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文檔簡介
實驗12從紅辣椒中分離紅色素12.1實驗目的(1)學習從紅辣椒中分離紅色素的原理和操作方法。(2)熟悉薄層分析和柱層析兩種分離、鑒定技術。12.2實驗原理紅辣椒中含有多種色素,它們在CH2Cl2中的溶解度較高,用其萃取劑,可得到色素的混合物。再通過柱層析分離,可得到較高純度的紅色素,并可通過薄層層析檢驗。12.3操作流程(1)萃取色素
紅辣椒混合色素回流冷卻抽濾蒸餾加沸石,CH2Cl2(2)薄層分析溶解點樣層析計算Rf混合色素(3)柱層析溶解加樣洗脫收集混合色素波譜分析12.4注意事項(1)紅辣椒要干且研細。(2)硅膠G薄板要鋪得均勻,不要太厚。(3)薄板涂好后靜置和活化時間要夠,否則板易裂,且斑點無法分開。(4)劃起始線時,要輕,不要刺破薄層。(5)薄層板浸入展開劑不能超過點樣線,否則樣品不在
薄板上分離而直接溶入展開劑。(6)色譜柱要裝充均勻,不能有斷層。(7)注意廢物處理。12.5問題討論(1)硅膠G薄板失活對結(jié)果有什么影響?(2)點樣時應該注意什么?點樣毛細管太粗會有什么后
果?(3)如果樣品不帶色,如何確定斑點的位置?12.6
參考答案(1)硅膠G薄板失活對結(jié)果有什么影響?
答:硅膠G薄板失活,不同色素在吸附劑上的吸附、解吸附的性能差異小,達不到分離目的。(2)點樣時應該注意什么?點樣毛細管太粗會有什么后果?
答:點樣時,毛細管垂直輕輕地點在原點標記上,毛細管在板上接觸的時間不宜過長。一般樣點直徑在2~3mm。如果毛細管太粗,則樣點直徑過大,影響色譜分離效果。(3)如果樣品不帶色,如何確定斑點的位置?
答:如果樣品本身無色,可把層析
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