藥物安全性評價-7安全性藥理學(xué)研究

第九章安全性藥理學(xué)研究焦月華中藥安全性評價方法目錄安全性藥理學(xué)的概念安全性藥理學(xué)研究在國內(nèi)外的發(fā)展安全性藥理學(xué)研究實驗設(shè)計基本原則實驗設(shè)計的具體要求安全性藥理核心組合研究的具體內(nèi)容1安全性藥理學(xué)的概念內(nèi)容：1.是與新藥臨床適應(yīng)證相關(guān)的藥效學(xué)研究；2.是與臨床治療適應(yīng)證無關(guān)的藥理作用和作用模式的次要藥理研究；3.是安全性藥理學(xué)(SafetyPharmacology)研究。定義：用藥理學(xué)方法研究藥物在治療劑量與治療以上劑量范圍內(nèi)，可能會出現(xiàn)的、潛在的、對機(jī)體有不良影響的藥理作用的藥物安全性評價學(xué)科.2安全性藥理學(xué)研究在國內(nèi)外的發(fā)展各國有關(guān)新藥評價技術(shù)都要求把一般藥理學(xué)研究作為新藥臨床前藥理評價必須完成的項目。瑞典《藥品登記規(guī)程》中要求:在新藥研究講行中，應(yīng)作廣泛的生物學(xué)篩選試驗。所得結(jié)果與臨床應(yīng)用評價及危險性評價有關(guān)。WHO規(guī)定:應(yīng)在機(jī)體的主要系統(tǒng)上進(jìn)行評定，以提示藥物其他的作用，不論這種作用是我們希望的，還是不希望的。具體的實驗設(shè)計則隨藥物的種類不同而變化。英國《新藥產(chǎn)品臨床前及臨床試驗準(zhǔn)則》指出:應(yīng)該在多種哺乳動物身上，研究藥物對主要器官系統(tǒng)的藥理作用。中樞神經(jīng)系統(tǒng)試驗、自主神經(jīng)系統(tǒng)功能試驗、心血管功能試驗、呼吸系統(tǒng)功能試驗、胃腸道的分泌與運(yùn)動功能試驗以及肝功能、腎功能、內(nèi)分泌功能等試驗特別是對精神行為、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)還提出了一些具體指標(biāo)。2

安全性藥理學(xué)研究在國內(nèi)外的發(fā)展ICH

：2001年《人用藥物安全性藥理學(xué)研究指南(S7A)》提出研究設(shè)計、含量、藥物的劑量應(yīng)符合GLP要求。2002《評價人用藥物潛在致心室復(fù)極化延遲作用的安全性藥理學(xué)研究草案(S7B)》闡述了評價藥物QT間隔延長的潛在的綜合危險評價和非臨床安全性評價策略的相關(guān)概念。日本:《安全性藥理學(xué)實驗技術(shù)指南》按照ICH的要求在GLP的條件下開展安全性藥理學(xué)研究。

中國:1985年頒布的《新藥審批辦法》，要求對新藥進(jìn)行一般藥理研究，觀察藥物對心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的作用?！缎滤幍姆桥R床研究指導(dǎo)原則》中，要求新藥研究開發(fā)單位提供一般藥理的研究資料，并將此作為反映新藥對人體潛在不良反應(yīng)的評價部分。使安全性藥理學(xué)的概念、定義、研究目的、研究方法、研究內(nèi)容以及評價要求有了國際性的公認(rèn)的規(guī)范3實驗設(shè)計基本原則安全性藥理學(xué)研究實驗設(shè)計的五個基本原則：

1.根據(jù)不同的藥物作用的選擇性特征與可能出現(xiàn)的安全性問題,選擇并且設(shè)計安全性藥理學(xué)研究應(yīng)該進(jìn)行的實驗。2.次要的藥物藥效活性試驗結(jié)果以及毒性試驗結(jié)果或臨床試驗結(jié)果顯示有可能會有某些安全性問題，應(yīng)該在安全性藥理實驗中加以考慮，設(shè)計必要的實驗。特別是臨床癥狀有可能波及重要器官時，如關(guān)系到心血管系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)的毒性，在安全性藥理學(xué)實驗設(shè)計的時候，應(yīng)該周密的考慮其研究的必要性。3實驗設(shè)計基本原則3.應(yīng)采用科學(xué)、公認(rèn)、有效的試驗方法安排安全性藥理學(xué)實驗，鼓勵采用新的方法、新的技術(shù)以利于獲得可靠的實驗數(shù)據(jù)。4.在某些情況下，還可以結(jié)合藥物動力學(xué)實驗哦或毒性實驗來安排安全性藥理學(xué)研究，從而節(jié)約開支、充分利用動物資源、人力資源和物力資源。5.嚴(yán)格執(zhí)行GLP管理規(guī)范，以確保安全性藥理學(xué)研究的質(zhì)量。4實驗設(shè)計的具體要求代謝物/異構(gòu)體/制劑給藥次數(shù)給藥劑量給藥途徑實驗設(shè)計實驗組的設(shè)立4實驗設(shè)計的具體要求

1實驗組的設(shè)立需要確定設(shè)立有幾個實驗組，每個實驗組多少用數(shù)量的實驗動物，才能獲取滿足科學(xué)合理的實驗基本數(shù)據(jù)要求，并符合表現(xiàn)出動物會出現(xiàn)有生物學(xué)效應(yīng)的可比原則與有意義的差異原則。必要時，除正常的對照組外，還應(yīng)設(shè)立陽性對照組，如不設(shè)立陽性對照組應(yīng)說明其理由。2給藥途徑一般應(yīng)參考擬用臨床給藥途徑選擇安全性藥理學(xué)實驗的給藥途徑。如藥物以代謝活化產(chǎn)物產(chǎn)生藥理效應(yīng)，不論以何種途徑給藥，還需要用高于代謝產(chǎn)物濃度的原型藥物劑量進(jìn)行安全性藥理學(xué)實驗。如臨床將采用多途徑給藥，則每種給藥途徑都要進(jìn)行安全性藥理學(xué)實驗。

4實驗設(shè)計的具體要求3給藥劑量一般要求在同一種動物身上比較產(chǎn)生不良反應(yīng)的劑量和產(chǎn)生治療作用的藥效學(xué)實驗的劑量。如觀察不到不良反應(yīng)，則需要考慮所選濃度范圍的科學(xué)性。4給藥次數(shù)安全性藥理學(xué)實驗一般采用單次給藥的方式。在給藥一定時間后才出現(xiàn)藥效或者多次給藥的毒性實驗才顯示存在安全性問題的時候，應(yīng)考慮安排進(jìn)行多次給藥的安全性藥理學(xué)實驗。5代謝物和異構(gòu)體以及制劑的實驗問題如果主要代謝物是發(fā)揮藥理作用的主要活性物質(zhì)，或者藥物以異構(gòu)體形式進(jìn)行藥理作用或其藥理活性有顯著差異的時候，則應(yīng)該進(jìn)行代謝物和異構(gòu)體的安全性藥理實驗。如果制劑能夠顯著的改變活性物質(zhì)的藥物動力學(xué)性質(zhì)、藥效動力學(xué)特征，還需要進(jìn)行制劑的安全性藥理實驗。5核心組合研究的具體內(nèi)容

安全性藥理核心組合研究主要包括藥物對神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的安全性藥理學(xué)評價，對三大主要器官系統(tǒng)的研究上都有其具體的方法。5.1神經(jīng)系統(tǒng)檢查（一）實驗?zāi)康挠^察新藥主要藥效學(xué)以外的廣泛藥理作用，了解該新藥對機(jī)體神經(jīng)系統(tǒng)的影響，發(fā)現(xiàn)其有意義的作用或潛在的影響，以便合理的用藥，提高療效，或發(fā)現(xiàn)可能發(fā)生的副作用及其潛在的危害，從而避免不良反應(yīng)的發(fā)生。（二）實驗方法1.給藥途徑試驗通常采用與臨床及主要藥效學(xué)相一致的途徑。2.給藥劑量及依據(jù)根據(jù)受試新藥臨床擬給藥途徑及主要藥效學(xué)試驗的有效劑量，設(shè)2~3個給藥劑量組，其中低劑量應(yīng)相當(dāng)于主要藥效學(xué)的有效劑量。給藥劑量設(shè)定依據(jù)以《中華人民共和國藥品監(jiān)督管理局中藥新藥研究的技術(shù)要求》為主。3.動物選用小鼠，體重18~22g，雌、雄各半。5.1神經(jīng)系統(tǒng)檢查4.儀器多功能小鼠自主活動記錄儀。5.分組將小鼠隨機(jī)分為對照組及供試品的三個給藥劑量組。每組10只，雌、雄各半。6.觀察記錄給藥后3h內(nèi)小鼠的一般行為活動、姿勢、步態(tài)，以及有無肌顫、不安、奔跑嘶叫、卷縮豎毛等精神神經(jīng)系統(tǒng)方面的異常表現(xiàn)。并于給藥后1h分別將每只小鼠放到自主活動記錄儀內(nèi)，記錄5min的自主活動次數(shù)。根據(jù)結(jié)果確定是否需要進(jìn)一步觀察與中樞抑制性或興奮性藥物間相互協(xié)同作用實驗。7.結(jié)果判定

各劑量組與對照組比較，動物給藥后的活動、步態(tài)、姿勢、有無流涎、肌顫、麻痹、抽搐、運(yùn)動失調(diào)、不安、奔跑嘶叫、反應(yīng)過敏或卷縮豎毛、感覺遲鈍等神經(jīng)系統(tǒng)方面的表現(xiàn)及自主活動次數(shù)的差異，判定供試品對神經(jīng)系統(tǒng)有無明顯影響。5.2心血管系統(tǒng)檢查（一）實驗?zāi)康?/p>

觀察新藥主要藥效學(xué)以外的廣泛藥理作用，了解該新藥對機(jī)體心血管系統(tǒng)的影響，發(fā)現(xiàn)其有意義的作用或潛在影響，以便合理的用藥，提高療效，或發(fā)現(xiàn)可能發(fā)生的副作用及其潛在的危害，從而避免不良反應(yīng)的發(fā)生。（二）試驗方法1.給藥途徑試驗通常采用與臨床及主要藥效學(xué)相一致的途徑。2.給藥劑量及依據(jù)根據(jù)受試新藥臨床擬給藥途徑及主要藥效學(xué)試驗的有效劑量，設(shè)2～3個給藥劑量組，其中低劑量應(yīng)相當(dāng)于主要藥效學(xué)的有效劑量。給藥劑量設(shè)定依據(jù)以《中華人民共和國藥品監(jiān)督管理局中藥新藥研究的技術(shù)要求》為主。3.動物犬，體重12～18kg；或貓，體重2.5～3.5kg；雌、雄各半。5.2心血管系統(tǒng)檢查4.儀器數(shù)據(jù)記錄分析儀及相關(guān)附件。5.分組將符合條件的試驗用犬或貓隨機(jī)分為對照組及供試品的2～3個劑量組，每組至少5只。6.觀察指標(biāo)觀察給藥后對動物心電圖、心率及血壓的影響。7.心血管檢查戊巴比妥鈉（30mg/kg）麻醉，仰位固定，手術(shù)分離左側(cè)頸總動脈，經(jīng)動脈插管接壓力換能器，再經(jīng)橋式放大器記錄血壓；分別于雙上肢及左下肢皮下插入針狀電極，經(jīng)生物電放大器處理后記錄標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ?qū)?lián)心電圖，另設(shè)一通道顯示心率。8.補(bǔ)液給藥指標(biāo)記錄分離右側(cè)頸外靜脈，插入導(dǎo)管，經(jīng)恒流泵維持靜脈緩慢輸入生理鹽水；上腹部手術(shù)，做十二指腸插管以備給藥。上述操作完畢，調(diào)整好各放大器的靈敏度及適合的掃描速度，穩(wěn)定30分鐘后，同步記錄血壓、心電圖(Ⅱ)、心率。作為給藥前正?；A(chǔ)數(shù)值。隨后經(jīng)十二指腸插管給藥。分別在給藥后不同時間點(diǎn)記錄上述各項指標(biāo)1次。比較給藥前、后各項指標(biāo)有無明顯改變。9.試驗結(jié)果判定

與給藥前或組間比較各組動物的收縮壓、舒張壓及平均動脈壓，心律及心率，心電圖的P、QRS、ST和T波及P~R間期的變化。判定供試品對心血管系統(tǒng)有無影響。5.2心血管系統(tǒng)檢查5.3呼吸系統(tǒng)系統(tǒng)檢查（一）實驗?zāi)康挠^察新藥主要藥效學(xué)以外的廣泛藥理作用，了解該新藥對機(jī)體呼吸系統(tǒng)的影響，發(fā)現(xiàn)其有意義的作用或潛在的影響，以便合理的用藥，提高療效，或發(fā)現(xiàn)可能發(fā)生的副作用，及其潛在的危害，從而避免不良反應(yīng)的發(fā)生。（二）程序

1.給藥途徑試驗通常采用與臨床及主要藥效學(xué)相一致的途徑。2.給藥劑量及依據(jù)根據(jù)受試新藥臨床擬給藥途徑及主要藥效學(xué)試驗的有效劑量，設(shè)2~3個給藥劑量組，其中低劑量應(yīng)相當(dāng)于主要藥效學(xué)的有效劑量。給藥劑量設(shè)定依據(jù)以《中華人民共和國藥品監(jiān)督管理局中藥新藥研究的技術(shù)要求》為主。3.動物犬，體重12~18kg；或貓，體重2.5~3.5kg；雌、雄兼用。5.3呼吸系統(tǒng)系統(tǒng)檢查4.儀器八導(dǎo)數(shù)據(jù)記錄分析儀及相關(guān)附件；恒流泵。5.分組將符合條件的試驗用犬或貓隨機(jī)分為對照組及供試品的2~3個劑量組。每組至少5只。6.觀察指標(biāo)觀察給藥后對動物呼吸節(jié)律、呼吸頻率及呼吸幅度的影響。7.對呼吸系統(tǒng)檢查戊巴比妥鈉（30mg/kg）麻醉，仰位固定，手術(shù)分離氣管接流量頭，再經(jīng)前置呼吸放大器記錄呼吸流量（ml/min）和呼吸頻率。5.3呼吸系統(tǒng)系統(tǒng)檢查8.補(bǔ)液給藥指標(biāo)記錄分離右側(cè)頸外靜脈，插入導(dǎo)管，經(jīng)恒流泵維持靜脈緩慢輸入生理鹽水；上腹部手術(shù)，做十二指腸插管以備給藥。上述操作完畢，調(diào)