免疫缺陷病與性傳播疾病的實(shí)驗(yàn)診斷

免疫缺陷病與性傳播疾病的實(shí)驗(yàn)診斷小結(jié)HIV、TP概念、定義（了解）HIV、TP病毒學(xué)、流行病學(xué)（理解）HIV、TP的臨床檢驗(yàn)（掌握）HIV、TP實(shí)驗(yàn)結(jié)果的解釋與應(yīng)用（掌握）免疫缺陷?。╥mmunodeficiencydiseases，IDD）定義與分類是指由于免疫系統(tǒng)發(fā)育不全或遭受損害所致的免疫功能缺陷引起的疾病。臨床表現(xiàn)為反復(fù)感染或嚴(yán)重感染。原發(fā)性（先天性）免疫缺陷病(premaryimmunodeficiencydisease，PID)繼發(fā)性（獲得性）免疫缺陷病(secondaryimmunodeficiencydisease，SID)常見(jiàn)的原發(fā)性免疫缺陷性疾病原發(fā)性抗體缺陷病X-連鎖無(wú)丙種球蛋白血癥選擇性IgA缺乏癥原發(fā)性T細(xì)胞缺陷病先天性胸腺發(fā)育障礙T細(xì)胞特異性免疫缺陷癥慢性皮膚黏膜念珠菌病原發(fā)性吞噬細(xì)胞功能缺陷病慢性肉芽腫病白細(xì)胞黏附缺陷原發(fā)性聯(lián)合免疫缺陷病原發(fā)性補(bǔ)體缺陷病免疫缺陷性疾病常用檢測(cè)方法體液免疫檢測(cè)抗體測(cè)定：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE補(bǔ)體測(cè)定：CH50、C3、C4等細(xì)胞免疫檢測(cè)細(xì)胞表型分析：T細(xì)胞分化抗原檢測(cè)、B細(xì)胞膜表面免疫球蛋白檢測(cè)、B細(xì)胞分化抗原檢測(cè)細(xì)胞功能測(cè)定：T細(xì)胞花環(huán)形成試驗(yàn)、T細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)、混合淋巴細(xì)胞試驗(yàn)、自然殺傷細(xì)胞活性檢測(cè)等細(xì)胞因子測(cè)定：IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、TNF等相關(guān)基因檢測(cè)性傳播疾病定義性傳播疾病簡(jiǎn)稱性病，指主要通過(guò)性接觸、類似性行為及間接接觸傳播的一組傳染病。包括艾滋病、梅毒、淋病、軟下疳、性病淋巴肉芽腫、非淋菌性尿道炎、尖銳濕疣、生殖器念珠菌病、細(xì)菌性陰道病、滴蟲病和乙型肝炎等20余種疾病。艾滋?。ǐ@得性免疫缺陷綜合征，AcquiredImmuneDeficiencySyndrome,AIDS）病原學(xué)HIV在外界環(huán)境中的生存能力:干燥環(huán)境中，HIV活性在幾小時(shí)降低90－99％在室溫（18－30℃）液體環(huán)境下，HIV可存活15天以上對(duì)一般消毒劑如酒精、次氯酸鈉、戊二醛等敏感WHO推薦的滅活HIV方法：100℃20分鐘艾滋病的致病機(jī)制：HIV感染→CD4+T→免疫功能缺陷艾滋病的傳播傳染源：AIDS病人、無(wú)癥狀HIV感染者兩個(gè)必要條件：皮膚有缺口或粘膜暴露、有足夠量的病毒進(jìn)入體液臨床特點(diǎn)早期：持續(xù)性的體重減輕、間歇熱、慢性腹瀉、全身淋巴結(jié)腫大晚期：機(jī)會(huì)性感染：多見(jiàn)卡氏肺囊蟲和白色念珠菌感染惡性腫瘤：Kaposi肉瘤和惡性淋巴瘤神經(jīng)系統(tǒng)損害：AIDS癡呆癥艾滋病的臨床檢驗(yàn)HIV抗體檢測(cè)初篩實(shí)驗(yàn)：①酶聯(lián)免疫吸附法ELISA②硒（金）標(biāo)法③明膠顆粒凝集法PA④電化學(xué)發(fā)光法ECLIAHIV初篩試驗(yàn)結(jié)果的解釋：陽(yáng)性：確認(rèn)實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性，即為HIV感染者或AIDS。嬰兒HIV陽(yáng)性，需18個(gè)月后檢測(cè)陽(yáng)性經(jīng)確認(rèn)陽(yáng)性者才能診斷（嬰兒被動(dòng)獲得IgG，8-14個(gè)月消失，18個(gè)月后產(chǎn)生自已的抗體）陰性：確實(shí)陰性窗口期高危行為后3個(gè)月內(nèi)為陰性，則可排除HIV感染確證實(shí)驗(yàn)：①蛋白印跡法WB:（WesternBlot）：陽(yáng)性:二條env帶或一條env帶加一條P24帶;陰性：無(wú)任何條帶不確定：有一個(gè)或幾個(gè)條帶，但不滿足陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)②條帶免疫印跡法SIA或LIA③放射免疫沉淀試驗(yàn)RIPA④間接免疫熒光試驗(yàn)IFAHIV病原學(xué)檢測(cè)病原學(xué)檢測(cè)方法核酸檢測(cè)（cDNA測(cè)定-PCR、RNA測(cè)定-病毒載量）應(yīng)用于早期診斷圍產(chǎn)期HIV感染的輔助診斷：宮內(nèi)感染（檢測(cè)定義）：新生兒出生48小時(shí)內(nèi)檢測(cè)到病毒核酸，或病毒培養(yǎng)陽(yáng)性，則提示孕期(宮內(nèi)）感染。對(duì)18個(gè)月嬰兒HIV抗體WB試驗(yàn)的不確定（或可疑）結(jié)果進(jìn)一步做輔助診斷；在HIV抗體未產(chǎn)生之前（窗口期）輔助診斷急性原發(fā)感染；HIV亞型分析；確定人群中HIV的變異；監(jiān)測(cè)臨床抗病毒藥物治療效果；檢測(cè)病毒的耐藥性突變。病毒培養(yǎng)分離P24抗原檢測(cè)：①酶聯(lián)免疫吸附法ELISA②放射免疫試驗(yàn)RIA③間接免疫熒光試驗(yàn)IFA適用于：HIV-1抗體不確定或窗口期的輔助診斷HIV-1抗體陽(yáng)性母親所生嬰兒早期的輔助診斷。第四代HIV抗原/抗體ELISA試劑檢測(cè)呈陽(yáng)性反應(yīng)，但HIV-1抗體確認(rèn)試驗(yàn)呈陰性者的輔助診斷。監(jiān)測(cè)病程進(jìn)展和抗病毒治療效果。CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)①CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)目②CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)目③CD4+T/CD8+T的比例梅毒梅毒：一種性傳播疾病Syphilis－梅毒；Treponemiapallidum，TP－蒼白螺旋體梅毒是由蒼白密螺旋體引起的一種慢性、系統(tǒng)性性傳播疾病。人體受感染后，螺旋體很快播散到全身，可引起神經(jīng)、心血管等多系統(tǒng)損害，甚至威脅生命。梅毒可通過(guò)胎盤傳染胎兒，導(dǎo)致自發(fā)性流產(chǎn)、死產(chǎn)或先天梅毒等。感染梅毒可促進(jìn)艾滋病的傳播，危害很大。梅毒的病毒學(xué)特征菌體細(xì)長(zhǎng)的螺旋狀微生物；運(yùn)動(dòng)緩慢而有規(guī)律；橫斷分裂繁殖TP在外界環(huán)境中的生存能力TP是厭氧菌在干燥環(huán)境或陽(yáng)光照射下會(huì)迅速死亡，而在潮濕環(huán)境中可生存較長(zhǎng)時(shí)間。煮沸、肥皂水和一般的消毒劑（如酒精、次氯酸鈉等）很容易將它殺死。TP在缺氧的環(huán)境下能生存數(shù)天，在潮濕的環(huán)境里也能存活數(shù)小時(shí)，在-78℃以下可保持活性甚久。梅毒的傳播梅毒螺旋體的唯一宿主：人類傳染源：梅毒患者傳播途徑性接觸：主要途徑，占95%母嬰傳播：胎盤傳播：先天性梅毒產(chǎn)道傳播：后天性梅毒血液傳播：輸血或血液制品其他傳播：接觸梅毒患者污染的衣被、毛巾、食具或污染的醫(yī)療器械。梅毒的免疫性人類對(duì)梅毒無(wú)先天免疫性，尚無(wú)疫苗接種進(jìn)行人工免疫，僅能在受感染后產(chǎn)生感染性免疫。已完全治愈的梅毒患者仍可以再感染。特異性抗體IgM型抗體感染2周后即可測(cè)出，早期梅毒抗梅治療3～9個(gè)月后或晚期梅毒治療2年后，大部分病人IgM可轉(zhuǎn)陰性，再感染時(shí)又出現(xiàn)陽(yáng)性，故IgM型抗體的存在也是活動(dòng)性（現(xiàn)癥）梅毒的表現(xiàn)。IgG型抗體感染梅毒4周左右產(chǎn)生，即使經(jīng)足量抗梅治療，梅毒螺旋體抗原消失后很長(zhǎng)時(shí)間，IgG抗體仍可通過(guò)記憶細(xì)胞的作用繼續(xù)產(chǎn)生，甚至終生在血清中可測(cè)出。胎兒在宮內(nèi)感染梅毒螺旋體后，胚胎晚期（6～9個(gè)月）已能合成IgM型抗體，出生后第3個(gè)月開始形成IgG型抗體；IgM抗體不能通過(guò)胎盤，而IgG抗體能通過(guò)胎盤，如患兒血清中檢測(cè)出19S-IgM抗梅毒螺旋體抗體是診斷先天梅毒的有力證據(jù)。新生兒攜帶的母體抗體可在生后6～12個(gè)月被分解代謝以致檢測(cè)不到。因此，可以通過(guò)連續(xù)隨訪觀察6個(gè)月判斷嬰兒是否感染梅毒。非特異性抗體---反應(yīng)素是梅毒螺旋體破壞人體組織過(guò)程中釋放出的一種具有抗原性的心磷脂，刺激機(jī)體所產(chǎn)生的抗體—反應(yīng)素，該反應(yīng)素與從牛心中提取的心磷脂在體外可發(fā)生抗原抗體反應(yīng)。一般在感染后5～7周（或下疳出現(xiàn)后2～3周）產(chǎn)生。經(jīng)正規(guī)治療后可逐漸消失。梅毒的診斷病史體檢：是否有符合梅毒的各種臨床表現(xiàn)和體征實(shí)驗(yàn)室檢查：①病原學(xué)檢查：直接查梅毒螺旋體(暗視野顯微鏡)②血清學(xué)檢驗(yàn)（常用）非特異性梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)性病研究實(shí)驗(yàn)室玻片試驗(yàn)（VDRL)：由于試劑需現(xiàn)配現(xiàn)用，故而國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室很少采用。但VDRL是唯一可用于神經(jīng)性梅毒診斷的血清學(xué)方法快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)(RPR)：在特制的紙片上進(jìn)行，加入一定量特制的炭粉，可使抗原抗體出現(xiàn)凝集，用肉眼可觀察結(jié)果甲苯胺紅試驗(yàn)（TRUST)：在試劑中加入甲苯胺紅代替炭粉顆粒，使結(jié)果更易于觀察不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)（USR)特異性梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)酶聯(lián)免疫法TP-ELISA明膠凝集法TPPA原理：用超聲裂解的梅毒螺旋體為抗原，致敏