丹參藥效學(xué)實(shí)驗(yàn) 離體蛙心 實(shí)驗(yàn)

丹參的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)組號：第---組實(shí)驗(yàn)組員：------------------河南中醫(yī)學(xué)院2010級研究生一班中藥藥理實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容介紹

實(shí)驗(yàn)立題

實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

實(shí)驗(yàn)原理

實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)過程實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄失敗原因分析與討論注意事項(xiàng)出處：《神農(nóng)本草經(jīng)》。來源：本品為雙子葉植物唇形科丹參的干燥根及根莖。性苦，味微寒。歸心、肝經(jīng)。功效：活血調(diào)經(jīng)，祛瘀止痛，涼血消癰，清心除煩，養(yǎng)血安神。藥理研究①強(qiáng)心

②擴(kuò)張血管

③抗血栓形成④改善微循環(huán)促進(jìn)組織的修復(fù)與再生作用保肝抗菌降血脂實(shí)驗(yàn)立題(丹參簡介）實(shí)驗(yàn)立題（實(shí)驗(yàn)題目）丹參強(qiáng)心的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)

丹參離體蛙心實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察丹參對離體心臟心率及心肌收縮力的影響，探索丹參的強(qiáng)心作用。掌握離體心臟的制備方法。掌握藥理科研實(shí)驗(yàn)設(shè)計的一般思路與方法。實(shí)驗(yàn)原理心肌具有自動節(jié)律性收縮的特性，可用人工灌流的方法，研究心臟活動的規(guī)律及特點(diǎn)；還可觀察灌流液成分的改變對離體心臟活動的影響。丹參具有強(qiáng)心作用。心肌細(xì)胞內(nèi)Ca2＋含量增高，使心肌收縮能力增強(qiáng)，故在實(shí)驗(yàn)中，可用低鈣任氏液灌注蛙心，使心臟的收縮減弱，可以提高心肌對丹參的敏感性。。實(shí)驗(yàn)材料儀器：蛙板、探針、剪刀、小鑷子、雙凹夾、長柄木夾、絲線、斯氏蛙心套管、記錄裝置（BL-420電腦記錄儀及肌張力轉(zhuǎn)能器)、

蛙心夾、鐵支架、lml注射器、鐵架臺（包括附屬夾子2個）、50燒杯2個。藥品：任氏液、低鈣任氏液（所含CaCl2量為一般任氏液的1/3，其它成分不變）、丹參注射液。動物：牛蛙2只實(shí)驗(yàn)方法打開電腦，連接BL-420系統(tǒng)制備心臟離體測定實(shí)驗(yàn)方法備打開電腦BL-420系統(tǒng)選擇相應(yīng)信號通道選擇張力實(shí)驗(yàn)調(diào)節(jié)生物信號編輯實(shí)驗(yàn)相關(guān)信息（實(shí)驗(yàn)題目，等）開始實(shí)驗(yàn)信號曲線保存（另存）打印連接BL-410系統(tǒng)停止實(shí)驗(yàn)打印取牛蛙1只，用探針破壞腦及脊髓，背位固定于蛙板上。剪開胸部皮膚，再剪除胸部肌肉及胸骨，打開胸腔，剪破心包膜，暴露心臟。在主動脈分支處下穿一線，打好松結(jié)，備結(jié)扎套管用。于左主動脈上剪一“V”形小口，插入盛有任氏液的蛙心套管，通過主動脈球轉(zhuǎn)向左后方，同時用鑷子輕提動脈球，向插管移動的反方向拉，使套管尖端進(jìn)入心室。見套管內(nèi)的液面隨著心搏上下波動后，將松結(jié)扎緊并固定在套管的小鉤上。用滴管吸去套管內(nèi)血液，防止血塊堵塞套管。結(jié)扎右側(cè)主動脈，剪斷主動脈，持套管提起心臟，自靜脈竇以下把其余血管一起結(jié)扎（切勿傷及或結(jié)扎靜脈竇），分離周圍組織，在結(jié)扎處下剪斷血管，使心臟離體。并用任氏液連續(xù)換洗，至無血色，使插管內(nèi)保留1.5ml左右的任氏液。將蛙心套管固定于鐵架臺，用帶有長線的蛙心夾在心舒期夾住心尖部，將長線連于張力換能器。實(shí)驗(yàn)方法制備離體心臟正常曲線測定：向?qū)Ч軆?nèi)加入1.5ml任氏液，待心臟曲線穩(wěn)定后，標(biāo)記（曲線位置），記錄一段正常心臟搏動曲線。低鈣任氏液曲線測定：將導(dǎo)管內(nèi)任氏液吸出，加入1.5ml低鈣任氏，液待心臟曲線穩(wěn)定后，標(biāo)記，記錄一段心臟搏動曲線。丹參注射液曲線測定：當(dāng)心臟收縮顯著減弱時，向?qū)Ч軆?nèi)加入丹參注射液，體積依次為：0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml.

※：每次加藥業(yè)前應(yīng)將上次所加藥液吸出，加入藥液后，液體總體積應(yīng)相同（1.5ml）.實(shí)驗(yàn)方法測量實(shí)驗(yàn)過程第一次實(shí)驗(yàn)：離體心臟制備時，由于分離心包膜時，將靜脈竇下面的靜脈血管剪斷，沒有結(jié)扎，再加上結(jié)扎不嚴(yán)實(shí)，漏液嚴(yán)重；在加丹參注射液時，由于劑量過大，心臟停止跳動。第二次實(shí)驗(yàn)：離體心臟制備時，結(jié)果與第一次一樣（靜脈竇下面的靜脈血管不易辨認(rèn)）--將靜脈竇下面的漏液處用絲線結(jié)扎，其他漏液處亦重新結(jié)扎，幾乎不再漏液；在加藥液過程中，加低鈣任氏液之前一直正常，但低鈣液加入一段時間后，曲線劇變，后加丹參液，心臟停止跳動。實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄及分析(一）

實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄及分析(二）

加入低鈣任氏液一段時間后（加丹參前），曲線劇變圖結(jié)果分析①第一只牛蛙心臟：由于漏液嚴(yán)重，及加藥液過多，心臟停止跳動，實(shí)驗(yàn)失敗。②第二只牛蛙心臟：在加入低鈣任氏液一段時間后，（不正常原因）曲線劇烈變化，在當(dāng)加入藥液后停止跳動，實(shí)驗(yàn)失敗。實(shí)驗(yàn)失敗原因分析與討論原因分析：

①加藥量過大，導(dǎo)致心臟死亡（？為什么一加藥液，曲線立即變?yōu)榻埔粭l直線？）

②外界氣溫較低，心臟暴露空氣中時間太長。③在靜脈血管被剪斷后，從心臟重新結(jié)扎時，可能對心臟功能有一定影響。問題討論：

①為什么剛加藥液，曲線立即變?yōu)榻埔粭l直線？

②為什么心臟曲線出現(xiàn)劇烈變化？a.外加環(huán)境溫度低，心臟出現(xiàn)的一種反應(yīng)

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)制備離體心臟時，勿傷及靜脈竇，且在分離靜脈竇下端心包膜時，一定要仔細(xì)，勿將于血管剪斷。在整個實(shí)驗(yàn)過程中，應(yīng)保持套管內(nèi)液面高度不變，以保證心臟固定的負(fù)荷。在實(shí)驗(yàn)過程中，基線的位置、放大倍數(shù)、描記速度應(yīng)始終一致。蛙心夾應(yīng)在心