液相色譜工作總結(jié)

液相色譜工作總結(jié)篇一：高效液相總結(jié)高效液相色譜中的速率理論范氏方程：H=A+CuA=2入dp在HPLC中為了降低渦流擴(kuò)散的影響:采用了3-10um的小顆粒球形固定相采用高壓勻漿Cd—為常數(shù)Cs-常數(shù)Bu?CdDmuDs—為組分在固定相中的擴(kuò)散系數(shù)df_—為固定液涂層厚度Hs?CSdfuDs2在HPLC中，流動(dòng)相是液體其粘度比氣體大得多，而且是在室溫下進(jìn)行操作。因此組分在流動(dòng)相中的擴(kuò)散系數(shù)Dm比GC中的Dg要小得多。另外HPLC流動(dòng)相的流速快，所以縱向擴(kuò)散項(xiàng)對(duì)譜帶擴(kuò)張的影響很小，可以忽略不言十。故在H—u曲線中沒(méi)極小值根據(jù)速率理論HPLC的實(shí)驗(yàn)條件為：小粒度、均勻的球形化學(xué)^合相；2.低粘度流動(dòng)相，流速不宜快；3.柱溫適當(dāng)流動(dòng)相在高效液相色譜中所用的流動(dòng)相也稱洗脫劑，溶解樣品用的溶劑最好就是洗脫劑。由于高效液相色譜中流動(dòng)相是液體，它對(duì)組分有親和力，并參與固定相對(duì)組分的競(jìng)爭(zhēng)。因此流動(dòng)相不僅起洗脫作用，還參與分離過(guò)程，在固定相一定時(shí)，HPLC中,n由色譜柱質(zhì)量決定，a主要受溶劑種類的影響，K受溶劑配比的影響。若固定相一定，改變流動(dòng)相的組成就可以r21使改變；改變流動(dòng)相中各種溶劑的配比，就能有效地控制k值。用分離方程討論流動(dòng)相對(duì)分離的影響注意HPLC與GC不同在HPLC中，當(dāng)固定相一定時(shí)，流動(dòng)相的種類影響選擇因子，配比影響容因子。因此，正確選擇流動(dòng)相直接影響組分的分離度。在GC中，流動(dòng)相是惰性的，它對(duì)組分沒(méi)有作用力，僅起運(yùn)載作用，因此，a主要受固定相性質(zhì)影響，k主要受柱溫影響，在GC中，以選擇固定相和改變柱溫來(lái)改善分離度。（1）不允許使用能引起柱效能損失或柱保留特性變化的溶劑。（2）溶劑對(duì)于試樣，必須具有適當(dāng)?shù)娜芙舛群土己玫倪x擇性。3）溶劑要與檢測(cè)器匹配。對(duì)于紫外吸收檢測(cè)器，應(yīng)注意選擇檢測(cè)波長(zhǎng)比溶劑的紫外截止波長(zhǎng)要長(zhǎng)。對(duì)于折光率檢測(cè)器，要求選擇與組分折光率有較大差別的溶劑作流動(dòng)相，以達(dá)最高靈敏度。（4）溶劑的純度要高，使用前應(yīng)過(guò)濾、脫氣（5）溶劑的化學(xué)穩(wěn)定性好。不能選用與樣品發(fā)生反應(yīng)或聚合的溶劑。（6）盡量使用低粘度的溶劑。常用的低粘度溶劑有丙酮、乙醇、乙腈等。但粘度過(guò)于低的溶劑也不宜采用，例戊烷、乙醚等，它們易在色譜柱或檢測(cè)器內(nèi)形成氣泡，影響分離.1.恒組成溶劑洗脫：在色譜過(guò)程中，溶劑的組成、配比不變。適用于組分?jǐn)?shù)目少、性質(zhì)差別不大的試樣的分離分析。2.梯度洗脫：在色譜過(guò)程中，可按一定程序連續(xù)地或階段地改變流動(dòng)相的組成，使一個(gè)復(fù)雜混合物的樣品中的性質(zhì)相差較多的組分都能獲得適宜的容量因子。梯度洗脫的優(yōu)點(diǎn)：1.提高分離效率，2.加快分析速度，3.改變峰形，4.提高檢測(cè)靈敏度。缺點(diǎn)：一液一固吸附色譜法（LSC該法有利于不同族化合物的分離，對(duì)不同異構(gòu)體的分離選擇性遠(yuǎn)比其他色譜方法好1固定相硅膠氧化鋁聚酰胺硅膠的吸附性是由硅膠表面的硅羥基產(chǎn)生的。硅膠如吸附水，可使吸附能力降低；升溫可以除去吸附的水，使硅膠活化。為了能有適當(dāng)?shù)谋Ａ糁挡⒌玫捷^好的分離，極性弱的試樣應(yīng)使用活性較高的吸附劑；極性強(qiáng)的試樣應(yīng)使用活性較低的吸附劑。進(jìn)行色譜分離時(shí)，流動(dòng)相若有水分，會(huì)降低吸附劑的吸附活性。2流動(dòng)相在吸附色譜中選擇流動(dòng)相的原則：極性大的試樣往往采用極性強(qiáng)的洗脫劑；極性弱的試樣宜用極性弱的洗脫劑。洗脫劑的極性強(qiáng)弱可用溶劑極性參數(shù)（P）來(lái)衡量。P越大，表示洗脫劑的極性越強(qiáng)，洗脫能力越大。例如：正烷P=，極性最小；水P二極性最大。實(shí)際工作中常用混合溶劑，以改分離效果。溶劑極性參數(shù)應(yīng)調(diào)節(jié)到使被測(cè)組分的容量因子在2-5的最佳范圍。P??P???P?????abaabb式中，Pa’Pb’分別為溶劑A、B溶劑極性參數(shù)，由a、由b分別為溶劑A、B在混合溶劑中的體積分?jǐn)?shù)。二液一液分配色譜法（LLPC）該法能適用于各種樣品的分離和分配系數(shù)較大的組分，保留值也較大，后出峰；分配系數(shù)較小的組分，保留值也較小，先出峰。固定相載體+固定液載體：是惰性物質(zhì)，僅起負(fù)載固定液的作用。固定液：是有機(jī)溶劑。最常用固定相（強(qiáng)極性固定液）聚乙二醇（中等極性）角鯊?fù)椋ǚ菢O性）主要優(yōu)點(diǎn)：1.表面均勻，無(wú)液坑，傳質(zhì)快，故柱效高。2.固定相在使用中不易流失，適用于梯度洗脫?；瘜W(xué)穩(wěn)定性好、重現(xiàn)性好、分離的選擇性高。特別適用于分離容量因子k值范圍寬的樣品。載樣量大。由于鍵合到載體表面的官能團(tuán)可以是各種極性的，因此它適用于種類繁多樣品的分離，是應(yīng)用最廣泛的固定相。用來(lái)制備鍵合固定相的載體，幾乎都用硅膠。利用硅膠表面的硅醇基（Si一OH）與有機(jī)分子可成鍵，即可得到各種性能的固定相。（1）非極性鍵合相：鍵合相表面基團(tuán)為非極性烷烴。如不同鏈長(zhǎng)的烷烴（C8和C18）和苯基等。常用于反相色譜。（2）弱極性鍵合相：常見(jiàn)的有醚基和二羥基等。可用于正相色譜或反相色譜，視流動(dòng)相極性而定。（3）極性鍵合相：鍵合相表面基團(tuán)極性基團(tuán)如氨丙基，氰乙基等。常用于正相色譜。（1）酯化鍵合（三Si—OR），它是最先用于液相色譜的鍵合固定相。（2）硅氮鍵合（Si—N）（3）硅烷化鍵合（三Si—O—Si—C）這類鍵合固定相具有熱穩(wěn)定好，不易吸水，耐有機(jī)溶劑的優(yōu)點(diǎn)。能在70°C以下，pH=2?8范圍內(nèi)正常工作，應(yīng)用較廣泛。動(dòng)相盡可能不與固定相互溶，而且流動(dòng)相與固定相的極性差別越顯著越好。正相色譜：常用低極性溶劑，加入適量極性溶劑。如在烴類中加入氯仿。2.反相色譜：通常用水或無(wú)機(jī)鹽緩沖溶液為主體，加入甲醇、乙腈等。保留值與流動(dòng)相極性的關(guān)系：梯度洗脫時(shí)，正相色譜通常逐漸增大洗脫劑中極性溶劑的比例，反相色譜逐漸增大洗脫劑中極性相對(duì)較低溶劑的比例，這樣有利于組分的洗脫。注意：反相色譜中溶劑的洗脫能力用溶劑強(qiáng)度因子S表示，如水S=0洗脫能力最弱，四氫反相色譜法固定相是采用極性較小的鍵合固定相，常用硅膠一C18H37硅膠一苯基等；流動(dòng)相是采用極性較強(qiáng)的溶劑，甲醇十水乙腈一水，多用于分離非等極性、中極性化合物。若采用水和無(wú)機(jī)鹽的緩沖液為流動(dòng)相，則可分離一些易離解的樣品，如有機(jī)酸、有機(jī)堿、酚類等。由于反相色譜法的流動(dòng)相價(jià)廉易購(gòu)，不干擾紫外吸收法，熒光法及電化學(xué)法的檢測(cè)，分析周期較短。加之由它派生的反相離子對(duì)色譜法與離子抑制色譜法，可以分離有機(jī)酸、堿、鹽等離子型化合物，是應(yīng)用最應(yīng)泛的色譜方法。應(yīng)調(diào)節(jié)流動(dòng)相的pH使試樣組分與離子對(duì)試劑全部離子化為宜。鍵合相反相離子對(duì)色譜法的固定相采用非極性的疏水鍵合相，如十八烷基鍵合相（ODS），流動(dòng)相為加有平衡離子的極性溶液（如甲醇一水或乙腈一水）。離子抑制色譜法：如果被分析的離子是弱酸的共軛堿或弱堿的共軛酸，則可用OH-或H+作為平衡離子，在流動(dòng)相中加入緩沖溶液調(diào)節(jié)一定pH，使被分析離子轉(zhuǎn)化成它的共軛酸或共軛堿，在兩相間分配。離子抑制色譜法適用于3WpKaW7的弱酸及7WpKaW8的弱堿分析。離子交換色譜法（IEC）固定相是離子交換樹(shù)脂，流動(dòng)相是一定pH和離子強(qiáng)度的緩沖溶液。利用被分離組分離子交換能力的差異而實(shí)現(xiàn)分離。主要用于分析在溶液中能夠電離成正負(fù)離子的物質(zhì)。離子交換色譜法所用流動(dòng)相大都是一定pH和離子強(qiáng)度的緩沖溶液離子強(qiáng)度的影響：如果增加離子強(qiáng)度（鹽離子的濃度），則可降低樣品離子的競(jìng)爭(zhēng)吸附能力，從而降低其在固定相上的保留值，使容量因子減小。增大pH值會(huì)使酸的電離度增加，使堿的電離度減少；降低pH值，其結(jié)果相反。一般最好將pH值選擇在被分離酸堿的pK附近，因處于離子狀態(tài)才能交換。離子色譜法（IC）將離子交換色譜法與電導(dǎo)檢測(cè)器相結(jié)合能同時(shí)測(cè)定多種無(wú)機(jī)和有機(jī)離子的新技術(shù)。優(yōu)點(diǎn)：靈敏度高、選擇性好、快速、能同時(shí)分析多種離子。特別是對(duì)陰離子的分析，在各種儀器分析法中堪首選方法。尺寸排阻色譜法（SEC）又稱空間排阻色譜法、凝膠色譜法，基于試樣分子的尺寸和形狀不同來(lái)實(shí)現(xiàn)分離的色譜方法。主要用于較大分子的分離。特點(diǎn)：1）根據(jù)保留值測(cè)定分子量。lgMr=A—BVR（2）保留時(shí)間短，譜峰窄，不用梯度洗脫。（3）易檢測(cè)，可采用靈敏度較低的檢測(cè)器4）柱壽命長(zhǎng)。（5）不能分辨分子大小相近的化合物，相對(duì)分子質(zhì)量差別必須大于10%才能得以分離。樣品分子基本上按其分子大小，排阻先后由柱中流出?？梢?jiàn)凝膠色譜法的分離機(jī)制與前幾種色譜方法不同，它只取決于凝膠的孔徑大小與被分離組分線團(tuán)尺寸之間的關(guān)系，與流動(dòng)相無(wú)關(guān)。（1）軟質(zhì)凝膠如葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠，它們適用以水溶性溶劑作流動(dòng)相，一般用于小分子質(zhì)量物質(zhì)的分析，不適宜用在高效液相色譜中。（2）半硬質(zhì)凝膠如聚苯乙烯，常以有機(jī)溶劑作流動(dòng)相。用于高效液相色譜時(shí)，流速不宜大。（3）硬質(zhì)凝膠如多孔硅膠、多孔玻璃等，它們既可用水溶性溶劑，又可用有機(jī)溶劑作流動(dòng)相，可在較高壓強(qiáng)和較高流速下操作。一般控制壓強(qiáng)小于7MPa,流速V1mL/min；否則將影響凝膠孔徑，造成不良分離3.流動(dòng)相（1）必須能溶解樣品，并必須能潤(rùn)濕凝膠。（2）溶劑的粘度要小。（3）選擇溶劑還必須與檢測(cè)器相匹配。常用的流動(dòng)相有四氫呋喃、甲苯、氯仿、二甲基酸胺和水等。以水溶液為流動(dòng)相的凝膠色譜適用于水溶性樣品，稱為凝膠過(guò)濾色譜法（GFC）。以有機(jī)溶劑為流動(dòng)相的凝膠色譜適用于非水溶性樣品，稱為凝膠滲透色譜法（GPC）。親和色譜法（AC）親和色譜是利用生物大分子和固定相表面存在某種特異性親和力，進(jìn)行選擇性分離的一種方法手性色譜法:適用于分離手性化合物的對(duì)應(yīng)體..高壓輸液系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)分離系統(tǒng)檢測(cè)系統(tǒng)此外還配有輔助裝置：如梯度洗脫，自動(dòng)進(jìn)樣及數(shù)據(jù)處理等。①防止任何固體微粒進(jìn)入泵體；②流動(dòng)相不應(yīng)含有任何腐蝕性物質(zhì)；③泵工作時(shí)要防止溶劑瓶?jī)?nèi)的流動(dòng)相被用完;④不要超過(guò)規(guī)定的最高壓力，否則會(huì)使高壓密封環(huán)變形，產(chǎn)生漏液；⑤流動(dòng)相使用前應(yīng)先脫氣色譜柱是液相色譜的心臟部件，它的作用是分離分析型：柱長(zhǎng)10~30cm，內(nèi)徑為2~5mm，制備型：柱長(zhǎng)10~30cm，內(nèi)徑20?40mm。柱子裝填得好壞對(duì)柱效影響很大。對(duì)于細(xì)粒度的填料(V20^m)j般米用勻漿填充法裝柱.按其適用范圍可分為：專屬型檢測(cè)器：它僅對(duì)被分離組分的某一性質(zhì)有響應(yīng)，屬于這類檢測(cè)器的有紫外、熒光檢測(cè)器等。通用型檢測(cè)器：它檢測(cè)的是一般物質(zhì)均具有的性質(zhì)，屬于這類檢測(cè)器的有示差折光，蒸發(fā)光散射檢測(cè)器等。l)紫外檢測(cè)器：特點(diǎn)靈敏度高，要求試樣必須有紫外吸收，而且溶劑必須能透過(guò)所選波長(zhǎng)的光。熒光檢測(cè)器：特點(diǎn)為高靈敏度、高選擇性和樣品用量少。只適合于能產(chǎn)生熒光的物質(zhì)的檢測(cè)。它是體內(nèi)藥物分析常用的檢測(cè)器之一。3）示差折光率檢測(cè)器：利用流動(dòng)相中出現(xiàn)試樣組分引起折光率變化進(jìn)行檢測(cè)。靈敏度可達(dá)10-7g?cm-3。主要缺點(diǎn)是對(duì)溫度變化敏感，必須保持恒溫并且不能用于梯度洗脫。4）電化學(xué)導(dǎo)檢測(cè)器：特點(diǎn)為靈敏度高，對(duì)具有氧化還原性的物質(zhì)都可進(jìn)行檢測(cè)。分為極譜檢測(cè)器、庫(kù)侖檢測(cè)器、安培檢測(cè)器、和電導(dǎo)檢測(cè)器，電導(dǎo)檢測(cè)器主要用于離子檢測(cè)。5）蒸發(fā)散射檢測(cè)器：特點(diǎn)為對(duì)各種物質(zhì)都有響應(yīng)，靈敏度比較低。流動(dòng)相必須是揮發(fā)性的，不能含有緩沖鹽。主要用于糖類、高級(jí)脂肪酸、氨基酸、維生素等物質(zhì)的檢測(cè)一、定性方法1.色譜法：利用保留值2.化學(xué)法：利用化學(xué)專屬反應(yīng)兩譜聯(lián)用二、定量方法1.外標(biāo)法2.內(nèi)標(biāo)法色譜系統(tǒng)適用性內(nèi)容包括：理論塔板數(shù)分離度拖尾因子（對(duì)稱因子）重復(fù)性在選定的條件下：理論塔板數(shù)不能低于各品種項(xiàng)下規(guī)定的最小理論塔板數(shù)，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不大于％,除另有規(guī)定外，分離度應(yīng)大于，拖尾因子（T）應(yīng)在?之間。分離類型的選擇根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量選擇氣相色譜：適用于相對(duì)分子質(zhì)量低的，其揮發(fā)性好樣品。標(biāo)準(zhǔn)液相色譜類型（液一固、液一液、及離子交換色譜）最適合的相對(duì)分子質(zhì)量范圍是200?XX。尺寸排阻法：最適于相對(duì)分子質(zhì)量大于XX的樣品。根據(jù)溶解度選擇弄清樣品在水、異辛烷、苯、四氯化碳、異丙醇中的溶解度是很有用的。如果樣品可溶于水并屬于能離解物質(zhì)，以采用離子交換色譜為佳。如樣品可溶于烴類（如苯或異辛烷），則可采用液一固吸附色譜；如樣品溶解于四氯化碳，則多采用的分配和吸附色譜分離。根據(jù)分子結(jié)構(gòu)選擇用紅外光譜法，可預(yù)先簡(jiǎn)單地判斷樣品中存在什么官能團(tuán)。然后，確定采用什么方法合適。酸、堿化合物用離子交換色譜；脂肪族或芳香族用液一液分配色譜、液一固吸附色譜；異構(gòu)體用液一固吸附色譜；同系物不同官能團(tuán)及強(qiáng)氫鍵的用液一液分配色譜。篇二：Agilent1200高效液相色譜儀工作站學(xué)習(xí)總結(jié)Agilent1200高效液相色譜儀工作站學(xué)習(xí)總結(jié)開(kāi)首語(yǔ)本人在XX年本人在XX年1月8日至1月11日參加廣州日至111日參加廣州安捷倫科技有限公司的1200高效液相色譜儀安捷倫科技有限公司的1200高效液相色譜儀化學(xué)工作站的學(xué)習(xí)培訓(xùn)，幾天學(xué)習(xí)培訓(xùn)，使我對(duì)1200液相色譜儀的硬件及軟件有了更全我對(duì)1200液相色譜儀的硬件及軟件有了更全面的了解和更多的認(rèn)識(shí)，現(xiàn)在做個(gè)總結(jié)向大家介紹如下。硬件篇安捷倫高效液相色譜儀1200由幾部分組成，脫氣機(jī)，泵、進(jìn)樣器、柱溫箱和檢測(cè)器。安捷倫1200HPLC系統(tǒng)采用積木式堆積結(jié)構(gòu)，方便用戶按照自己的需要配置不同的的系統(tǒng)，整個(gè)系統(tǒng)的流路自上而下設(shè)計(jì)、連接，減小了系統(tǒng)的死體積和延遲體積。Agilent1200HPLC系統(tǒng)堆疊方式脫氣機(jī)安捷倫1200系列在線脫氣機(jī)有，微量真空脫氣機(jī)G1379B、標(biāo)準(zhǔn)真空脫氣機(jī)G1322A。原理基本相同，就是使用半透膜管路，允許氣體分子通過(guò)，液體分子無(wú)法通過(guò)。A型用的是微滲管，B型用的是濾膜。流路A型是左進(jìn)右出，而B(niǎo)型為下進(jìn)上出，本科室使用的為A型G1322A。使用真空脫氣機(jī)可以降低噪聲，保證保留時(shí)間的重現(xiàn)性，與He脫氣相比，更方便，更節(jié)省費(fèi)用。真空脫氣機(jī)脫氣原理泵安捷倫1200系列泵有：?jiǎn)卧茫篏1310A、四元泵：G1311A、二元泵：G1312A、二元泵SL型：G1212B。單獨(dú)一個(gè)泵腔泵腔無(wú)法滿足溶劑傳輸系統(tǒng)的要泵腔求：連續(xù)性、穩(wěn)定性都不符合標(biāo)準(zhǔn)，現(xiàn)在新購(gòu)儀器中已很少考慮。單元泵，按溶劑的傳輸系統(tǒng)有兩種，一種是并聯(lián)柱塞泵，另一種是串連柱塞泵。并聯(lián)柱塞泵由于兩個(gè)泵的相位不同，可以補(bǔ)償流量脈沖，但由于單向閥的數(shù)量增多，所以容易造成泄漏，增加了維護(hù)使用的難度。串連柱塞泵左泵腔的活塞運(yùn)動(dòng)速度為右泵腔活塞的2倍，因此，相同時(shí)間內(nèi)，左泵提供的流量為右泵的兩倍，左泵提供的溶劑一半直接供給系統(tǒng)，另一半被右泵吸入，稍后供給液相系統(tǒng)，減少了單向閥的用量，可以使用壓縮因子補(bǔ)償。四元泵，其實(shí)就是比單元泵多了四元比例閥。由單元泵可以升級(jí)到四元泵，除了要加上四元比例閥外，還要更換主板。需要注意的是，當(dāng)使用鹽溶液和有機(jī)溶劑時(shí)，建議將鹽溶液接到四元比例閥下面的通道上，有機(jī)溶劑接到上面的通道上。如果經(jīng)常使用鹽溶液，建議定期用水沖洗所有的通道以去除閥口上可能出現(xiàn)的鹽沉淀。四元泵的工作原理二元泵，有兩個(gè)泵頭，特點(diǎn)是高壓混合，無(wú)需脫氣;對(duì)于有強(qiáng)紫外吸收的流動(dòng)相，使用靜態(tài)混合器可以降低基線噪聲；可以選擇溶劑切換閥自動(dòng)進(jìn)行溶劑切換；對(duì)于高鹽流動(dòng)相，可選擇泵頭密封墊清洗裝置。所以脫氣機(jī)不是標(biāo)準(zhǔn)配置，但增加真空脫氣機(jī)，流量范圍可以從?5ml/min擴(kuò)展至?5ml/min；加入靜態(tài)混合器，使流動(dòng)相混合更加均勻；如果配置溶劑切換閥，則兩個(gè)泵頭可分別控制兩種溶劑，類似四元比例閥，但并不完全一樣，只能同時(shí)混合兩種溶劑，不可實(shí)現(xiàn)四種溶劑的同時(shí)使用。二元泵為高壓泵，為后混合式，精度更高，而且由于為高壓混合，產(chǎn)生的氣泡也更少，所以價(jià)格也比四元泵貴得多。四元泵為低壓泵，流速穩(wěn)定性相對(duì)較差，低壓混合容易產(chǎn)生氣泡，在實(shí)驗(yàn)中常會(huì)遇到這樣的問(wèn)題，多元混合中出現(xiàn)流動(dòng)相不穩(wěn)定的現(xiàn)象，特別是流動(dòng)相配比較低的如小于1%，其多元混合效果難以達(dá)到我們的要求，造成保留時(shí)間漂移，甚至得不到我們預(yù)期的色譜峰。明白四元泵的低壓混合的道理，實(shí)際操作中我們發(fā)現(xiàn)問(wèn)題時(shí)，有助于我們對(duì)原因的分析。必要時(shí)泵可以拆御，更換密封墊及濾芯。對(duì)容易出故障部位及處理方法，比如寶石活塞桿是不能超聲的部件，泵頭密封墊要成對(duì)更換，實(shí)驗(yàn)室中至少應(yīng)備有一付號(hào)泵頭密封室中至少應(yīng)備有一付4號(hào)泵頭密封室中至少應(yīng)備有一付墊，部件號(hào)為：5663-6589（用于反相色譜）；部件號(hào)為：（用于反相色譜）；0905-1420（用于正相色譜）。同時(shí)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)備（用于正相色譜）。同時(shí)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)備）。過(guò)濾芯，有5-10個(gè)PTFE過(guò)濾芯，以備日常所需。判斷方個(gè)過(guò)濾芯以備日常所需。法為，打開(kāi)沖洗閥，以水為溶劑，法為，打開(kāi)沖洗閥，以水為溶劑，流速5ml/min，系統(tǒng)壓力大于10bar就應(yīng)更換過(guò)濾白，系統(tǒng)壓力大于就應(yīng)更換過(guò)濾白頭了。頭了。二元泵的工作原理進(jìn)樣器，安捷倫1200系列進(jìn)樣器有：標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)進(jìn)樣器G1329A、高性能進(jìn)樣器G1367A、高性能進(jìn)樣器SL型G1367B、手動(dòng)進(jìn)樣器G1328B。自動(dòng)進(jìn)樣器的特殊功能，洗針功能可以把樣品殘留降低到最小限度；多次吸液用于進(jìn)樣量大于100^1的情況；程序進(jìn)樣可以非常靈活地執(zhí)行用戶的進(jìn)樣程序要求，如多種樣品自動(dòng)混合，自動(dòng)進(jìn)樣等高級(jí)功能的自由設(shè)置，但是，由于進(jìn)樣針的擴(kuò)散，所以進(jìn)樣量越小，受到擴(kuò)散的影響也越大，所以自動(dòng)混合的準(zhǔn)確度還是難以達(dá)到容量瓶的混合方式。這在做標(biāo)準(zhǔn)由線時(shí)得注意的問(wèn)題，如為定量則不推薦小樣量的混合方式。程序進(jìn)樣方式設(shè)置如下圖：第一步：設(shè)置進(jìn)樣第一步：器第二步：第二步：使用進(jìn)樣器程序（U）第三步：更多信息（功能項(xiàng)）第三步：更多信息（功能項(xiàng)）對(duì)于手動(dòng)進(jìn)樣器，必須了解六通閥的工作原理，應(yīng)特別注意的是進(jìn)樣量少于定量環(huán)的50%或大于定量環(huán)的3-5倍量是比較準(zhǔn)確的，不過(guò)，大家用自動(dòng)進(jìn)樣器已經(jīng)習(xí)慣了，如果再用回手動(dòng)進(jìn)樣器會(huì)不會(huì)有些郁悶？會(huì)不會(huì)有一種坐慣了寶馬又要回到踩單車的感覺(jué)？柱溫箱，使用安捷倫柱溫箱可以保證柱的穩(wěn)定性，從而保證了保留時(shí)間的重現(xiàn)性。恒定的柱溫特別是日溫差大的時(shí)候更為必要。檢測(cè)器，安捷倫1200系列檢測(cè)器有，可變波長(zhǎng)檢測(cè)器G1314B、二極管陣列檢測(cè)器G1315B.二極管陣列檢測(cè)器SL型G1315C、示差折光檢測(cè)器G1362A、熒光檢測(cè)器G1321A。本所用的是VWD的G1314B型，DAD型及FLD的就不多說(shuō)了。對(duì)VWD型檢測(cè)器應(yīng)了解它的工作原理，氘燈的使用維護(hù)及更換。需要注意的是，使用中不要頻繁的開(kāi)關(guān)氘燈，否則影響氘燈的壽命?？梢岳迷\斷方式來(lái)檢測(cè)氘燈的能量，當(dāng)然，發(fā)現(xiàn)氘燈能量降低時(shí)不要馬上得出氘燈應(yīng)該更換的結(jié)論，這也許是流通池臟或有氣泡造成的能量降低，所以必須用診斷方式檢測(cè)流通池。診斷結(jié)果大于說(shuō)明流通池很干凈，小于則說(shuō)明流通池該清洗了。更換氘燈后要在診斷日志中填寫更換氘燈，這樣氘燈的使用時(shí)數(shù)便從零開(kāi)始。這里還有一點(diǎn)得注意的是流通池的后壓力非常重要，一定要使用適當(dāng)出口連接管，出口管線要使用專用廢液管為系統(tǒng)提供適當(dāng)?shù)暮髩?，不得私自將廢液管截短，以防氣泡進(jìn)入流通池。但如果壓力過(guò)高，流通池的石英窗片可能破裂。在這里我要說(shuō)的是，對(duì)安捷倫1200高效液相色譜儀正確的操作方法和定期的維護(hù)保養(yǎng)的是很重要的。篇三：液相色譜論文高效液相色譜技術(shù)的應(yīng)用生物技術(shù)及應(yīng)用王偉XX0708018高效液相色譜自20世紀(jì)70年代問(wèn)世以來(lái)，憑著其自身顯著的優(yōu)勢(shì)，經(jīng)過(guò)近30年的發(fā)展，在基礎(chǔ)理論、儀器裝置和色譜柱等方面的研究已趨于成熟，現(xiàn)在已成為化學(xué)學(xué)科中最有優(yōu)勢(shì)的分離分析方法之一。與其它的分離方法相比，高效液相色譜法具有下列主要優(yōu)點(diǎn)：應(yīng)用了顆粒極細(xì)（一般為10ton以下）、規(guī)則均勻的固定相，傳質(zhì)阻抗小，分離效率高，比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍；采用高壓輸液泵輸送流動(dòng)相，分析時(shí)間短，通常分析一個(gè)樣品在15?30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成，一般小于1小時(shí)；廣泛使用了高靈敏檢測(cè)器，大大提高了檢測(cè)靈敏度。因此，HPLC的應(yīng)用范圍非常廣，百分之七十以上的有機(jī)化合物可用高效液相色譜分析，特別是高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析，顯示出優(yōu)勢(shì)。以下就具體介紹一下高效液相色譜法在國(guó)內(nèi)外應(yīng)用：在食品領(lǐng)域的應(yīng)用HPLC在食品營(yíng)養(yǎng)成分領(lǐng)域的應(yīng)用包括對(duì)碳水化合物的檢測(cè)、維生素的檢測(cè)、氨基酸的檢測(cè)、脂肪酸的檢測(cè)等，HPLC法操作簡(jiǎn)便，重現(xiàn)性好，色譜分離時(shí)間短且分離度好。已經(jīng)逐漸取代了傳統(tǒng)的檢測(cè)方法。HPLC在食品添加劑領(lǐng)域的應(yīng)用目前，我國(guó)有20多類、近1000種食品添加劑，合理使用添加劑對(duì)人體健康以及食品都是有益無(wú)害的，但如果不加以限制使用，對(duì)人體健康會(huì)產(chǎn)生危害°HPLC可以分別對(duì)食品甜味劑，防腐劑，色素以及抗氧化劑等進(jìn)行檢測(cè)。HPLC在食品污染物領(lǐng)域的應(yīng)用HPLC可以檢測(cè)食品中農(nóng)藥、獸藥的殘留以及食品中其他來(lái)源的化學(xué)污染物，西維因、多菌靈和狄氏劑等150多種農(nóng)藥都可以用HPLC法進(jìn)行分離或分析，在啤酒中時(shí)有發(fā)現(xiàn)的致癌性很強(qiáng)的亞硝胺類化合物，利用反相色譜法能快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)。在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用高效液相色譜法在1985年版《中國(guó)藥典》中收載后，為藥品檢驗(yàn)工作更高效、靈敏、準(zhǔn)確地進(jìn)行藥物質(zhì)量控制奠定了基礎(chǔ)，并迅速成為藥品檢驗(yàn)采用的主流分析方法之一。鑒別中的應(yīng)用在HPLC法中，保留時(shí)間與組分的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)有關(guān)，是定性的參數(shù)之一，可用于藥物的鑒別。有關(guān)物質(zhì)檢查中的應(yīng)用因HPLC法具有簡(jiǎn)便、快捷、專屬、準(zhǔn)確等優(yōu)勢(shì)，其已成為檢測(cè)有關(guān)物質(zhì)的主流方法。③含苣測(cè)定中的應(yīng)用HPLC法具有分辯率高、分析速度快，重復(fù)性好、樣品用量低、自動(dòng)化程度高等優(yōu)點(diǎn)，在定量測(cè)定時(shí)極具優(yōu)勢(shì)其中大部分是反相色譜，也有吸附色譜、離子交換色中藥成分檢驗(yàn)中藥是一個(gè)多成分的復(fù)雜體系，通過(guò)各成分之間的配伍組合，達(dá)到最佳治療效果。由于成分多樣和復(fù)雜，成分分析較為困難。HPLC法