口岸樣品采集技術及生物安全基礎課件

口岸樣品采集技術及生物平安根底口岸樣品采集技術及生物平安根底1現(xiàn)場衛(wèi)生檢疫查驗現(xiàn)場采樣樣品保存樣品運輸技術驗證執(zhí)法有效性安全防護安全操作不確定現(xiàn)場衛(wèi)生現(xiàn)場采樣樣品保存樣品運輸技術驗證執(zhí)法有效性安全防護安2一、樣品采集的目的、作用和原那么二、采樣器具的配置三、樣品采集的方法四、樣品的保存和運送五、生物平安根底及樣品采集的生物平安防護一、樣品采集的目的、作用和原那么3一、樣品采集的目的、作用和原那么1、目的:一是查明突發(fā)公共衛(wèi)生事件或疾病爆發(fā)流行的原因；二是進展衛(wèi)生質量監(jiān)測和評價。2、作用:一是查明傳染源，提供可靠技術支持；二是通過檢測分析，積累技術資料；提高科研水平。一、樣品采集的目的、作用和原那么1、目的:4一、樣品采集的目的、作用和原那么3、根本原那么▲Ⅰ制定詳細樣品采集方案：根據(jù)口岸衛(wèi)生檢疫疫情和可疑遭受生物襲擊的現(xiàn)場情況，確定樣品采集的范圍和種類；按采樣點的多少組成假設干采樣小組，并準備好必要的采樣器材和保存液；每個采樣小組最少由兩人組成，便于采樣時互相協(xié)作。一、樣品采集的目的、作用和原那么3、根本原那么5表1根據(jù)檢測目的擬選擇的樣品種類檢測目的樣品選擇檢測抗體血液、呼吸道分泌物、唾液、腦脊液、可疑物等檢測抗原血液、呼吸道分泌物、唾液、腦脊液、糞便、組織、可疑物等分離病原血液、各種拭子標本、含漱液、糞便、尿液、腦脊液、皰疹液、空氣采樣標本、各種衛(wèi)生評價樣品等檢測核酸血液、糞便、尿液等各種分離病毒用標本表1根據(jù)檢測目的擬選擇的樣品種類檢測抗體血液、呼吸道分泌6表2根據(jù)臨床癥狀擬選擇的樣品種類臨床癥狀樣品選擇發(fā)熱、呼吸道癥狀鼻咽拭子、含漱液、痰、雙份血清等高熱、周身疼痛鼻咽拭子、含漱液、痰、雙份血清等神經(jīng)癥狀腦脊液、腦組織、雙份血清等出血性癥狀血液、胸水、尿、糞便、雙份血清等黃膽血液、肝組織、尿、雙份血清等出疹、痘膿皰液、痂、雙份血清等表2根據(jù)臨床癥狀擬選擇的樣品種類發(fā)熱、呼吸道癥狀鼻咽拭子7▲Ⅱ樣品采集和處置的生物平安：主要是通過個人防護和廢棄物品的合理處置，到達在采樣中防止造成人員感染、標本和環(huán)境的污染。樣品采集前樣品采集時樣品采集后▲Ⅱ樣品采集和處置的生物平安：樣品采集前樣品采集時樣品采集后8樣品采集前充分做好的個人生物平安防護準備。包括：個人的安康狀況確認平安防護用品準備應急處置用品準備樣品采集人員是否有皮膚破損，是否患有免疫力低下的疾病或其他高危狀況。主要包括防護口罩、面罩或眼罩、帽子、乳膠手套、防護服、防護鞋套等。配置急救包，供意外暴露時應急使用。樣品采集前充分做好的個人生物平安防護準備。包括：個人的安9樣品采集時根據(jù)所估計的疫情級別，選擇不同的防護服和相關防護用品，按生物平安防護要求佩戴和進展樣品采集操作；如疑心有高度傳染力的病原，需使用連體式隔離防護服、呼吸面罩、防護目鏡、N95級防護口罩和雙層乳膠手套等。對接觸不同患者，在樣品采集時不應重復使用一副手套，以免穿插感染，并注意檢查手套的平安性。樣品采集時根據(jù)所估計的疫情級別，選擇不同的防護服和相關防護用10樣品采集后及時消毒處理使用過的防護用品及時消毒污染區(qū)表面和溢出物污染的廢棄物品必須進行無害化消毒后廢棄樣品采集后及時消毒處理使用過的防護用品及時消毒污染區(qū)表面和溢11▲Ⅲ樣品采集的時效性

在現(xiàn)場衛(wèi)生檢疫工作中，及時到達現(xiàn)場，及時采集到有價值的樣品，是及時檢驗、及時診斷、及時處置的重要前提；尤其是一些應急突發(fā)公共衛(wèi)生事件更應注重其時效性。有時樣品采集的迅速及時比完整還要重要，如對外界標本的采集，要在消毒或處理之前；疑似病人的樣品采集，要在發(fā)病初期或使用抗生藥物或治療之前采集等?！髽悠凡杉臅r效性

在現(xiàn)場衛(wèi)生檢疫工作中，及時到達現(xiàn)場，及12▲Ⅳ樣品采集的代表性或針對性以衛(wèi)生質量評價為目的的樣品采集，影響采樣的主要因素是代表性，包括采樣量、采樣部位、采樣時間、采樣的隨機性和均勻性，以及外部條件等。以查明突發(fā)公共衛(wèi)生事件或疾病爆發(fā)流行的原因為目的的樣品采集，不要求樣品的代表性，強調(diào)要有針對性，應根據(jù)疾病表現(xiàn)和流行病學調(diào)查資料，正確采集病原微生物含量最多的部位和足夠檢測用的樣本。昆蟲和動物標本，除自斃鼠外，盡量采集活的，并保持原形，便于鑒定；嚙〔nie)齒動物一般裝在鼠袋內(nèi)，盛放昆蟲的容器要具有即及既可以透氣，又要防止昆蟲跑掉?！魳悠凡杉拇硇曰蜥槍π?3▲Ⅴ樣品采集時間和種類根據(jù)不同疾病的特點和臨床表現(xiàn)，確定采樣時間和標本種類：以別離培養(yǎng)細菌為目的作病毒別離和病毒抗原檢測的標本盡量在急性發(fā)病期和使用抗生素之前采集標本，如已使用抗生素，采樣和分離培養(yǎng)最好加入相應的中和劑（中和樣品中殘存的抑菌物質）或進行其他處理，避免抗菌藥物對細菌培養(yǎng)的干擾。在發(fā)病初期和急性期采樣，最好在發(fā)病1～2天內(nèi)采取，此時病毒在體內(nèi)大量繁殖，檢出率高?！鯓悠凡杉瘯r間和種類根據(jù)不同疾病的特點和臨床表現(xiàn)，確定采樣14▲Ⅵ樣品采集的防污染避免采樣引入新的污染或者對微生物有殺滅作用或抑菌作用的物質采樣用具、容器需嚴格滅菌，避免有消毒劑殘留，并以無菌操作采樣容器要選耐用材料制成，可防滲漏，并能承受空中或地面運送過程中可能發(fā)生的溫度和壓力變化?！鰳悠凡杉姆牢廴颈苊獠蓸右胄碌奈廴净蛘邔ξ⑸镉袣缱?5▲Ⅶ樣品采集的標記樣品采集后，應及時標明相關信息樣品名稱編號采樣時間采樣量采樣者檢測工程其他可以識別或適用信息等▲Ⅶ樣品采集的標記樣品采集后，應及時標明相關信息16▲Ⅷ樣品采集后的合理處置和及時送檢樣品采集后原那么上應及時送檢；對病毒樣品不能及時送檢的，應合理保存：短期保存可以置4℃環(huán)境條件下；長期保存必須置-70℃或-70℃以下?！鴺悠凡杉蟮暮侠硖幹煤图皶r送檢樣品采集后原那么上應及時送17二、采樣器具的配置口岸衛(wèi)生檢疫采樣包〔箱〕的根本配置要求和內(nèi)容包括：1、采樣箱是采樣工具的主體；其配置要易于攜帶、消毒和密封，有足夠的空間可以容納采集的樣品和使用的采樣工具，具有要防滲漏、耐受性性能好、環(huán)境溫度保證功能。包括箱體、冰排、溫控設備等。二、采樣器具的配置口岸衛(wèi)生檢疫采樣包〔箱〕的根本配置要求和內(nèi)182、采樣管、采樣瓶、采樣袋是盛放樣品的主要容器；要易于封口，具有能防破碎、防滲漏功能的可密封容器，可容納初始樣品或樣品容器。包括多種型號的樣品保存管〔病毒采樣管、真空采血管、運送培養(yǎng)基等〕、鋼化或塑料瓶、優(yōu)質包裝袋等；接觸樣品的容器必須干凈、無污染。對于衛(wèi)生學評價可能會需要大容量的容器，可根據(jù)需要配置。2、采樣管、采樣瓶、采樣袋是盛放樣品的主要容器；要易于封口，193、樣品采集的輔助工具：剪刀、鑷子、止血帶、試子、棉簽、碘伏、酒精棉球、生理鹽水、不干膠標簽、記號筆、鋼筆或圓珠筆、記錄紙等。4、生物平安防護用品：包括一次性手套、一次性口罩、一次性帽子、一次性鞋套、工作服，隔離服，防護眼鏡、免洗洗手液等。3、樣品采集的輔助工具：剪刀、鑷子、止血帶、試子、棉簽、碘伏20三、樣品采集的方法樣品種類很多，結合口岸衛(wèi)生檢疫工作需要，就以下樣品的采集和要求進展介紹。1、用于微生物分離培養(yǎng)或抗原檢測的樣品：主要用于查明突發(fā)公共衛(wèi)生事件或疾病暴發(fā)流行的原因。

1.1呼吸道樣品

1.2糞便

1.3血液

1.4尿液

1.5皮膚

1.6尸檢組織三、樣品采集的方法樣品種類很多，結合口岸衛(wèi)生檢疫211.1呼吸道樣品呼吸道樣品種類有：咽拭子、鼻拭子、鼻腔吸取物、鼻腔沖洗液、氣管插管的病人的氣管吸取物和痰液等。咽拭子的采集：讓患者仰頭張口〔適用時可用壓舌板壓舌〕，將采樣拭子適度用力拭抹咽后壁和扁桃體部位，應防止觸及舌部，取出后迅速將拭子浸入樣品保存液中，在靠近頂端處折斷拭子桿，旋緊管蓋并密封。

推薦使用的采樣拭子為頭部為合成纖維的拭子（例如，聚酯纖維），鋁或塑料做柄，不推薦棉拭子和木柄。樣品管中保存液應根據(jù)樣品采集的目的配置（如病毒采樣液一般為2～3毫升，含有蛋白質、穩(wěn)定劑、阻止細菌和真菌生長的抗生素和緩沖液）。

1.1呼吸道樣品221.1呼吸道樣品鼻拭子：用推薦使用的無菌采樣拭子〔適用時將生理鹽水將拭子沾濕〕，輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉動退出。以同一拭子拭另側鼻孔。將拭子頭浸入樣品保存液中，于尾部折斷，旋緊管蓋并密封。1.1呼吸道樣品231.1呼吸道樣品鼻腔吸取物/鼻腔沖洗液：適用時，用無菌采集器具收集鼻腔吸取物/鼻腔沖洗液5-10ml放入樣品保存液中，旋緊管蓋并密封。氣管吸取物：必要時，對于氣管插管的病人可以采集氣管吸取物5-10ml放入樣品保存液中，旋緊管蓋并密封。痰液：對于肺部感染應采取痰標本，以清晨第一口痰為最正確。采取標本的時間一般在發(fā)病的第一日采集，最遲不得超過3日，最好選擇體溫在38℃以上時采集。洗漱液：必要時，用生理鹽水或自配淡鹽水約15ml作為洗漱液，讓患者咳嗽后，倒入滅菌生理鹽水或自配淡鹽水約15ml，反復洗漱咽部1分鐘；洗漱時讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢〞聲，讓生理鹽水在咽部轉動。然后直接將洗漱液吐入滅菌容器內(nèi)。1.1呼吸道樣品241.2糞便▲方法對黏液膿血便應挑取黏液或膿血局部;液狀糞便采集水樣便或含絮狀物的液狀糞便2～5ml；成形糞便至少取蠶豆大小糞便1塊〔約5g〕放于滅菌容器內(nèi)，最好加有保存液或增菌液;假設無法獲得糞便時，可用保存液或增菌液濕潤過的棉拭子插入肛門4～5cm深處〔小兒2～3cm〕輕輕轉動一圈，取直腸外表的黏液后取出，盛入運送培養(yǎng)基或保存液中送檢?！笸换颊邞辽俨杉?支肛拭；采樣時注意勿將尿液或水混入糞便或容器內(nèi)；采樣后盡快塞緊或旋緊容器，所采取的糞便標本應盡快送檢，運送時間不得超過2小時，否那么應保存在4～8℃條件下送檢；集體腹瀉或食源性疾病爆發(fā)患者糞便采集，應根據(jù)患者人數(shù)決定采取標本的數(shù)量；盡量在急性腹瀉期及用藥前采集。1.2糞便▲方法251.3血液血清樣品一般使用一次性真空采血管，嚴格無菌操作，靜脈采集全血4-5ml；全血樣品一般使用一次性真空采血管，嚴格無菌操作，靜脈采集全血2ml〔內(nèi)含抗凝劑〕；作血液病原培養(yǎng)時，嚴格無菌操作采靜脈血，一般成人采血10～15ml，兒童2～5ml，嬰兒0.5～2ml，放入無菌的參加抗凝劑的有螺口容器或培養(yǎng)瓶中及時送檢。1.3血液血清樣品一般使用一次性真空采血管，嚴格無菌操作，靜26靜脈采血靜脈采血271.4尿液主要采用中段尿采集法，先用肥皂水清洗外陰部，再以無菌水洗凈，一般取首次晨尿的中段尿10～20ml于無菌容器內(nèi)，最好在2～3小時內(nèi)送到實驗室檢測，否那么應在4～8℃條件下保存運送樣品。

有時需要采集皮疹或皮膚病變標本幫助診斷。如懷疑皮膚炭疽或淋巴腺鼠疫時可從病變皮膚（焦痂和腹股溝淋巴結）取樣做細菌學培養(yǎng)。出現(xiàn)囊皰疹或膿皰疹時可直接從囊皰或膿皰采集液體用于鏡檢或培養(yǎng)。采集皰疹標本時要注意無菌操作，刺破皰囊后用無菌拭子盡量拭抹足夠量的皰疹內(nèi)液體。

1.5皮膚1.4尿液1.5皮膚281.6尸檢組織主要采集肺、氣管、心臟、脾、肝、腦、腎和淋巴結等重要器官樣品；每種組織應多部位采集，每份樣品應采集20-50g，淋巴結2個，分別置于50ml，放入裝有相應液體或培養(yǎng)基的無菌容器中，立即送檢。如需要采血那么需進展心臟穿刺。1.6尸檢組織主要采集肺、氣管、心臟、脾、肝、腦、腎和淋巴結292、用于病原體抗體檢測的標本2.1血液樣品：一般采集急性期和恢復期的血清來檢測抗體滴度的變化情況。適用于住院病人；采集時間：第一份血清于入院后24小時內(nèi)采集；第二份血清于發(fā)病后10-14天采集；第三份血清于發(fā)病后22-28天或出院當日采集。對于口岸傳染病抗體檢測的血液樣品采集沒有特殊要求，按常規(guī)要求采集，采集方法如前所述。2.2腦脊液：一般用于臨床診斷，要求在無菌條件下，由有經(jīng)驗的醫(yī)生按腰椎穿刺技術，穿刺抽取3～5ml，放于無菌試管或厭氧瓶內(nèi)（需厭氧培養(yǎng)時），立即送檢；用于病毒培養(yǎng)時在4～8℃最多可維持48小時，否則需在-70℃保存。2、用于病原體抗體檢測的標本2.1血液樣品：302.1血液樣品一般采集急性期和恢復期的血清來檢測抗體滴度的變化情況。適用于住院病人；采集時間：第一份血清于入院后24小時內(nèi)采集；第二份血清于發(fā)病后10-14天采集；第三份血清于發(fā)病后22-28天或出院當日采集。對于口岸傳染病抗體檢測的血液樣品采集沒有特殊要求，按常規(guī)要求采集，采集方法如前所述。

一般用于臨床診斷，要求在無菌條件下，由有經(jīng)驗的醫(yī)生按腰椎穿刺技術，穿刺抽取3～5ml，放于無菌試管或厭氧瓶內(nèi)（需厭氧培養(yǎng)時），立即送檢；用于病毒培養(yǎng)時在4～8℃最多可維持48小時，否則需在-70℃保存。

2.2腦脊液2、用于病原體抗體檢測的標本2.1血液樣品2.2腦脊液2、用于病原體抗體檢測的標本313.1空氣樣品空氣采樣器有不同的分類方法，種類繁多：→如按流量的不同，采樣器可分為大、中、小三類；→根據(jù)采樣器所用介質性質可分為固體采樣器和液體采樣器；→根據(jù)采樣器的工作原理可分為撞擊式、沉降式、過濾式、靜電吸附式、旋風式和離心撞擊式六種。用于檢測微生物或化學因子，一般使用空氣采樣器采集；空氣中細菌和真菌可使用平板沉降法?！桨宄两捣ㄓ捎诜椒ê唵?，不需要特殊設備，雖然準確性低于儀器法，但仍被廣泛應用，采樣方法是將瓊脂平板置于各采樣點，翻開平皿蓋，扣放于平皿旁，暴皿于規(guī)定時間后立即蓋好蓋送檢；采樣布點，室內(nèi)面積＜30平米時，設內(nèi)、中、外對角線3點，距墻壁1m，距地面高1.5ml；＞30平米，設4角及中央5點，距墻壁1m，采樣高度距地面高1.5m處。3、環(huán)境樣品：

一般用于檢測環(huán)境被污染的狀況，并對其進行衛(wèi)生學評價，也可作為食源性疾病、突發(fā)公共衛(wèi)生事件的原因樣本。主要是空氣、水、土壤樣品。3.1空氣樣品3、環(huán)境樣品：

一般用于檢測環(huán)境被污染323.2水樣水樣來源主要是河水、湖水、地下水和自來水，在疫區(qū)還包括稻田、塘水、井水和鄰近畜舍、廁所的積水點。采樣器具主要有手工采樣的采樣瓶和自動采樣器。▲手工采樣：水樣瓶用鐵架固定，塞住瓶口，待瓶沉入到一定深度時拉開瓶塞，讓水樣進入。▲自動采樣：是用自動采樣器在一定間隔時間中或連續(xù)采集樣品，分別放入樣品瓶或合并于一個樣品瓶中成為混合樣。疫區(qū)傳染病病原污染的上述水體，采集時最好采非日光直射處的表層水。采集自來水樣品時，先用酒精燈將水龍頭燒灼消毒，然后將龍頭翻開，放水5～10分鐘，再采集水樣。采樣量可根據(jù)工作條件和樣品處理方法以及檢測要求進展采集，用于化學因子檢測的水樣盛裝容器可以不滅菌，但應徹底清洗干凈。3.2水樣水樣來源主要是河水、湖水、地下水和自來水，在疫區(qū)還333.3土壤根據(jù)檢測目的，選擇有代表性的土壤，確定采樣地點。按對角穿插〔五點法〕取樣；要求：除去地表污物，再鏟除1cm左右表層土，用燒灼過的勺或鏟取土樣約200～300g，裝于滅菌容器內(nèi)，并注意保存適當空間;標明采樣地點、深度、日期后送檢。3.3土壤344、產(chǎn)品樣本：口岸傳染病檢測涉及到的主要是血液制品，檢查是否帶有傳染性因子；對于食品、化妝品、涉水產(chǎn)品、消毒及衛(wèi)生用品等，主要用于衛(wèi)生理化和衛(wèi)生微生物指標檢測，對其進行衛(wèi)生學評價及產(chǎn)品效果評價。樣品采集要求：注意包裝的完整性和抽樣的隨機性。4、產(chǎn)品樣本：355、昆蟲、動物樣品：蚊、蠅等，可用捕蟲網(wǎng)和吸蚊器捕捉；蚤類、蜱類可用布旗或毛巾在草叢、灌木、地面上拖動，使它們攀附在布旗或毛巾上；蜱類可用鑷子夾入試管內(nèi)；蚤類可用棉簽或毛筆蘸上水粘住，迅速放入試管內(nèi)；鼠類可用捕鼠器捕捉，死鼠可裝入塑料袋內(nèi)送檢。一般蚊、蚤應收集50只以上，蜱不少于20只。6、可疑物品：可在可疑物品表面使用拭子擦拭后，保存于樣品保存液中/無菌容器,適用時，也可直接截取適量污染物，保存于樣品保存液中/無菌容器。5、昆蟲、動物樣品：36四、樣品的保存和運送1、樣品保存1.1檢測病原體樣品的保存：▲原則：盡量保護待檢微生物的屬性和注意生物安全。▲微生物屬性保護基本要素：→溫度：一般低溫可增加微生物的存活和抑制雜菌的過度生長，特殊除外。→濕度：→營養(yǎng)：→pH：→抑制雜菌：▲對于口岸衛(wèi)生檢疫樣品原則上要求樣品采集后立即置4℃環(huán)境保存送檢，如果不能立即送檢，短時間（24小時內(nèi)）保存應置于4℃冰箱，若在24小時后檢測，保存于-70℃冰箱保存。四、樣品的保存和運送1、樣品保存371.2進行衛(wèi)生學評價樣品的保存:▲原則：樣本采集后要根據(jù)對溫度、濕度的要求分類處理,及時送檢。但大多數(shù)樣本都可以常溫下保存，保持原有屬性?！螅罕苊馕廴?！主要是環(huán)節(jié)控制;1.3.化學因子或毒物樣品的保存：各類樣本要分別盛▲原則：裝于密閉容器中，包裝固定、安全,冷藏保存，及時送檢。多數(shù)毒物檢驗樣本對保存的條件不是特別嚴格，如果需要特殊條件保存的樣本要按要求保存，▲要求：防止外泄！1.2進行衛(wèi)生學評價樣品的保存:382、樣品運送2.1總體要求：必須應符合生物安全要求，遵循WH0對傳染性物質和診斷性標本的安全運送指南（WH0，1997）和《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或標本運輸管理規(guī)定》（衛(wèi)生部第45號令）。達到標準的包裝方法和材料應能確保即使在運送中包裝意外受損時也能保護人員的安全及標本的完整。2.2樣品運送的包裝要求：使用WHO三級包裝系統(tǒng)第一層：裝樣品，要防滲漏。樣品容器應置于帶蓋的容器（試管）內(nèi)，容器（試管）上應有明顯標記樣品的編號或受檢者信息。第二層：耐受性好，防滲漏，可以容納第一層若干個容器。第一層容器與第二層包裝之間放置足以吸附可能漏液的吸附材料，能防止第一層容器互相碰撞，對容器啟到緩沖作用。第三層：可以容納若干個第二層包裝，防滲漏，保溫、防污染，便于運輸和消毒的密封容器，在外包裝必須有明確的生物危害標識。2、樣品運送39口岸樣品采集技術及生物安全基礎課件40口岸樣品采集技術及生物安全基礎課件412.3樣品運送具體要求：▲Ⅰ地面運送樣品：→運送過程必須專人專車；→送樣的人必須具有防護及消毒基礎知識；→車上應備有能處理突發(fā)事件的防護用品（吸水材料、消毒劑、手套、口罩、護目鏡、密封防水的廢棄物容器等）；→使用專用送樣工具；→樣品存放環(huán)境必須滿足要求（短途運送加冰保冷即可；長途運送需加干冰保冷，保持2-8℃的恒溫條件）；→樣品運送過程中不得將樣品轉托他人；→在確定樣品運送時，將樣品運送的時間和運輸方式告知接收實驗室等；→對于血液樣品為避免路途顛簸引起溶血，可在運送前分離血清。2.3樣品運送具體要求：42▲Ⅱ空運樣品：→完整的包裝其整個外部最小尺寸不能小于10cm；→每個包裝中標本量不超過4kg或4L（每個原始容器最大500m1）；→每個包裝標本中所含的感染物不應超過50g或50ml；→運輸標本的外包裝必須有明確的標簽，標明寄送人和接收人的詳細聯(lián)系方式、包裝日期和運輸日期等?！蚩者\樣品：43▲Ⅲ樣品運送附帶的文件：樣品的編號、種類、性質、數(shù)量、采樣日期等詳細資料?！艋瘜W因子或毒物樣品的運送：→密封包裝；→送檢的樣本要根據(jù)對溫度、濕度的要求分類處理；特殊條件運送的樣本要特殊處理；→運送過程中，要保證條件能夠持續(xù)保障；→要嚴防泄漏；→嚴格按照化學品管理的有關規(guī)定及時到公安部門備案；→為防止在運輸過程中的意外情況，要制定應急預案；，→專人押運。▲Ⅲ樣品運送附帶的文件：44五、生物平安根底及樣品采集的生物平安防護實驗室生物平安和生物平安實驗室的生物平安要求，有相關標準標準，如?實驗室生物平安通用要求?〔GB19489-2021〕、?病原微生物實驗室生物平安管理條例?〔國務院令第424號〕等；針對職業(yè)人員在傳染病處理過程中的防護，衛(wèi)生部也有相關的指導原那么，如SARS、禽流感、甲型H1N1期間制定的職業(yè)暴露人員防護指導原那么等，其目的都是加強人員的生物平安防護，防止人員暴露和感染。五、生物平安根底及樣品采集的生物平安防護實驗室生451、根本概念1.1生物平安防護：防止危險生物因子造成人員暴露，向外擴散并導致危害的綜合措施。1.2個人防護裝備：用防止人員受到化學和生物等有害因子傷害的的器材和用品。1.3危害程度分級：根據(jù)生物因子對個體和群體的危害程度將其分為4級.危害等級Ⅰ〔低個體危害，低群體危害〕：不會導致安康工作者和動物致病的細菌、真菌、病毒和寄生蟲等生物因子。危害等級Ⅱ〔中等個體危害，有限群體危害〕：能引起人或動物發(fā)病，但一般情況下對安康工作者、群體、家畜或環(huán)境不會引起嚴重危害的病原體。實驗室感染不導致嚴重疾病，具備有效治療和預防措施，并且傳播風險有限。危害等級Ⅲ(高個體危害，低群體危害)：能引起人或動物嚴重疾病，或造成嚴重經(jīng)濟損失，但通常不能因偶然接觸而在個體間傳播，或能用抗生素抗寄生蟲藥治療的病原體。危害等級Ⅳ〔高個體危害，高群體危害〕：能引起人或動物非常嚴重的疾病，一般不能治愈，容易直接、間接或因偶然接觸在人與人，或動物與人，或人與動物，或動物與動物之間傳播的病原體。1、根本概念461.4消毒：殺滅或去除傳播媒介上病原微生物，使其到達無害化的處理。1.5消毒劑：用于殺滅傳播媒介上的微生物使其達消毒或滅菌要求的制劑。1.6滅菌：殺滅或去除傳播媒介上一切微生物的處理。1.7滅菌劑：可殺滅一切微生物(包括細菌芽孢)使其到達滅菌要求的制劑。1.8有效氯：有效氯是衡量含氯消毒劑氧化能力的標志，是指與含氯消毒劑氧化能力相當?shù)穆攘?非指消毒劑所含氯量)，其含量用mg/L或%濃度表示。1.4消毒：殺滅或去除傳播媒介上病原微生物，使其到達無害化的472、個人防護用品防護服面部及身體保護裝備手套鞋/鞋套呼吸防護裝備2、個人防護用品防護服483、防護用品的使用方法3.1穿防護用品順序第一步：戴口罩，一只手托著口罩，扣于面部適當?shù)牟课唬硪恢皇謱⒖谡謳Т髟谶m宜的部位，壓緊鼻夾，緊貼于鼻梁處。在此過程中，雙手不接觸面部任何部位。第二步：戴帽子，戴帽子時注意雙手不接觸面部。第三步：穿防護服。第四步：戴上防護眼鏡，注意雙手不接觸面部。第五步：穿上鞋套或膠鞋。第六步：戴上手套〔必要時戴兩副手套〕，將手套套在防護服袖口外面。3、防護用品的使用方法3.1穿防護用品順序493、防護用品的使用方法

3.2．脫掉防護用品順序第一步：脫去外層手套，一次性手套應將反面朝外，放入黃色塑料袋中，橡膠手套放入消毒液中。第二步：摘下防護鏡，放入消毒液中。第三步：脫掉防護服，將反面朝外，放入黃色塑料袋中。第四步：摘下防護帽子，將手指反掏進帽子，將帽子輕輕摘，反面朝外，放入黃色塑料袋中。第五步：摘下防護口罩，一手按住口罩，另一只手將口罩帶摘下，放入黃色塑料袋中，注意雙手不接觸面部。第六步：脫下鞋套或膠鞋，將鞋套反面朝外，放入黃色塑料袋中，將膠鞋放入消毒液中。第七步：脫內(nèi)層手套，一次性手套應將反面朝外，放入黃色塑料袋中，橡膠手套放入消毒液中。注意：如在脫卸個人防護裝備時發(fā)現(xiàn)個人防護裝備受到潛在污染或受到明顯污染時，必須再戴上一副干凈的手套后，再脫卸其余裝備。3、防護用品的使用方法504、洗手和手消毒方法4.1根本要求是接觸確診病人和疑似病人前后要消毒洗手是接觸血液、體液、排泄物、分泌物和被污染的物品后要消毒洗手；是進入和離開隔離病房穿戴防護用品前、脫掉防護用品后要消毒洗手；是在同一病人身上，從污染操作轉為清潔操作之間要消毒洗手；是戴手套之前，摘手套之后要消毒洗手。4、洗手和手消毒方法514.2標準洗手方法手消毒后的洗手方法可遵循六步十五秒洗手法。即掌心對掌心搓擦；手指交織掌心對手背搓擦；手指交織掌心對掌心搓；兩手互握互搓指背；拇指在長中轉動搓擦；指尖在掌心中搓擦。A掌心對掌心搓擦B手指交織掌心對手背搓擦C手指交織掌心對掌心搓擦D兩手互握互搓指背E拇指在長中轉動搓擦F指尖在掌心中搓擦4.2標準洗手方法524、洗手和手消毒方法4.3手消毒的方法可用0.3—0.5%碘伏消毒液或快速手消毒劑〔異丙醇類、洗必泰-醇、新潔爾滅-醇、70-75%酒精等消毒劑〕按洗手方法，揉搓作用1—3分鐘。4、洗手和手消毒方法535、物品消毒處理5.1常用消毒方法▲物理消毒燃燒：高溫消毒，終末處理。干烤：140℃，作用時間2-3h。主要用于非一次性器具的消毒。高壓蒸汽滅菌消毒：121℃，作用時間20-30分鐘〔可根據(jù)消毒物品要求設定〕。用于廢棄物品消毒處理。紫外線消毒：照射時間30分鐘，用于空氣、臺面消毒。5、物品消毒處理5.1常用消毒方法545、物品消毒處理▲化學消毒化學消毒劑的選擇原那么：有效濃度低、作用速度快、性狀穩(wěn)定、配置簡便、殺滅效果好、腐蝕性小、殘留痕跡易祛除、對人、畜毒性小、價格低廉易運輸。主要消毒劑和使用方法包括：→含氯消毒劑：主要是次氯酸鈉?！灿行?00mg/片〕●使用濃度：根據(jù)需要配置成2000-5000mg/L水溶液；●作用時間：30分鐘以上。●適用范圍：5000mg/L次氯酸鈉溶液用于廢棄污物缸和溢出物、污水、排泄物消毒處理；2000mg/L用于污染臺面、器具、地面、墻面或傷口的消毒處理。●評價：使用方便、價格低，有腐蝕作用?！^氧化物消毒劑：主要是過氧乙酸?！袷褂脻舛?將過氧乙酸原液〔A、B〕按比例配置后過夜使用。用于浸泡，配置成0.2-0.4%的水溶液，用于噴霧配置成0.04-0.4%水溶液，用于熏蒸配置成3-5%水溶液。●作用時間：10-30分鐘。●適用范圍：主要用于污染臺面、地面或房間生活用品的消毒；●評價：使用方便，無殘毒性，有腐蝕作用。5、物品消毒處理▲化學消毒555、物品消毒處理→醛類消毒劑：主要是甲醛、戊二醛?！袷褂脻舛龋河糜诮菖渲贸?-10%(甲醛)或2-4%〔戊二醛〕水溶液；用于熏蒸直接使用18ml/m2；●作用時間：10-30分鐘?！襁m用于：房間、生活用品消毒；●評價：廣譜，穩(wěn)定性好，耐存放，受有機物影響小，有異味和刺激性?！庀緞褐饕堑夥袷褂脻舛龋?.5%碘伏成品溶液?！褡饔脮r間：1-5分鐘。●使用范圍：主要用于皮膚、傷口以及餐具消毒處理。●評價：毒性低、易保存，作用快.5、物品消毒處理→醛類消毒劑：主要是甲醛、戊二醛。565、物品消毒處理→乙醇溶液●使用濃度：取無水乙醇配置成70-75%的水溶液或直接使用成品?！褡饔脮r間：1-5分鐘?！袷褂梅秶褐饕糜谟糜谄つw、傷口以及實驗室臺面、門把手、儀器外表等消毒處理?！裨u價：毒性低、易保存，作用快?！?4〞消毒液●使用濃度：根據(jù)使用要求與按水比例混勻。原液有效氯含量1-1.3%?！袷褂梅秶涸号c水1：19比例混勻用于地面、物體外表消毒處理。原液與水1：1比例混勻用于廢棄污物缸和溢出物消毒處理?！褡饔脮r間：30分鐘?！裨u價：毒性低、易保存，作用快。5、物品消毒處理→乙醇溶液575、物品消毒處理5.2消毒要求▲外表消毒地面：工作完成后對地面進展清潔，必要時，用適宜的消毒液進展拖擦。工作臺面：工作完成后用2000mg/L次氯酸鈉消毒液或0.3%過氧乙酸溶液或適宜的“84〞消毒液進展抹擦消毒或75%乙醇噴灑消毒。門把手及工作椅凳：每天工作完成后用70-75%乙醇噴灑消毒。儀器外表：適宜時，用70-75%乙醇抹擦消毒。外表污染物：如樣品外溢或器皿打破〔翻〕外溢，用5000mg/L次氯酸鈉溶液或其他有效消毒劑，由外向內(nèi)灑于被污染的外表，覆蓋整個污染區(qū)域，保持30分鐘；然后清理干凈。用過的清潔器具用后浸于上述消毒液內(nèi)1小時，清潔的抹布按實驗廢棄物品處理。樣品傳遞箱：可使用移動紫外線消毒車對物體外表進展消毒或用70-75%乙醇噴灑消毒。5、物品消毒處理5.2消毒要求585、物品消毒處理▲空氣消毒工作完成后，對工作環(huán)境關閉門窗，用紫外線燈，照射30分鐘?！骶呦痉仓苯踊蜷g接接觸過可疑傳染病性樣品的器材均視為具有傳染性，應進展消毒處理。使用的一次性器具按廢氣物品處理，不準再次使用。使用的非一次性器具，用后浸入5000mg/L次氯酸鈉溶液或其他有效消毒劑浸泡過夜后再清洗消毒處理。貴重儀器局部污染時用75%酒精溶液擦拭。對間接接觸樣品的采樣器具，根據(jù)污染情況定期或適時進展有效消毒液浸泡或高壓蒸汽消毒處理。5、物品消毒處理▲空氣消毒595、物品消毒處理▲廢棄物品消毒處理一次性手套、帽子、工作衣、鞋套等使用后放入專用污物袋中封口后，加貼廢棄物品處理生物平安標識，集中交由地方廢棄物品回收部門銷毀處理。一次性采樣器材，使用后浸泡于盛有5000mg/L次氯酸鈉溶液或其他有效消毒劑的污物缸內(nèi)消毒處理或直接放入專用污物袋中，然后進展高壓蒸汽消毒；消毒處理后的廢棄物品，封口后加貼實驗室廢棄物品處理生物平安標識，集中交由地方廢棄物品回收部門銷毀處理。所有鋒利物品應置于不宜刺破的容器內(nèi)，消毒后用適宜的方法處理。5、物品消毒處理▲廢棄物品消毒處理606、意外事故緊急處理措施▲Ⅰ皮膚被刺傷：立即用肥皂和大量流動的水對局部進展沖洗或用刺激性較輕的含氯創(chuàng)傷消毒劑浸泡皮膚創(chuàng)口；盡可能擠出傷出的血液，用70-75%乙醇或其他消毒劑消毒傷口?！蚱つw污染：用水和肥皂沖洗污染部位，用70%乙醇或其他消毒劑消毒液浸泡處理；如手被污染，可置于次氯酸消毒液或其它消毒液內(nèi)浸泡片刻，然后用肥皂與清水刷洗干凈?！髽悠坊驒z測試劑濺入眼內(nèi)立即大量用生理鹽水沖洗。▲Ⅳ樣品或檢測試劑濺入嘴內(nèi)先吐出殘留的液體后，用水或1g/L高錳酸鉀溶液屢次反復漱口。6、意外事故緊急處理措施▲Ⅰ皮膚被刺傷：立即用肥皂和大量616、意外事故緊急處理措施▲Ⅴ衣物被污染時，應立即將工作服小心脫下，用高壓滅菌消毒處理。▲Ⅵ發(fā)生傳染性物質外漏〔灑于桌面或地上〕時，應立即在污染區(qū)周圍倒入2000-5000mg/L次氯酸消毒液或其他有效消毒劑，由外圍逐漸向中心消毒處理，待半小時后，清理干凈；如果發(fā)生大面積污染時，根據(jù)嚴重程度，確定消毒程序后立即處理。▲Ⅶ遇有高危的意外事故發(fā)生，除進展局部處理外，同時應立即采取預防措施，并對其進展隨訪。按相關標準要求執(zhí)行?！l(fā)生重大意外事故時，在緊急處理的同時，請教相關專家，按專家的意見進展處理，對造成重大人員傷害的，立即送往醫(yī)療機構救治。6、意外事故緊急處理措施▲Ⅴ衣物被污染時，應立即將工作服62THANKSFORYOURATTENTION!THANKSFORYOURATTENTION!63口岸樣品采集技術及生物平安根底口岸樣品采集技術及生物平安根底64現(xiàn)場衛(wèi)生檢疫查驗現(xiàn)場采樣樣品保存樣品運輸技術驗證執(zhí)法有效性安全防護安全操作不確定現(xiàn)場衛(wèi)生現(xiàn)場采樣樣品保存樣品運輸技術驗證執(zhí)法有效性安全防護安65一、樣品采集的目的、作用和原那么二、采樣器具的配置三、樣品采集的方法四、樣品的保存和運送五、生物平安根底及樣品采集的生物平安防護一、樣品采集的目的、作用和原那么66一、樣品采集的目的、作用和原那么1、目的:一是查明突發(fā)公共衛(wèi)生事件或疾病爆發(fā)流行的原因；二是進展衛(wèi)生質量監(jiān)測和評價。2、作用:一是查明傳染源，提供可靠技術支持；二是通過檢測分析，積累技術資料；提高科研水平。一、樣品采集的目的、作用和原那么1、目的:67一、樣品采集的目的、作用和原那么3、根本原那么▲Ⅰ制定詳細樣品采集方案：根據(jù)口岸衛(wèi)生檢疫疫情和可疑遭受生物襲擊的現(xiàn)場情況，確定樣品采集的范圍和種類；按采樣點的多少組成假設干采樣小組，并準備好必要的采樣器材和保存液；每個采樣小組最少由兩人組成，便于采樣時互相協(xié)作。一、樣品采集的目的、作用和原那么3、根本原那么68表1根據(jù)檢測目的擬選擇的樣品種類檢測目的樣品選擇檢測抗體血液、呼吸道分泌物、唾液、腦脊液、可疑物等檢測抗原血液、呼吸道分泌物、唾液、腦脊液、糞便、組織、可疑物等分離病原血液、各種拭子標本、含漱液、糞便、尿液、腦脊液、皰疹液、空氣采樣標本、各種衛(wèi)生評價樣品等檢測核酸血液、糞便、尿液等各種分離病毒用標本表1根據(jù)檢測目的擬選擇的樣品種類檢測抗體血液、呼吸道分泌69表2根據(jù)臨床癥狀擬選擇的樣品種類臨床癥狀樣品選擇發(fā)熱、呼吸道癥狀鼻咽拭子、含漱液、痰、雙份血清等高熱、周身疼痛鼻咽拭子、含漱液、痰、雙份血清等神經(jīng)癥狀腦脊液、腦組織、雙份血清等出血性癥狀血液、胸水、尿、糞便、雙份血清等黃膽血液、肝組織、尿、雙份血清等出疹、痘膿皰液、痂、雙份血清等表2根據(jù)臨床癥狀擬選擇的樣品種類發(fā)熱、呼吸道癥狀鼻咽拭子70▲Ⅱ樣品采集和處置的生物平安：主要是通過個人防護和廢棄物品的合理處置，到達在采樣中防止造成人員感染、標本和環(huán)境的污染。樣品采集前樣品采集時樣品采集后▲Ⅱ樣品采集和處置的生物平安：樣品采集前樣品采集時樣品采集后71樣品采集前充分做好的個人生物平安防護準備。包括：個人的安康狀況確認平安防護用品準備應急處置用品準備樣品采集人員是否有皮膚破損，是否患有免疫力低下的疾病或其他高危狀況。主要包括防護口罩、面罩或眼罩、帽子、乳膠手套、防護服、防護鞋套等。配置急救包，供意外暴露時應急使用。樣品采集前充分做好的個人生物平安防護準備。包括：個人的安72樣品采集時根據(jù)所估計的疫情級別，選擇不同的防護服和相關防護用品，按生物平安防護要求佩戴和進展樣品采集操作；如疑心有高度傳染力的病原，需使用連體式隔離防護服、呼吸面罩、防護目鏡、N95級防護口罩和雙層乳膠手套等。對接觸不同患者，在樣品采集時不應重復使用一副手套，以免穿插感染，并注意檢查手套的平安性。樣品采集時根據(jù)所估計的疫情級別，選擇不同的防護服和相關防護用73樣品采集后及時消毒處理使用過的防護用品及時消毒污染區(qū)表面和溢出物污染的廢棄物品必須進行無害化消毒后廢棄樣品采集后及時消毒處理使用過的防護用品及時消毒污染區(qū)表面和溢74▲Ⅲ樣品采集的時效性

在現(xiàn)場衛(wèi)生檢疫工作中，及時到達現(xiàn)場，及時采集到有價值的樣品，是及時檢驗、及時診斷、及時處置的重要前提；尤其是一些應急突發(fā)公共衛(wèi)生事件更應注重其時效性。有時樣品采集的迅速及時比完整還要重要，如對外界標本的采集，要在消毒或處理之前；疑似病人的樣品采集，要在發(fā)病初期或使用抗生藥物或治療之前采集等?！髽悠凡杉臅r效性

在現(xiàn)場衛(wèi)生檢疫工作中，及時到達現(xiàn)場，及75▲Ⅳ樣品采集的代表性或針對性以衛(wèi)生質量評價為目的的樣品采集，影響采樣的主要因素是代表性，包括采樣量、采樣部位、采樣時間、采樣的隨機性和均勻性，以及外部條件等。以查明突發(fā)公共衛(wèi)生事件或疾病爆發(fā)流行的原因為目的的樣品采集，不要求樣品的代表性，強調(diào)要有針對性，應根據(jù)疾病表現(xiàn)和流行病學調(diào)查資料，正確采集病原微生物含量最多的部位和足夠檢測用的樣本。昆蟲和動物標本，除自斃鼠外，盡量采集活的，并保持原形，便于鑒定；嚙〔nie)齒動物一般裝在鼠袋內(nèi)，盛放昆蟲的容器要具有即及既可以透氣，又要防止昆蟲跑掉。▲Ⅳ樣品采集的代表性或針對性76▲Ⅴ樣品采集時間和種類根據(jù)不同疾病的特點和臨床表現(xiàn)，確定采樣時間和標本種類：以別離培養(yǎng)細菌為目的作病毒別離和病毒抗原檢測的標本盡量在急性發(fā)病期和使用抗生素之前采集標本，如已使用抗生素，采樣和分離培養(yǎng)最好加入相應的中和劑（中和樣品中殘存的抑菌物質）或進行其他處理，避免抗菌藥物對細菌培養(yǎng)的干擾。在發(fā)病初期和急性期采樣，最好在發(fā)病1～2天內(nèi)采取，此時病毒在體內(nèi)大量繁殖，檢出率高?！鯓悠凡杉瘯r間和種類根據(jù)不同疾病的特點和臨床表現(xiàn)，確定采樣77▲Ⅵ樣品采集的防污染避免采樣引入新的污染或者對微生物有殺滅作用或抑菌作用的物質采樣用具、容器需嚴格滅菌，避免有消毒劑殘留，并以無菌操作采樣容器要選耐用材料制成，可防滲漏，并能承受空中或地面運送過程中可能發(fā)生的溫度和壓力變化?！鰳悠凡杉姆牢廴颈苊獠蓸右胄碌奈廴净蛘邔ξ⑸镉袣缱?8▲Ⅶ樣品采集的標記樣品采集后，應及時標明相關信息樣品名稱編號采樣時間采樣量采樣者檢測工程其他可以識別或適用信息等▲Ⅶ樣品采集的標記樣品采集后，應及時標明相關信息79▲Ⅷ樣品采集后的合理處置和及時送檢樣品采集后原那么上應及時送檢；對病毒樣品不能及時送檢的，應合理保存：短期保存可以置4℃環(huán)境條件下；長期保存必須置-70℃或-70℃以下?！鴺悠凡杉蟮暮侠硖幹煤图皶r送檢樣品采集后原那么上應及時送80二、采樣器具的配置口岸衛(wèi)生檢疫采樣包〔箱〕的根本配置要求和內(nèi)容包括：1、采樣箱是采樣工具的主體；其配置要易于攜帶、消毒和密封，有足夠的空間可以容納采集的樣品和使用的采樣工具，具有要防滲漏、耐受性性能好、環(huán)境溫度保證功能。包括箱體、冰排、溫控設備等。二、采樣器具的配置口岸衛(wèi)生檢疫采樣包〔箱〕的根本配置要求和內(nèi)812、采樣管、采樣瓶、采樣袋是盛放樣品的主要容器；要易于封口，具有能防破碎、防滲漏功能的可密封容器，可容納初始樣品或樣品容器。包括多種型號的樣品保存管〔病毒采樣管、真空采血管、運送培養(yǎng)基等〕、鋼化或塑料瓶、優(yōu)質包裝袋等；接觸樣品的容器必須干凈、無污染。對于衛(wèi)生學評價可能會需要大容量的容器，可根據(jù)需要配置。2、采樣管、采樣瓶、采樣袋是盛放樣品的主要容器；要易于封口，823、樣品采集的輔助工具：剪刀、鑷子、止血帶、試子、棉簽、碘伏、酒精棉球、生理鹽水、不干膠標簽、記號筆、鋼筆或圓珠筆、記錄紙等。4、生物平安防護用品：包括一次性手套、一次性口罩、一次性帽子、一次性鞋套、工作服，隔離服，防護眼鏡、免洗洗手液等。3、樣品采集的輔助工具：剪刀、鑷子、止血帶、試子、棉簽、碘伏83三、樣品采集的方法樣品種類很多，結合口岸衛(wèi)生檢疫工作需要，就以下樣品的采集和要求進展介紹。1、用于微生物分離培養(yǎng)或抗原檢測的樣品：主要用于查明突發(fā)公共衛(wèi)生事件或疾病暴發(fā)流行的原因。

1.1呼吸道樣品

1.2糞便

1.3血液

1.4尿液

1.5皮膚

1.6尸檢組織三、樣品采集的方法樣品種類很多，結合口岸衛(wèi)生檢疫841.1呼吸道樣品呼吸道樣品種類有：咽拭子、鼻拭子、鼻腔吸取物、鼻腔沖洗液、氣管插管的病人的氣管吸取物和痰液等。咽拭子的采集：讓患者仰頭張口〔適用時可用壓舌板壓舌〕，將采樣拭子適度用力拭抹咽后壁和扁桃體部位，應防止觸及舌部，取出后迅速將拭子浸入樣品保存液中，在靠近頂端處折斷拭子桿，旋緊管蓋并密封。

推薦使用的采樣拭子為頭部為合成纖維的拭子（例如，聚酯纖維），鋁或塑料做柄，不推薦棉拭子和木柄。樣品管中保存液應根據(jù)樣品采集的目的配置（如病毒采樣液一般為2～3毫升，含有蛋白質、穩(wěn)定劑、阻止細菌和真菌生長的抗生素和緩沖液）。

1.1呼吸道樣品851.1呼吸道樣品鼻拭子：用推薦使用的無菌采樣拭子〔適用時將生理鹽水將拭子沾濕〕，輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉動退出。以同一拭子拭另側鼻孔。將拭子頭浸入樣品保存液中，于尾部折斷，旋緊管蓋并密封。1.1呼吸道樣品861.1呼吸道樣品鼻腔吸取物/鼻腔沖洗液：適用時，用無菌采集器具收集鼻腔吸取物/鼻腔沖洗液5-10ml放入樣品保存液中，旋緊管蓋并密封。氣管吸取物：必要時，對于氣管插管的病人可以采集氣管吸取物5-10ml放入樣品保存液中，旋緊管蓋并密封。痰液：對于肺部感染應采取痰標本，以清晨第一口痰為最正確。采取標本的時間一般在發(fā)病的第一日采集，最遲不得超過3日，最好選擇體溫在38℃以上時采集。洗漱液：必要時，用生理鹽水或自配淡鹽水約15ml作為洗漱液，讓患者咳嗽后，倒入滅菌生理鹽水或自配淡鹽水約15ml，反復洗漱咽部1分鐘；洗漱時讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢〞聲，讓生理鹽水在咽部轉動。然后直接將洗漱液吐入滅菌容器內(nèi)。1.1呼吸道樣品871.2糞便▲方法對黏液膿血便應挑取黏液或膿血局部;液狀糞便采集水樣便或含絮狀物的液狀糞便2～5ml；成形糞便至少取蠶豆大小糞便1塊〔約5g〕放于滅菌容器內(nèi)，最好加有保存液或增菌液;假設無法獲得糞便時，可用保存液或增菌液濕潤過的棉拭子插入肛門4～5cm深處〔小兒2～3cm〕輕輕轉動一圈，取直腸外表的黏液后取出，盛入運送培養(yǎng)基或保存液中送檢?！笸换颊邞辽俨杉?支肛拭；采樣時注意勿將尿液或水混入糞便或容器內(nèi)；采樣后盡快塞緊或旋緊容器，所采取的糞便標本應盡快送檢，運送時間不得超過2小時，否那么應保存在4～8℃條件下送檢；集體腹瀉或食源性疾病爆發(fā)患者糞便采集，應根據(jù)患者人數(shù)決定采取標本的數(shù)量；盡量在急性腹瀉期及用藥前采集。1.2糞便▲方法881.3血液血清樣品一般使用一次性真空采血管，嚴格無菌操作，靜脈采集全血4-5ml；全血樣品一般使用一次性真空采血管，嚴格無菌操作，靜脈采集全血2ml〔內(nèi)含抗凝劑〕；作血液病原培養(yǎng)時，嚴格無菌操作采靜脈血，一般成人采血10～15ml，兒童2～5ml，嬰兒0.5～2ml，放入無菌的參加抗凝劑的有螺口容器或培養(yǎng)瓶中及時送檢。1.3血液血清樣品一般使用一次性真空采血管，嚴格無菌操作，靜89靜脈采血靜脈采血901.4尿液主要采用中段尿采集法，先用肥皂水清洗外陰部，再以無菌水洗凈，一般取首次晨尿的中段尿10～20ml于無菌容器內(nèi)，最好在2～3小時內(nèi)送到實驗室檢測，否那么應在4～8℃條件下保存運送樣品。

有時需要采集皮疹或皮膚病變標本幫助診斷。如懷疑皮膚炭疽或淋巴腺鼠疫時可從病變皮膚（焦痂和腹股溝淋巴結）取樣做細菌學培養(yǎng)。出現(xiàn)囊皰疹或膿皰疹時可直接從囊皰或膿皰采集液體用于鏡檢或培養(yǎng)。采集皰疹標本時要注意無菌操作，刺破皰囊后用無菌拭子盡量拭抹足夠量的皰疹內(nèi)液體。

1.5皮膚1.4尿液1.5皮膚911.6尸檢組織主要采集肺、氣管、心臟、脾、肝、腦、腎和淋巴結等重要器官樣品；每種組織應多部位采集，每份樣品應采集20-50g，淋巴結2個，分別置于50ml，放入裝有相應液體或培養(yǎng)基的無菌容器中，立即送檢。如需要采血那么需進展心臟穿刺。1.6尸檢組織主要采集肺、氣管、心臟、脾、肝、腦、腎和淋巴結922、用于病原體抗體檢測的標本2.1血液樣品：一般采集急性期和恢復期的血清來檢測抗體滴度的變化情況。適用于住院病人；采集時間：第一份血清于入院后24小時內(nèi)采集；第二份血清于發(fā)病后10-14天采集；第三份血清于發(fā)病后22-28天或出院當日采集。對于口岸傳染病抗體檢測的血液樣品采集沒有特殊要求，按常規(guī)要求采集，采集方法如前所述。2.2腦脊液：一般用于臨床診斷，要求在無菌條件下，由有經(jīng)驗的醫(yī)生按腰椎穿刺技術，穿刺抽取3～5ml，放于無菌試管或厭氧瓶內(nèi)（需厭氧培養(yǎng)時），立即送檢；用于病毒培養(yǎng)時在4～8℃最多可維持48小時，否則需在-70℃保存。2、用于病原體抗體檢測的標本2.1血液樣品：932.1血液樣品一般采集急性期和恢復期的血清來檢測抗體滴度的變化情況。適用于住院病人；采集時間：第一份血清于入院后24小時內(nèi)采集；第二份血清于發(fā)病后10-14天采集；第三份血清于發(fā)病后22-28天或出院當日采集。對于口岸傳染病抗體檢測的血液樣品采集沒有特殊要求，按常規(guī)要求采集，采集方法如前所述。

一般用于臨床診斷，要求在無菌條件下，由有經(jīng)驗的醫(yī)生按腰椎穿刺技術，穿刺抽取3～5ml，放于無菌試管或厭氧瓶內(nèi)（需厭氧培養(yǎng)時），立即送檢；用于病毒培養(yǎng)時在4～8℃最多可維持48小時，否則需在-70℃保存。

2.2腦脊液2、用于病原體抗體檢測的標本2.1血液樣品2.2腦脊液2、用于病原體抗體檢測的標本943.1空氣樣品空氣采樣器有不同的分類方法，種類繁多：→如按流量的不同，采樣器可分為大、中、小三類；→根據(jù)采樣器所用介質性質可分為固體采樣器和液體采樣器；→根據(jù)采樣器的工作原理可分為撞擊式、沉降式、過濾式、靜電吸附式、旋風式和離心撞擊式六種。用于檢測微生物或化學因子，一般使用空氣采樣器采集；空氣中細菌和真菌可使用平板沉降法。▲平板沉降法由于方法簡單，不需要特殊設備，雖然準確性低于儀器法，但仍被廣泛應用，采樣方法是將瓊脂平板置于各采樣點，翻開平皿蓋，扣放于平皿旁，暴皿于規(guī)定時間后立即蓋好蓋送檢；采樣布點，室內(nèi)面積＜30平米時，設內(nèi)、中、外對角線3點，距墻壁1m，距地面高1.5ml；＞30平米，設4角及中央5點，距墻壁1m，采樣高度距地面高1.5m處。3、環(huán)境樣品：

一般用于檢測環(huán)境被污染的狀況，并對其進行衛(wèi)生學評價，也可作為食源性疾病、突發(fā)公共衛(wèi)生事件的原因樣本。主要是空氣、水、土壤樣品。3.1空氣樣品3、環(huán)境樣品：

一般用于檢測環(huán)境被污染953.2水樣水樣來源主要是河水、湖水、地下水和自來水，在疫區(qū)還包括稻田、塘水、井水和鄰近畜舍、廁所的積水點。采樣器具主要有手工采樣的采樣瓶和自動采樣器?！止げ蓸樱核畼悠坑描F架固定，塞住瓶口，待瓶沉入到一定深度時拉開瓶塞，讓水樣進入?！詣硬蓸樱菏怯米詣硬蓸悠髟谝欢ㄩg隔時間中或連續(xù)采集樣品，分別放入樣品瓶或合并于一個樣品瓶中成為混合樣。疫區(qū)傳染病病原污染的上述水體，采集時最好采非日光直射處的表層水。采集自來水樣品時，先用酒精燈將水龍頭燒灼消毒，然后將龍頭翻開，放水5～10分鐘，再采集水樣。采樣量可根據(jù)工作條件和樣品處理方法以及檢測要求進展采集，用于化學因子檢測的水樣盛裝容器可以不滅菌，但應徹底清洗干凈。3.2水樣水樣來源主要是河水、湖水、地下水和自來水，在疫區(qū)還963.3土壤根據(jù)檢測目的，選擇有代表性的土壤，確定采樣地點。按對角穿插〔五點法〕取樣；要求：除去地表污物，再鏟除1cm左右表層土，用燒灼過的勺或鏟取土樣約200～300g，裝于滅菌容器內(nèi)，并注意保存適當空間;標明采樣地點、深度、日期后送檢。3.3土壤974、產(chǎn)品樣本：口岸傳染病檢測涉及到的主要是血液制品，檢查是否帶有傳染性因子；對于食品、化妝品、涉水產(chǎn)品、消毒及衛(wèi)生用品等，主要用于衛(wèi)生理化和衛(wèi)生微生物指標檢測，對其進行衛(wèi)生學評價及產(chǎn)品效果評價。樣品采集要求：注意包裝的完整性和抽樣的隨機性。4、產(chǎn)品樣本：985、昆蟲、動物樣品：蚊、蠅等，可用捕蟲網(wǎng)和吸蚊器捕捉；蚤類、蜱類可用布旗或毛巾在草叢、灌木、地面上拖動，使它們攀附在布旗或毛巾上；蜱類可用鑷子夾入試管內(nèi)；蚤類可用棉簽或毛筆蘸上水粘住，迅速放入試管內(nèi)；鼠類可用捕鼠器捕捉，死鼠可裝入塑料袋內(nèi)送檢。一般蚊、蚤應收集50只以上，蜱不少于20只。6、可疑物品：可在可疑物品表面使用拭子擦拭后，保存于樣品保存液中/無菌容器,適用時，也可直接截取適量污染物，保存于樣品保存液中/無菌容器。5、昆蟲、動物樣品：99四、樣品的保存和運送1、樣品保存1.1檢測病原體樣品的保存：▲原則：盡量保護待檢微生物的屬性和注意生物安全?！⑸飳傩员Ｗo基本要素：→溫度：一般低溫可增加微生物的存活和抑制雜菌的過度生長，特殊除外。→濕度：→營養(yǎng)：→pH：→抑制雜菌：▲對于口岸衛(wèi)生檢疫樣品原則上要求樣品采集后立即置4℃環(huán)境保存送檢，如果不能立即送檢，短時間（24小時內(nèi)）保存應置于4℃冰箱，若在24小時后檢測，保存于-70℃冰箱保存。四、樣品的保存和運送1、樣品保存1001.2進行衛(wèi)生學評價樣品的保存:▲原則：樣本采集后要根據(jù)對溫度、濕度的要求分類處理,及時送檢。但大多數(shù)樣本都可以常溫下保存，保持原有屬性?！螅罕苊馕廴荆≈饕黔h(huán)節(jié)控制;1.3.化學因子或毒物樣品的保存：各類樣本要分別盛▲原則：裝于密閉容器中，包裝固定、安全,冷藏保存，及時送檢。多數(shù)毒物檢驗樣本對保存的條件不是特別嚴格，如果需要特殊條件保存的樣本要按要求保存，▲要求：防止外泄！1.2進行衛(wèi)生學評價樣品的保存:1012、樣品運送2.1總體要求：必須應符合生物安全要求，遵循WH0對傳染性物質和診斷性標本的安全運送指南（WH0，1997）和《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或標本運輸管理規(guī)定》（衛(wèi)生部第45號令）。達到標準的包裝方法和材料應能確保即使在運送中包裝意外受損時也能保護人員的安全及標本的完整。2.2樣品運送的包裝要求：使用WHO三級包裝系統(tǒng)第一層：裝樣品，要防滲漏。樣品容器應置于帶蓋的容器（試管）內(nèi)，容器（試管）上應有明顯標記樣品的編號或受檢者信息。第二層：耐受性好，防滲漏，可以容納第一層若干個容器。第一層容器與第二層包裝之間放置足以吸附可能漏液的吸附材料，能防止第一層容器互相碰撞，對容器啟到緩沖作用。第三層：可以容納若干個第二層包裝，防滲漏，保溫、防污染，便于運輸和消毒的密封容器，在外包裝必須有明確的生物危害標識。2、樣品運送102口岸樣品采集技術及生物安全基礎課件103口岸樣品采集技術及生物安全基礎課件1042.3樣品運送具體要求：▲Ⅰ地面運送樣品：→運送過程必須專人專車；→送樣的人必須具有防護及消毒基礎知識；→車上應備有能處理突發(fā)事件的防護用品（吸水材料、消毒劑、手套、口罩、護目鏡、密封防水的廢棄物容器等）；→使用專用送樣工具；→樣品存放環(huán)境必須滿足要求（短途運送加冰保冷即可；長途運送需加干冰保冷，保持2-8℃的恒溫條件）；→樣品運送過程中不得將樣品轉托他人；→在確定樣品運送時，將樣品運送的時間和運輸方式告知接收實驗室等；→對于血液樣品為避免路途顛簸引起溶血，可在運送前分離血清。2.3樣品運送具體要求：105▲Ⅱ空運樣品：→完整的包裝其整個外部最小尺寸不能小于10cm；→每個包裝中標本量不超過4kg或4L（每個原始容器最大500m1）；→每個包裝標本中所含的感染物不應超過50g或50ml；→運輸標本的外包裝必須有明確的標簽，標明寄送人和接收人的詳細聯(lián)系方式、包裝日期和運輸日期等。▲Ⅱ空運樣品：106▲Ⅲ樣品運送附帶的文件：樣品的編號、種類、性質、數(shù)量、采樣日期等詳細資料?！艋瘜W因子或毒物樣品的運送：→密封包裝；→送檢的樣本要根據(jù)對溫度、濕度的要求分類處理；特殊條件運送的樣本要特殊處理；→運送過程中，要保證條件能夠持續(xù)保障；→要嚴防泄漏；→嚴格按照化學品管理的有關規(guī)定及時到公安部門備案；→為防止在運輸過程中的意外情況，要制定應急預案；，→專人押運。▲Ⅲ樣品運送附帶的文件：107五、生物平安根底及樣品采集的生物平安防護實驗室生物平安和生物平安實驗室的生物平安要求，有相關標準標準，如?實驗室生物平安通用要求?〔GB19489-2021〕、?病原微生物實驗室生物平安管理條例?〔國務院令第424號〕等；針對職業(yè)人員在傳染病處理過程中的防護，衛(wèi)生部也有相關的指導原那么，如SARS、禽流感、甲型H1N1期間制定的職業(yè)暴露人員防護指導原那么等，其目的都是加強人員的生物平安防護，防止人員暴露和感染。五、生物平安根底及樣品采集的生物平安防護實驗室生1081、根本概念1.1生物平安防護：防止危險生物因子造成人員暴露，向外擴散并導致危害的綜合措施。1.2個人防護裝備：用防止人員受到化學和生物等有害因子傷害的的器材和用品。1.3危害程度分級：根據(jù)生物因子對個體和群體的危害程度將其分為4級.危害等級Ⅰ〔低個體危害，低群體危害〕：不會導致安康工作者和動物致病的細菌、真菌、病毒和寄生蟲等生物因子。危害等級Ⅱ〔中等個體危害，有限群體危害〕：能引起人或動物發(fā)病，但一般情況下對安康工作者、群體、家畜或環(huán)境不會引起嚴重危害的病原體。實驗室感染不導致嚴重疾病，具備有效治療和預防措施，并且傳播風險有限。危害等級Ⅲ(高個體危害，低群體危害)：能引起人或動物嚴重疾病，或造成嚴重經(jīng)濟損失，但通常不能因偶然接觸而在個體間傳播，或能用抗生素抗寄生蟲藥治療的病原體。危害等級Ⅳ〔高個體危害，高群體危害〕：能引起人或動物非常嚴重的疾病，一般不能治愈，容易直接、間接或因偶然接觸在人與人，或動物與人，或人與動物，或動物與動物之間傳播的病原體。1、根本概念1091.4消毒：殺滅或去除傳播媒介上病原微生物，使其到達無害化的處理。1.5消毒劑：用于殺滅傳播媒介上的微生物使其達消毒或滅菌要求的制劑。1.6滅菌：殺滅或去除傳播媒介上一切微生物的處理。1.7滅菌劑：可殺滅一切微生物(包括細菌芽孢)使其到達滅菌要求的制劑。1.8有效氯：有效氯是衡量含氯消毒劑氧化能力的標志，是指與含氯消毒劑氧化能力相當?shù)穆攘?非指消毒劑所含氯量)，其含量用mg/L或%濃度表示。1.4消毒：殺滅或去除傳播媒介上病原微生物，使其到達無害化的1102、個人防護用品防護服面部及身體保護裝備手套鞋/鞋套呼吸防護裝備2、個人防護用品防護服1113、防護用品的使用方法3.1穿防護用品順序第一步：戴口罩，一只手托著口罩，扣于面部適當?shù)牟课?，另一只手將口罩帶戴在適宜的部位，壓緊鼻夾，緊貼于鼻梁處。在此過程中，雙手不接觸面部任何部位。第二步：戴帽子，戴帽子時注意雙手不接觸面部。第三步：穿防護服。第四步：戴上防護眼鏡，注意雙手不接觸面部。第五步：穿上鞋套或膠鞋。第六步：戴上手套〔必要時戴兩副手套〕，將手套套在防護服袖口外面。3、防護用品的使用方法3.1穿防護用品順序1123、防護用品的使用方法

3.2．脫掉防護用品順序第一步：脫去外層手套，一次性手套應將反面朝外，放入黃色塑料袋中，橡膠手套放入消毒液中。第二步：摘下防護鏡，放入消毒液中。第三步：脫掉防護服，將反面朝外，放入黃色塑料袋中。第四步：摘下防護帽子，將手指反掏進帽子，將帽子輕輕摘，反面朝外，放入黃色塑料袋中。第五步：摘下防護口罩，一手按住口罩，另一只手將口罩帶摘下，放入黃色塑料袋中，注意雙手不接觸面部。第六步：脫下鞋套或膠鞋，將鞋套反面朝外，放入黃色塑料袋中，將膠鞋放入消毒液中。第七步：脫內(nèi)層手套，一次性手套應將反面朝外，放入黃色塑料袋中，橡膠手套放入消毒液中。注意：如在脫卸個人防護裝備時發(fā)現(xiàn)個人防護裝備受到潛在污染或受到明顯污染時，必須再戴上一副干凈的手套后，再脫卸其余裝備。3、防護用品的使用方法1134、洗手和手消毒方法4.1根本要求是接觸確診病人和疑似病人前后要消毒洗手是接觸血液、體液、排泄物、分泌物和被污染的物品后要消毒洗手；是進入和離開隔離病房穿戴防護用品前、脫掉防護用品后要消毒洗手；是在同一病人身上，從污染操作轉為清潔操作之間要消毒洗手；是戴手套之前，摘手套之后要消毒洗手。4、洗手和手消毒方法1144.2標準洗手方法手消毒后的洗手方法可遵循六步十五秒洗手法。即掌心對掌心搓擦；手指交織掌心對手背搓擦；手指交織掌心對掌心搓；兩手互握互搓指背；拇指在長中轉動搓擦；指尖在掌心中搓擦。A掌心對掌心搓擦B手指交織掌心對手背搓擦C手指交織掌心對掌心搓擦D兩手互握互搓指背E拇指在長中轉動搓擦F指尖在掌心中搓擦4.2標準洗手方法1154、洗手和手消毒方法4.3手消毒的方法可用0.3—0.5%碘伏消毒液或快速手消毒劑〔異丙醇類、洗必泰-醇、新潔爾滅-醇、70-75%酒精等消毒劑〕按洗手方法，揉搓作用1—3分鐘。4、洗手和手消毒方法1165、物品消毒處理5.1常用消毒方法▲物理消毒燃燒：高溫消毒，終末處理。干烤：140℃，作用時間2-3