第十九章衣原體

衣原體Chlamydiae第十九章

第一節(jié)概述定義：

一類嚴(yán)格真核細(xì)胞內(nèi)寄生，具有獨(dú)特發(fā)育周期，并能通過細(xì)菌濾器的原核細(xì)胞型微生物，歸屬于細(xì)菌學(xué)范疇。

共同特性

有細(xì)胞壁，G－，呈圓形或橢圓形，具有獨(dú)特的發(fā)育周期，類似細(xì)菌的二分裂方式繁殖。

有DNA和RNA兩種核酸，含核糖體；具有嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生性，對(duì)多種抗生素敏感。衣原體科衣原體屬(3個(gè)種)沙眼衣原體鼠衣原體豬衣原體嗜衣原體屬(6個(gè)種)肺炎嗜衣原體鸚鵡熱嗜衣原體獸類嗜衣原體流產(chǎn)嗜衣原體貓嗜性衣原體豚鼠嗜性衣原體衣原體分類四種衣原體的性狀比較（一）發(fā)育周期與形態(tài)染色

包括原體和網(wǎng)狀體

原體（Elementarybody,EB）：呈球形、橢圓形或梨形，直徑0.2～0.4

μm，是發(fā)育成熟的衣原體。具有強(qiáng)感染性，在宿主細(xì)胞外較穩(wěn)定，無繁殖能力。當(dāng)進(jìn)入宿主易感細(xì)胞后，宿主細(xì)胞膜圍于原體外形成空泡，原體在空泡中逐漸發(fā)育，增殖成為網(wǎng)狀體。Giemsa染色呈紫色，Macchiavello染色呈紅色。一、生物學(xué)性狀

網(wǎng)狀體，亦稱始體（Initialbody）：體積較大，直徑0.5～1.0

μm，圓形或橢圓形，電子致密度較低，無胞壁，代謝活躍，以二分裂方式繁殖，在空泡內(nèi)增殖成許多子代原體。成熟的子代原體從被破壞的感染細(xì)胞中釋放，再感染新的易感細(xì)胞，開始新的發(fā)育周期，每個(gè)發(fā)育周期約48～72

h。網(wǎng)狀體是衣原體發(fā)育周期中的繁殖型，不具感染性，Macchivello染色呈藍(lán)色。衣原體的發(fā)育周期原體和始體的比較性狀原體始體大?。é蘭）0.2～0.40.5～1.0細(xì)胞壁＋-代謝活性-＋胞外穩(wěn)定性強(qiáng)弱感染性強(qiáng)無繁殖能力無強(qiáng)RNA:DNA比1:13:1（二）培養(yǎng)特性

雞胚接種：6～8日齡雞胚卵黃囊中繁殖，感染后3～6天致雞胚死亡，并可在卵黃囊膜中找到包涵體、原體和始體顆粒。

組織細(xì)胞培養(yǎng)：可在HeLa、McCoy或HL等細(xì)胞中生長(zhǎng)良好，可將接種有標(biāo)本的細(xì)胞培養(yǎng)管離心沉淀以促使衣原體穿入細(xì)胞，在細(xì)胞培養(yǎng)管中加入代謝抑制物。（三）抗原結(jié)構(gòu)

屬特異性抗原：位于胞壁的共同抗原為脂多糖，類似于G－菌的脂蛋白-脂多糖復(fù)合物，可用補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)檢測(cè)。

種特異性抗原：大多數(shù)衣原體種特異性抗原位于主要外膜蛋白（majoroutermembrane

protein,MOMP）上，可用補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)和中和試驗(yàn)檢測(cè)鑒別不同種衣原體。

型特異性抗原：根據(jù)MOMP可變區(qū)氨基酸序列的不同，可將每種衣原體分為不同的血清型或生物型（biovar）。（四）抵抗力

衣原體耐冷不耐熱，60℃僅能存活5～10

min；在-60℃感染性可保持5年，液氮內(nèi)可保存10年以上，冷凍干燥保存30年以上仍可復(fù)蘇。

對(duì)常用消毒劑敏感，紫外線照射可迅速滅活。

四環(huán)素、氯霉素、強(qiáng)力霉素和紅霉素等抗生素有抑制衣原體繁殖的作用。（一）致病性

能產(chǎn)生類似G－菌內(nèi)毒素的毒性物質(zhì)，能抑制宿主細(xì)胞代謝，直接破壞宿主細(xì)胞。

MOMP能阻止吞噬體與溶酶體融合，表位易變異，在體內(nèi)可逃避特異性抗體的中和作用而繼續(xù)感染細(xì)胞。

熱休克蛋白（HSP）能刺激機(jī)體巨噬細(xì)胞產(chǎn)生TNF-α、IL-1、IL-6等炎癥性細(xì)胞因子。二、致病性與免疫性二、致病性與免疫性（二）免疫性

產(chǎn)生特異性細(xì)胞免疫和體液免疫，以細(xì)胞免疫為主。第二節(jié)

沙眼衣原體衣原體發(fā)現(xiàn)

1956年湯飛凡等首次分離培養(yǎng)出沙眼衣原體，無可爭(zhēng)辯地結(jié)束了半個(gè)多世紀(jì)關(guān)于沙眼病原的爭(zhēng)論。他是世界上發(fā)現(xiàn)重要病原體的第一個(gè)中國(guó)人。生物分型

沙眼生物型（Biovartrachoma）

性病淋巴肉芽腫生物型（biovarlymphogramulomavenereum,LGV）一、生物學(xué)性狀（一）形態(tài)染色

原體為圓形或橢圓形，Giemsa染色呈紫紅色。原體能合成糖原，故被碘溶液染成棕褐色。網(wǎng)狀體核質(zhì)分散，Giemsa染色為深藍(lán)或暗紫色。碘染色沙眼衣原體始體的鏡下形態(tài)（Giemsa染色）（二）血清學(xué)分型

根據(jù)MOMP表位氨基酸序列的差異，將沙眼衣原體分為19個(gè)血清型，其中沙眼生物型包括15個(gè)血清型；LGV生物型包括L1、L2、L2a和L3共4個(gè)血清型。二、致病性與免疫性

所致疾病

1.沙眼

通過眼-手-眼途徑直接或間接密切接觸傳播。由A、B、Ba和C血清型引起。早期流淚，后期結(jié)膜瘢痕、瞼內(nèi)翻、倒睫及角膜血管翳引起角膜損害，影響視力或致盲。

2.包涵體結(jié)膜炎

嬰兒結(jié)膜炎，引起急性化膿性結(jié)膜炎（包涵體膿漏眼），不侵犯角膜，能自愈；成人結(jié)膜炎可經(jīng)兩性接觸、經(jīng)手至眼或污染的游泳池水感染，引起濾泡性結(jié)膜炎，又稱游泳池結(jié)膜炎，一般經(jīng)數(shù)周或數(shù)月痊愈，無后遺癥。

3.泌尿生殖道感染

沙眼生物型D～K血清型引起，男性多表現(xiàn)為非淋菌性尿道炎，并可合并附睪炎、前列腺炎、直腸炎等；女性表現(xiàn)為尿道炎、宮頸炎、輸卵管炎與盆腔炎等。

4.嬰幼兒肺炎

5.性病淋巴肉芽腫

侵犯男性腹股溝淋巴結(jié)，引起化膿性淋巴結(jié)炎和慢性淋巴肉芽腫，常形成瘺管；亦可侵犯女性會(huì)陰、肛門、直腸，引起會(huì)陰-肛門-直腸組織狹窄。三、微生物學(xué)檢查法（一）直接涂片鏡檢

取結(jié)膜刮片，Giemsa或碘液及熒光抗體染色鏡檢，觀察上皮細(xì)胞漿內(nèi)有無包涵體。沙眼衣原體感染宮頸刮取物直接圖片（熒光染色）沙眼衣原體包涵體的鏡下形態(tài)（碘染色）（二）分離培養(yǎng)

取感染組織的滲出液或刮取物，接種于雞胚卵黃囊或傳代細(xì)胞，再用IFA或ELISA檢測(cè)培養(yǎng)物中的衣原體。（三）衣原體抗原與核酸組分檢測(cè)

ELISA：檢測(cè)沙眼衣原體LPS和MOMP

PCR和LCR（鏈接酶鏈反應(yīng)）等擴(kuò)增技術(shù)檢測(cè)沙眼衣原體DNA預(yù)防重點(diǎn)是注意個(gè)人衛(wèi)生，避免直接或間接的接觸傳染。治療藥物選用強(qiáng)力霉素、羅紅霉素、阿奇霉素、加替沙星等。目前尚無有效的沙眼衣原體疫苗，MOMP是其主要候選抗原。由于MOMP的多型性，其疫苗不易對(duì)所有型別沙眼衣原體都產(chǎn)生保護(hù)性，故增加了MOMP作為疫苗的難度。四、防治原則第三節(jié)

肺炎衣原體

肺炎衣原體是衣原體屬的一個(gè)新種。

最初分離的兩株病原體：1965年自一名臺(tái)灣小學(xué)生眼結(jié)膜中分離得到的一株TW-183（Taiwan-183）。1983年自美國(guó)西雅圖一位急性呼吸道感染病人的咽部分離出另一株AR-39（acuterespiratory-39)，后發(fā)現(xiàn)這兩株衣原體為同一菌株，乃命名為TWAR。（一）形態(tài)染色

原體直徑為0.38

μm，電鏡下呈典型的梨形，并有清晰的周漿間隙，Giemsa染色呈紫紅色，該法對(duì)細(xì)胞內(nèi)包涵體的定位比碘染法敏感。一、生物學(xué)性狀一、生物學(xué)性狀（二）細(xì)胞培養(yǎng)

McCoy和HeLa細(xì)胞，但都很難用于連續(xù)傳代。目前常用HEp-2和HL細(xì)胞系，其在培養(yǎng)肺炎嗜衣原體的敏感性方面要高于前兩者。所致疾病易引起肺炎、支氣管炎、咽炎和鼻竇炎等。起病緩慢，臨床癥狀與肺炎支原體相似，表現(xiàn)為咽痛、咳嗽、咳痰、發(fā)熱等，一般癥狀較輕。肺炎嗜衣原體與冠心病、動(dòng)脈粥樣硬化等慢性病的發(fā)生密切相關(guān)，但其具體機(jī)制尚待深入研究。二、致病性與免疫性

病原學(xué)檢查

先直接涂片，觀察包涵體；

以熒光或酶標(biāo)記的種特異性單克隆抗體直接檢測(cè)標(biāo)本中肺炎嗜衣原體抗原。三、微生物學(xué)檢查法三、微生物學(xué)檢查法

血清學(xué)方法

微量免疫熒光試驗(yàn)（micro-immunofluorescencetest,MIF）被稱為“金標(biāo)準(zhǔn)”。

凡雙份血清抗體滴度增高4倍或以上，或單份血清IgM抗體滴度≥1:16，或IgG抗體滴度≥1:512，可確定為急性感染，IgG≥1:16表示為既往感染。第四節(jié)

鸚鵡熱嗜衣原體生物學(xué)性狀原體呈球形或卵圓形。網(wǎng)狀體呈球形或不規(guī)則形態(tài)。原體在細(xì)胞空泡中增殖，形成結(jié)構(gòu)疏松、不含糖原、碘染色呈陰性的包涵體。至少可以分為6個(gè)血清型致病性經(jīng)呼吸道、破損皮膚、粘膜或結(jié)膜感染臨床表現(xiàn)多為非典型性肺炎微生物檢查取患者血、痰標(biāo)本或咽拭子直接涂片染色觀察包涵體。IFA或ELISA檢測(cè)