丹參藥效學實驗 離體蛙心 實驗

丹參的藥效學實驗

實驗組號：第---組實驗組員：------------------河南中醫(yī)學院2010級研究生一班中藥藥理實驗實驗內(nèi)容介紹

實驗立題

實驗目的

實驗原理

實驗材料實驗方法實驗過程實驗結(jié)果記錄失敗原因分析與討論注意事項出處：《神農(nóng)本草經(jīng)》。來源：本品為雙子葉植物唇形科丹參的干燥根及根莖。性苦，味微寒。歸心、肝經(jīng)。功效：活血調(diào)經(jīng)，祛瘀止痛，涼血消癰，清心除煩，養(yǎng)血安神。藥理研究①強心

②擴張血管

③抗血栓形成④改善微循環(huán)促進組織的修復與再生作用保肝抗菌降血脂實驗立題(丹參簡介）實驗立題（實驗題目）丹參強心的藥效學實驗

丹參離體蛙心實驗實驗目的觀察丹參對離體心臟心率及心肌收縮力的影響，探索丹參的強心作用。掌握離體心臟的制備方法。掌握藥理科研實驗設(shè)計的一般思路與方法。實驗原理心肌具有自動節(jié)律性收縮的特性，可用人工灌流的方法，研究心臟活動的規(guī)律及特點；還可觀察灌流液成分的改變對離體心臟活動的影響。丹參具有強心作用。心肌細胞內(nèi)Ca2＋含量增高，使心肌收縮能力增強，故在實驗中，可用低鈣任氏液灌注蛙心，使心臟的收縮減弱，可以提高心肌對丹參的敏感性。。實驗材料儀器：蛙板、探針、剪刀、小鑷子、雙凹夾、長柄木夾、絲線、斯氏蛙心套管、記錄裝置（BL-420電腦記錄儀及肌張力轉(zhuǎn)能器)、

蛙心夾、鐵支架、lml注射器、鐵架臺（包括附屬夾子2個）、50燒杯2個。藥品：任氏液、低鈣任氏液（所含CaCl2量為一般任氏液的1/3，其它成分不變）、丹參注射液。動物：牛蛙2只實驗方法打開電腦，連接BL-420系統(tǒng)制備心臟離體測定實驗方法備打開電腦BL-420系統(tǒng)選擇相應信號通道選擇張力實驗調(diào)節(jié)生物信號編輯實驗相關(guān)信息（實驗題目，等）開始實驗信號曲線保存（另存）打印連接BL-410系統(tǒng)停止實驗打印取牛蛙1只，用探針破壞腦及脊髓，背位固定于蛙板上。剪開胸部皮膚，再剪除胸部肌肉及胸骨，打開胸腔，剪破心包膜，暴露心臟。在主動脈分支處下穿一線，打好松結(jié)，備結(jié)扎套管用。于左主動脈上剪一“V”形小口，插入盛有任氏液的蛙心套管，通過主動脈球轉(zhuǎn)向左后方，同時用鑷子輕提動脈球，向插管移動的反方向拉，使套管尖端進入心室。見套管內(nèi)的液面隨著心搏上下波動后，將松結(jié)扎緊并固定在套管的小鉤上。用滴管吸去套管內(nèi)血液，防止血塊堵塞套管。結(jié)扎右側(cè)主動脈，剪斷主動脈，持套管提起心臟，自靜脈竇以下把其余血管一起結(jié)扎（切勿傷及或結(jié)扎靜脈竇），分離周圍組織，在結(jié)扎處下剪斷血管，使心臟離體。并用任氏液連續(xù)換洗，至無血色，使插管內(nèi)保留1.5ml左右的任氏液。將蛙心套管固定于鐵架臺，用帶有長線的蛙心夾在心舒期夾住心尖部，將長線連于張力換能器。實驗方法制備離體心臟正常曲線測定：向?qū)Ч軆?nèi)加入1.5ml任氏液，待心臟曲線穩(wěn)定后，標記（曲線位置），記錄一段正常心臟搏動曲線。低鈣任氏液曲線測定：將導管內(nèi)任氏液吸出，加入1.5ml低鈣任氏，液待心臟曲線穩(wěn)定后，標記，記錄一段心臟搏動曲線。丹參注射液曲線測定：當心臟收縮顯著減弱時，向?qū)Ч軆?nèi)加入丹參注射液，體積依次為：0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml.

※：每次加藥業(yè)前應將上次所加藥液吸出，加入藥液后，液體總體積應相同（1.5ml）.實驗方法測量實驗過程第一次實驗：離體心臟制備時，由于分離心包膜時，將靜脈竇下面的靜脈血管剪斷，沒有結(jié)扎，再加上結(jié)扎不嚴實，漏液嚴重；在加丹參注射液時，由于劑量過大，心臟停止跳動。第二次實驗：離體心臟制備時，結(jié)果與第一次一樣（靜脈竇下面的靜脈血管不易辨認）--將靜脈竇下面的漏液處用絲線結(jié)扎，其他漏液處亦重新結(jié)扎，幾乎不再漏液；在加藥液過程中，加低鈣任氏液之前一直正常，但低鈣液加入一段時間后，曲線劇變，后加丹參液，心臟停止跳動。實驗結(jié)果記錄及分析(一）

實驗結(jié)果記錄及分析(二）

加入低鈣任氏液一段時間后（加丹參前），曲線劇變圖結(jié)果分析①第一只牛蛙心臟：由于漏液嚴重，及加藥液過多，心臟停止跳動，實驗失敗。②第二只牛蛙心臟：在加入低鈣任氏液一段時間后，（不正常原因）曲線劇烈變化，在當加入藥液后停止跳動，實驗失敗。實驗失敗原因分析與討論原因分析：

①加藥量過大，導致心臟死亡（？為什么一加藥液，曲線立即變?yōu)榻埔粭l直線？）

②外界氣溫較低，心臟暴露空氣中時間太長。③在靜脈血管被剪斷后，從心臟重新結(jié)扎時，可能對心臟功能有一定影響。問題討論：

①為什么剛加藥液，曲線立即變?yōu)榻埔粭l直線？

②為什么心臟曲線出現(xiàn)劇烈變化？a.外加環(huán)境溫度低，心臟出現(xiàn)的一種反應

實驗注意事項制備離體心臟時，勿傷及靜脈竇，且在分離靜脈竇下端心包膜時，一定要仔細，勿將于血管剪斷。在整個實驗過程中，應保持套管內(nèi)液面高度不變，以保證心臟固定的負荷。在實驗過程中，基線的位置、放大倍數(shù)、描記速度應始終一致。蛙心夾應在心