人體及動物生理學(xué)實驗

人體及動物

生理學(xué)實驗1實驗題目學(xué)時實驗一實驗?zāi)康?、要求、實驗報告的書寫、實驗室?guī)則；常用生理實驗技術(shù)、生理儀器的使用3實驗二坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備刺激強度和頻率與骨骼肌收縮的關(guān)系3實驗三神經(jīng)干復(fù)合電位的引導(dǎo)、傳導(dǎo)速度的測定3實驗四血細胞計數(shù)與紅細胞溶解3實驗五血紅蛋白含量測定與ABO血型鑒定3實驗六蛙心起搏點的觀察、期前收縮與代償間歇3實驗七蛙類離體心臟灌流3實驗八人體動脈血壓測定;心音聽診;心電圖描記;呼吸通氣量測定3實驗九家兔動脈血壓的神經(jīng)、體液調(diào)節(jié)3實驗十家兔呼吸運動調(diào)節(jié);胸內(nèi)負壓測定3實驗?zāi)夸?實驗十一家兔離體小腸段平滑肌生理特性

3實驗十二家兔尿生成的調(diào)節(jié)

3實驗十三反射時的測定反射弧的分析3實驗十四家兔大腦皮質(zhì)運動區(qū)的刺激效應(yīng)與去大腦僵直3實驗十五視力、視野和盲點的測定3總計

45實驗?zāi)夸?實驗一

人體及動物生理學(xué)實驗

常用儀器、設(shè)備及器械的使用

實驗?zāi)康摹⒁蟆嶒瀳蟾娴臅鴮?、實驗室?guī)則；常用生理實驗技術(shù)、生理儀器的使用。4生理學(xué)實驗?zāi)康氖箤W(xué)生正確使用生理學(xué)的基本實驗儀器，初步掌握基本操作技術(shù)；使學(xué)生了解獲得知識的基本方法和初步分析整理實驗結(jié)果的能力，并借以驗證和鞏固理論課的某些基本理論。在實驗過程中培養(yǎng)學(xué)生科學(xué)的思維方法、實事求是的科學(xué)態(tài)度和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶W(xué)風(fēng)。通過實驗逐步培養(yǎng)學(xué)生具有敏銳的觀察力和分析能力以及獨立思考和解決問題的能力。同時培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新意識、科學(xué)素養(yǎng)和科研能力。

通過書寫實驗報告，提高學(xué)生分析、歸納問題及文字報答能力。5實驗要求實驗前，學(xué)生必須認真預(yù)習(xí)實驗指導(dǎo)，了解實驗的目的要求、實驗設(shè)計原理、簡要的操作步驟和注意事項，還應(yīng)復(fù)習(xí)與本實驗有關(guān)的理論部分，以提高實驗的目的性和主動性，達到進一步鞏固有關(guān)理論知識的效果。6實驗中：應(yīng)認真聽講，按教師要求進行各項實驗操作。仔細觀察、認真記錄實驗中出現(xiàn)的各種生理現(xiàn)象，并對引起生理現(xiàn)象的原因、意義進行分析和思考。實驗用器材、物品要擺放整齊，便于操作。注意保持實驗桌面的清潔衛(wèi)生，隨時清除污物。實驗桌上不得放置與實驗無關(guān)的物品。愛護儀器和實驗動物，注意節(jié)約實驗材料。不經(jīng)教師許可，不得動用他人或他組的儀器用品，公用物品在使用完后應(yīng)放回原處，以免影響他人使用。遵守實驗室規(guī)則。實驗結(jié)束前請教師審查實驗結(jié)果。如有錯誤，及時補救。未經(jīng)教師許可，學(xué)生不得擅自終止實驗或離開實驗室。7實驗后：應(yīng)將實驗用具整理就緒，放回原處。所有手術(shù)器械、手術(shù)桌和其它手術(shù)用品擦洗干凈，儀器用干布擦干凈。實驗用具如有破損或缺少，及時報告指導(dǎo)教師。做好實驗室的清潔衛(wèi)生工作。按教師要求妥善處理實驗動物，不可自行處理。尤其不能將為處死的動物隨手丟棄。實驗后，關(guān)閉水源、電源，經(jīng)教師允許放可離開實驗室。整理實驗記錄，按教師要求書寫實驗報告并及時交給教師批閱。如發(fā)現(xiàn)不合格要求的經(jīng)指明問題，退回重寫。8實驗報告的書寫實驗報告是對實驗的全面總結(jié)；是理論聯(lián)系實際和應(yīng)用知識的重要環(huán)節(jié)，是對學(xué)生撰寫科學(xué)論文能力的初步培養(yǎng)，可為今后的科學(xué)研究打下良好的基礎(chǔ)。

實驗報告要文字簡練、條理清楚、觀點明確、字跡清楚，正確使用標(biāo)點符號。實驗報告有一定的格式：內(nèi)容要求：實驗題目、實驗?zāi)康?、實驗原理、實驗器材、實驗步驟、實驗結(jié)果、分析討論、結(jié)論。重點強調(diào)實驗結(jié)果的處理和分析討論內(nèi)容。9實驗報告有一定的格式：姓名、班級、指導(dǎo)教師、學(xué)號、組別、日期實驗序號及實驗題目、實驗室、室溫、氣壓、濕度、同組人、日期實驗題目實驗?zāi)康膶嶒炘?/p>

實驗器材

實驗步驟

實驗結(jié)果分析及討論結(jié)論10實驗結(jié)果是實驗報告中最為重要的部分，應(yīng)將實驗過程中所觀察到的現(xiàn)象經(jīng)過處理后的原始資料進行真實、正確、詳細地描述。有記錄曲線的應(yīng)進行合理的剪切、歸類、在實驗報告的適當(dāng)位置進行粘貼，并加以標(biāo)注和必要的文字說明，如曲線的序號、名稱；施加刺激（藥物）的標(biāo)記。有的實驗結(jié)果是數(shù)據(jù)，可繪制成圖表進行表達。實驗結(jié)果11圖５洋蔥液對家兔離體小腸平滑肌收縮活動的影響12濃度(g/ml)幅度(g)頻率(次/min)加藥前加藥后加藥前加藥后0.601.251.862.500.41±0.1970.40±0.2410.41±0.2630.41±0.2370.55±0.247*0.61±0.253**0.65±0.239**0.67±0.282**12.83±0.99113.15±0.98313.20±1.07813.10±0.95013.20±1.14113.20±0.91513.60±1.06813.20±0.915表1不同濃度洋蔥液對家兔離體小腸平滑肌活動的影響

*

p﹤0.05有顯著意義；**p﹤0.01有非常顯著意義13討論和結(jié)論討論和結(jié)論是實驗報告中最具有創(chuàng)造性的工作部分，是學(xué)生獨立思考、獨立工作能力的具體體現(xiàn)，因此應(yīng)該嚴(yán)肅、認真，不能盲目抄襲書本和他人的實驗報告。進行實驗結(jié)果的討論，首先要判斷實驗結(jié)果是否為預(yù)期的，然后根據(jù)已掌握的課堂理論或查閱資料所獲得的知識，對實驗結(jié)果進行有針對性的解釋、分析，并指出其生理意義。如果出現(xiàn)和預(yù)期的結(jié)果相矛盾的地方，也應(yīng)分析其產(chǎn)生的原因。14實驗結(jié)論實驗結(jié)論是從試驗結(jié)果中進一步歸納出來的一般性、概括性的推理，即對本次實驗所能驗證的概念、原理或理論的簡明總結(jié)。結(jié)論應(yīng)與本次實驗的目的相呼應(yīng)。結(jié)論的書寫要簡明扼要，概括性強，不必要再羅列具體的結(jié)果，所引用的課外參考資料應(yīng)注明出處。15實驗室規(guī)則遵守紀(jì)律，因故外出或早退應(yīng)向老師請假。進實驗室必須穿實驗服。實驗時應(yīng)嚴(yán)肅認真，不進行與實驗無關(guān)的活動。實驗者必須先熟悉儀器使用要點，儀器損壞或失靈，應(yīng)請老師修理或調(diào)換。違章操作致使儀器損壞者，應(yīng)按章賠償。實驗器械，用后洗凈擦干，如數(shù)歸還。若有損壞或遺失，應(yīng)及時報告，酌情賠償。愛護公物，節(jié)約器材、藥品和動物。實驗物品不得擅自帶離實驗室。實驗結(jié)束，將本組實驗器材和桌凳收拾干凈，將動物尸體及污物投放指定處。實驗室由各組輪流打掃，保持整潔。16四、生理學(xué)實驗常用儀器、設(shè)備的使用

生理學(xué)常用刺激器材及使用方法1.刺激器（刺激參數(shù)—刺激強度、時間、頻率）2.刺激電極3.鋅銅弓生理學(xué)常用記錄器材及使用方法※1.生物機能實驗信號采集處理系統(tǒng)(BL-420)P25-262.打印機3.多導(dǎo)生理記錄儀其它：1.萬能支臺2.張力換能器3.血壓換能器4.記滴器17生物機能實驗信號采集處理系統(tǒng)(BL-420)掌握開機與關(guān)機、實驗工作界面進入與退出的操作方法；掌握通道的選擇輸入方法與不同生理信號的輸入方法；掌握選擇掃描速度的方法并認清橫坐標(biāo)表示的時間信號；掌握控制掃描開關(guān)（開、暫停與停止實驗）的方法，并學(xué)會保存實驗記錄、反演記錄、剪輯、復(fù)制實驗結(jié)果的方法；學(xué)習(xí)刺激器參數(shù)設(shè)置中，各項刺激參數(shù)的調(diào)節(jié)方法與刺激標(biāo)記的使用方法；學(xué)習(xí)編輯實驗標(biāo)記的方法；學(xué)習(xí)生理信號的顯示與記錄方法。18五、生理學(xué)實驗常用手術(shù)臺、手術(shù)器械的使用方法

1.手術(shù)臺：兔、狗、鼠192.手術(shù)器械的種類及使用（實驗指導(dǎo)P4-8）（1）手術(shù)刀：主要用于切開皮膚或臟器。執(zhí)刀方法----執(zhí)弓式、執(zhí)筆式、握持式、反挑式（2）手術(shù)剪：主要用于剪皮膚或肌肉等粗軟組織。分類：尖頭剪、鈍頭剪，直剪、彎剪，剪毛剪，眼科剪（3）手術(shù)鑷：主要用于夾持或牽拉切口的皮膚或肌肉組織。分類：分大、中、小、眼科鑷，圓頭、尖頭，直頭、彎頭，有齒、無齒。持鑷姿勢：類似于執(zhí)筆式。（4）金冠剪：可用于剪開皮膚、內(nèi)臟、肌肉、骨骼及繩線等。持剪姿勢同一般手術(shù)剪。（5）毀髓針（6）玻璃分針：專用于分離神經(jīng)與血管的工具。尖端圓滑，直頭或彎頭。持玻璃分針的姿勢同執(zhí)筆式。（7）止血鉗：直止血鉗、彎止血鉗（8）其他：持針器、咬骨鉗、顱骨鉆、縫針、動脈夾等20六、生理學(xué)實驗常用溶液及配制方法1.常用鹽溶液：（P210）生理鹽水（兩棲類6.5~7.0、哺乳類）、任氏液、臺式液、洛（樂）氏液2.常用動物麻醉藥物劑量和使用方法（P8-10）局部麻醉：0.5%~1.0%鹽酸普魯卡因、2%鹽酸可卡因全身麻醉：乙醚、2%~3%戊巴比妥鈉、20%~25%氨基甲酸乙酯（烏拉坦）、苯巴比妥鈉3.常用抗凝劑的配制：肝素、草酸鈉、檸檬酸鈉21七、動物實驗的基本操作技術(shù)1.常用動物的捕捉方法2.常用動物麻醉方法：靜脈注射、腹腔注射、肌肉注射3.常用動物的固定方法：背位（仰臥位）固定法、腹位（俯臥位）固定法、蛙類固定法4.常用手術(shù)的基本操作（1）手術(shù)切口與止血（2）手術(shù)結(jié)（3）頸部手術(shù)（4）腹部手術(shù)（5）股部手術(shù)5.采血技術(shù)22

坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備

刺激強度與骨骼肌收縮的關(guān)系

骨骼肌單收縮的分析

骨骼肌收縮的總和與強直收縮實驗二23[目的要求]1.學(xué)習(xí)坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備方法。

2.觀察不同的刺激強度和頻率與骨骼肌收縮形式之間的關(guān)系。24腓腸肌由許多肌纖維組成，刺激腓腸肌時，不同的刺激強度會引起肌肉的不同反應(yīng)。當(dāng)刺激強度小時，不引起肌肉發(fā)生收縮反應(yīng)，此時的刺激為閾下刺激。當(dāng)全部肌纖維同時收縮時，則出現(xiàn)最大的收縮反應(yīng)。這時即使再增大刺激強度，肌肉收縮的力量也不再隨之加大?？梢砸鸺∪獍l(fā)生最大收縮反應(yīng)的最小刺激強度為最適刺激強度。[實驗原理1]（刺激強度與骨骼肌收縮的關(guān)系）25[實驗原理2]（骨骼肌收縮的總和與強直收縮）給具有興奮性的肌肉一個短促的閾刺激，肌肉就發(fā)生一次迅速的收縮，稱為單收縮。若給予兩個或兩個以上的閾刺激時，可因刺激的頻率不同而呈現(xiàn)不同的收縮形式。如果兩個或多個刺激的間隔大于該肌肉單收縮的全部時間，則引起波型上互相分開的兩個或多個單收縮；若后一個刺激落在前一次收縮的舒張期，就會形成兩個或多個單收縮不同程度的總合，其收縮幅度比單收縮高。在一定范圍內(nèi)，刺激間隔越小，收縮幅度就越高，稱為復(fù)合收縮。若多個刺激引起波型呈鋸齒狀的收縮曲線，稱不完全強直收縮，若多個刺激間隔進一步縮小，使后一個刺激落在前一個收縮的收縮期內(nèi)，肌肉就處于完全持久的收縮狀態(tài)，產(chǎn)生一個沒有舒張期的持續(xù)的收縮曲線，叫做完全強直收縮。26[實驗器材]1.藥品與器材

任氏液。蛙板，玻璃板，蛙類手術(shù)器械1套(粗剪刀、組織剪、眼科剪各1把，大、小鑷子各1把，探針1根，玻璃分針2根)，培養(yǎng)皿，鋅銅弓，絲線，圖釘，污物缸，肌動器，張力換能器；BL-420生物機能實驗系統(tǒng)。2.實驗對象蟾蜍。27[方法步驟]

1.制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本①破壞腦和脊髓-圖A②剪去軀干上部及內(nèi)臟-圖B③剝皮、洗手及器械、分離兩腿④制作坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本-圖C.D⑤用鋅銅弓檢查標(biāo)本興奮性ABCD282.將標(biāo)本固定在肌動器內(nèi)，連接張力換能器。3.打開電腦，進入BL-420生物機能實驗系統(tǒng)。實驗項目→神經(jīng)肌肉實驗→

①刺激強度與反應(yīng)的關(guān)系②骨骼肌單收縮的分析③骨骼肌收縮的總和與強直收縮293031①刺激強度與反應(yīng)的關(guān)系打開實驗項目選擇，進入《刺激強度與反應(yīng)的關(guān)系》項目調(diào)節(jié)刺激裝置的設(shè)置啟動波形顯示圖標(biāo)32②骨骼肌單收縮的分析

選用單刺激方式，調(diào)節(jié)刺激強度，使肌肉收縮幅度適中將實驗用通道的掃描速度調(diào)快，啟動刺激開關(guān)。當(dāng)顯示通道出現(xiàn)一個單收縮曲線時，立即點擊暫停圖標(biāo)測量單收縮的三個時程：潛伏期、收縮期和舒張期。33③骨骼肌收縮的總和與強直收縮

（刺激頻率與反應(yīng)的關(guān)系）打開實驗項目選擇，進入《刺激頻率與反應(yīng)的關(guān)系》項目調(diào)節(jié)刺激裝置的設(shè)置啟動波形顯示圖標(biāo)34[結(jié)果]

1.刺激強度與反應(yīng)的關(guān)系（閾下刺激、閾刺激、遇上刺激、最大刺激）352.骨骼肌的單收縮圖骨骼肌單收縮的分析363.單收縮、不完全強直收縮、完全強直收縮37圖刺激頻率與反應(yīng)的關(guān)系38[注意事項]1.實驗過程中經(jīng)常用任氏液濕潤標(biāo)本，以防干燥。2.股骨不可保留過短，否則標(biāo)本不好固定。3.分離神經(jīng)須用玻璃分針，不能用金屬器械。4.避免過長時間地連續(xù)刺激標(biāo)本，以防標(biāo)本疲勞。39[思考題]

1.為什么要用任氏液濕潤標(biāo)本？2.鋅銅弓為什么能夠檢驗神經(jīng)肌肉的興奮性？40坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的制備

神經(jīng)干復(fù)合動作電位的

引導(dǎo)、傳導(dǎo)速度的測定實驗三41[目的要求]學(xué)習(xí)蛙坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的制備。觀察坐骨神經(jīng)干復(fù)合動作電位的波形，并了解其產(chǎn)生的基本原理。了解動作電位在神經(jīng)干上的傳導(dǎo)，學(xué)習(xí)測定其傳導(dǎo)速度測定的方法。42[實驗原理1]神經(jīng)干在受到有效刺激后，可以產(chǎn)生動作電位，標(biāo)志著神經(jīng)發(fā)生興奮。如果在神經(jīng)干另一端引導(dǎo)傳來的興奮沖動，可以引導(dǎo)出雙向的動作電位，如在兩個引導(dǎo)電極之間將神經(jīng)麻醉或損壞，則引導(dǎo)出動作電位即為單向動作電位。神經(jīng)細胞的動作電位是以“全或無”的方式發(fā)生的。坐骨神經(jīng)干是由很多不同類型的神經(jīng)纖維組成的，所以，神經(jīng)干的動作電位是復(fù)合動作電位。復(fù)合動作電位的幅值在一定刺激強度下是隨刺激強度的變化而變化的。43圖神經(jīng)干雙相動作電位44雙相動作電位興奮區(qū)細胞外引導(dǎo)電極檢流計45[實驗原理2]神經(jīng)干受到有效刺激興奮以后，產(chǎn)生的動作電位以脈沖的形式按一定的速度向遠處擴布傳導(dǎo)。不同類型的纖維其傳導(dǎo)興奮的速度是各不相同的。測定神經(jīng)纖維上興奮的傳導(dǎo)速度(v)，在遠離刺激點的不同距離處分別引導(dǎo)其動作電位，兩引導(dǎo)點之間的距離為S，在兩引導(dǎo)點分別引導(dǎo)出的動作電位的時相差為Δt

。再按照公式即可計算其傳導(dǎo)速度：v=s/Δt

46動作電位傳導(dǎo)速度的測定－+SΔt

傳導(dǎo)速度測定

υ=

SΔt刺激器輸入通道R1-Rr1+R2-R2+47圖神經(jīng)沖動傳導(dǎo)速度的測定48[實驗器材]1.儀器與材料：生物信號處理系統(tǒng)、解剖針、手術(shù)剪、眼科剪、圓頭手術(shù)鑷、尖頭手術(shù)鑷、玻璃分針、神經(jīng)屏蔽盒及連接導(dǎo)線，棉花、蛙板、燒杯。2.藥品：任氏液3.動物：蟾蜍495051[方法步驟]1.坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的制備①

毀腦脊髓②剪除軀干上部及內(nèi)臟③剝皮（之后洗凈雙手和用過的全部手術(shù)器械）④完成坐骨神經(jīng)標(biāo)本

分離兩腿游離坐骨神經(jīng)完成坐骨神經(jīng)標(biāo)本52圖蛙坐骨神經(jīng)干標(biāo)本53神經(jīng)干標(biāo)本盒刺激電極與生物信號處理系統(tǒng)的刺激輸出相連。神經(jīng)干標(biāo)本盒兩對引導(dǎo)電極分別接微機生物信號處理系統(tǒng)1、2通道。RM6240C微機生物信號處理系統(tǒng)神經(jīng)干標(biāo)本盒。S+S-E

R1-R1+R2-R2+2.連接實驗裝置543.實驗觀察打開電腦，進入生物機能實驗系統(tǒng)。實驗項目→神經(jīng)肌肉實驗→

①神經(jīng)干動作電位記錄與觀察——雙相動作電位的觀察儀器參數(shù)：1、2通道時間常數(shù)0.02s、濾波頻率1KHz、靈敏度5mV，采樣頻率：100KHz，掃描速度：0.2ms/div。刺激方式：單刺激，刺激幅度1.0V，刺激波寬0.1ms，延遲2ms，同步觸發(fā)。

②測定神經(jīng)干動作電位的傳導(dǎo)速度。55圖神經(jīng)干雙相動作電位[實驗結(jié)果]1.神經(jīng)干雙相動作電位56圖神經(jīng)沖動傳導(dǎo)速度的測定2.神經(jīng)沖動傳導(dǎo)速度的測定57[注意事項]標(biāo)本剝制過程，盡量減少神經(jīng)的損傷；刺激參數(shù)設(shè)置要合理，過大會損毀神經(jīng)。雙刺激的參數(shù)要一致。58[結(jié)果]觀察和記錄神經(jīng)干動作電位并對其產(chǎn)生原理進行分析；測出動作電位傳導(dǎo)的速度59解釋在一定范圍內(nèi)神經(jīng)干動作電位的振幅隨刺激強度而改變，是否與單個神經(jīng)纖維動作電位的“全”或“無”定律相矛盾？[思考題]60實驗四血細胞計數(shù)紅細胞溶解61[目的與要求]1.掌握紅細胞和白細胞人工計數(shù)的方法和原理。2.學(xué)習(xí)測定紅細胞滲透脆性的方法，理解細胞外液滲透壓對維持細胞正常形態(tài)與功能的重要性。3.觀察紅細胞溶血現(xiàn)象62[實驗原理]將一定量的血液經(jīng)一定倍數(shù)的等滲鹽水稀釋后，置于血細胞計數(shù)板的計數(shù)室內(nèi)，計數(shù)一定容積溶液內(nèi)的紅細胞或白細胞，然后再推算出1立方毫米或1L血液內(nèi)的各種細胞數(shù)。紅細胞在高滲氯化鈉溶液中，會失去水分發(fā)生皺縮；在低滲氯化鈉溶液中，會因過多水分進入紅細胞而膨脹，甚至破裂，使血紅蛋白釋出，此即紅細胞溶解。紅細胞對低滲溶液具有不同的抵抗力，這種抵抗力與紅細胞表面積/體積有關(guān)，也即紅細胞有不同的滲透脆性，表面積/體積比值小者抵抗力小(滲透脆性大)；反之，抵抗力大（滲透脆性?。?。63[實驗器材]1.儀器與材料：顯微鏡，血細胞計數(shù)板，蓋玻片，一次性定量毛細取血管（10μl、20μl），消毒棉球，擦鏡紙，5ml小試管（12支），試管架，移液管（1ml及2ml），滴管，玻璃棒，細耳球。2.藥品：紅細胞稀釋液、白細胞稀釋液，蒸餾水，171mmol/L氯化鈉溶液，肝素鈉。3.動物：家兔64[方法步驟]1.血細胞的計數(shù)①采血及稀釋

紅細胞：2.00ml稀釋液+0.01ml血液稀釋倍數(shù)：200白細胞：0.38ml稀釋液+0.02ml血液稀釋倍數(shù)：20②清洗計數(shù)板并熟悉計數(shù)板及計數(shù)室的結(jié)構(gòu)③計數(shù)方法

◆稀釋血液滴入計數(shù)室后，須靜置2—3分鐘，然后低倍鏡下計數(shù)

◆計數(shù)時應(yīng)循一定的路徑以免遺漏或重復(fù)。◆對于分布在劃線上的血細胞，依照“數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右”的原則進行計數(shù)

④計算：

6566672.紅細胞溶血——滲透脆性的測定

取小試管10支，編號后，按下表制成不同濃度的NaCl

溶液。向每一試管中各加一滴血，混勻（切勿用力震蕩），室溫下放置2小時后觀察結(jié)果觀察結(jié)果：試管號12345678910171mmol/LNaCl(ml)1.61.51.41.31.21.11.00.90.80.7蒸餾水（ml）0.91.01.11.21.31.41.51.61.71.8NaCl溶液濃度（%）0.640.600.560.520.480.440.400.360.320.2868[實驗結(jié)果]1.記錄5個中方格中紅細胞數(shù)，并根據(jù)公式換算出每立方毫米血液中紅細胞數(shù)。

紅細胞數(shù)/mm3=5個中格紅細胞數(shù)×100002.記錄四個大方格中白細胞數(shù)，并根據(jù)公式換算出每立方毫米血液中白細胞數(shù)。白細胞數(shù)/mm3=4個大方格白細胞數(shù)×503.仔細觀察各小試管中上下溶液的顏色、透明度等，根據(jù)現(xiàn)象判斷出紅細胞的最小抵抗和最大抵抗的氯化鈉溶液濃度并記錄。69[注意事項]1.血液加入試管后，須充分搖勻，但動作要輕。2.計數(shù)室內(nèi)細胞分布要均勻。紅細胞：各中方格間數(shù)目相差不超過20個；白細胞：各大方格間數(shù)目相差不超過8個。3.混懸液滴入計數(shù)室時，液量要適當(dāng)。4.所用吸管、試管、計數(shù)板等必須十分干凈。70[作業(yè)]1.計算結(jié)果，并分析哪些因素可能會影響血細胞計數(shù)的準(zhǔn)確性？2.判斷紅細胞最大脆性和最小脆性，并結(jié)合實驗現(xiàn)象說明根據(jù)？71實驗五血紅蛋白含量測定ABO血型鑒定72[目的要求]1.掌握測定血紅蛋白含量的基本方法——比色法

2.學(xué)習(xí)鑒定血型的基本方法。3.觀察紅細胞凝集現(xiàn)象，掌握ABO血型鑒定的原理。73[實驗原理1]測定血紅蛋白量的方法很多，常用比色法。比色法即沙利氏比色法。其原理是在一定量血液中加入少許鹽酸，酸不僅使紅細胞膜破壞，而且使原來位于紅細胞的亞鐵血紅素轉(zhuǎn)變成高鐵血紅素（酸化血紅素），后者呈較穩(wěn)定的棕色。將其用蒸餾水稀釋后與血紅蛋白測定計的標(biāo)準(zhǔn)色進行目測比色，即得每100ml血液所含的血紅蛋白克數(shù)或百分率。74血型通常是指紅細胞的血型，是根據(jù)存在于紅細胞膜外表面的特異性抗原(鑲嵌于紅細胞膜上的特異性糖蛋白)來確定的，這種抗原或稱凝集原是由遺傳基因決定的。血清中的抗體或稱凝集素，可與紅細胞膜上不同的相應(yīng)抗原結(jié)合，產(chǎn)生凝集反應(yīng)，最后發(fā)生紅細胞溶解。由于這種現(xiàn)象在臨床上在輸血前必須進行血型鑒定，以確保安全輸血。在血型系統(tǒng)中最重要的是ABO血型系統(tǒng)，其次為Rh系統(tǒng)。[實驗原理2]75ABO血型鑒定原理血型A型（B抗體）B型（A抗體）O型（A、B抗體）AB型（無抗體）A型（A抗原）－＋＋－B型（B抗原）＋－＋－O型（無抗原）－－－－AB型（AB抗原）＋＋＋－據(jù)受試者紅細胞上是否含有凝集原和所含凝集原種類的不同，可將血型分為A、B、AB和O四種基本血型。見下表：76[儀器與材料]血紅蛋白計、0.1mol/L鹽酸溶液、一次性20μl定量毛細取血管、滴管、玻璃棒、蒸餾水、家兔顯微鏡、載玻片、一次性刺血針、消毒牙簽、玻璃棒、鑷子、標(biāo)準(zhǔn)血清（A、B、O型）、生理鹽水、75%酒精棉球、77[方法與步驟]（一）血紅蛋白測定1.熟悉血紅蛋白計的組成及結(jié)構(gòu)2.取0.1mol/L鹽酸至血紅蛋白稀釋管的刻度10處（用百分率計算的那一側(cè)刻度值）。3.用一次性毛細取血管吸血至刻度20μl，并將其注入血紅蛋白稀釋管的鹽酸液內(nèi)，反復(fù)洗滌吸管多次，搖勻放置十分鐘，使鹽酸與紅細胞及其內(nèi)部的血紅蛋白充分作用。4.比色：將稀釋管插入標(biāo)準(zhǔn)比色架兩色柱中央的空格中，并用滴管向稀釋試管內(nèi)逐滴加入蒸餾水并及時混勻，直至顏色與標(biāo)準(zhǔn)玻璃的色柱的顏色相同為止，此時稀釋管上液面的讀數(shù)即100ml血液中血紅蛋白的克數(shù)。78（二）ABO血型鑒定1.取一載玻片，并在左中右位置上方用蠟筆依次注上A、B和AB字樣。2.用滴管分別依次吸抗A血清、抗B血清和抗AB血清各一滴，分別滴在載玻片A、B和AB的下方。3.采血：常規(guī)消毒，穿刺采血部位并采血。4.將血液分別與抗A血清、抗B血清和抗AB血清混勻，在室溫下靜止數(shù)分鐘后觀察凝集結(jié)果。79觀察結(jié)果：80[注意事項]1.一定要準(zhǔn)確掌握進入稀釋管內(nèi)的血液量（20μl）。2.蒸餾水需逐滴加入，多做幾次比色，以免稀釋過量。3.凝血現(xiàn)象的觀察需一定的的時間，必要時需在顯微鏡下觀察。81[作業(yè)]1.得出實驗結(jié)果，并分析哪些因素可能會影響血紅蛋白數(shù)量的準(zhǔn)確性？2.判斷你的血型，并說出你的根據(jù)？82實驗六蛙心起搏點的觀察、期前收縮與代償間歇83[目的要求]1.學(xué)習(xí)暴露蛙類心臟的方法，熟悉心臟結(jié)構(gòu)。2.觀察心臟起搏點以及各部分的自律性高低和心臟的興奮性傳導(dǎo)順序。3.學(xué)習(xí)在體蟾蜍心跳曲線的記錄方法。4.觀察心室在收縮活動的不同時期對額外刺激的反應(yīng)。5.了解期前收縮與代償間歇產(chǎn)生的原因。84[實驗原理]1.兩棲類動物的心臟為兩心房、一心室，心臟的起搏點是靜脈竇。靜脈竇的自動節(jié)律最高，心房次之，心室最低。正常情況下，心臟的活動節(jié)律服從靜脈竇的節(jié)律，其活動順序為：靜脈竇、心房、心室。

兩棲類動物的心臟解剖2.斯氏結(jié)扎：3.心肌細胞的生理特點是具有興奮性、自律性、傳導(dǎo)性、收縮性。心肌細胞興奮性的最大特點是有效不應(yīng)期特別長（收縮期，舒張早期）858687[實驗器材]1.器材：生物信號處理系統(tǒng)，張力換能器，刺激電極，蛙類手術(shù)器械，蛙心夾，絲線，萬能支架2.藥品：任氏液3.動物：蟾蜍88[方法步驟]（一）蛙心起搏點的觀察（看錄像）1.破壞腦脊髓。2.仰臥位固定于蛙板上。3.打開胸腔暴露心臟，觀察心臟的結(jié)構(gòu)。4.斯氏結(jié)扎，記錄結(jié)果。靜脈竇心房心室對照第一扎第二扎表斯氏結(jié)扎后各部位波動頻率（次/分鐘）8990圖蟾蜍心臟的背面觀和腹面觀911.破壞腦脊髓2.仰臥位固定于蛙板上。3.打開胸腔暴露心臟4.蛙心夾于心臟舒張期夾住心尖5.連接實驗裝置，如圖6.選擇合適的刺激強度；分別在心室舒張的早期、中期和晚期給予單個刺激，觀察心跳曲線的變化。

（二）蟾蜍心室的期前收縮與代償間歇9293[實驗結(jié)果]9495961.蟾蜍毀髓時要徹底。2.實驗過程中，應(yīng)經(jīng)常用任氏液濕潤心臟。3.刺激電極要與心室肌接觸良好，應(yīng)避免短路。4.心跳曲線的上升支應(yīng)代表心室收縮，下降支代表心室舒張，如相反則應(yīng)將換能器倒向。5.先用刺激電極刺激蟾蜍的腹壁肌肉，以檢測強度是否適宜。[注意事項]97[思考題]1.正常情況下，為什么靜脈竇是蟾蜍心臟的起搏點？它對潛在起搏點如何控制？2.每次結(jié)扎后會出現(xiàn)什么現(xiàn)象，為什么？3.如何證實心肌有較長的不應(yīng)期？心肌的較長不應(yīng)期有何生理意義？4.期前收縮后一定出現(xiàn)代償間歇嗎？為什么？5.代償間歇是怎樣產(chǎn)生的？6.為何心肌有期前收縮而骨骼肌不會出現(xiàn)？98實驗七蛙類離體心臟灌流99[目的要求]1.學(xué)習(xí)斯氏離體蛙心灌流法。2.了解心肌的生理特性3.觀察鈉離子、鉀離子、鈣離子及腎上腺素（Adr）、乙酰膽堿（Ach）等對離體心臟活動的影響。100[實驗原理]心臟具有自動節(jié)律性收縮的特性，可用人工灌流的方法，研究心臟活動的規(guī)律及特點；還可觀察灌流液成分的改變對離體心臟活動的影響。心肌細胞生理特性表現(xiàn)為：興奮性、傳導(dǎo)性和自動節(jié)律性、收縮性。101心肌細胞電生理特性產(chǎn)生的離子基礎(chǔ)1．心肌的興奮性（1）靜息電位水平------細胞外K+濃度改變：高K+：致細胞內(nèi)外K+濃度梯度減小，靜息電位水平降低，動作電位幅度減小，興奮性增大。

低K+：細胞外K+降低致細胞內(nèi)外K+濃度梯度增大，靜息電位絕對值增大，膜呈超極化狀態(tài)，興奮性降低。（2）Na+通道的性狀------與其興奮時興奮性周期性變化有關(guān)。1022.心肌的傳導(dǎo)性主要取決于動作電位0期去極化的速度和幅度（Na+和Ca2+）可能的解釋是：強的局部電流擴布的距離大，可以使距興奮部位更遠的下游部位受到局部電流的刺激而興奮，故興奮的傳導(dǎo)較快。1033.心肌的自動節(jié)律性（1）最大復(fù)極化電位水平------復(fù)極3期K+外流增加，導(dǎo)致最大復(fù)極化電位絕對值增大，自率性減慢。（2）4期自動除極速度------①遞減性K+外流；②進行性增強的內(nèi)向離子流（主要為Na+）（取決于竇房結(jié)P細胞的自動去極化電位）4.心肌收縮性：依賴細胞外Ca2+濃度。104[儀器與材料]1.動物：蟾蜍。2.器械：斯氏蛙心套管、套管夾、支架、雙凹夾、滑輪、燒杯、常用手術(shù)器械、蛙板、蛙心夾、計算機采集系統(tǒng)、張力傳感器、滴管、培養(yǎng)皿（或小燒杯）、污物缸、紗布、棉線、3.藥品：任氏液、0.65%NaCl、5%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1：5000腎上腺素、1：10000乙酰膽堿、300U/ml肝素。

105[方法與步驟]1.連接實驗裝置：2.離體蛙心的制備——斯氏蛙心插管法，將插好離體心臟的套管固定在支架上，并與張力換能器相連3.啟動生物信號采集處理系統(tǒng)實驗項目→蛙心灌流→開始實驗1064.實驗觀察⑴記錄正常心搏曲線。⑵改用0.65%NaCl溶液灌流，并做好加藥標(biāo)記，觀察心搏變化。待曲線出現(xiàn)明顯變化時，立即吸去套管中的灌流液，同時做好沖洗標(biāo)記，并用新鮮任氏液清洗2—3次，待心搏恢復(fù)正常。⑶向套管內(nèi)加2—6滴5%NaCl溶液，做好加藥記號，觀察心搏曲線的頻率及振幅變化。當(dāng)曲線出現(xiàn)明顯變化時，應(yīng)立即吸去套管中的灌流液，同時做好沖洗標(biāo)記，并用新鮮任氏液清洗2—3次，待心搏恢復(fù)正常。107⑷同法向套管內(nèi)加入1—3滴2%CaCl2溶液，觀察并記錄心搏曲線的變化。當(dāng)出現(xiàn)明顯變化時，立即更換任氏液，待心搏恢復(fù)正常（如果恢復(fù)遲緩，可多次沖洗）。⑸向套管中加1—2滴1%KCl溶液，記錄心搏曲線的變化。當(dāng)心搏曲線變化時，用同法更換灌流液，待心搏恢復(fù)正常。108⑹同法記錄套管中加入1—2滴的1：5000腎上腺素后心搏曲線的變化。⑺同法記錄套管中加入1—2滴的1：10000乙酰膽堿后心搏曲線的變化。5.整理記錄109注意事項：1.換液時切勿碰套管，以免影響描記曲線的基線，同時保持灌流液面一致。110實驗八人體動脈血壓測定;心音聽診;呼吸通氣量的測定111[目的要求]1.學(xué)習(xí)并掌握間接測量人體血壓的原理和方法，觀察某些因素對動脈血壓的影響。2.學(xué)習(xí)心音聽診的方法，識別第一心音與第二心音。3.掌握呼吸通氣量的測定方法。112[實驗原理1]通常血液在血管內(nèi)流動時并沒有聲音，但當(dāng)外加壓力使血管變窄形成血液渦流時，則可發(fā)生聲音（血管音）。因此，可以根據(jù)血管音的變化來測量動脈血壓。測定人體動脈血壓最常用的方法是使用血壓及間接測壓。測壓時，用壓脈帶在手臂或手腕（腕式血壓計）加壓，當(dāng)外界壓力超過動脈的收縮壓時，動脈血流完全被阻斷，此時在動脈處聽不到任何聲音。當(dāng)外加壓力等于或稍低于動脈內(nèi)的收縮壓而高于舒張壓時，則在心臟收縮時，動脈內(nèi)可有少量的血流通過，而心室舒張時卻無血流通過。血液斷續(xù)的通過血管時，會發(fā)出聲音。故恰好可以完全阻斷血流的最小外加壓力（即發(fā)生第一次聲音時的壓力）相當(dāng)于收縮壓。當(dāng)外加壓力等于或小于舒張壓時，血管內(nèi)的血流連續(xù)通過，所發(fā)出的音調(diào)會突然降低或消失。在心臟舒張時有少許血流通過的最大管外壓力（即音調(diào)突然降低時的壓力）相當(dāng)于舒張壓。113[實驗原理2]心音是由心臟瓣膜關(guān)閉和心肌收縮引起的振動所產(chǎn)生的聲音用聽診器在胸膛前聽診,在每一心動周期內(nèi)可以聽到兩個心音。第一心音：音調(diào)較低(低頻為25—40次/S)而歷時較長（0.12s），聲音較響，是由房室瓣關(guān)閉和心肌收縮振動所產(chǎn)生的。由于房室瓣的關(guān)閉與心室收縮開始幾乎同時發(fā)生，因此第一心音是心室收縮的標(biāo)志，其響度和性質(zhì)變化，?？煞从承氖壹∈湛s強、弱和房室瓣膜的機能狀態(tài)。第二心音：生調(diào)較低（音頻為50次/S）而歷時較短（0.08s），較清脆，主要是由半月瓣關(guān)閉產(chǎn)生振動造成的。由于半月瓣關(guān)閉與心室舒張幾乎同時發(fā)生，因此，第二心音是心室舒張的標(biāo)志，其響度?？煞从硠用}壓得高低。114[實驗原理3]人的性別、年齡及運動情況都會產(chǎn)生不同的呼吸氣量。正常安靜狀態(tài)下每次呼吸的氣量約500ml，稱超氣量。人可以在正常吸入空氣以后，再用力吸入更多的氣體；而在正常呼氣之后，也能再用力呼氣，本實驗就是測量這些呼吸氣量的變化。115[實驗器材]血壓計、聽診器、單筒肺量計、橡皮接口、75%酒精、酒精棉球。116[方法及步驟]（一）人體動脈血壓測量1.受試者脫左臂衣袖，心臟與血壓計零點同一水平。靜坐5min，放松肢體，平穩(wěn)呼吸，穩(wěn)定情緒。2.松開打氣球上的螺絲，將壓脈帶內(nèi)空氣完全放出，再將螺絲扭緊。1173.將壓脈帶裹于左上臂，其下緣應(yīng)在肘關(guān)節(jié)上約3cm處，松緊應(yīng)適宜。受試者手掌向上平放于臺上，壓脈帶應(yīng)與心臟同一水平（如右圖）。4.在肘窩部找到動脈搏動處，左手持聽診器的胸具置于其上。注意：不可用力下壓。1185.聽取血管音變化右手持打氣球，向壓脈帶打氣加壓，此時注意傾聽聲音變化，在聲音消失后再加壓30mmHg，然后扭開打氣球之螺絲，緩慢放氣（切勿過快），此時可聽到血管音的一系列變化，聲音從無到有，由低而高，而后突然變低，最后完全消失。然后扭緊打氣球螺絲繼續(xù)打氣加壓，反復(fù)聽取聲音變化2—3次。6.測量動脈血壓重復(fù)上一操作，同時注意檢壓計之水銀柱和聲音變化。在徐徐放氣減壓時，第一次聽到血管音的水銀柱高度即代表收縮壓。在血管音突然由強變?nèi)鯐r的水銀柱高度即代表舒張壓，記下測定數(shù)值后，將壓脈帶內(nèi)的空氣放盡，使壓力降至零。1197.重復(fù)測量2~3次，記錄測壓平均值。8．呼吸對血壓的影響：讓受試者作緩慢的深呼吸1min，而后即刻測量其血壓。9．運動對血壓的影響讓受試者作原地蹲起運動，1min內(nèi)完成50~60次，共做1min。運動后立即坐下，并將變化最大的血壓數(shù)值記下。10．冷刺激對血壓的影響：令受試者的手浸入冷水中1min，測量血壓。120（二）心音聽診1.受試者安靜端坐，胸部裸露。2.檢查者帶好聽診器，注意聽診器的耳具應(yīng)與外耳道開都的方向一致（向前）。以右手的食指、拇指和中指輕持聽診器胸具緊貼于胸部皮膚上，依次由左房室瓣聽診區(qū)——主動脈瓣聽診區(qū)——肺動脈瓣聽診區(qū)——右房室瓣聽診區(qū)，仔細聽取心音，注意區(qū)分兩心音。如難以區(qū)分兩心音，可同時觸診心尖搏動或頸動脈脈搏，此時出現(xiàn)的心音即為第一心音。

121臨床常用的心音聽診區(qū)122（三）呼吸通氣量的測定1.儀器準(zhǔn)備單筒肺量計（圖5—4）的主要部件有：（1）測量裝置由兩個對口套裝的圓筒構(gòu)成。外筒口向上，筒內(nèi)有3根通氣管。內(nèi)筒又稱浮筒，當(dāng)外商灌滿水后，通過吹氣口向通氣管內(nèi)充氣時，內(nèi)筒可以上浮。根據(jù)筒內(nèi)氣體增加的容積，可測出吹入氣體的量。（2）記錄裝置浮筒頂端有根吊線，浮筒內(nèi)容積的變化可以牽動吊線，而吊線的活動又可通過記錄筆描記到記錄紙上，可以根據(jù)需要選擇走紙速度，描記出呼吸氣量的曲線。123（3）通氣管共3根，開口于浮筒底部。一根是充O2管，可與外界氣體相通（圖5－4氧氣接頭），用以調(diào)節(jié)浮筒內(nèi)氣體成分。另外兩個通氣管分別裝有鈉石灰和鼓風(fēng)機（用于吸去CO2和推動氣流），與吹氣口三通管相通。測量前先將外筒裝水至水位表要求的刻度。開放氧氣接頭，使筒內(nèi)裝有一定量空氣，然后關(guān)閉氧氣口。轉(zhuǎn)動三通管的開關(guān)，關(guān)閉肺量計，檢查是否漏氣。打開電源開關(guān)，準(zhǔn)備好描筆及記錄紙。將描筆調(diào)節(jié)到記錄鼓的中部位置上。1242．肺通氣功能的測定方法受試者將消毒橡皮接口連到三通管上，然后用牙齒咬住接口的兩條根，而將橡皮口片置于口腔前庭，用鼻夾夾鼻。轉(zhuǎn)動三通開關(guān)，用口平靜呼吸外界空氣，練習(xí)口呼吸數(shù)分鐘。轉(zhuǎn)動三通開關(guān)，打開肺量計，再開慢速走紙擋開關(guān)，啟動記錄鍵，即可測量并記錄呼吸氣量的變化。3．潮氣量的測量每次平靜呼吸時吸入和呼出空氣的容量，約500ml。進行這項測量時，不要用力呼吸。記錄氣量并重復(fù)測3次。然后計算平均潮氣量，填入表5－1。1254.補吸氣量測量正常吸氣之后再用力吸入空氣的容量，約2800ml。正常呼吸2—3次后盡量深吸氣，跟著呼入肺量計內(nèi)，只是到肋骨復(fù)位的正常呼氣，不要用力，記錄其氣量并重復(fù)3次。用測量得出的數(shù)字減去潮氣量即為補吸氣量，然后計算平均補吸氣量。5.補呼氣量測量正常呼氣之后再用力呼氣的氣量，約1000ml。正常呼吸2—3次后用力呼氣。重復(fù)3次，計算平均補呼氣量。6.肺活量測量肺內(nèi)全部可交換氣體（即潮氣+補吸氣+補呼氣）約4500ml。正常呼吸2—3次后深吸氣和呼氣，記錄氣量，并重復(fù)3次。7.用下列公式計算每分鐘呼吸通氣量。潮氣×呼吸次數(shù)/min=每分鐘呼吸通氣量（ml/min）。126實驗九

家兔動脈血壓的

神經(jīng)、體液調(diào)節(jié)127[目的要求]學(xué)習(xí)直接測定家兔動脈血壓的急性實驗方法觀察神經(jīng)、體液因素對心血管活動的影響。128[實驗原理]在正常生理情況下，人和高等動物的動脈血壓是相對穩(wěn)定的。這種相對穩(wěn)定性是通過神經(jīng)和體液因素的調(diào)節(jié)而實現(xiàn)的，其中以頸動脈竇-主動脈弓減壓反射尤為重要。此反射既可在血壓升高時降壓，又可在血壓降低時升壓，故有血壓緩沖反射之稱。家兔的減壓神經(jīng)在解剖上獨成一支，易于分離和觀察其作用，為實驗提供了有利條件。129本實驗是應(yīng)用液導(dǎo)系統(tǒng)直接測定動脈血壓的。即由動脈套管、輸液管及水銀檢壓計相互連通，其內(nèi)充滿抗凝液體，構(gòu)成液導(dǎo)系統(tǒng)。將動脈套管插入動脈內(nèi)，動脈內(nèi)的壓力及其變化，可通過密閉的液導(dǎo)系統(tǒng)傳遞壓力，反映在水銀檢壓計上，由水銀面的上下活動記錄血壓波動曲線。此外，也可通過壓力換能器將壓力變化轉(zhuǎn)換為電信號，間接地用生理記錄儀記錄。[實驗原理]130[實驗器材]1.儀器與材料：BL-420生物機能實驗系統(tǒng)，壓力傳感器，動脈插管，氣管插管，兔手術(shù)臺，三通管，動脈夾，注射器，保護電極，常規(guī)手術(shù)器械，止血鉗，紗布，棉球等。2.藥品：25％氨基甲酸乙酯，生理鹽水，1：5000腎上腺素，1：10000乙酰膽堿5%肝素3.動物：家兔131[方法步驟]1.稱重、麻醉、固定：25％氨基甲酸乙酯4mL/kg(理論估計值)由耳緣靜脈緩慢注入，觀察麻醉指征。背交叉固定2.頸部手術(shù)：a.剪毛，氣管插管b.分離右側(cè)頸部迷走神經(jīng)，減壓神經(jīng)c.分離雙側(cè)頸總動脈d.左側(cè)頸總動脈插管，先結(jié)扎遠心端，在近心端夾動脈夾，向近心端插入動脈插管。1323.觀察項目a.正常血壓曲線，向上為血壓升高，向下為血壓降低。b.用動脈夾夾閉右側(cè)頸總動脈30sc.電刺激右側(cè)主動脈神經(jīng)（減壓神經(jīng)），觀察d.結(jié)扎右側(cè)主動脈神經(jīng)，并剪斷，分別刺激中樞端和外周端，觀察e.結(jié)扎右側(cè)迷走神經(jīng)，并剪斷，觀察f.電刺激右側(cè)迷走神經(jīng)外周端，觀察g.耳緣靜脈注射1:5000腎上腺素0.1－0.3mLh.耳緣靜脈注射1:10000乙酰膽堿0.1--0.2mL133[注意事項]1.一項實驗后，須待血壓基本恢復(fù)后再進行下一項實驗。2.隨時注意動脈套管的位置，特別是動物掙扎時，避免扭轉(zhuǎn)插管阻塞血流或戳穿血管。3.隨時注意動物麻醉的深度，如實驗時間過長，動物經(jīng)常掙扎，可補注少量麻醉劑。4.刺激神經(jīng)之前，應(yīng)先檢查是否有刺激電流輸出。5.神經(jīng)需刺激時才拉出，不要一直由保護電極勾住，防止神經(jīng)干燥。134[作業(yè)]分析每一實驗觀察項目引起血壓變化的機制。135實驗十家兔呼吸運動的調(diào)節(jié)136[目的要求]1.學(xué)習(xí)記錄家兔呼吸運動的方法。2.觀察并分析肺牽張反射及不同因素對呼吸運動的影響137[實驗原理]人體及高等動物的呼吸運動所以能維持地、紀(jì)律性地進行，是由于體內(nèi)調(diào)節(jié)機制的存在。體內(nèi)、外的各種刺激，可以直接作用于中樞或不同部位的感受器，反射性地影響呼吸運動，以適應(yīng)機體代謝的需要。肺的牽張反射參與呼吸節(jié)律的調(diào)節(jié)。138[實驗器材]1.儀器與材料BL-420E生物機能實驗系統(tǒng)，兔體手術(shù)臺、哺乳類動物手術(shù)器械、氣管插管、50cm的橡皮管、縫合針、張力換能器、20ml注射器2.藥品25％氨基甲酸乙酯、生理鹽水3.動物健康家兔，體重2-3Kg139[方法步驟]（一）手術(shù)操作1.稱重、麻醉、固定2.頸部手術(shù)，氣管插管，分離雙側(cè)迷走神經(jīng)，3.劍突部位剪毛，將連接換能器的縫合針，固定于劍突處。（二）儀器連接140（三）實驗觀察項目1.描記正常呼吸曲線（頻率，幅度）2.增加解剖無效腔3.增加氣道阻力對呼吸運動的影響4.肺牽張反射5.同時結(jié)扎雙側(cè)迷走神經(jīng)，觀察結(jié)扎前后呼吸運動曲線的變化，6.重復(fù)實驗4。7.剪斷雙側(cè)迷走神經(jīng)，分別電刺激中樞端和外周端，觀察呼吸運動曲線的變化。141[注意事項]1.氣管插管時，注意防止切口出血過多，避免吸入肺影響肺通氣。2.每項實驗均要有正常呼吸曲線作為前后對照142實驗十一家兔離體腸段平滑肌的生理特性143[目的要求]1.學(xué)習(xí)離體腸段平滑肌的試驗方法。2.了解腸段平滑肌的生理特性。144[實驗原理]哺乳動物消化管平滑肌具有肌肉組織共有的特性，如興奮性、傳導(dǎo)性和收縮性等。但消化管平滑肌又有其特點，即興奮性較低，收縮緩慢，富有伸展性，具有緊張性、自動節(jié)律性，對化學(xué)、溫度和機械牽張刺激較敏感。這些特性可維持消化管內(nèi)一定壓力，保持胃腸等一定的形態(tài)和位置，適合于消化管內(nèi)容物的理化變化，在體內(nèi)受中樞神經(jīng)系統(tǒng)和體液因素的調(diào)節(jié)。將離體組織器官置于模擬體內(nèi)環(huán)境的溶液中，可以在一定時間內(nèi)保持其功能。本實驗以臺氏液作灌流液，在體外觀察及記錄哺乳動物離體腸斷的一般生理特性。145[實驗器材]1.儀器與材料：BL-420E生物機能實驗系統(tǒng)，兔體手術(shù)臺、哺乳類動物手術(shù)器械、恒溫平滑肌槽，燒杯（500ml3個、100ml1個）、20ml注射器、張力傳感器、溫度計（2支）2.藥品：臺氏液、腎上腺素（1:10000）、乙酰膽堿（1:10000）、阿托品針劑（1支）。3.實驗動物：家兔146[方法步驟]1.裝好實驗裝置，平滑肌槽恒溫調(diào)至37℃。2.制備離體兔腸段

用木槌猛擊兔后頭延髓部，致其昏迷后立即剖開腹腔，找到胃幽門與十二指腸交界處。在十二指腸起始端扎一線，取出十二指腸、放入冷臺式液內(nèi)。先沖洗內(nèi)容物并剪成若干約1.5cm長的小腸段在其兩端結(jié)扎，一端做一短線環(huán)固定在通氣的浴皿內(nèi)，另一端扎線與張力傳感器相連。將腸段完全浸浴在調(diào)好溫度的平滑肌槽中，并調(diào)整好臺式液充氣量（小氣泡接連不斷）。3、開啟生物機能實驗系統(tǒng)，接通與張力傳感器相連的通道。固定管并調(diào)節(jié)扎線與張力傳感器，使腸段運動自如又能牽動傳感器（注意：扎線不可貼壁或過緊過松）。1474.實驗觀察（1）記錄對照腸段運動曲線。（2）加入25℃臺式液，并記錄曲線變化，同時觀察腸段緊張度變化。當(dāng)出現(xiàn)明顯變化后，立即用37℃臺式液沖洗，待恢復(fù)正常。（3）同法加入45℃臺式液并記錄曲線變化，同時觀察腸段緊張度變化。當(dāng)出現(xiàn)明顯變化后，立即用新鮮37℃臺式液沖洗并待恢復(fù)。

由于以上流出液中未加入藥物，可以回收使用。以下加入藥物的流出也不可再用。148（4）加入2滴腎上腺素（1:10000），觀察并記錄曲線變化。（5）加入1～2滴乙酰膽堿（1:10000），觀察并記錄曲線變化。（6）加入3滴阿托品后立即加入于（5）同樣劑量的乙酰膽堿，記錄并觀察曲線變化。同（5）比較曲線有何不同。149[注意事項]

1.加藥前必須準(zhǔn)備好更換用的37℃臺式液。上述藥物劑量只是參考，效果不明顯可補加，每次加藥出現(xiàn)效果后，必須立即更換浴槽內(nèi)的臺式液并沖洗3次，待腸肌恢復(fù)正常后在觀察下一項目。浴槽內(nèi)臺式液要保持一定溫度。2.游離及取出腸段時，動作要快，取兔腸及兔腸穿線時盡可能不用金屬及手指觸及。為保持離體腸段的活性，可先預(yù)冷充氧的營養(yǎng)液，游離腸段及穿線在預(yù)冷的營養(yǎng)液中進行。實驗中始終通氣。150實驗十二家兔尿生成的調(diào)節(jié)151[實驗?zāi)康腯1.學(xué)習(xí)用輸尿管插管法記錄尿量的方法。2.觀察幾種因素對尿生成的影響。152尿生成過程包括：腎小球的濾過作用、腎小管與集合管的重吸收作用以及腎小管與集合管的分泌作用。凡是影響這些過程的因素，都會影響尿的生成而引起尿量變化。[實驗?zāi)康腯153154155[實驗器材]1.儀器與材料BL-420E生物機能實驗系統(tǒng)，兔手術(shù)臺、手術(shù)器械、受滴傳感器、輸尿管插管、培養(yǎng)皿、注射器2.藥品25％氨基甲酸乙酯、肝素溶液、0.01％腎上腺素溶液、垂體后葉素注射液、10％葡萄糖溶液、溫?zé)嵘睇}水。3.動物健康家兔，體重1.5－2.5Kg156（一）手術(shù)操作1.稱重、麻醉、固定2.下腹部手術(shù)，進行左（或右）側(cè)輸尿管插管手術(shù)引流尿液。（二）儀器連接[方法與步驟]157（三）實驗觀察1.記錄正常尿量；正常尿液顏色2.耳緣靜脈注射溫?zé)嵘睇}水30ml（速度稍快），觀察記錄尿量的變化。3.耳緣靜脈注射腎上腺素0.2-0.5ml，觀察尿量變化。4.耳緣靜脈注射10％葡萄糖溶液15ml，觀察尿量變化。5.耳緣靜脈注射垂體后葉素2u（0.4ml）,觀察尿量變化。158[作業(yè)]1．根據(jù)實驗結(jié)果，試分析尿量發(fā)生變化的機理。159實驗十三

反射時的測定

反射弧的分析160[目的要求]學(xué)習(xí)反射時的測定方法；了解刺激強度與反射時的關(guān)系；學(xué)習(xí)反射弧的測定方法。了解反射弧的組成及其各部分在反射活動中所起的作用161[實驗原理]神經(jīng)調(diào)節(jié)的主要方式是反射（在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的參與下，機體對刺激所產(chǎn)生的具有適應(yīng)意義的反應(yīng)過程稱為反射）。反射活動的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是反射弧。一旦其中任何一個環(huán)節(jié)的解剖結(jié)構(gòu)和生理完整性受到破壞，反射活動就無法實現(xiàn)。脊髓是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的最低級部位，它的機能最簡單，便于觀察。在反射活動中，由于神經(jīng)元特別是中間神經(jīng)元聯(lián)系方式的不同，使反射活動表現(xiàn)出種種特征。如：反射時的長短、反射活動空間范圍的大小、反射活動持續(xù)時間的久暫，以及引起反射活動的刺激條件，等等。從皮膚接受刺激至機體出現(xiàn)反應(yīng)的時間為反射時。162163[實驗器材]1.儀器與材料：蛙類手術(shù)器械1套、蛙板、鐵架臺、小燒杯、培養(yǎng)皿、小濾紙片、棉花、紗布、橡皮筋、大頭針、絲線。2.藥品：0.5％、1％的硫酸，2%普魯卡因。3.動物：蟾蜍。164[方法步驟]蛙針或斷頭法破壞蛙腦成脊蛙，用夾子夾住下頜，懸在鐵架臺上，待其興奮性恢復(fù)后，進行下面實驗。1.正常脊髓反射活動的觀察：(1)屈肌反射和對側(cè)伸肌反射：以培養(yǎng)皿盛0.5％硫酸少許，接觸蛙下肢趾尖，觀察受刺激側(cè)和對側(cè)下肢的反應(yīng)。（刺激后要立即洗去硫酸，以免損傷皮膚，并應(yīng)擦干水漬）(2)搔扒反射：以浸有0.5％硫酸的小濾紙片貼于蛙的腹側(cè)部，觀察后肢反應(yīng)的早遲及動作的準(zhǔn)確性。1652.反射時的測定：依前法用0.25％及1％的硫酸刺激左腳趾，用秒表測定反射時。每種濃度重復(fù)3次。求其平均值。3.用剪刀在蛙左側(cè)后肢股部皮膚做一環(huán)形切口，將切口以下皮膚剝凈，直至趾端（包括趾底），再以0.5％硫酸刺激，結(jié)果如何？4.依前法用0.5％的硫酸刺激右腳趾？在右側(cè)后肢股部的背側(cè)，分離出坐骨神經(jīng)(位置不能太低，分支盡量剪斷)，結(jié)扎，剪斷，0.5％硫酸刺激右腳趾？5.以適當(dāng)強度電刺激右側(cè)坐骨神經(jīng)中樞端，觀察同側(cè)及對側(cè)的肢體反應(yīng)；刺激外周端？6.脊髓對維持肌緊張的作用：另制備脊蛙一只，待反射恢復(fù)后即用蛙針將脊髓破壞，0.5％硫酸刺激腳趾，有無反射出現(xiàn)？比較破壞脊髓前后四肢的緊張情況，說明原因。[方法步驟]166[注意事項]1.每次實驗時，要使皮膚接觸硫酸的面積不變，以保持相同的刺激強度。2.每次用酸刺激后，均應(yīng)迅速用水洗去蛙趾皮膚上的硫酸，以免皮膚受傷。洗后應(yīng)沾干水漬，防止再刺激時硫酸被稀釋。3.浸入時間最長不超過10秒。167[作業(yè)和思考]1.分析反射弧的組成與作用。2.什么叫反射時？反射時的長短主要取決于哪些因素？3.什么叫做脊蛙？為什么進行這個實驗要使用脊蛙？4.為什么剪斷了傳入或者傳出神經(jīng)纖維后，反射就不再出現(xiàn)了。5.為什么剝掉了皮膚以后，H2SO4刺激皮膚反射活動不再出現(xiàn)了？6.完全損毀中樞神經(jīng)以后，動物的肌肉緊張程度有什么變化？反射活動還出現(xiàn)嗎？7.完全損毀中樞神經(jīng)以后，用電直接刺激肌肉，還收縮嗎？如果收縮，這叫做反射嗎？為什么？168實驗十四家兔大腦皮質(zhì)運動區(qū)的刺激效應(yīng)與去大腦僵直169[目的要求]1.學(xué)習(xí)哺乳動物的開顱方法；2.通過電刺激家兔大腦皮層不同區(qū)域，觀察相關(guān)肌肉收縮的活動，了解皮層運動區(qū)與肌肉運動的定位關(guān)系及其特點。3.觀察去大腦僵直現(xiàn)象，證明中樞神經(jīng)系統(tǒng)有關(guān)部位對肌緊張有調(diào)控作用。170[實驗原理]大腦皮層運動區(qū)是軀體運動的高級中樞。電刺激大腦皮層運動區(qū)的不同部位，能引起特定的肌肉或肌群的收縮運動。中樞神經(jīng)系統(tǒng)對肌緊張具有易化和抑制作用。機體通過二者的相互作用保持骨骼肌適當(dāng)?shù)木o張度，以維持機體的正常姿勢。這兩種作用的協(xié)調(diào)需要中樞神經(jīng)系統(tǒng)保持完整性。如果在動物的中腦四疊體的前(上)、后(下)丘之間切斷腦干，由于切斷了大腦皮層運動區(qū)和紋狀體等部位與網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的功能聯(lián)系，造成抑制區(qū)的活動減弱而易化區(qū)的活動相對地加強，動物出現(xiàn)四肢伸直，頭尾昂起，脊背挺直等伸肌緊張亢進的特殊姿勢，稱為去大腦僵直。171172[實驗器材]器械：電子刺激器、刺激電極、哺乳類動物手術(shù)器械、顱骨鉆、咬骨鉗、骨蠟、紗布、棉球。藥品：25%氨基甲酸乙酯、生理鹽水、液體石蠟、實驗動物：家兔173[方法步驟]（一）實驗準(zhǔn)備1.將兔稱重、麻醉、固定，待動物達到淺麻醉狀態(tài)后，腹位固定于兔手術(shù)臺上。2.剪去頭頂部的毛，從眉間至枕部將頭皮和骨膜縱行切開，用刀柄向兩側(cè)剝離肌肉和骨膜，用顱骨鉆在冠狀縫后,矢狀縫外的骨板上鉆孔(如右圖)。174然后用咬骨鉗擴大創(chuàng)口，暴露一側(cè)大腦皮層，用注射針頭或三角縫針挑起硬腦膜，小心剪去創(chuàng)口部位的硬腦膜，將37℃的液體石蠟滴在腦組織表面，以防皮層干燥。術(shù)中要隨時注意止血，防止傷及大腦皮層和矢狀竇。若遇到顱骨出血，可用骨蠟止血。175（二）實驗項目1.術(shù)畢解開動物固定繩，以便觀察動物軀體的運動效應(yīng)：將無關(guān)電極固定在頭部切開的皮膚上，先用刺激電極接觸皮下肌肉，調(diào)節(jié)刺激強度。以引起肌肉收縮的最小刺激強度及25～30Hz的頻率刺激大腦皮層的不同區(qū)域，觀察軀體肌肉活動的反應(yīng)。實驗前預(yù)先畫一張兔大腦半球背面觀輪廓圖，并將觀察到的反應(yīng)標(biāo)記在圖上(如圖)。每次刺激時間約5～10s，每次刺激間隔約1min。1761772.去大腦僵直：

用小咬骨鉗將所開的顱骨創(chuàng)口向外擴展至枕骨結(jié)節(jié)，暴露出雙側(cè)大腦半球后緣。結(jié)扎兩側(cè)的頸總動脈。左手將動物頭托起，右手用刀柄從大腦半球后緣輕輕翻開枕葉，即可見到中腦前（上）、后（下）丘部分（前粗大，后丘?。?，在前、后丘之間略向傾斜，對準(zhǔn)兔的口角的方位插入(圖12.2-3A)，向左右撥動，徹底切斷腦干。使兔側(cè)臥，十分鐘后，可見兔的四肢伸直，頭昂舉，尾上翹，呈角弓反張狀態(tài)(如圖)。178179[注意事項]1.麻醉不宜過深。2.