藥物分析3課件

第3章藥物分析方法學(xué)樣品預(yù)處理技術(shù)2鑒別試驗3雜質(zhì)檢查4常規(guī)化學(xué)分析方法5儀器分析方法6部分現(xiàn)代分析新技術(shù)簡介7樣品采集方法1采集方法2樣品保存方法3采集原則13.1樣品采集方法采集方法3.1.2采集原則3.1.13.1樣品采集方法樣品采集涉及從整體中分離出具有代表性的部分進行收集，對分析測試結(jié)果的準(zhǔn)確度影響極大。藥物分析中常會遇到性狀和均勻性不同的分析對象.因此,這里主要介紹液態(tài)和固態(tài)樣品的采集。3.2樣品預(yù)處理技術(shù)樣品預(yù)處理技術(shù)2藥物分析樣品預(yù)處理方法3藥物分析中常用的分離純化技術(shù)4樣品預(yù)處理的原則1目前,有許多樣品預(yù)處理方法和技術(shù)可供選擇,應(yīng)當(dāng)根據(jù)分析測定的目的，分析測定的對象及其狀況，所具備的分析測定的條件，選擇可實施的分析樣品處理程序。按照分析樣品的形態(tài)，可將樣品預(yù)處理技術(shù)分為固體樣品預(yù)處理技術(shù)、液體樣品預(yù)處理技術(shù)及氣體樣品預(yù)處理技術(shù)。藥物分析中用于固體和液體樣品的常用預(yù)處理技術(shù)見表3-1、3-2。樣品預(yù)處理的原則3.2.1樣品預(yù)處理技術(shù)3.2.23.2樣品預(yù)處理技術(shù)經(jīng)有機破壞后的預(yù)處理方法23.2.3藥物分析樣品預(yù)處理方法2.溶劑萃取:(1)液-液萃取技術(shù)(2)液-固萃取技術(shù)3.2.4藥物分析中常用的分離純化技術(shù)4.超聲波萃取3.2.4藥物分析中常用的分離純化技術(shù)5.微波輔助萃取微波輔助萃取,也稱微波萃取技術(shù),是利用微波能來提高萃取效率的一種新技術(shù)。優(yōu)點如下：萃取時間短、選擇性好、萃取效率高、萃取溫度較低、設(shè)備簡單、節(jié)能環(huán)保。3.2.4藥物分析中常用的分離純化技術(shù)6.超臨界流體萃取3.2.4藥物分析中常用的分離純化技術(shù)7.加速溶劑萃取加速溶劑萃取是通過改變萃取條件來提高萃取效率和加快萃取速度的萃取方法,屬于液-固萃取的一種,改變萃取條件通常是提高萃取劑的溫度和壓力。8.膜分離技術(shù)是近年來新發(fā)展起來的可用于分析化學(xué)領(lǐng)域的新技術(shù)之一。3.2.4藥物分析中常用的分離純化技術(shù)9.其他樣品預(yù)處理技術(shù)(1)凝膠滲透色譜(2)吹掃捕集法(3)免疫親和色譜(4)分子印跡技術(shù)3.2.4藥物分析中常用的分離純化技術(shù)3.3.1藥物鑒別方法選擇的基本原則及方法特點1.選用的方法要有一定的專屬性、靈敏性，且便于推廣；2.化學(xué)法與儀器法相結(jié)合,每種藥品一般選用2-4種方法進行鑒別,相互取長補短；3.盡可能采用藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中收載的方法；4對于藥物制劑的鑒別,通常需要將主藥提取出來后,再選用適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM行鑒別。3.3.2藥物鑒別分析方法化學(xué)鑒定法2波譜鑒別法3色譜鑒別法4晶形分析5物理常數(shù)測定法13.4雜志檢查雜質(zhì)限量檢查方法2雜質(zhì)的定性和定量檢查方法3雜質(zhì)分析方法驗證4雜質(zhì)的來源及類別13.4.1雜質(zhì)的來源及類別藥品中的雜質(zhì)按照其來源可分為一般雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)。按照來源不同還可將雜質(zhì)分為工藝雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、從反應(yīng)物及試劑中混入的雜質(zhì)等。按照雜質(zhì)毒性分類，雜質(zhì)又可分為毒性雜質(zhì)和信號雜質(zhì)按雜質(zhì)結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)一般分為三類：有機雜質(zhì)、無機雜質(zhì)及殘留溶劑。3.4.3雜質(zhì)的定性和定量檢查方法藥典中一般藥物中雜質(zhì)檢查涉及的原理和方法主要有:1.利用藥物與雜質(zhì)在物理性質(zhì)上的差異2.利用藥物與雜質(zhì)在化學(xué)性質(zhì)上的差異此外，一些新技術(shù)如CE,SFC以及聯(lián)用技術(shù)等,近年來發(fā)展很快,在測定特殊雜質(zhì)中的應(yīng)用正逐年增加。1.物理法2.化學(xué)法3.光譜法4.色譜法5.熱分析法3.4.4雜質(zhì)分析方法驗證雜質(zhì)檢查可分為限度試驗和定量測定兩種情況。用于限度檢查的分析驗證側(cè)重于專屬性、檢測限和耐用性；用于雜質(zhì)定量測定方法的驗證則強調(diào)專屬性、定量限、線性、范圍、準(zhǔn)確度、精密度、耐用性。（1）專屬性（2）線性與范圍（3）準(zhǔn)確性（4）靈敏度3.5.1滴定分析法滴定分析法也稱容量分析法是將一種已知準(zhǔn)確濃度的試劑溶液到被測物質(zhì)的溶液中，直到所加的試劑與被測物質(zhì)按化學(xué)計量定量反應(yīng)完全為止，然后根據(jù)試劑溶液的濃度和體積，通過定量關(guān)系計算被測物質(zhì)的含量，滴定分析法是化學(xué)分析法中的重要分析方法之一。滴定分析常采用直接滴定、返滴定和置換滴定三種滴定方式。3.5.1滴定分析法非水溶液滴定法2沉淀滴定法3配位滴定法4氧化還原滴定法5酸堿滴定法13.5.2重量分析法重量法是稱取一定重量的供試品，將其待測成分以單質(zhì)或純粹化合物狀態(tài)分離出來，根據(jù)單質(zhì)或化合物的重量及供試品的重量以計算成分含量百分?jǐn)?shù)的定量方法。由于供試品中被測組分性質(zhì)不同，采用的分離方法各異，重量分析又可分為揮發(fā)法、萃取法、沉淀法和電解法等。3.5.2重量分析法揮發(fā)重量法萃取重量法沉淀重量法：重量分析中分析結(jié)果常按百分含量計算。稱量形式的稱量值W與其樣品重S的比值即為所求的百分含量(X)。式中，F(xiàn)為換算因數(shù)，換算因數(shù)是待測組分的分子量與稱量形式的分子量的比值。3.5.2.1揮發(fā)重量法揮發(fā)重量法是利用被測組分具有揮發(fā)性,或?qū)⑵滢D(zhuǎn)化為揮發(fā)性物質(zhì)來進行揮發(fā)組分含量測定的方法。揮發(fā)重量法又分為直接法和間接法。3.5.2.2萃取重量法萃取重量法是采用不相混溶的兩種溶劑，將被測組分從一種溶劑萃取到另一種溶劑中來，然后將萃取液中溶劑蒸去，干燥至恒重，再稱量其干燥物重量的一種方法。3.5.2.3沉淀重量法沉淀重量法的操作步驟是：取樣-溶解-加沉淀劑促其沉淀-過濾-洗滌-干燥（或灼燒）至恒重-稱重-計算。稱量形式的稱量值W與其樣品重S的比值即為所求的百分量（X）3.5.2.3沉淀重量法3.6儀器分析方法光譜分析方法2電化學(xué)分析法3核磁共振分析技術(shù)簡介4質(zhì)譜分析技術(shù)簡介5色譜分析方法13.6.1色譜分析方法色譜分析法是利用混合物中各組分在固定相與流動相間分配系數(shù)的差異，實現(xiàn)待測樣品內(nèi)不同組分高效、快速分離分析的技術(shù)。3.6.2光譜分析方法光是電磁波，其能量（E）的高低可用波長（λ）或頻率（ν）表示：3.6.2光譜分析方法3.6.2光譜分析方法3.6.2.1紫外可見光譜分析紫外可見光譜分析基本原理：紫外和可見光譜都屬于電子光譜，它們都是由于價電子的躍遷而產(chǎn)生的。3.6.2.1紫外可見光譜分析Lambert-Beer定律是吸收光度法定量分析的基本定律，該定律指出：被吸收的入射光的分?jǐn)?shù)正比于光程中吸光數(shù)目的分子數(shù)目，對于溶液，如果溶劑不吸收，則被溶液所吸收的光的強度正比于溶液的濃度（c）和光在溶液中經(jīng)過的距離?？墒褂霉剑?.6.2.1紫外可見光譜分析在一般文獻資料中，紫外吸收中最大吸收波長位置及摩爾吸光系數(shù)表示為：此式表示樣品在乙醇溶劑中，最大吸收波長為204nm，摩爾吸光系數(shù)為1120。3.6.2.1紫外可見光譜分析3.6.2.1紫外可見光譜分析實際測試中，有很多因素會影響有機化合物的紫外吸收波長。實際分析測試中應(yīng)充分考慮下列因素的影響。共軛效應(yīng)位阻效應(yīng)跨環(huán)效應(yīng)溶劑效應(yīng)3.6.2.1紫外可見光譜分析紫外光譜分析測試系統(tǒng)：常用的紫外及可見分光光度計其組成主要包括光源、分光系統(tǒng)、吸光池、檢測系統(tǒng)和記錄系統(tǒng)等五個部分，見圖3-29。其商品儀器的類型很多，性能差別懸殊，但其基本原理類同。3.6.2.1紫外可見光譜分析在藥物分析中的應(yīng)用：紫外光譜在藥物分析中主要用于藥物的鑒別、檢查和含量測定。與其他光譜測定方法相比，紫外光譜法具有儀器價格較低、操作簡便的優(yōu)點，歷史也很悠久，主要應(yīng)用于有機化合物共軛發(fā)光基團的鑒定、成分分析、平衡常數(shù)測定、相對分子質(zhì)量測定、互變異構(gòu)體測定、氫鍵強度測定等，是一種常用且有力的藥物分析和測試手段。3.6.2.2紅外光譜分析（1）紅外光譜分析基本原理：紅外光譜是研究紅外光與物質(zhì)分子間相互作用的吸收光譜，紅外光的波長覆蓋0.76~1000μm的寬廣區(qū)域。紅外光譜圖多用透光率T（%）為縱坐標(biāo)，表示吸收強度；以波長（μm）或波數(shù)σ（cm-1）為橫坐標(biāo)，表示吸收峰的位置，現(xiàn)在主要以波數(shù)作橫坐標(biāo)。波數(shù)是頻率的一種表示方法，表示每厘米長的光波中波的數(shù)目，它與波長的關(guān)系為：3.6.2.2紅外光譜分析物質(zhì)中的分子處于不停的運動中，其分子的能量（E分子）為：3.6.2.2紅外光譜分析3.6.2.2紅外光譜分析3.6.2.2紅外光譜分析3.6.2.2紅外光譜分析3.6.2.2紅外光譜分析3.6.2.2紅外光譜分析3.6.2.2紅外光譜分析3.6.2.2紅外光譜分析示例3-5紅外光譜鑒別青霉素類藥物（詳見教材P78-79）3.6.2光譜分析方法3.分子發(fā)光分析法4.分子熒光光譜法3.6.2光譜分析方法3.6.2光譜分析方法示例3-6熒光分光光度法測定吡哌酸片含量（詳見教材P82）示例3-7流動注射化學(xué)發(fā)光法測定尼莫地平（詳見教材P84）5.化學(xué)發(fā)光法3.6.2光譜分析方法6.原子吸收光譜法3.6.2光譜分析方法6.原子吸收光譜法3.6.2光譜分析方法6.原子吸收光譜法示例3-8原子吸收光譜法測定中成藥（胃痛寧片）中微量元素3.6.3電化學(xué)分析法1.電位分析法2.庫侖分析法3.電化學(xué)分析法在藥物分析中的應(yīng)用示例3-9電位滴定法測定復(fù)方氯丙那林魚腥草素鈉片中魚腥草素鈉的含量（詳見教材P90）3.6.4核磁共振分析技術(shù)簡介1.核磁共振分析基本原理3.6.4核磁共振分析技術(shù)簡介3.6.4核磁共振分析技術(shù)簡介2.的儀器系統(tǒng)3.6.4核磁共振分析技術(shù)簡介3.6.4核磁共振分析技術(shù)簡介3.核磁圖譜識別和解析3.6.4核磁共振分析技術(shù)簡介3.6.4核磁共振分析技術(shù)簡介3.6.4核磁共振分析技術(shù)簡介3.6.4核磁共振分析技術(shù)簡介示例3-10甲基丙二酸二乙酯分析（詳見教材P97）4.核磁共振在藥物分析中的應(yīng)用簡介3.6.5質(zhì)譜分析技術(shù)簡介1.質(zhì)譜分析基本原理3.6.5質(zhì)譜分析技術(shù)簡介2.質(zhì)譜分析的儀器系統(tǒng)3.6.5質(zhì)譜分析技術(shù)簡介3.質(zhì)譜中的主要分子離子峰及質(zhì)譜圖解析3.6.5質(zhì)譜分析技術(shù)簡介示例3-11尿中異丙嗪代謝產(chǎn)物的測定及質(zhì)譜解析（詳見教材P103）3.7部分現(xiàn)代分析新技術(shù)簡介新型色譜簡介2色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析技術(shù)簡介3微流控芯片和生物芯片分析技術(shù)簡介4多維色譜分析技術(shù)13.7.1多維色譜分析技術(shù)色譜聯(lián)用技術(shù)主要可分為色譜-色譜聯(lián)用技術(shù)和色譜光譜聯(lián)用技術(shù)。全二維氣相色譜多維高效液相色譜多維毛細管電泳3.7.2新型色譜簡介制備型液相色譜色譜作為一種精度高、速度快的分析工具，在醫(yī)藥工業(yè)、生化技術(shù)和精細化學(xué)品的生產(chǎn)方面已成為越來越重要的制備分離手段。模擬移動床色譜它是提純化合物的另一個強大且極具吸引力的分離手段。高速逆流色譜技術(shù)是基于組分在