)據(jù)反演時調(diào)節(jié)軟件放大倍數(shù)。選擇標(biāo)尺單位及調(diào)節(jié)標(biāo)尺基線位置波形顯示窗口顯示生物信號的原始波形或數(shù)據(jù)處理后的波形，每一通道顯示窗口對應(yīng)一個實驗采樣通道顯示通道之間的分隔條用于分隔不同的波形顯示通道，也是調(diào)節(jié)波形顯示通道高度的調(diào)節(jié)器4個顯示通道的面積之和相等分時復(fù)用區(qū)包含硬件參數(shù)調(diào)節(jié)區(qū)、顯示參數(shù)調(diào)節(jié)區(qū)以及通用信息區(qū)和專用信息區(qū)4個分時復(fù)用區(qū)域這些區(qū)域占據(jù)屏幕右邊相同的區(qū)域Mark標(biāo)志區(qū)用于存放Mark標(biāo)志和選擇Mark標(biāo)志Mark標(biāo)志在光標(biāo)測量時使用狀態(tài)條顯示當(dāng)前系統(tǒng)命令的執(zhí)行狀態(tài)或一些提示信息數(shù)據(jù)滾動條及反演按鈕區(qū)用于實時實驗和反演時快速數(shù)據(jù)查找和定位，同時調(diào)節(jié)4個通道的掃描速度。特殊實驗標(biāo)記選擇區(qū)用于編輯特殊實驗標(biāo)記，選擇特殊實驗標(biāo)記，然后將選擇的特殊實驗標(biāo)記添加到波形曲線旁邊包括特殊標(biāo)記選擇列表和打開特殊標(biāo)記編輯對話框按鈕2．生物信號顯示窗口生物信號顯示窗口如圖所示，其窗口說明詳見表1-2。表1-2生物信號顯示窗口功能名稱功能備注標(biāo)尺基線生物信號的參考零點，其上為正，其下為負(fù)波形顯示顯示采集到的生物信號波形或處理后的結(jié)果波形背景標(biāo)尺點波形幅度大小和時間長短的參考刻度線或點其類型和顏色可選生物信號顯示窗口3．工具條工具條如下圖所示。工具條工具條和命令菜單的含義相似，也是一些命令的集合，是我們實驗中常用的一些命令。工具條上的每一個圖形按鈕被稱為工具條按鈕，每一個工具條按鈕對應(yīng)一條命令。三、BL-420生物機(jī)能實驗系統(tǒng)操作步驟1．開機(jī)只有當(dāng)計算機(jī)各接口連線連接完畢后，才能開機(jī)。2.打開“BL-420生物機(jī)能實驗系統(tǒng)”外置系統(tǒng)3．啟動軟件用鼠標(biāo)雙擊桌面上的“BL-420生物機(jī)能實驗系統(tǒng)”快捷圖標(biāo)，顯示器顯示BL-420生物機(jī)能實驗系統(tǒng)的主界面。4．開始實驗的方法鼠標(biāo)單擊菜單條的“實驗項目”菜單項，彈出下拉式菜單，移動鼠標(biāo)，選定實驗系統(tǒng)及內(nèi)容后，用鼠標(biāo)左鍵單擊該項，系統(tǒng)自動進(jìn)入已設(shè)置基本參數(shù)的該實驗監(jiān)視狀態(tài)。如要以全屏方式顯示某通道信號，只需用鼠標(biāo)雙擊該通道任一部位，即完成單通道的全屏顯示。同時也可以通過拖動各通道之間的分隔條任意調(diào)節(jié)各通道顯示區(qū)的大小。如要恢復(fù)原通道顯示大小，用鼠標(biāo)雙擊顯示區(qū)的任一部位即可。5．?dāng)?shù)據(jù)顯示在實驗過程中，我們要不斷觀察生物信號測量的數(shù)據(jù)。這時只需用鼠標(biāo)單擊分時顯示復(fù)用區(qū)“”或“”按鈕，該區(qū)即根據(jù)不同通道記錄信號的類型，顯示不同的測量數(shù)據(jù)。6．暫停觀察如要仔細(xì)觀察正在顯示的某段圖形，鼠標(biāo)單擊工具條上的“”暫停按鈕，此時該段圖形將被凍結(jié)在屏幕上。如需繼續(xù)觀察掃描圖形，鼠標(biāo)單擊“”啟動鍵即可。7．刺激器的使用當(dāng)需要給標(biāo)本刺激時，鼠標(biāo)單擊工具條的“”啟動刺激按鈕；停止刺激時，鼠標(biāo)再次單擊工具條的“”刺激按鈕。8．實驗標(biāo)記在我們實驗過程中對發(fā)生的事件如用藥、刺激等要作標(biāo)記，它是我們實驗后分析數(shù)據(jù)時對該事件的標(biāo)志。在該系統(tǒng)中標(biāo)記有兩種方式。一種是特殊實驗標(biāo)記，鼠標(biāo)右鍵彈出。另一種是通用實驗標(biāo)記，在界面的工具條上。9．實驗結(jié)束當(dāng)實驗結(jié)束時，用鼠標(biāo)單擊工具條的“”停止鍵。如果在實驗中啟動了“”記錄存盤框，此時會彈出一個存盤對話框，提示你給剛才記錄存盤的實驗數(shù)據(jù)輸入文件名(文件名自定義)。否則，計算機(jī)將以“Temp.dat”作為該實驗數(shù)據(jù)的文件名，并覆蓋前一次相同文件名的數(shù)據(jù)，存入儲存器。當(dāng)單擊“確定”，存盤對話框消失后，即可調(diào)出本次實驗圖形數(shù)據(jù)進(jìn)行反演。10．?dāng)?shù)據(jù)測量方法：鼠標(biāo)單擊工具條上的“”區(qū)間測量投鈕，此時，圖形暫停掃描，通道內(nèi)出現(xiàn)一垂直線條，線條隨鼠標(biāo)移動而移動；單擊鼠標(biāo)左鍵以確定要測量圖形的始端，同時第二條垂直線出現(xiàn)，相同方法確定終端。在被測量圖形段內(nèi)出現(xiàn)一條水平直線。用鼠標(biāo)上下移動該直線，選定頻率計數(shù)的基線，鼠標(biāo)單擊以示確定(水平直線也代表該區(qū)問的時程，用此測量方法同樣可以測量某波形的時程)。這時所有被測量的參數(shù)自動顯示在該通道信息區(qū)內(nèi)，單擊鼠標(biāo)右鍵結(jié)束本次測量。注意事項1．在開機(jī)狀態(tài)下，切忌插入或拔出計算機(jī)各插口連線。2．切忌液體滴人計算機(jī)及附屬設(shè)備內(nèi)。3．未經(jīng)允許，不得隨意改動計算機(jī)系統(tǒng)設(shè)置。4．在實驗開始記錄時，注意是否在記錄狀態(tài)下(記錄按鈕被顯示為按下狀態(tài))，否則不進(jìn)行數(shù)據(jù)存盤，反演時無圖形數(shù)據(jù)。5．未經(jīng)許可嚴(yán)禁自帶軟盤上機(jī)操作。第二部分哺乳動物實驗實驗一離體腸段平滑肌的灌流目的：了解哺乳動物離體腸段的活動及其影響因素。掌握動物實驗的基本操作技術(shù)。[原理]哺乳動物腸平滑肌具有自律性活動。植物性神經(jīng)系統(tǒng)的遞質(zhì)，激素和溫度等都能影響其自律性活動。內(nèi)容：將兔倒提，用棒猛擊其后腦部致死。剖開腹腔，拉出小腸放入溫臺氏液中。截取3—4cm長的一段十二指腸或空腸，洗凈腸內(nèi)容物，于其兩端各穿一線，將一端固定于實驗勾上，另一端與換能器相連。將恒溫平滑肌槽放入控制溫度36—37。c（1）記錄正常的離體小腸平滑肌的活動曲線。（2）加入0.1%腎上腺素2滴,觀察其活動的變化,待作用出現(xiàn)后，放掉浴皿中的臺式液，換液。（3）加入乙酰膽堿2滴,記錄其活動曲線,換液。（4）加入阿托品2滴后,再加入乙酰膽堿2滴,記錄其活動曲線,換液。（5）將溫度降低至20一30。c,記錄其活動曲線。（6）將溫度逐漸升高至37一39。c,記錄其活動曲線。實驗操作要點及注意事項：1、注意控制溫度。2、兔子先禁食24小時，在實驗前一小時喂給食物、而后擊斃則腸運動效果較好。實驗二（一）呼吸運動的調(diào)節(jié)[目的]觀察影響呼吸運動的一些因素,了解其作用機(jī)理。[原理]呼吸運動的深度和頻率能適應(yīng)機(jī)體代謝時對氣體的需要,都是由于受到神經(jīng)系統(tǒng)和體液因素調(diào)節(jié)的結(jié)果。[實驗動物和用品]兔，手術(shù)臺，常用手術(shù)器械，氣管套管，橡膠管，保護(hù)電極，5ml和20ml注射器，3%乳酸，萬用支架，雙凹夾，啟普發(fā)動器（碳酸鹽.鹽酸）,玻璃針,烏拉坦,換能器。[實驗方法和步驟]1、動物手術(shù)：稱重、麻醉。仰臥保定于手術(shù)臺上，剖開頸部皮膚，分離出氣管與兩側(cè)迷走神經(jīng)穿線備用。在氣管上切一“T”形小口插入氣管插管，用棉線結(jié)扎固定。2．連接馬利氏氣鼓與換能器。打開記算機(jī),調(diào)整進(jìn)行下列實驗：3．記錄正常的呼吸運動曲線。4．增加吸入氣中的二氧化碳：將CO2發(fā)生器同氣管套管與空氣相通一側(cè)的出入口相接，使動物吸入CO2氣體。記錄活動曲線。5．缺氧：堵住氣管套管與空氣相通一側(cè)的出入口數(shù)秒鐘，使動物暫時窒息，記錄活動曲線。6．增大無效腔：氣管套管與空氣相通一側(cè)接一長約50cm的橡皮管，使無效腔增加，記錄活動曲線。7．增加血液酸度：耳緣靜脈注射2ml3%的乳酸,記錄活動曲線。8．迷走神經(jīng)在呼吸運動中的作用：剪斷一側(cè)迷走神經(jīng)，記錄活動曲線。再剪斷另一側(cè)迷走神經(jīng)，記錄活動曲線。電刺激一側(cè)迷走神經(jīng)的離中端，再刺激向中端，記錄活動曲線。[注意事項]插氣管插管前一定注意把氣管內(nèi)清理干凈后再插。2．氣體流速不易過急，以免直接影響呼吸運動，造成假象、干擾實驗結(jié)果。[結(jié)果與分析]（二）胸內(nèi)負(fù)壓[目的]證明胸內(nèi)負(fù)壓的存在，了解胸內(nèi)負(fù)壓產(chǎn)生的機(jī)理及其影響因素。[原理]胸內(nèi)負(fù)壓是肺的彈性和肺泡表面張力而產(chǎn)生的回縮力造成的，并隨呼吸運動而變化。胸內(nèi)負(fù)壓的存在是保證正常呼吸運動的必要條件。若胸壁發(fā)生穿透性損傷，引起空氣大量進(jìn)入胸膜腔時，則負(fù)壓消失，肺組織塌陷，呼吸運動停止。[實驗動物與用品]兔，手術(shù)臺，常用手術(shù)器械，粗注射針頭，20ml注射器，水檢壓計，橡皮管。[方法與步驟]將兔麻醉仰臥固定與手術(shù)臺上，剪去頸部、腹部和胸部右側(cè)4—5肋間處被毛。在頸部腹面切開皮膚，分離肌肉，找出氣管。在氣管上作一“T”形切口，并插入氣管套管，結(jié)扎固定。切開胸部右側(cè)4-5肋間處皮膚1—1.5cm，分離肌肉至暴露肋間肌為止（若用粗針頭，可不必分離肌肉）。然后由第四肋間插入以橡皮管連接水檢壓計的胸套管或粗注射針頭，深度以水檢壓計隨呼吸明顯搏動為止；固定胸頭管或針頭后，即可開始實驗觀察和記錄。1.打開橡皮管夾后，即見水檢壓計與胸膜腔相通一側(cè)的液面上升，而與大氣壓相通一側(cè)的液面下降。這表明胸膜腔內(nèi)的壓力低于大氣壓。2.觀察吸氣和呼氣時，胸內(nèi)負(fù)壓有何變化？為什么？3.將氣管套管一側(cè)開口連接一根長約50cm左右的橡皮管，然后堵住另一開口，使無效腔容積增大。胸內(nèi)負(fù)壓與第二項相比有何變化？為什么？4.穿透胸膜腔，使胸膜腔與大氣相通，造成氣胸。觀察水檢壓計的液面有何變化？為什么？5.用注射器抽出進(jìn)入胸膜腔內(nèi)的空氣，使胸膜腔內(nèi)又呈現(xiàn)負(fù)壓，觀察水檢壓計的液面變化？為什么？[注意事項]用穿刺針時，不要插得過猛過深，以免刺破肺組織和血管，形成氣胸和出血過多。[結(jié)果與分析]實驗三動脈血壓的直接測定及其影響因素[目的]了解動脈血壓的直接測定及其影響因素對血壓的影響。[原理]正常的血壓經(jīng)常維持在一定水平，當(dāng)內(nèi)外環(huán)境的某些因素改變時，可通過神經(jīng)和體液的調(diào)節(jié)，使動脈血壓發(fā)生相應(yīng)的改變。[材料與用品]兔，手術(shù)臺，手術(shù)器械，動脈套管，動脈夾，注射器，0.01%ACH,0.1%AD,0.9%NaCL,0.1%肝素，3.8%檸檬酸三鈉。[方法步驟]1．手術(shù)將兔稱重、麻醉后。仰臥保定于手術(shù)臺上，頸部被皮、切開頸部皮膚，分離皮下組織及肌肉，分離雙側(cè)的頸動脈各穿二根棉線備用。再分離雙側(cè)的迷走神經(jīng)、交感神經(jīng)、減壓神經(jīng)，各穿二根不同顏色的棉線備用。然后分離坐骨神經(jīng)穿線備用。2．在一側(cè)頸動脈處結(jié)扎遠(yuǎn)心端，再于近心端用動脈夾夾住。用小剪刀在這段動脈上斜向近心端剪一小口，將灌有肝素生理鹽水的動脈套管插入近心端，并在套管的側(cè)管上結(jié)扎固定。小心松開動脈夾，即可見血液沖進(jìn)動脈插管，打開計算機(jī)，調(diào)整進(jìn)行下列實驗：1).觀察正常的血壓。2).夾閉另一側(cè)頸動脈，觀察血壓變化。3).牽拉頸動脈竇，觀察血壓變化。4).刺激減壓神經(jīng)，觀察血壓變化。5).剪斷一側(cè)減壓神經(jīng)，再剪斷一另側(cè)減壓神經(jīng)，觀察血壓變化。6).刺激減壓神經(jīng)離中端，再刺激減壓神經(jīng)向中端，觀察血壓變化。7).刺激迷走神經(jīng)，交感神經(jīng)，觀察血壓變化。8).剪斷迷走神經(jīng)，刺激迷走神經(jīng)向中端，離中端，觀察血壓變化。9).由耳緣靜脈注射0.01%ACH0.2ml,觀察血壓變化。10).由耳緣靜脈注射0.1%AD0.2ml,觀察血壓變化。11).由耳緣靜脈注射0.1%去甲腎上腺素0.2ml，觀察血壓變化。12).由耳緣靜脈注射0.9%NaCL,觀察血壓變化。圖七兔頸部氣管、神經(jīng)、血管位置示意圖喉及氣管2.頸總動脈3、3，.迷走神經(jīng)4、4，.交感神經(jīng)干5.減壓神經(jīng)6.節(jié)狀神經(jīng)節(jié)7.頸前神經(jīng)節(jié)8.喉區(qū)神經(jīng)9.主動脈弓10.迷走心神經(jīng)[注意事項]進(jìn)行一項實驗后，須待血壓恢復(fù)正常，才能開始下一項實驗。動脈套管與頸動脈須保持平行，防止刺破動脈或堵塞血流。分離神經(jīng)時應(yīng)特別小心，不要過度牽拉，使神經(jīng)受損，影響實驗結(jié)果。[結(jié)果與分析]實驗四影響尿生成的因素[目的]了解影響尿生成的若干因素。[原理]尿的生成過程包括腎小球的濾過,腎小管與集合管的重吸收和分泌,凡對這些過程有影響的因素都可影響尿的生成。[材料與用品]兔，手術(shù)臺，常用手術(shù)器械，膀胱漏斗，注射器，縫合針，棉線，10%NaSO4,0.9%Nacl,20%G,0.1%AD,ADH。[方法步驟]1.稱重，麻醉。2.保定，頸部被皮，頸部正中切開皮膚，分離一側(cè)迷走神經(jīng)在其下穿線備用。3.腹部被皮，腹部于恥骨聯(lián)合上方正中做一2—3CM長的切口，暴露膀胱，先辯認(rèn)清楚膀胱和輸尿管的解剖部位。在膀胱腹面正中做荷包縫合，做一小切口，插入膀胱漏斗（對準(zhǔn)輸尿管），安裝固定膀胱漏斗。圖九兔輸尿管及膀胱導(dǎo)尿法1．輸尿管2.插膀胱導(dǎo)管部位3.膀胱導(dǎo)管4．開計算機(jī)，調(diào)整。按下列步驟進(jìn)行實驗：1).計數(shù)5一10分鐘內(nèi)尿的正常分泌滴數(shù)。2).耳緣靜脈注射20%G10ml,觀察尿的分泌滴數(shù)。3).耳緣靜脈注射0.9%NaCL20ml,觀察尿的分泌滴數(shù)。4).耳緣靜脈注射0.1%AD0.1-0.2ml,觀察尿的分泌滴數(shù)。5).耳緣靜脈注射呋塞米（5mg·kg-1），觀察尿量的變化。

6).結(jié)扎并切斷右側(cè)迷走神經(jīng)，連續(xù)刺激迷走神經(jīng)的外周端20～30s，使血壓降至6.67kPa（50mmHg）左右，觀察尿量的變化。7).耳緣靜脈注射ADH0.1-0.2ml,觀察尿的分泌滴數(shù)。8).耳緣靜脈注射垂體后葉素1—2單位,觀察尿的分泌滴數(shù)。[注意事項]待尿量恢復(fù)正常后，再進(jìn)行下項實驗。[結(jié)果與分析]第三部分蛙類實驗實驗一期前收縮與代償間歇[目的]了解心肌在興奮性變化中對額外刺激的收縮反應(yīng)。掌握蛙心收縮的記錄方法。[原理]心肌具有較長的絕對不應(yīng)期，其全部收縮都處于絕對不應(yīng)期中，故在此期間不能接受任何刺激而出現(xiàn)新的興奮和收縮；而心肌的舒張期（不包括舒張期的早期）則處于相對不應(yīng)期中，故能接受一個具有閾上強度的額外刺激，并出現(xiàn)一個期前收縮。期前收縮之后隨之出現(xiàn)一個歷時較長的代償間歇。代償間歇的出現(xiàn)是由于從竇房結(jié)（兩棲動物為靜脈竇）傳來的正常節(jié)律性興奮，落在期前收縮的絕對不應(yīng)期中，故不能引起蛙心的收縮，而要等待下一個正常節(jié)律性興奮傳來時，才能再引起蛙心的收縮。這樣，便在期前收縮之后，出現(xiàn)一個歷時較長的代償間歇。[材料與用品]蛙，蛙類手術(shù)器械，刺激電極，張力換能期，蛙心夾，滴管，任氏液。[方法步驟]1.取蛙一只，破壞腦和脊髓，將其仰臥固定與蛙板上。從劍突下將胸部皮膚向上剪開，然后剪掉胸骨，打開心包，暴露心臟。2.將與張力換能器有連線的蛙心夾在心舒張期夾住心尖。將刺激電極固定，使其兩極與心室相接觸。3.接通計算機(jī)，進(jìn)行觀察記錄。（1）、描記一段正常蛙心收縮曲線。（2）、在蛙心收縮期給與中等強度的單個電刺激，觀察蛙心活動有無改變？為什么？（3）、在蛙心舒張期給與中等強度的單個電刺激，觀察蛙心活動有無改變？為什么？[注意事項]：經(jīng)常用任氏液潤濕心臟，以免其干燥。2.蛙心夾與張力換能器間的連線應(yīng)有一定的緊張度。[結(jié)果與分析]實驗二蛙心起博點[目的]觀察蛙心臟傳導(dǎo)系統(tǒng)不同部位自律性的高低及興奮傳導(dǎo)的走向。[原理]蛙心傳導(dǎo)系統(tǒng)中各部分都具有自律性，其中以靜脈竇的自律興最高，房室交接次之，心室內(nèi)的傳導(dǎo)組織最低。故靜脈竇為蛙心興奮時搏動的起博點。靜脈竇的興奮沿心房傳導(dǎo)至房室交界，在經(jīng)房室束和浦金野氏纖維傳導(dǎo)至心肌。若在不同部位阻斷傳導(dǎo)，則出現(xiàn)正常收縮節(jié)律的障礙。[實驗動物與用品]蛙（或蟾蜍），蛙類手術(shù)器械，滴管，棉線，任氏液。[方法與步驟]將蛙的腦和脊髓破壞，使之仰臥固定在蛙板上，剪除胸部皮膚、肌肉和胸骨，完全暴露心臟。剪開包心膜。進(jìn)行下列實驗項目：1.將蛙心翻向頭端或提起心尖，觀察蛙心各部收縮的順序，并計算其收縮的頻率（次/分）。2.先用棉線在靜脈竇和心房之間結(jié)扎，該結(jié)扎稱為斯氏第一結(jié)。此時靜脈竇依然波動，但是心房與心室均停止與舒張狀態(tài)。待心房和心室恢復(fù)搏動后，計數(shù)其各處的波動頻率是否一致？為什么？3．再用棉線在心房和心室之間結(jié)扎。此結(jié)扎稱為斯氏第二結(jié)。此時心房仍有搏動，但心室搏動停止。以后，如心室出現(xiàn)搏動，其頻率如何？為什么？[注意事項]1.結(jié)扎前要人真識別心臟各部分的界限。2.結(jié)扎的部位要準(zhǔn)確的落在相鄰部位的交界處，結(jié)扎時用力逐漸增加，直至心房、心室搏動停止。[結(jié)果與分析]實驗三蛙心灌流[目的]用離體蛙心灌流的方法，觀察各種理化因素對心臟活動的影響。[原理]維持心臟正常的收縮節(jié)律和強度，需要有一個適當(dāng)?shù)睦砘h(huán)境（離子的濃度比例，PH，環(huán)境溫度等），這種環(huán)境條件稍有改變，便可影響心臟的正常活動。心臟受植物神經(jīng)支配，神經(jīng)興奮時，其末梢釋放遞質(zhì)，作用于心肌細(xì)胞上的受體，從而調(diào)節(jié)心臟的活動，交感神經(jīng)或兒茶酚胺的強心作用主要是通過激活心肌細(xì)胞膜上的—腎上腺素能受體，使心肌收縮力增強。迷走神經(jīng)或乙酰膽堿是通過膽堿能M受體的作用，對心肌細(xì)胞起抑制作用，使心肌的自律性降低，阻斷受體將使相應(yīng)的遞質(zhì)不能發(fā)揮作用。[材料與用品]蛙（蟾蜍），萬能支架，雙凹夾，木夾，蛙板，蛙手術(shù)器械，蛙心插管，蛙心夾，棉線，玻璃針，2%NaCL，2%CaCL2,1%KCL,0.1%ad,0.01%Ach。[方法步驟]1.取一只蛙，破壞腦和脊髓后，使其仰臥固定于蛙板上，從劍突下將胸部皮膚向上剪開一個倒三角形口，然后剪掉胸骨，打開心包，暴露心臟。2.在主動脈干下方穿2根線，一條在左主動脈上端結(jié)扎作插管時牽引用，另一根則在動脈圓錐上方，用于結(jié)扎固定蛙心套管。在左側(cè)支主動脈弓處剪一小口，插入裝滿任氏液的蛙心套管，固定于蛙心套管的側(cè)鉤上，以免心臟滑脫。3.離體輕輕提起蛙心插管以抬高心臟，用一棉線在靜脈竇與腔靜脈交界處作一結(jié)扎，在結(jié)扎線外側(cè)剪斷與心臟連接動、靜脈及組織，將蛙心游離出來，注意保護(hù)靜脈竇。4.沖洗心腔用新鮮任氏液反復(fù)換洗蛙心套管內(nèi)含血的任氏液，直至蛙心套管內(nèi)無血液殘留為止。5.固定于萬能支架，用蛙心夾在心臟舒張期夾住心尖，并將蛙心夾的線頭連至張力換能器上。6.打開計算機(jī)，聯(lián)機(jī)，調(diào)整。進(jìn)行下列實驗1).描記正常心博曲線。2).改用0.65%NaCL灌流，觀察心臟活動有何變化？待心臟發(fā)生明顯變化時，應(yīng)迅速吸出套管內(nèi)的液體，并添加新鮮的任氏液進(jìn)行換洗，反復(fù)數(shù)次，待心臟恢復(fù)活動正常。3).加2滴2%CaCL，觀察心臟活動有何變化？換液。4).加2滴1%KCL，觀察心臟活動有何變化？換液。5).加2滴0.1%Ad，觀察心臟活動有何變化？換液。6).加2滴0.01%ACH，觀察心臟活動有何變化？換液。7).加冷任氏液（4。C），觀察心臟活動有何變化？換液。8)．加熱任氏液（40。C），觀察心臟活動有何變化？[注意事項]1.對離體蛙心表面常用任氏液沖洗。2.插蛙心套管進(jìn)入心室的標(biāo)準(zhǔn)：(1)心尖可觸摸到套管尖口，但不能插的太深以免插破心尖。(2)套管中可見到蘑菇云狀噴血。(3)管中任氏液面上下波動。3.每次滴加試劑均待恢復(fù)正常后再滴加。4.注意保護(hù)靜脈竇。5．實驗中套管內(nèi)的任氏液的液面應(yīng)始終保持同一高度。[結(jié)果與分析]實驗四（一）蛙坐股神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備[目的]掌握蛙坐股神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備方法。[原理]蛙類的一些基本生命活動和生理功能與溫血動物相類似，而其組織在離體狀態(tài)下，易于控制和掌握，所以蛙類的神經(jīng)肌肉標(biāo)本常用以研究興奮性，興奮過程，刺激的一些規(guī)律和特性。[材料及用具]蛙（蟾蜍），解剖器械，鋅銅弓，培養(yǎng)皿，任氏液，棉線。[方法和步驟]1．破壞蛙的腦脊髓：取蛙或蟾蜍一只，用蛙針從枕骨大孔垂直插入，向前伸入顱腔，搗毀腦髓；向后插入椎管，搗毀脊髓。如果蛙處于癱瘓狀態(tài)，表示腦和脊髓完全破壞。然后沿兩側(cè)腋部將蛙橫為上下兩半。并將前半段棄去，保留后半段備用。2．剝離皮膚：避開神經(jīng)，用左手持圓頭鑷子夾住脊柱，右手捏住皮膚邊緣，逐步向下牽拉剝離皮膚。拉至大腿時，如阻力較大，可先剝下一側(cè)，再剝另一側(cè)。將全部皮膚剝除后，將標(biāo)本置于盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。將手及使用過的解剖器械洗凈。3．分離標(biāo)本為兩部分：沿脊柱正中線將標(biāo)本勻稱的剪成左右兩半，一半浸入盛有任氏液的燒杯中備用，另一半作進(jìn)一步剝制。4．分離坐股神經(jīng)：在大腿背側(cè)的半膜肌與股二頭肌之間用玻璃針分離坐骨神經(jīng)。注意分離時要仔細(xì)用剪刀剪斷坐骨神經(jīng)的分支，向上分離至基部，向下分離到腘窩。保留與坐骨神經(jīng)相連的一小塊脊柱，將分離出來的坐骨神經(jīng)搭于腓腸肌上；去除膝關(guān)節(jié)周圍以上的全部大腿肌肉，刮凈股骨上附著的肌肉，保留的部分就是坐骨神經(jīng)及股骨。5．分離腓腸?。涸诟焐显痪€，提起結(jié)線，剪斷結(jié)線后的跟腱，腓腸肌即可分離出來。此時在膝關(guān)節(jié)下方將其他所有組織全部剪去，到此為止，帶有股骨的坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備完成。6．標(biāo)本的檢驗：將坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本放置在蛙玻璃板上，用鋅銅弓刺激坐骨神經(jīng)，若腓腸肌迅速發(fā)生收縮反應(yīng)，說明標(biāo)本機(jī)能良好，制備成功。應(yīng)及時移放入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中，供實驗之用。[注意事項]1．剝離標(biāo)本時，切記用金屬器械牽拉或觸碰神經(jīng)干。2．分離肌肉時應(yīng)按層次剪切。分離神經(jīng)時，必須將周圍的結(jié)締組織剝離干凈。3．制備標(biāo)本過程中，應(yīng)隨時用任氏液浸濕神經(jīng)和肌肉，防止干燥。4．切勿讓蟾蜍的皮膚分泌物和血液等沾污神經(jīng)和肌肉，也不能用水沖洗，否則會影響神經(jīng)肌肉的機(jī)能。甲乙丙丁圖四蟾蜍坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備甲、后肢肌肉背面觀乙、坐骨神經(jīng)分離暴露后的位置丙、丁、坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本（實踐部分）1、股三頭肌2、股二頭肌3、半膜肌4、股骨[結(jié)果與分析]（二）不同刺激強度刺激神經(jīng)對肌肉收縮的影響[目的]應(yīng)用電刺激方法，測出肌肉閾刺激、閾上刺激與最大刺激的強度值，以了解刺激與肌肉收縮的關(guān)系。[原理]肌肉和其他任何活組織一樣，都具有興奮性。當(dāng)受刺激而發(fā)生興奮時，便表現(xiàn)出收縮活動的反應(yīng)。但并非任何強度的刺激都能引起肌肉收縮反應(yīng)，而必須達(dá)到強度閾值。測定能引起肌肉收縮反應(yīng)的刺激強度，電刺激方法較為理想。用單個感應(yīng)電震，由弱到強依次進(jìn)行刺激，從閾刺激起始，隨著刺激強度的增加，肌肉收縮也相應(yīng)的增大。當(dāng)刺激強度增加到一定限度時，肌肉收縮也達(dá)到最大限度，如再增大刺激強度，肌肉收縮就不再增大。[材料與用品]蛙坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本，萬能支架、雙凹夾、任氏液、張力換能器。[方法和步驟]1．制備腓腸肌標(biāo)本：可按照坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備方法，將制備好的標(biāo)本浸泡在任氏液中備用。2．連接刺激和記錄裝置：（1）、將張力換能器固定在鐵支架上，腓腸肌跟腱的結(jié)扎線固定在換能器彈簧片上，此連線不宜太緊或太松，并應(yīng)與桌面垂直。（2）、把穿好線的坐骨神經(jīng)輕輕提起，放在刺激電極上，應(yīng)保證神經(jīng)與刺激電極接觸良好。（3）、換能器的輸出端與記算計相連。3．觀察項目：（1）、將刺激方式調(diào)為“單”，強度調(diào)至最低檔次，然后將強度逐漸調(diào)大，記錄出剛能引起肌肉出現(xiàn)微小收縮的強度（閾強度）。（2）、將刺激強逐步增大，觀察肌肉反應(yīng)是否也相應(yīng)增大。（3）、增加刺激強度，直至肌肉收縮曲線不再繼續(xù)伸高為止，讀出最大刺激強度。[注意事項]1．每次刺激之后必須讓肌肉有一定的休息時間（0.5—1min）2．用任氏液濕潤標(biāo)本