自然科學(xué)清潔驗證課件

清潔驗證清潔驗證為什么要進行清潔驗證？確立可靠的清潔方法和程序，以防止藥品在生產(chǎn)過程中受到污染和交叉污染。清潔驗證的目的為什么要進行清潔驗證？清潔驗證的目的法規(guī)對清潔驗證的要求新版GMP第一百四十三條

清潔方法應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗證，證實其清潔的效果，以有效防止污染和交叉污染。清潔驗證應(yīng)當(dāng)綜合考慮設(shè)備使用情況、所使用的清潔劑和消毒劑、取樣方法和位置以及相應(yīng)的取樣回收率、殘留物的性質(zhì)和限度、殘留物檢驗方法的靈敏度等因素。法規(guī)對清潔驗證的要求新版GMP第一百四十三條歐盟GMP的要求36.為確認(rèn)清潔規(guī)程的能力，應(yīng)進行清潔驗證，應(yīng)根據(jù)所涉及的物料，合理的確認(rèn)產(chǎn)品、清潔劑和微生物污染的限度標(biāo)準(zhǔn)。這個限度標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)該是可以達到的，能夠證實的。37、應(yīng)使用經(jīng)驗的、檢出靈敏度高的檢驗方法來檢測殘留或污染物。每種分析方法的或儀器的檢測靈敏度應(yīng)足以檢測出設(shè)定合格限度水平的殘留或污染物。38.通常只有接觸產(chǎn)品設(shè)備表面的清潔規(guī)程需要驗證。某些場合下，還應(yīng)考慮不直接接觸產(chǎn)品的部分。應(yīng)驗證設(shè)備使用與清潔的間隔時間，以及已清潔設(shè)備可保留的時間，并通過驗證確定清潔的間隔時間和清潔方法。歐盟GMP的要求36.為確認(rèn)清潔規(guī)程的能力，應(yīng)進行清潔驗證，39.對于相似產(chǎn)品和相似工藝而言，可從相似產(chǎn)品及工藝中，選擇具有代表性產(chǎn)品和工藝進行清潔驗證。可采用最差條件的方法進行單獨的驗證試驗，在驗證中應(yīng)考慮關(guān)鍵因素。

40.為證明方法是經(jīng)過驗證的，通常應(yīng)在3個連續(xù)批次使用該清潔規(guī)程，并檢驗合格。

41、如果實際產(chǎn)品是有毒物質(zhì)或有害物質(zhì)，在清潔驗證中，可以例外的采用物化特性相似的無毒無害物質(zhì)來模擬。

歐盟GMP的要求39.對于相似產(chǎn)品和相似工藝而言，可從相似產(chǎn)品及工藝中，選擇CIP（CleanInPlace）在線清潔Manual手工清潔目前的清潔方法？CIP（CleanInPlace）在線清潔目前的清潔方引言、背景清潔策略：清潔確認(rèn)與清潔驗證詳細(xì)的清潔步驟批準(zhǔn)的清潔劑設(shè)備清潔的可接受范圍目檢直接表面取樣設(shè)備清潔相關(guān)的分析策略/分析方法學(xué)設(shè)備儲存區(qū)域人員培訓(xùn)早期處方研究中的設(shè)備清潔策略臨床試驗后期研究中的設(shè)備清潔策略商業(yè)化生產(chǎn)的設(shè)備清潔策略結(jié)論清潔驗證內(nèi)容引言、背景設(shè)備儲存區(qū)域清潔驗證內(nèi)容1988年有一個制劑--消膽胺樹酯，因原料藥受農(nóng)用殺蟲劑降解物污染從市場召回。污染的原因是使用了回收溶劑，回收溶劑的桶管理不善，那些桶原用以貯存殺蟲劑生產(chǎn)中的回收溶劑，此后又用來貯存消膽胺樹酯生產(chǎn)的回收溶劑。受殺蟲劑污染的原料藥發(fā)往另一個制劑生產(chǎn)廠，結(jié)果污染了流化床干燥器，由此引起許多制劑的交叉污染由來1988年有一個制劑--消膽胺樹酯，因原料藥受農(nóng)用殺蟲劑降解從歷史上看，F(xiàn)DA關(guān)注的重點是青霉素與非青霉素類藥品的交叉污染。有一位幼兒教師，懷里抱著一名幼兒，在2小時前幼兒注射過青霉素鈉。孩子一泡尿撒在幼兒教師手臂上，十幾秒鐘后，教師突然呼吸困難，心慌氣短，面色蒼白，不一會兒就呈現(xiàn)昏迷狀態(tài)。經(jīng)醫(yī)生診斷為青霉素過敏。青霉素過敏反應(yīng)的發(fā)生率約在0.7%至10%。由IgE（親細(xì)胞免疫球蛋白E抗體）所致的全身性超過敏反應(yīng)發(fā)生率為0.01%。頭孢類過敏概率明顯低于青霉素（僅為其25％）重點從歷史上看，F(xiàn)DA關(guān)注的重點是青霉素與非青霉素類藥品的交叉污符合GMP要求降低藥物交叉污染及微生物污染的風(fēng)險保證用藥安全延長系統(tǒng)或設(shè)備的使用壽命提高企業(yè)經(jīng)濟效益清潔驗證的必要性符合GMP要求清潔驗證的必要性定義從設(shè)備表面去除可見及不可見物質(zhì)的過程：活性成分及其降解產(chǎn)物輔料清潔劑微生物潤滑劑設(shè)備運行過程中產(chǎn)生的微粒等清潔的含義定義清潔的含義由來、重點、范圍清潔驗證的四個階段開發(fā)方案準(zhǔn)備方案實施監(jiān)控及再驗證階段清潔合格標(biāo)準(zhǔn)清潔驗證方案應(yīng)有的內(nèi)容清潔驗證方案的制訂和實施監(jiān)控和再驗證主題內(nèi)容由來、重點、范圍主題內(nèi)容選定清潔方法，制定清潔規(guī)程（開發(fā)階段）制定驗證方案（參照物、取樣點、驗證合格標(biāo)準(zhǔn)、取樣方法和檢驗方法）實施驗證，獲取數(shù)據(jù)，評價并得出結(jié)論監(jiān)控及再驗證清潔驗證的四個階段選定清潔方法，制定清潔規(guī)程（開發(fā)階段）清潔驗證的四個階段清潔水平風(fēng)險(RA)清潔與清潔驗證要求(CV)早期工藝步驟無毒物質(zhì)溶解度好專用設(shè)備中間工藝步驟溶解度差后期工藝步驟有毒物質(zhì)多用途設(shè)備清潔水平風(fēng)險(RA)清潔與清潔驗證要求(CV)早期工藝步驟無清潔驗證程序–概述No.任務(wù)階段1確定需要清潔的設(shè)備（罐子、小部件、瓶子，等）制定清單2確定與相應(yīng)設(shè)備部件接觸的產(chǎn)品和其它物質(zhì)（潛在污染物）3確定用于清潔No.1中設(shè)備的清潔程序4設(shè)備分類（“總括法”）類別劃分5產(chǎn)品和物質(zhì)分類（“總括法”）6如有可能，合并/劃分清潔程序清潔驗證程序–概述No.任務(wù)階段1確定需要清潔的設(shè)備（罐清潔驗證程序–概述No.任務(wù)階段7關(guān)鍵潛在污染物的風(fēng)險評估進行分析評估，以優(yōu)化驗證8對某些設(shè)備存在的潛在污染物的最差狀況進行定義9評估關(guān)鍵清潔程序，以評估驗證范圍10關(guān)鍵取樣點的風(fēng)險評估11對取樣方法和采用的分析方法進行定義12驗收標(biāo)準(zhǔn)的定義和證明清潔驗證程序–概述No.任務(wù)階段7關(guān)鍵潛在污染物的風(fēng)險評清潔驗證程序–概述No.任務(wù)階段13CV所需文件的制定、審核和批準(zhǔn)（CV方案、SOP等）CV執(zhí)行與文件14CV準(zhǔn)備和執(zhí)行，包括所有必要的分析性能15分析數(shù)據(jù)的評估16結(jié)論起草，CV報告的編寫、審核、批準(zhǔn)清潔驗證程序–概述No.任務(wù)階段13CV所需文件的制定、開發(fā)階段方案準(zhǔn)備階段方案實施階段監(jiān)控及再驗證階段清潔SOP

制訂培訓(xùn)設(shè)備取樣點選擇表面積計算確定待檢測物與合格標(biāo)準(zhǔn)選定參照物清潔劑的殘留驗證方案制訂培訓(xùn)實驗方法方法開發(fā)驗證方案執(zhí)行清潔取樣化驗合格？驗證報告原因分析日常監(jiān)控再驗證變更管理

否是

否

是

是

開發(fā)階段方案準(zhǔn)備階段方案實施階段監(jiān)控及再驗證階段清手工清洗由操作人員拆洗、擦洗或用高壓水槍清洗自動清洗由自動控制進行沖洗的清洗，有的帶干燥功能半自動清洗以上兩種方式相結(jié)合的清洗過程選定清潔方法手工清洗選定清潔方法制定SOP--驗證的先決條件參照設(shè)備說明書制定詳細(xì)的規(guī)程，規(guī)定每一臺設(shè)備的清潔程序，以期每個操作人員都能以可重復(fù)的方式對其清洗，并獲得相同的清潔效果。清潔程序一般步驟（清洗、消毒、干燥、儲存）

制定清潔規(guī)程-1制定SOP--驗證的先決條件制定清潔規(guī)程-1清潔規(guī)程的要點1、拆卸方法2、預(yù)洗/檢查要求3、清洗（清潔劑、方法、時間、溫度范圍）4、淋洗（用符合藥典標(biāo)準(zhǔn)的水、固定的方法和固定的時間）制定清潔規(guī)程-2清潔規(guī)程的要點制定清潔規(guī)程-2清潔規(guī)程的要點5、裝配：按說明書、示意圖要求裝配6、干燥：明確方式和參數(shù)7、檢查：符合設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)，包括目檢8、貯存：保持設(shè)備及系統(tǒng)清潔完好狀態(tài)的方法，如倒置、放在層流罩下、在線滅菌、規(guī)定存放時間。制定清潔規(guī)程-3清潔規(guī)程的要點制定清潔規(guī)程-3取樣方法的確定(取樣方法選擇)取樣方法驗證檢驗方法的確定（檢驗方法的選擇）檢驗方法的驗證清潔驗證取樣方法、分析方法驗證

清潔驗證取樣方法、分析方法驗證取樣過程需經(jīng)過驗證，通過回收率試驗驗證取樣過程的回收率和重現(xiàn)性。通常取樣回收率和檢驗方法回收率結(jié)合進行，總回收率一般（企業(yè)可以根據(jù)實際情況確定）不低于70％，多次取樣回收率的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于20％。棉簽取樣過程的驗證實際上是對取樣棉簽、溶劑的選擇、取樣人員操作、殘留物轉(zhuǎn)移到取樣棉簽、樣品溶出(萃取)過程的全面考察。棉簽取樣方法的驗證-1取樣過程需經(jīng)過驗證，通過回收率試驗驗證取樣過程的回收率和重現(xiàn)棉簽取樣方法的驗證-2：驗證方法如下：①準(zhǔn)備一塊與設(shè)備表面材質(zhì)相同的板材，如平整光潔的316L不銹鋼板；②在鋼板上劃出100mm×100mm的區(qū)域；③將5倍限度量的待檢測物溶液，定量裝入校驗的微量注射器；④將其溶液盡量均勻地涂布在100mm×100mm的區(qū)域內(nèi)；⑤自然干燥或用電吹風(fēng)溫和地吹干不銹鋼板；⑥用選定的擦拭溶劑潤濕擦拭棉簽，按下圖所示進行擦拭取樣；⑦重復(fù)以上規(guī)程3次；棉簽取樣方法的驗證-2：驗證方法如下：棉簽取樣方法的驗證：⑧將擦拭棉簽分別放入棉簽管中，加入預(yù)定溶劑5ml，超聲；⑨用經(jīng)驗證的檢驗方法檢驗，計算回收率和回收率的RSD。下圖為棉簽插試取樣方法：第一步第二步棉簽取樣方法的驗證：⑧將擦拭棉簽分別放入棉簽管中，加入預(yù)定溶通常淋洗法限度檢查不需做回收率驗證；定量檢查應(yīng)做回收率驗證，可以利用淋洗溶劑沖洗已知量（在限度附近）的分析物確定回收率，回收率通常應(yīng)不低于95%。淋洗的取樣方法為根據(jù)淋洗水流經(jīng)設(shè)備的線路，選擇淋洗線路相對最下游的一個或幾個排水口為取樣口。分別按照微生物檢驗樣品和化學(xué)檢驗樣品的取樣規(guī)程收集清潔程序最后一步淋洗即將結(jié)束時的水樣。淋洗法樣品可對沖洗液直接檢測也可對沖洗液做稀釋后檢測；無論直接檢測還是稀釋檢測都應(yīng)在接到樣品后首先將樣品同空白溶劑做視覺檢查，確定是否有顏色差異和異物存在；如果有上述現(xiàn)象發(fā)生，可直接判定樣品不合格。淋洗液取樣方法的驗證：通常淋洗法限度檢查不需做回收率驗證；定量檢查應(yīng)做回收率驗取樣方法和取樣點的確認(rèn)

通常設(shè)備的取樣清潔驗證中如何確定合適取樣方法和取樣點是驗證方案的關(guān)鍵內(nèi)容之一，必須由合適的理由來確認(rèn)取樣點，此取樣點應(yīng)能夠代表設(shè)備的“最臟點”。（1）取樣方法的確認(rèn)方法分為棉簽直接表面擦拭、淋洗液沖洗。擦拭取樣的優(yōu)點是能對最難清潔部位直接取樣，通過考察有代表性的最難清潔部位的殘留物水平評價整套生產(chǎn)設(shè)備的清潔狀況。通過選擇適當(dāng)?shù)牟潦萌軇⒉潦霉ぞ吆筒潦梅椒?，可將清洗過程中未溶解的，已“干結(jié)”在設(shè)備表面或溶解度很小的物質(zhì)擦拭下來。檢驗的結(jié)果能直接反映出各取樣點的清潔狀況。取樣方法和取樣點的確認(rèn)通常設(shè)備的取樣清潔驗證中如何確取樣方法和取樣點的確認(rèn)擦拭取樣的缺點是很多情況下須拆卸設(shè)備后方能接觸到取樣部位，對取樣工具、溶劑、取樣人員的操作等都有一定的要求，總的來說比較復(fù)雜。淋洗取樣法為大面積取樣方法，其優(yōu)點是取樣面大，對不便拆卸或不宜經(jīng)常拆卸的設(shè)備也能取樣。因此其適用于擦拭取樣不易接觸到的表面，尤其適用于設(shè)備表面平坦、管道多且長的的生產(chǎn)設(shè)備。淋洗水樣品的缺點是溶解與流體力學(xué)原理，當(dāng)溶劑不能在設(shè)備表面形成湍流進而有效溶解殘留物時，或者殘留物不溶于水或“干結(jié)”在設(shè)備表面時，淋洗水就難以反映真實的情況。必須由經(jīng)過培訓(xùn)的人員進行取樣，并且必須按照批準(zhǔn)的測試方案進行。執(zhí)行取樣的人員同執(zhí)行清潔操作的人員不能為同一人。取樣方法和取樣點的確認(rèn)擦拭取樣的缺點是很多情況下須拆卸設(shè)備取樣方法和取樣點的確認(rèn)（2）取樣點的確認(rèn)通常不可能擦拭設(shè)備的全部表面，因此應(yīng)該選擇設(shè)備的最差區(qū)域作為取樣點。這些區(qū)域應(yīng)在清潔難度和殘留水平方面代表著對清潔規(guī)程最大程度的挑戰(zhàn)，例如罐底部、攪拌槳槳葉底部和閥門的周圍。如果進行微生物取樣，取樣計劃應(yīng)包括微生物的可能最差區(qū)域，例如：較難靠近的地方以及可收集水的排水區(qū)域。微生物和化學(xué)取樣應(yīng)在不同區(qū)域進行，測試方案中應(yīng)包括設(shè)備及其取樣點的描述或圖表。取樣方法和取樣點的確認(rèn)（2）取樣點的確認(rèn)分析方法的驗證通常清洗分析方法分為限度檢查和定量檢查，不同的檢查方法驗證的參數(shù)也不相同。（1）回收率回收率的分析方法驗證已在取樣方法的驗證中詳細(xì)描述，不在此贅述。（2）精密度精密度系指在規(guī)定的條件下，從同一個均勻樣品中，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。通常用相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)來表示。定量檢查的RSD%應(yīng)不大于10%。淋洗法和棉簽法用于限度檢查通常不需要做精密度實驗；分析方法的驗證通常清洗分析方法分為限度檢查和定量檢查分析方法的驗證（3）線性/范圍線性系指在設(shè)計的范圍內(nèi)，測定結(jié)果與試樣中被測物濃度呈正比關(guān)系的程度。范圍系指能達到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。定量檢查應(yīng)至少測試5個濃度范圍并且包含清潔的最低限和最高限度，線性的相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于0.98；濃度范圍應(yīng)達到殘留物限度的50％～150％。淋洗法和棉簽法用于限度檢查時不需做線性/范圍驗證。分析方法的驗證（3）線性/范圍分析方法的驗證（4）檢測限和定量限檢測限系指在確定的試驗條件下，試樣中被測物能被檢測出的最小量；定量限系指在確定的試驗條件下，試樣中被測物能被準(zhǔn)確測定的最小量，其測定結(jié)果應(yīng)具有一定準(zhǔn)確度和精密度。淋洗法和棉簽法用于限度檢查只需做檢測限實驗。通常檢測限是指信噪比為3:1時被分析物的濃度，定量限是指信噪比為10:1時被分析物的濃度。分析方法的驗證（4）檢測限和定量限分析方法的驗證（5）專屬性專屬性系指在其他成分(如：雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、相似物等)存在下，分析方法能準(zhǔn)確測出被測物的特性。評價空白溶劑、分析系統(tǒng)、棉簽本身是否有干擾；通常采用的驗證方法為：進針空白溶劑評價溶劑干擾、進樣量為0評價系統(tǒng)干擾、進針棉簽浸泡的溶劑評價棉簽干擾。（6）樣品溶液穩(wěn)定性通常樣品室溫或5℃冰箱冷藏放置24-72小時，測定結(jié)果應(yīng)不低于初始值的90%。分析方法的驗證（5）專屬性分析方法的驗證（7）系統(tǒng)適用性定量檢查測定時，應(yīng)制備2份對照品，對照品一致性檢查應(yīng)為不超過5%；對照品的RSD%不應(yīng)超過10%。（8）限度檢查時溶液的進樣順序限度檢查測定時測定順序依次為空白溶劑、樣品、對照品。分析方法的驗證（7）系統(tǒng)適用性驗證方案的關(guān)鍵點1、選定清潔的參照物（最難清潔的物質(zhì)）2、最難清潔部位和最難取樣部位3、殘留物允許限度和相應(yīng)的檢測方法（合格標(biāo)準(zhǔn)和檢測方法）制定驗證方案-1驗證方案的關(guān)鍵點制定驗證方案-1確定最難清潔的物質(zhì)（參照物）藥品一般由活性成份+輔料組成（活性成分的衍生物、潤滑劑、消毒劑、環(huán)境污染物質(zhì)、設(shè)備釋放的異物等）單組份產(chǎn)品：組份=參照物多種成份：藥效最強、溶解度最差的成份可作為清潔參照物制定驗證方案-2確定最難清潔的物質(zhì)（參照物）制定驗證方案-2最難清洗物選擇毒性在清洗溶劑中的溶解度已知難于清洗，如對設(shè)備表面材質(zhì)有一定附著力包含色料、芳香劑的產(chǎn)品設(shè)備的生產(chǎn)量（生產(chǎn)頻率高的產(chǎn)品相應(yīng)的清洗頻率也高）清洗過程中如果使用清洗劑，則其殘留物也應(yīng)視為標(biāo)記物

最難清洗物選擇毒性

最難清洗物選擇示例產(chǎn)品名稱毒性溶解性已知的清洗問題顏色香味與味道產(chǎn)量A10ug/cm3易溶無無10%B40ug/cm3溶解無無20%C50ug/cm3溶解無無50%D50ug/cm3微溶有有20%

最難清洗物選擇示例產(chǎn)品毒性溶解性已知的清洗顏色產(chǎn)量A10u最難清洗物選擇示例從活性成分的毒性來講，A的毒性最大，其他依次為B,C,D.從溶解性方面來講，D產(chǎn)品屬于微溶。除產(chǎn)品D外其他均沒有已知的清洗問題。除產(chǎn)品D外，其他產(chǎn)品均沒有顏色及氣味的問題。基于上述理由產(chǎn)品A與D被確定為清洗驗證的標(biāo)記產(chǎn)品。最難清洗物選擇示例從活性成分的毒性來講，A的毒性最大，其他依確定最難清潔部位和取樣點清洗的方法手工清洗：機械摩擦，效果較好一般沖洗：溶解、沖擊法去污，有些部位不容易清潔。制定驗證方案-3確定最難清潔部位和取樣點制定驗證方案-3最難清潔的部位：噴淋球的覆蓋率（壓力小、流速很低的部位、清潔劑不易接觸到的部位設(shè)備結(jié)構(gòu)圖（剖面圖）P&ID圖目測：最基本的方法/設(shè)備表面最死角/閥門、管道終淋洗水/取樣閥、底閥容易吸附殘留物的部位注意點：取樣點應(yīng)包括最難清潔部位制定驗證方案-4最難清潔的部位：制定驗證方案-4

確定合格標(biāo)準(zhǔn)（殘留量限度）根據(jù)生產(chǎn)設(shè)備和產(chǎn)品的實際情況，制定科學(xué)合理的，能夠?qū)崿F(xiàn)并能通過適當(dāng)?shù)姆椒z驗的限度標(biāo)準(zhǔn)。標(biāo)準(zhǔn)通常由企業(yè)自己確定制定驗證方案-5

確定合格標(biāo)準(zhǔn)（殘留量限度）制定驗證方案-5FDA沒有為清潔驗證設(shè)定一個通用方法或限度標(biāo)準(zhǔn)。那是不切實際的，因為原料和制劑生產(chǎn)企業(yè)使用的設(shè)備和生產(chǎn)的產(chǎn)品千差萬別，確立殘留物限度不僅必須對所有有關(guān)物質(zhì)有足夠的了解，而且所定的限度必須是現(xiàn)實的、能達到和可被驗證的。”清潔合格標(biāo)準(zhǔn)-1FDA沒有為清潔驗證設(shè)定一個通用方法或限度標(biāo)準(zhǔn)。清潔合格標(biāo)準(zhǔn)換言之企業(yè)應(yīng)根據(jù)其生產(chǎn)設(shè)備和產(chǎn)品的實際情況，制定科學(xué)合理的，能實現(xiàn)并能通過適當(dāng)?shù)姆椒z驗的限度標(biāo)準(zhǔn)。從保證用藥安全出發(fā)，由企業(yè)自確定合格標(biāo)準(zhǔn)清潔合格標(biāo)準(zhǔn)-2換言之清潔合格標(biāo)準(zhǔn)-2目前制藥業(yè)普遍接受的限度標(biāo)準(zhǔn)：

1.分析方法客觀能達到的靈敏度，如濃度限度--10ppm(10/1000000)2.生物活性的限度，治療劑量的1/10003.以目檢為依據(jù)的限度，如不得有可見的殘留物。清潔合格標(biāo)準(zhǔn)-3目前制藥業(yè)普遍接受的限度標(biāo)準(zhǔn)：清潔合格標(biāo)準(zhǔn)-3

可見，清潔驗證合格的執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)是從三個方面來確定的；

檢測方法的靈敏度（10ppm）（殘留物的濃度限度）藥品的生物活性（1/1000）檢查的方便性及可行性。（目檢，肉眼檢測）據(jù)報導(dǎo)，人員對光滑的表面目檢能達到1~4μg/cm2的水平。清潔合格標(biāo)準(zhǔn)-4可見，清潔驗證合格的執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)是從三個方面來確定的；清殘留物的濃度限度含義:是指上批產(chǎn)品殘留在設(shè)備里的物質(zhì)全部溶解到下批產(chǎn)品中的濃度限度≤10ppm檢測：最終淋洗水中殘留物的濃度限度≤10ppm清潔合格標(biāo)準(zhǔn)-5殘留物的濃度限度清潔合格標(biāo)準(zhǔn)-5生物活性：以最低日治療劑量（MTDD）的1/1000為限度的合格標(biāo)準(zhǔn)MTDD=Minimumtreatmentdailydosage

一般治療性藥品，常以此為標(biāo)準(zhǔn)計算控制標(biāo)準(zhǔn)特殊品種有特殊要求，但FDA及國家藥監(jiān)局沒有具體規(guī)定。清潔合格標(biāo)準(zhǔn)-6生物活性：清潔合格標(biāo)準(zhǔn)-6有人認(rèn)為，1/1000標(biāo)準(zhǔn)的含義是第一批產(chǎn)品殘留在下一產(chǎn)品中的比例控制在1/1000以內(nèi)；這是一種誤解。制訂標(biāo)準(zhǔn)的出發(fā)點是用藥安全，1/1000只是計算的基礎(chǔ)，實際控制標(biāo)準(zhǔn)與二個藥品的使用劑量、下一批產(chǎn)品的批量及二個產(chǎn)品生產(chǎn)時共享的接觸面積等因素有關(guān)。本文將用示例進行討論。對千分之一的誤解有人認(rèn)為，1/1000標(biāo)準(zhǔn)的含義是第一批產(chǎn)品殘留在下一產(chǎn)品中Aspirin/Bamyl巴米爾阿斯匹林泡騰片解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗風(fēng)濕、抑制血小斑聚集包裝：0.5g×10片/盒成人用量解熱鎮(zhèn)痛一次0.5g，一日0.5-2.0g1-4片Betaloc倍他樂克酒石酸美托洛爾片降壓、也是治療心絞痛、心肌梗死的藥物包裝：50mg×10片/盒成人用量降壓100-200mg2-4片二個品種示例討論如病人有低血壓，感冒服用巴米爾，如阿斯匹林中倍他樂克殘留量過大，出現(xiàn)降壓作用，這就成了不安全因素Aspirin/Bamyl巴米爾Betaloc倍他樂克二清潔驗證合格標(biāo)準(zhǔn)計算大中B小劑量中等劑量最大劑量大中ABetaloc-降血壓Aspirin-退熱小劑量中等劑量最大劑量MTDD×0.1%殘留控制目標(biāo)：服用退熱藥，不出現(xiàn)降血壓作用生產(chǎn)中，二個產(chǎn)品批量不同，清潔控制限度要計算殘留清潔驗證合格標(biāo)準(zhǔn)計算大中B小劑量中等劑量最大劑量大中ABet生物學(xué)活性限度-MTDD的0.1%-圖解Betaloc-降壓Aspirin-退熱備注有關(guān)參數(shù)每日使用2-4片每片50mg最低日治療劑量為2片每日使用1-4片每片0.5g日最大使用劑量0.5gx4片=2g最低日治療劑量的1/1000，指A產(chǎn)品最大日制劑量時，允許B的殘存量2片50mg×2片×0.1%=100mg×1/1000=0.1mg

4片

0.5gx4片=2g=2000mg

A應(yīng)控制B的殘留：2g中不得超過0.1mg即5×0.1%50ppm說明：1.Betaloc為先加工產(chǎn)品，每片主藥的含量50mg。

2.Aspirin為后續(xù)加工的產(chǎn)品，日最大劑量為2g。清潔的目的：是保證在服退熱藥時，不出現(xiàn)Betaloc的降壓作用。生物學(xué)活性限度-MTDD的0.1%-圖解Betaloc-降計算控制指標(biāo)計算得50ppmAspirin批量為100kg時，Betaloc總量：100kg×

0.1mg÷2000mg=5g條件同上，如設(shè)備接觸表面積為5m2,5g÷5m2=5000mg÷50000cm2=5mg/50cm2=2.5mg/25cm2這樣就得到了清潔驗證的實際控制標(biāo)準(zhǔn)如設(shè)備不是淋洗方式清潔的，通常不采用淋洗水殘留濃度控制標(biāo)準(zhǔn)注：一般的表面樣均是25cm2計算控制指標(biāo)計算得Aspirin批量為100kg時，Bet實施驗證時，非無菌產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)還采用以下微生物污染限度表面樣：≤50CFU/棉簽水樣：≤25CFU/ml（最終淋洗水）清潔標(biāo)準(zhǔn)中的微生物限度back實施驗證時，非無菌產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)還采用以下微生物污染限度清潔標(biāo)1.概述闡述待驗證的設(shè)備、系統(tǒng)和清潔方法2.驗證人員3.文件：設(shè)備清潔SOP清潔程序（二個可能寫在一起）取樣方法分析方法清潔驗證方案的內(nèi)容1.概述清潔驗證方案的內(nèi)容確定殘留參照物確定合格標(biāo)準(zhǔn)（限度）分析方法的建立取樣要求（取樣點位置、編號、數(shù)量等）驗證結(jié)果及綜合評估監(jiān)控及再驗證清潔驗證方案的內(nèi)容back確定殘留參照物清潔驗證方案的內(nèi)容back

取樣方法應(yīng)根據(jù)設(shè)備的類型、被取樣點的材料、設(shè)備的構(gòu)型等綜合確定必要時可采用幾種不同的取樣方法，使樣品有更好的代表性取樣方法應(yīng)是實用的、易培訓(xùn)的，否則清潔的狀態(tài)難以監(jiān)控制定驗證方案--取樣方法取樣方法應(yīng)根據(jù)設(shè)備的類型、被取樣點制定驗證方案--取樣方法取樣方法最終淋洗水取樣（配制罐、反應(yīng)罐）擦拭法取樣制定驗證方案--常見取樣法取樣方法制定驗證方案--常見取樣法棉簽擦拭取樣示意圖棉簽擦拭取樣示意圖檢驗方法對于分析物應(yīng)有足夠的專屬性和靈敏度選擇實驗室最常使用的檢驗方法檢驗方法和取樣方法必須經(jīng)過驗證合適的取樣方法經(jīng)驗證的檢驗方法制定驗證方案--檢驗檢驗方法對于分析物應(yīng)有足夠的專屬性和靈敏度制定驗證方案--檢取樣方法驗證通過回收率試驗驗證取樣過程的回收率和重現(xiàn)性。要求：包括取樣和檢驗方法因素在內(nèi)的綜合回收率一般不低于70％。制定驗證方案取樣方法驗證制定驗證方案檢驗方法驗證

專屬性、靈敏度、檢測限、精密度、線性范圍、回收率試驗一般要求線性范圍應(yīng)達到殘留物限度的

50％至150％；代表精密度的RSD≤10％制定驗證方案檢驗方法驗證制定驗證方案設(shè)備清潔驗證是指從目檢、化學(xué)和微生物角度試驗并證明設(shè)備按規(guī)定的SOP清洗后，使用該設(shè)備生產(chǎn)時，上批產(chǎn)品及清洗過程所帶來的污染符合預(yù)期標(biāo)準(zhǔn)。清潔驗證需作3批。驗證的實施--基本要求設(shè)備清潔驗證是指從目檢、化學(xué)和微生物角度試驗并證明設(shè)備按規(guī)定清洗驗證的維護

變更控制引入新產(chǎn)品或取消現(xiàn)有產(chǎn)品(可能影響矩陣)；設(shè)備、生產(chǎn)工藝或清洗規(guī)程的變更；潔凈/污染設(shè)備保留時間的變更；清洗劑的變更；產(chǎn)品處方的變更；清洗驗證的維護變更控制清洗驗證的維護在清洗驗證完成之后，清洗規(guī)程需要遵循變更控制的流程及進行日常的監(jiān)控。

關(guān)于產(chǎn)品、設(shè)備及規(guī)程的任何變更必須遵循變更控制流程對變更對驗證狀態(tài)的影響進行評估。評估清洗驗證是否持續(xù)地符合企業(yè)及法規(guī)的標(biāo)準(zhǔn)（某些更新的要求）對清洗驗證的回顧進行書面記錄以確認(rèn)清洗操作仍然處于驗證的狀態(tài)清洗驗證回顧的頻率由各個企業(yè)自主決定（一般的回顧頻率為最多1年)清洗驗證的維護在清洗驗證完成之后，清洗規(guī)程需要遵循變更控制的實施清潔驗證條件清潔程序已被批準(zhǔn)清潔驗證草案已完成執(zhí)行清潔驗證的設(shè)備已驗證清潔驗證所用的化學(xué)方法已驗證清潔驗證所用的微生物方法已驗證或確認(rèn)清潔驗證文件檢查要點（1）實施清潔驗證條件清潔驗證文件檢查要點（1）分組原則設(shè)備分組針對某一產(chǎn)品做清潔驗證時，設(shè)計及功能相近的設(shè)備可以適當(dāng)分組需要制定分組原則產(chǎn)品分組對于任一設(shè)備，列出與其接觸的的藥品清單清潔驗證檢查要點（2）分組原則清潔驗證檢查要點（2）驗證產(chǎn)品的選擇確定基于相同清潔驗證程序?qū)τ诘漠a(chǎn)品組中最難清潔的產(chǎn)品作為驗證產(chǎn)品評價基準(zhǔn)：劑型產(chǎn)品本身工藝過程因素設(shè)備因素清潔驗證文件檢查要點（3）驗證產(chǎn)品的選擇清潔驗證文件檢查要點（3）次數(shù)對于最差情況產(chǎn)品須進行3次成功的驗證如果出現(xiàn)一個產(chǎn)品組中有二個或多個最差條件情況產(chǎn)品，一般需要每個最差情況產(chǎn)品至少做2次成功的驗證當(dāng)引入產(chǎn)品、增加新設(shè)備、設(shè)備發(fā)生重大變更或產(chǎn)品批量發(fā)生改變時，需根據(jù)評估結(jié)果重新進行1-3次驗證。清潔驗證文件檢查要點（4）次數(shù)清潔驗證文件檢查要點（4）取樣取樣要求的相關(guān)文件復(fù)核取樣人員資質(zhì)取樣器具沖洗溶劑、取樣方法取樣量樣品容器取樣過程防護樣品標(biāo)示取樣日志清潔驗證文件檢查要點（5）取樣清潔驗證文件檢查要點（5）取樣點的選擇取樣點的代表性設(shè)備結(jié)構(gòu)經(jīng)驗擦拭試驗供應(yīng)商提供的信息歷史數(shù)據(jù)研發(fā)數(shù)據(jù)取樣點一般多于2點取樣點的標(biāo)注圖示文字注明材質(zhì)清潔驗證文件檢查要點（6）取樣點的選擇清潔驗證文件檢查要點（6）取樣過程目檢在TOC檢測前進行目檢TOC取樣執(zhí)行最后一步，取TOC，確定水溶性有機物質(zhì)及清洗劑的殘留水平。同時取空白水樣微生物取樣避免可能的風(fēng)險控制清潔驗證文件檢查要點（6）取樣過程清潔驗證文件檢查要點（6）可接受限度微生物檢測限度固體制劑，可以評估微生物取樣的必要性微生物檢測標(biāo)準(zhǔn)可以依據(jù)生產(chǎn)環(huán)境、微生物在產(chǎn)品中生長繁殖的潛在性和對產(chǎn)品的危害程度進行評價通常的標(biāo)準(zhǔn)（棉簽取樣或Rodac）非無菌固體制劑≤100CFU/25cm2外用和液體制劑≤25CFU/25cm2微生物結(jié)果超標(biāo)，需進行ID鑒別清潔驗證文件檢查要點（9）可接受限度清潔驗證文件檢查要點（9）可接受限度目檢限度與產(chǎn)品接觸的表面無可見殘留物設(shè)備必須干燥如設(shè)備有冷凝水，需對冷凝水進行微生物檢測總有機碳限度≤10ppm清潔驗證文件檢查要點（10）可接受限度清潔驗證文件檢查要點（10）設(shè)備的放置時間和連續(xù)使用時間設(shè)備使用后到開始清潔的最長放置時間設(shè)備清洗后到開始使用的最長放置時間考察項目：微生物指標(biāo)產(chǎn)品外觀降解產(chǎn)物清潔驗證文件檢查要點（14）設(shè)備的放置時間和連續(xù)使用時間清潔驗證文件檢查要點（14）出現(xiàn)驗證偏差的處理制定必要的措施根據(jù)出現(xiàn)驗證結(jié)果超標(biāo)情況，對整個驗證過程，包括清潔程序、執(zhí)行情況、取樣方法、未知峰來源的追溯與排查等方面進行調(diào)查，并制定方案對驗證結(jié)果超標(biāo)產(chǎn)生的風(fēng)險進行分析。重新驗證的發(fā)起調(diào)查過程及結(jié)論的記錄清潔驗證文件檢查要點（15）出現(xiàn)驗證偏差的處理清潔驗證文件檢查要點（15）變更控制與再驗證增加新產(chǎn)品清潔程序發(fā)生顯著變化（改變清洗劑、清洗劑濃度、操作參數(shù)、配方、清洗步驟等），驗證3次增加的新的生產(chǎn)設(shè)備或清潔設(shè)備改變可接受標(biāo)準(zhǔn)其它任何可能影響清潔驗證過程有效性的變更，如設(shè)備的發(fā)生重大改變、產(chǎn)品批量改變等等清潔驗證文件檢查要點（15）變更控制與再驗證清潔驗證文件檢查要點（15）[自然科學(xué)]清潔驗證課件周期性再驗證周期CIP最長5年進行一次評估，已確定是否在驗證手工清洗最長3年進行一次評估，以確認(rèn)是否再驗證評估的方法變更的歷史情況歷史數(shù)據(jù)和控制數(shù)據(jù)法律法規(guī)要求清潔驗證文件檢查要點（16）周期性再驗證清潔驗證文件檢查要點（16）OVERThanks！OVERThanks！清潔驗證清潔驗證為什么要進行清潔驗證？確立可靠的清潔方法和程序，以防止藥品在生產(chǎn)過程中受到污染和交叉污染。清潔驗證的目的為什么要進行清潔驗證？清潔驗證的目的法規(guī)對清潔驗證的要求新版GMP第一百四十三條

清潔方法應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗證，證實其清潔的效果，以有效防止污染和交叉污染。清潔驗證應(yīng)當(dāng)綜合考慮設(shè)備使用情況、所使用的清潔劑和消毒劑、取樣方法和位置以及相應(yīng)的取樣回收率、殘留物的性質(zhì)和限度、殘留物檢驗方法的靈敏度等因素。法規(guī)對清潔驗證的要求新版GMP第一百四十三條歐盟GMP的要求36.為確認(rèn)清潔規(guī)程的能力，應(yīng)進行清潔驗證，應(yīng)根據(jù)所涉及的物料，合理的確認(rèn)產(chǎn)品、清潔劑和微生物污染的限度標(biāo)準(zhǔn)。這個限度標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)該是可以達到的，能夠證實的。37、應(yīng)使用經(jīng)驗的、檢出靈敏度高的檢驗方法來檢測殘留或污染物。每種分析方法的或儀器的檢測靈敏度應(yīng)足以檢測出設(shè)定合格限度水平的殘留或污染物。38.通常只有接觸產(chǎn)品設(shè)備表面的清潔規(guī)程需要驗證。某些場合下，還應(yīng)考慮不直接接觸產(chǎn)品的部分。應(yīng)驗證設(shè)備使用與清潔的間隔時間，以及已清潔設(shè)備可保留的時間，并通過驗證確定清潔的間隔時間和清潔方法。歐盟GMP的要求36.為確認(rèn)清潔規(guī)程的能力，應(yīng)進行清潔驗證，39.對于相似產(chǎn)品和相似工藝而言，可從相似產(chǎn)品及工藝中，選擇具有代表性產(chǎn)品和工藝進行清潔驗證?？刹捎米畈顥l件的方法進行單獨的驗證試驗，在驗證中應(yīng)考慮關(guān)鍵因素。

40.為證明方法是經(jīng)過驗證的，通常應(yīng)在3個連續(xù)批次使用該清潔規(guī)程，并檢驗合格。

41、如果實際產(chǎn)品是有毒物質(zhì)或有害物質(zhì)，在清潔驗證中，可以例外的采用物化特性相似的無毒無害物質(zhì)來模擬。

歐盟GMP的要求39.對于相似產(chǎn)品和相似工藝而言，可從相似產(chǎn)品及工藝中，選擇CIP（CleanInPlace）在線清潔Manual手工清潔目前的清潔方法？CIP（CleanInPlace）在線清潔目前的清潔方引言、背景清潔策略：清潔確認(rèn)與清潔驗證詳細(xì)的清潔步驟批準(zhǔn)的清潔劑設(shè)備清潔的可接受范圍目檢直接表面取樣設(shè)備清潔相關(guān)的分析策略/分析方法學(xué)設(shè)備儲存區(qū)域人員培訓(xùn)早期處方研究中的設(shè)備清潔策略臨床試驗后期研究中的設(shè)備清潔策略商業(yè)化生產(chǎn)的設(shè)備清潔策略結(jié)論清潔驗證內(nèi)容引言、背景設(shè)備儲存區(qū)域清潔驗證內(nèi)容1988年有一個制劑--消膽胺樹酯，因原料藥受農(nóng)用殺蟲劑降解物污染從市場召回。污染的原因是使用了回收溶劑，回收溶劑的桶管理不善，那些桶原用以貯存殺蟲劑生產(chǎn)中的回收溶劑，此后又用來貯存消膽胺樹酯生產(chǎn)的回收溶劑。受殺蟲劑污染的原料藥發(fā)往另一個制劑生產(chǎn)廠，結(jié)果污染了流化床干燥器，由此引起許多制劑的交叉污染由來1988年有一個制劑--消膽胺樹酯，因原料藥受農(nóng)用殺蟲劑降解從歷史上看，F(xiàn)DA關(guān)注的重點是青霉素與非青霉素類藥品的交叉污染。有一位幼兒教師，懷里抱著一名幼兒，在2小時前幼兒注射過青霉素鈉。孩子一泡尿撒在幼兒教師手臂上，十幾秒鐘后，教師突然呼吸困難，心慌氣短，面色蒼白，不一會兒就呈現(xiàn)昏迷狀態(tài)。經(jīng)醫(yī)生診斷為青霉素過敏。青霉素過敏反應(yīng)的發(fā)生率約在0.7%至10%。由IgE（親細(xì)胞免疫球蛋白E抗體）所致的全身性超過敏反應(yīng)發(fā)生率為0.01%。頭孢類過敏概率明顯低于青霉素（僅為其25％）重點從歷史上看，F(xiàn)DA關(guān)注的重點是青霉素與非青霉素類藥品的交叉污符合GMP要求降低藥物交叉污染及微生物污染的風(fēng)險保證用藥安全延長系統(tǒng)或設(shè)備的使用壽命提高企業(yè)經(jīng)濟效益清潔驗證的必要性符合GMP要求清潔驗證的必要性定義從設(shè)備表面去除可見及不可見物質(zhì)的過程：活性成分及其降解產(chǎn)物輔料清潔劑微生物潤滑劑設(shè)備運行過程中產(chǎn)生的微粒等清潔的含義定義清潔的含義由來、重點、范圍清潔驗證的四個階段開發(fā)方案準(zhǔn)備方案實施監(jiān)控及再驗證階段清潔合格標(biāo)準(zhǔn)清潔驗證方案應(yīng)有的內(nèi)容清潔驗證方案的制訂和實施監(jiān)控和再驗證主題內(nèi)容由來、重點、范圍主題內(nèi)容選定清潔方法，制定清潔規(guī)程（開發(fā)階段）制定驗證方案（參照物、取樣點、驗證合格標(biāo)準(zhǔn)、取樣方法和檢驗方法）實施驗證，獲取數(shù)據(jù)，評價并得出結(jié)論監(jiān)控及再驗證清潔驗證的四個階段選定清潔方法，制定清潔規(guī)程（開發(fā)階段）清潔驗證的四個階段清潔水平風(fēng)險(RA)清潔與清潔驗證要求(CV)早期工藝步驟無毒物質(zhì)溶解度好專用設(shè)備中間工藝步驟溶解度差后期工藝步驟有毒物質(zhì)多用途設(shè)備清潔水平風(fēng)險(RA)清潔與清潔驗證要求(CV)早期工藝步驟無清潔驗證程序–概述No.任務(wù)階段1確定需要清潔的設(shè)備（罐子、小部件、瓶子，等）制定清單2確定與相應(yīng)設(shè)備部件接觸的產(chǎn)品和其它物質(zhì)（潛在污染物）3確定用于清潔No.1中設(shè)備的清潔程序4設(shè)備分類（“總括法”）類別劃分5產(chǎn)品和物質(zhì)分類（“總括法”）6如有可能，合并/劃分清潔程序清潔驗證程序–概述No.任務(wù)階段1確定需要清潔的設(shè)備（罐清潔驗證程序–概述No.任務(wù)階段7關(guān)鍵潛在污染物的風(fēng)險評估進行分析評估，以優(yōu)化驗證8對某些設(shè)備存在的潛在污染物的最差狀況進行定義9評估關(guān)鍵清潔程序，以評估驗證范圍10關(guān)鍵取樣點的風(fēng)險評估11對取樣方法和采用的分析方法進行定義12驗收標(biāo)準(zhǔn)的定義和證明清潔驗證程序–概述No.任務(wù)階段7關(guān)鍵潛在污染物的風(fēng)險評清潔驗證程序–概述No.任務(wù)階段13CV所需文件的制定、審核和批準(zhǔn)（CV方案、SOP等）CV執(zhí)行與文件14CV準(zhǔn)備和執(zhí)行，包括所有必要的分析性能15分析數(shù)據(jù)的評估16結(jié)論起草，CV報告的編寫、審核、批準(zhǔn)清潔驗證程序–概述No.任務(wù)階段13CV所需文件的制定、開發(fā)階段方案準(zhǔn)備階段方案實施階段監(jiān)控及再驗證階段清潔SOP

制訂培訓(xùn)設(shè)備取樣點選擇表面積計算確定待檢測物與合格標(biāo)準(zhǔn)選定參照物清潔劑的殘留驗證方案制訂培訓(xùn)實驗方法方法開發(fā)驗證方案執(zhí)行清潔取樣化驗合格？驗證報告原因分析日常監(jiān)控再驗證變更管理

否是

否

是

是

開發(fā)階段方案準(zhǔn)備階段方案實施階段監(jiān)控及再驗證階段清手工清洗由操作人員拆洗、擦洗或用高壓水槍清洗自動清洗由自動控制進行沖洗的清洗，有的帶干燥功能半自動清洗以上兩種方式相結(jié)合的清洗過程選定清潔方法手工清洗選定清潔方法制定SOP--驗證的先決條件參照設(shè)備說明書制定詳細(xì)的規(guī)程，規(guī)定每一臺設(shè)備的清潔程序，以期每個操作人員都能以可重復(fù)的方式對其清洗，并獲得相同的清潔效果。清潔程序一般步驟（清洗、消毒、干燥、儲存）

制定清潔規(guī)程-1制定SOP--驗證的先決條件制定清潔規(guī)程-1清潔規(guī)程的要點1、拆卸方法2、預(yù)洗/檢查要求3、清洗（清潔劑、方法、時間、溫度范圍）4、淋洗（用符合藥典標(biāo)準(zhǔn)的水、固定的方法和固定的時間）制定清潔規(guī)程-2清潔規(guī)程的要點制定清潔規(guī)程-2清潔規(guī)程的要點5、裝配：按說明書、示意圖要求裝配6、干燥：明確方式和參數(shù)7、檢查：符合設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)，包括目檢8、貯存：保持設(shè)備及系統(tǒng)清潔完好狀態(tài)的方法，如倒置、放在層流罩下、在線滅菌、規(guī)定存放時間。制定清潔規(guī)程-3清潔規(guī)程的要點制定清潔規(guī)程-3取樣方法的確定(取樣方法選擇)取樣方法驗證檢驗方法的確定（檢驗方法的選擇）檢驗方法的驗證清潔驗證取樣方法、分析方法驗證

清潔驗證取樣方法、分析方法驗證取樣過程需經(jīng)過驗證，通過回收率試驗驗證取樣過程的回收率和重現(xiàn)性。通常取樣回收率和檢驗方法回收率結(jié)合進行，總回收率一般（企業(yè)可以根據(jù)實際情況確定）不低于70％，多次取樣回收率的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于20％。棉簽取樣過程的驗證實際上是對取樣棉簽、溶劑的選擇、取樣人員操作、殘留物轉(zhuǎn)移到取樣棉簽、樣品溶出(萃取)過程的全面考察。棉簽取樣方法的驗證-1取樣過程需經(jīng)過驗證，通過回收率試驗驗證取樣過程的回收率和重現(xiàn)棉簽取樣方法的驗證-2：驗證方法如下：①準(zhǔn)備一塊與設(shè)備表面材質(zhì)相同的板材，如平整光潔的316L不銹鋼板；②在鋼板上劃出100mm×100mm的區(qū)域；③將5倍限度量的待檢測物溶液，定量裝入校驗的微量注射器；④將其溶液盡量均勻地涂布在100mm×100mm的區(qū)域內(nèi)；⑤自然干燥或用電吹風(fēng)溫和地吹干不銹鋼板；⑥用選定的擦拭溶劑潤濕擦拭棉簽，按下圖所示進行擦拭取樣；⑦重復(fù)以上規(guī)程3次；棉簽取樣方法的驗證-2：驗證方法如下：棉簽取樣方法的驗證：⑧將擦拭棉簽分別放入棉簽管中，加入預(yù)定溶劑5ml，超聲；⑨用經(jīng)驗證的檢驗方法檢驗，計算回收率和回收率的RSD。下圖為棉簽插試取樣方法：第一步第二步棉簽取樣方法的驗證：⑧將擦拭棉簽分別放入棉簽管中，加入預(yù)定溶通常淋洗法限度檢查不需做回收率驗證；定量檢查應(yīng)做回收率驗證，可以利用淋洗溶劑沖洗已知量（在限度附近）的分析物確定回收率，回收率通常應(yīng)不低于95%。淋洗的取樣方法為根據(jù)淋洗水流經(jīng)設(shè)備的線路，選擇淋洗線路相對最下游的一個或幾個排水口為取樣口。分別按照微生物檢驗樣品和化學(xué)檢驗樣品的取樣規(guī)程收集清潔程序最后一步淋洗即將結(jié)束時的水樣。淋洗法樣品可對沖洗液直接檢測也可對沖洗液做稀釋后檢測；無論直接檢測還是稀釋檢測都應(yīng)在接到樣品后首先將樣品同空白溶劑做視覺檢查，確定是否有顏色差異和異物存在；如果有上述現(xiàn)象發(fā)生，可直接判定樣品不合格。淋洗液取樣方法的驗證：通常淋洗法限度檢查不需做回收率驗證；定量檢查應(yīng)做回收率驗取樣方法和取樣點的確認(rèn)

通常設(shè)備的取樣清潔驗證中如何確定合適取樣方法和取樣點是驗證方案的關(guān)鍵內(nèi)容之一，必須由合適的理由來確認(rèn)取樣點，此取樣點應(yīng)能夠代表設(shè)備的“最臟點”。（1）取樣方法的確認(rèn)方法分為棉簽直接表面擦拭、淋洗液沖洗。擦拭取樣的優(yōu)點是能對最難清潔部位直接取樣，通過考察有代表性的最難清潔部位的殘留物水平評價整套生產(chǎn)設(shè)備的清潔狀況。通過選擇適當(dāng)?shù)牟潦萌軇?、擦拭工具和擦拭方法，可將清洗過程中未溶解的，已“干結(jié)”在設(shè)備表面或溶解度很小的物質(zhì)擦拭下來。檢驗的結(jié)果能直接反映出各取樣點的清潔狀況。取樣方法和取樣點的確認(rèn)通常設(shè)備的取樣清潔驗證中如何確取樣方法和取樣點的確認(rèn)擦拭取樣的缺點是很多情況下須拆卸設(shè)備后方能接觸到取樣部位，對取樣工具、溶劑、取樣人員的操作等都有一定的要求，總的來說比較復(fù)雜。淋洗取樣法為大面積取樣方法，其優(yōu)點是取樣面大，對不便拆卸或不宜經(jīng)常拆卸的設(shè)備也能取樣。因此其適用于擦拭取樣不易接觸到的表面，尤其適用于設(shè)備表面平坦、管道多且長的的生產(chǎn)設(shè)備。淋洗水樣品的缺點是溶解與流體力學(xué)原理，當(dāng)溶劑不能在設(shè)備表面形成湍流進而有效溶解殘留物時，或者殘留物不溶于水或“干結(jié)”在設(shè)備表面時，淋洗水就難以反映真實的情況。必須由經(jīng)過培訓(xùn)的人員進行取樣，并且必須按照批準(zhǔn)的測試方案進行。執(zhí)行取樣的人員同執(zhí)行清潔操作的人員不能為同一人。取樣方法和取樣點的確認(rèn)擦拭取樣的缺點是很多情況下須拆卸設(shè)備取樣方法和取樣點的確認(rèn)（2）取樣點的確認(rèn)通常不可能擦拭設(shè)備的全部表面，因此應(yīng)該選擇設(shè)備的最差區(qū)域作為取樣點。這些區(qū)域應(yīng)在清潔難度和殘留水平方面代表著對清潔規(guī)程最大程度的挑戰(zhàn)，例如罐底部、攪拌槳槳葉底部和閥門的周圍。如果進行微生物取樣，取樣計劃應(yīng)包括微生物的可能最差區(qū)域，例如：較難靠近的地方以及可收集水的排水區(qū)域。微生物和化學(xué)取樣應(yīng)在不同區(qū)域進行，測試方案中應(yīng)包括設(shè)備及其取樣點的描述或圖表。取樣方法和取樣點的確認(rèn)（2）取樣點的確認(rèn)分析方法的驗證通常清洗分析方法分為限度檢查和定量檢查，不同的檢查方法驗證的參數(shù)也不相同。（1）回收率回收率的分析方法驗證已在取樣方法的驗證中詳細(xì)描述，不在此贅述。（2）精密度精密度系指在規(guī)定的條件下，從同一個均勻樣品中，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。通常用相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)來表示。定量檢查的RSD%應(yīng)不大于10%。淋洗法和棉簽法用于限度檢查通常不需要做精密度實驗；分析方法的驗證通常清洗分析方法分為限度檢查和定量檢查分析方法的驗證（3）線性/范圍線性系指在設(shè)計的范圍內(nèi)，測定結(jié)果與試樣中被測物濃度呈正比關(guān)系的程度。范圍系指能達到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。定量檢查應(yīng)至少測試5個濃度范圍并且包含清潔的最低限和最高限度，線性的相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于0.98；濃度范圍應(yīng)達到殘留物限度的50％～150％。淋洗法和棉簽法用于限度檢查時不需做線性/范圍驗證。分析方法的驗證（3）線性/范圍分析方法的驗證（4）檢測限和定量限檢測限系指在確定的試驗條件下，試樣中被測物能被檢測出的最小量；定量限系指在確定的試驗條件下，試樣中被測物能被準(zhǔn)確測定的最小量，其測定結(jié)果應(yīng)具有一定準(zhǔn)確度和精密度。淋洗法和棉簽法用于限度檢查只需做檢測限實驗。通常檢測限是指信噪比為3:1時被分析物的濃度，定量限是指信噪比為10:1時被分析物的濃度。分析方法的驗證（4）檢測限和定量限分析方法的驗證（5）專屬性專屬性系指在其他成分(如：雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、相似物等)存在下，分析方法能準(zhǔn)確測出被測物的特性。評價空白溶劑、分析系統(tǒng)、棉簽本身是否有干擾；通常采用的驗證方法為：進針空白溶劑評價溶劑干擾、進樣量為0評價系統(tǒng)干擾、進針棉簽浸泡的溶劑評價棉簽干擾。（6）樣品溶液穩(wěn)定性通常樣品室溫或5℃冰箱冷藏放置24-72小時，測定結(jié)果應(yīng)不低于初始值的90%。分析方法的驗證（5）專屬性分析方法的驗證（7）系統(tǒng)適用性定量檢查測定時，應(yīng)制備2份對照品，對照品一致性檢查應(yīng)為不超過5%；對照品的RSD%不應(yīng)超過10%。（8）限度檢查時溶液的進樣順序限度檢查測定時測定順序依次為空白溶劑、樣品、對照品。分析方法的驗證（7）系統(tǒng)適用性驗證方案的關(guān)鍵點1、選定清潔的參照物（最難清潔的物質(zhì)）2、最難清潔部位和最難取樣部位3、殘留物允許限度和相應(yīng)的檢測方法（合格標(biāo)準(zhǔn)和檢測方法）制定驗證方案-1驗證方案的關(guān)鍵點制定驗證方案-1確定最難清潔的物質(zhì)（參照物）藥品一般由活性成份+輔料組成（活性成分的衍生物、潤滑劑、消毒劑、環(huán)境污染物質(zhì)、設(shè)備釋放的異物等）單組份產(chǎn)品：組份=參照物多種成份：藥效最強、溶解度最差的成份可作為清潔參照物制定驗證方案-2確定最難清潔的物質(zhì)（參照物）制定驗證方案-2最難清洗物選擇毒性在清洗溶劑中的溶解度已知難于清洗，如對設(shè)備表面材質(zhì)有一定附著力包含色料、芳香劑的產(chǎn)品設(shè)備的生產(chǎn)量（生產(chǎn)頻率高的產(chǎn)品相應(yīng)的清洗頻率也高）清洗過程中如果使用清洗劑，則其殘留物也應(yīng)視為標(biāo)記物

最難清洗物選擇毒性

最難清洗物選擇示例產(chǎn)品名稱毒性溶解性已知的清洗問題顏色香味與味道產(chǎn)量A10ug/cm3易溶無無10%B40ug/cm3溶解無無20%C50ug/cm3溶解無無50%D50ug/cm3微溶有有20%

最難清洗物選擇示例產(chǎn)品毒性溶解性已知的清洗顏色產(chǎn)量A10u最難清洗物選擇示例從活性成分的毒性來講，A的毒性最大，其他依次為B,C,D.從溶解性方面來講，D產(chǎn)品屬于微溶。除產(chǎn)品D外其他均沒有已知的清洗問題。除產(chǎn)品D外，其他產(chǎn)品均沒有顏色及氣味的問題?；谏鲜隼碛僧a(chǎn)品A與D被確定為清洗驗證的標(biāo)記產(chǎn)品。最難清洗物選擇示例從活性成分的毒性來講，A的毒性最大，其他依確定最難清潔部位和取樣點清洗的方法手工清洗：機械摩擦，效果較好一般沖洗：溶解、沖擊法去污，有些部位不容易清潔。制定驗證方案-3確定最難清潔部位和取樣點制定驗證方案-3最難清潔的部位：噴淋球的覆蓋率（壓力小、流速很低的部位、清潔劑不易接觸到的部位設(shè)備結(jié)構(gòu)圖（剖面圖）P&ID圖目測：最基本的方法/設(shè)備表面最死角/閥門、管道終淋洗水/取樣閥、底閥容易吸附殘留物的部位注意點：取樣點應(yīng)包括最難清潔部位制定驗證方案-4最難清潔的部位：制定驗證方案-4

確定合格標(biāo)準(zhǔn)（殘留量限度）根據(jù)生產(chǎn)設(shè)備和產(chǎn)品的實際情況，制定科學(xué)合理的，能夠?qū)崿F(xiàn)并能通過適當(dāng)?shù)姆椒z驗的限度標(biāo)準(zhǔn)。標(biāo)準(zhǔn)通常由企業(yè)自己確定制定驗證方案-5

確定合格標(biāo)準(zhǔn)（殘留量限度）制定驗證方案-5FDA沒有為清潔驗證設(shè)定一個通用方法或限度標(biāo)準(zhǔn)。那是不切實際的，因為原料和制劑生產(chǎn)企業(yè)使用的設(shè)備和生產(chǎn)的產(chǎn)品千差萬別，確立殘留物限度不僅必須對所有有關(guān)物質(zhì)有足夠的了解，而且所定的限度必須是現(xiàn)實的、能達到和可被驗證的。”清潔合格標(biāo)準(zhǔn)-1FDA沒有為清潔驗證設(shè)定一個通用方法或限度標(biāo)準(zhǔn)。清潔合格標(biāo)準(zhǔn)換言之企業(yè)應(yīng)根據(jù)其生產(chǎn)設(shè)備和產(chǎn)品的實際情況，制定科學(xué)合理的，能實現(xiàn)并能通過適當(dāng)?shù)姆椒z驗的限度標(biāo)準(zhǔn)。從保證用藥安全出發(fā)，由企業(yè)自確定合格標(biāo)準(zhǔn)清潔合格標(biāo)準(zhǔn)-2換言之清潔合格標(biāo)準(zhǔn)-2目前制藥業(yè)普遍接受的限度標(biāo)準(zhǔn)：

1.分析方法客觀能達到的靈敏度，如濃度限度--10ppm(10/1000000)2.生物活性的限度，治療劑量的1/10003.以目檢為依據(jù)的限度，如不得有可見的殘留物。清潔合格標(biāo)準(zhǔn)-3目前制藥業(yè)普遍接受的限度標(biāo)準(zhǔn)：清潔合格標(biāo)準(zhǔn)-3

可見，清潔驗證合格的執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)是從三個方面來確定的；

檢測方法的靈敏度（10ppm）（殘留物的濃度限度）藥品的生物活性（1/1000）檢查的方便性及可行性。（目檢，肉眼檢測）據(jù)報導(dǎo)，人員對光滑的表面目檢能達到1~4μg/cm2的水平。清潔合格標(biāo)準(zhǔn)-4可見，清潔驗證合格的執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)是從三個方面來確定的；清殘留物的濃度限度含義:是指上批產(chǎn)品殘留在設(shè)備里的物質(zhì)全部溶解到下批產(chǎn)品中的濃度限度≤10ppm檢測：最終淋洗水中殘留物的濃度限度≤10ppm清潔合格標(biāo)準(zhǔn)-5殘留物的濃度限度清潔合格標(biāo)準(zhǔn)-5生物活性：以最低日治療劑量（MTDD）的1/1000為限度的合格標(biāo)準(zhǔn)MTDD=Minimumtreatmentdailydosage

一般治療性藥品，常以此為標(biāo)準(zhǔn)計算控制標(biāo)準(zhǔn)特殊品種有特殊要求，但FDA及國家藥監(jiān)局沒有具體規(guī)定。清潔合格標(biāo)準(zhǔn)-6生物活性：清潔合格標(biāo)準(zhǔn)-6有人認(rèn)為，1/1000標(biāo)準(zhǔn)的含義是第一批產(chǎn)品殘留在下一產(chǎn)品中的比例控制在1/1000以內(nèi)；這是一種誤解。制訂標(biāo)準(zhǔn)的出發(fā)點是用藥安全，1/1000只是計算的基礎(chǔ)，實際控制標(biāo)準(zhǔn)與二個藥品的使用劑量、下一批產(chǎn)品的批量及二個產(chǎn)品生產(chǎn)時共享的接觸面積等因素有關(guān)。本文將用示例進行討論。對千分之一的誤解有人認(rèn)為，1/1000標(biāo)準(zhǔn)的含義是第一批產(chǎn)品殘留在下一產(chǎn)品中Aspirin/Bamyl巴米爾阿斯匹林泡騰片解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗風(fēng)濕、抑制血小斑聚集包裝：0.5g×10片/盒成人用量解熱鎮(zhèn)痛一次0.5g，一日0.5-2.0g1-4片Betaloc倍他樂克酒石酸美托洛爾片降壓、也是治療心絞痛、心肌梗死的藥物包裝：50mg×10片/盒成人用量降壓100-200mg2-4片二個品種示例討論如病人有低血壓，感冒服用巴米爾，如阿斯匹林中倍他樂克殘留量過大，出現(xiàn)降壓作用，這就成了不安全因素Aspirin/Bamyl巴米爾Betaloc倍他樂克二清潔驗證合格標(biāo)準(zhǔn)計算大中B小劑量中等劑量最大劑量大中ABetaloc-降血壓Aspirin-退熱小劑量中等劑量最大劑量MTDD×0.1%殘留控制目標(biāo)：服用退熱藥，不出現(xiàn)降血壓作用生產(chǎn)中，二個產(chǎn)品批量不同，清潔控制限度要計算殘留清潔驗證合格標(biāo)準(zhǔn)計算大中B小劑量中等劑量最大劑量大中ABet生物學(xué)活性限度-MTDD的0.1%-圖解Betaloc-降壓Aspirin-退熱備注有關(guān)參數(shù)每日使用2-4片每片50mg最低日治療劑量為2片每日使用1-4片每片0.5g日最大使用劑量0.5gx4片=2g最低日治療劑量的1/1000，指A產(chǎn)品最大日制劑量時，允許B的殘存量2片50mg×2片×0.1%=100mg×1/1000=0.1mg

4片

0.5gx4片=2g=2000mg

A應(yīng)控制B的殘留：2g中不得超過0.1mg即5×0.1%50ppm說明：1.Betaloc為先加工產(chǎn)品，每片主藥的含量50mg。

2.Aspirin為后續(xù)加工的產(chǎn)品，日最大劑量為2g。清潔的目的：是保證在服退熱藥時，不出現(xiàn)Betaloc的降壓作用。生物學(xué)活性限度-MTDD的0.1%-圖解Betaloc-降計算控制指標(biāo)計算得50ppmAspirin批量為100kg時，Betaloc總量：100kg×

0.1mg÷2000mg=5g條件同上，如設(shè)備接觸表面積為5m2,5g÷5m2=5000mg÷50000cm2=5mg/50cm2=2.5mg/25cm2這樣就得到了清潔驗證的實際控制標(biāo)準(zhǔn)如設(shè)備不是淋洗方式清潔的，通常不采用淋洗水殘留濃度控制標(biāo)準(zhǔn)注：一般的表面樣均是25cm2計算控制指標(biāo)計算得Aspirin批量為100kg時，Bet實施驗證時，非無菌產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)還采用以下微生物污染限度表面樣：≤50CFU/棉簽水樣：≤25CFU/ml（最終淋洗水）清潔標(biāo)準(zhǔn)中的微生物限度back實施驗證時，非無菌產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)還采用以下微生物污染限度清潔標(biāo)1.概述闡述待驗證的設(shè)備、系統(tǒng)和清潔方法2.驗證人員3.文件：設(shè)備清潔SOP清潔程序（二個可能寫在一起）取樣方法分析方法清潔驗證方案的內(nèi)容1.概述清潔驗證方案的內(nèi)容確定殘留參照物確定合格標(biāo)準(zhǔn)（限度）分析方法的建立取樣要求（取樣點位置、編號、數(shù)量等）驗證結(jié)果及綜合評估監(jiān)控及再驗證清潔驗證方案的內(nèi)容back確定殘留參照物清潔驗證方案的內(nèi)容back

取樣方法應(yīng)根據(jù)設(shè)備的類型、被取樣點的材料、設(shè)備的構(gòu)型等綜合確定必要時可采用幾種不同的取樣方法，使樣品有更好的代表性取樣方法應(yīng)是實用的、易培訓(xùn)的，否則清潔的狀態(tài)難以監(jiān)控制定驗證方案--取樣方法取樣方法應(yīng)根據(jù)設(shè)備的類型、被取樣點制定驗證方案--取樣方法取樣方法最終淋洗水取樣（配制罐、反應(yīng)罐）擦拭法取樣制定驗證方案--常見取樣法取樣方法制定驗證方案--