從實驗室到臨床腫瘤標志物

從實驗室到臨床腫瘤標志物第一頁，共四十八頁，2022年，8月28日內(nèi)容腫瘤標志物簡介腫瘤標志物的應用——影響因素第二頁，共四十八頁，2022年，8月28日腫瘤標志物簡介——腫瘤標志物的定義

腫瘤標志物（tumormarker，TM）是指在腫瘤的發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細胞本身所產(chǎn)生的或者是由機體對腫瘤細胞反應而產(chǎn)生的，反映腫瘤存在和生長的一類物質(zhì)，包括蛋白質(zhì)、激素、酶（同工酶）、多胺及某些癌基因等。第三頁，共四十八頁，2022年，8月28日腫瘤標志物簡介——理想的腫瘤標志物特異性好靈敏度高與腫瘤分期或腫瘤大小有關(guān)與預后相關(guān)存在于體液特別是血液易于檢測絕大部分腫瘤標志物既存在于腫瘤中，也存在于正常人和非腫瘤患者中一種腫瘤標志物可在多種腫瘤呈陽性大部分腫瘤往往有多個腫瘤標志物陽性第四頁，共四十八頁，2022年，8月28日腫瘤標志物簡介——腫瘤標志物的合理應用篩查/早期診斷診斷–

鑒別診斷治療的監(jiān)測隨訪–

早期發(fā)現(xiàn)腫瘤復發(fā)和轉(zhuǎn)移預后第五頁，共四十八頁，2022年，8月28日腫瘤標志物的合理應用（一）——篩查/早期診斷僅用于特定人群的篩查!PSA大于50歲的男性-聯(lián)合直腸指診（DRE)AFP肝癌高危人群AFP和HCG生殖細胞腫瘤的高風險人群TG和降鈣素甲狀腺癌的診斷不能單獨用于腫瘤的診斷！第六頁，共四十八頁，2022年，8月28日不能用于無癥狀人群的篩查!假設(shè)（1）CEA診斷結(jié)直腸癌敏感性70%，特異性95%（2）結(jié)直腸癌在人群中的發(fā)病率是1/10,000問CEA用于無癥狀人群（健康人群）結(jié)直腸癌的篩查效力有多大？答10,000人中，如果有1%的患者，將有

例患者被檢出；

例患者不能被發(fā)現(xiàn)。與此同時，將產(chǎn)生

個假陽性結(jié)果。第七頁，共四十八頁，2022年，8月28日腫瘤標志物的合理應用（二）——腫瘤的診斷與鑒別診斷PSA大于50歲的男性-聯(lián)合直腸指診（DRE)CYFRA21-1高水平提示肺癌NSE和proGRP分型不明確的肺癌ProGRP或NSE水平極高提示小細胞肺癌AFP如果組織分型不能確定，AFP水平極高提示按照肝細胞癌治療CA15-3存在轉(zhuǎn)移瘤（腺癌），原發(fā)灶不明，CA15-3高水平提示轉(zhuǎn)移性乳腺癌CA19-9胰腺癌的鑒別診斷CA125/HE4一線治療后的卵巢癌殘留病灶或復發(fā)患者，應開始二線治療絕經(jīng)前或絕經(jīng)后女性盆腔腫塊的惡性程度的風險評估第八頁，共四十八頁，2022年，8月28日腫瘤標志物的合理應用（三）——腫瘤治療的監(jiān)測腫瘤標志物水平下降

與半衰期有關(guān)

手術(shù)或治療有效更換試劑需要進行平行試驗評估!初次治療前（手術(shù)、放療、化療、激素治療）初次治療后任何治療前隨訪監(jiān)測腫瘤標志物明顯增高后4～6周采用同種試劑結(jié)果才具有可比性！第九頁，共四十八頁，2022年，8月28日腫瘤標志物的合理應用（三）——腫瘤治療的監(jiān)測CA15-3在乳腺癌治療檢測中的作用第十頁，共四十八頁，2022年，8月28日腫瘤標志物的合理應用（四）——患者隨訪和復發(fā)的早期發(fā)現(xiàn)腫瘤標志物的水平再次升高/

腫瘤標志物升高的速度

高度提示腫瘤發(fā)生復發(fā)或轉(zhuǎn)移

連續(xù)動態(tài)的監(jiān)測，以個體患者的基線水平為基礎(chǔ)，可避免假陽性和假陰性的出現(xiàn)與基線值相比，如出現(xiàn)100%的增長，具有100%的特異性腫瘤標志物的診斷價值

腫瘤的復發(fā)和轉(zhuǎn)移的早期監(jiān)測不依賴原發(fā)腫瘤標志物的釋放!腫瘤標志物聯(lián)合檢測

增加腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移的診斷價值第十一頁，共四十八頁，2022年，8月28日腫瘤標志物的合理應用（五）——預后評估腫瘤發(fā)生部位腫瘤分期(無-,局部的–遠處轉(zhuǎn)移)腫瘤分級治療前腫瘤標志物的水平腫瘤標志物的高水平提示腫瘤晚期，預后不良正常或輕微升高提示無疾病復發(fā)時間長，生存期長有效治療后無疾病復發(fā)時間的預后指標第十二頁，共四十八頁，2022年，8月28日腫瘤類型主要標志物次要標志物肝癌胃癌胰腺癌結(jié)腸直腸癌肺癌乳腺癌前列腺癌卵巢癌睪丸腫瘤宮頸癌膀胱癌骨髓瘤AFPCA72-4CA19-9、CA242CA242、CEANSE、ProGRPCYFRA21-1CA15-3PSACA125、HE4AFP、HCGSCCCYFRA本-周蛋白、β2-MGCEAPG、CEA、CA19-9CEACA19-9CEA、SCC、TPACEA、CA125fPSAAFP、CEA、HCG、CA72-4LDHCA125、CEA、CYFRACEA腫瘤標志物簡介——腫瘤標志物的聯(lián)合檢測第十三頁，共四十八頁，2022年，8月28日腫瘤標志物簡介——敏感性、特異性、受試者工作曲線第十四頁，共四十八頁，2022年，8月28日腫瘤標志物簡介——敏感性、特異性、受試者工作曲線第十五頁，共四十八頁，2022年，8月28日腫瘤標志物簡介——敏感性、特異性、受試者工作曲線第十六頁，共四十八頁，2022年，8月28日cutoff值（ug/L）肺癌n=199鱗癌n=74腺癌n=92NSCLCn=178SCLCn=21CYFRA21-12.2358.8*75.7*53.363.5*19.0**NSE20.3934.7**29.1**29.3**29.2**81.0*CEA3.9847.231.162.0*47.842.9注：采用X2檢驗，*表示和其他TM相比在本組中有最高的陽性率。**表示和其他TM相比在本組中有最低的陽性率特異性為95%，以健康人為對照組，TM的cutoff值及陽性率三種主要腫瘤標志物在肺癌診斷中的應用第十七頁，共四十八頁，2022年，8月28日cutoff值（ug/L）肺癌n=199鱗癌n=74腺癌n=92NSCLCn=178SCLCn=21CYFRA21-13.26ug/L44.7*66.2*35.948.9*9.5**NSE26.14ug/L22.6**20.3**13.0**16.3**76.2*CEA5.51ug/L38.721.653.3*39.333.3注：采用X2檢驗，*表示和其他TM相比在本組中有最高的陽性率。**表示和其他TM相比在本組中有最低的陽性率特異性為95%，以良性肺疾病為對照組，TM的cutoff值及陽性率三種主要腫瘤標志物在肺癌診斷中的應用第十八頁，共四十八頁，2022年，8月28日腫瘤標志物簡介——敏感性、特異性、受試者工作曲線第十九頁，共四十八頁，2022年，8月28日圖1TM鑒別NSCLC與BLD圖2TM鑒別SCLC與BLD三種主要腫瘤標志物用于肺癌診斷的ROC曲線第二十頁，共四十八頁，2022年，8月28日內(nèi)容腫瘤標志物簡介腫瘤標志物的應用——影響因素分析前的影響因素分析中的影響因素分析后的影響要求第二十一頁，共四十八頁，2022年，8月28日樣本因素患者因素分析前管理腫瘤標志物應用——分析前管理樣本處理第二十二頁，共四十八頁，2022年，8月28日分析前管理——樣本因素樣本類型血清或血漿均可含分離膠的試管含EDTA抗凝劑腫瘤標志物監(jiān)測盡量使用相同樣本類型樣本穩(wěn)定性4℃（短期）；-30℃（長期）；-70℃（更長期）某些腫瘤標志物對熱不穩(wěn)定：PSA、hCG樣本處理樣本溶血，樣本量不足樣本錯誤或樣本信息錯誤第二十三頁，共四十八頁，2022年，8月28日重視患者的基線水平合理選擇腫瘤標志物注意樣本的采集時機了解患者的臨床狀況避免樣本污染藥物、治療措施及生活方式的影響患者因素分析前管理——患者因素第二十四頁，共四十八頁，2022年，8月28日分析前管理——患者因素ASCO: AmericanSocietyofClinicalOncology

美國臨床腫瘤協(xié)會NACB: TheNationalAcademyofClinicalbiochemistryoftheAmericanAssociationofClinicalChemistry

美國臨床生化協(xié)會EGTM: EuropeanGrouponTumorMarkers(EGTM)

歐洲腫瘤標志物專家組中國腫瘤標志物專家組合理選擇腫瘤標志物第二十五頁，共四十八頁，2022年，8月28日腫瘤標志物在臨床常見惡性腫瘤中的應用篩查/早期發(fā)現(xiàn)輔助診斷分期/預后復發(fā)檢測療效監(jiān)測肝癌AFP(高危人群篩查)AFPAFPAFPAFP前列腺癌PSA，cPSA，%fPSA（結(jié)合直腸指診，適用>50歲人群）PSA，cPSA，%fPSA（結(jié)合直腸指診）PSA，cPSA(結(jié)合直腸指診和活檢Gleason分級)PSA，cPSAPSA，cPSA結(jié)直腸癌FOB(適用>50歲人群；有家族史者)無推薦TMCEACEACEA胰腺癌無推薦TMCA19-9（需要聯(lián)合CT檢查）CA19-9無推薦TMCA19-9卵巢癌CA125（僅用于聯(lián)合B超，早期檢測有遺傳史的高危人群）CA125（僅用于絕經(jīng)后婦女）CA125CA125CA125乳腺癌無推薦TM無推薦TMER，PR，HER-2，uPA，PAI-1無推薦TMCA15-3，CEA(監(jiān)測病情進展)第二十六頁，共四十八頁，2022年，8月28日篩查/早期發(fā)現(xiàn)輔助診斷分期/預后復發(fā)檢測療效監(jiān)測胃癌無推薦TM無推薦TM無推薦TM無推薦TM無推薦TM膀胱癌無推薦TM無推薦TM無推薦TM無推薦TM無推薦TM睪丸癌無推薦的TMAFP，hCG，LDHAFP，hCG，LDHAFP，hCG，LDHAFP，hCG，LDH甲狀腺癌無推薦TM無推薦TM無推薦TM甲狀腺球蛋白和甲狀腺球蛋白抗體肺癌無推薦TM必要時選擇針對檢測小細胞肺癌或非小細胞肺癌的TM單克隆免疫球蛋白病血清蛋白電泳；免疫固定電泳；血清游離輕鏈，血液粘滯度，β2微球蛋白，尿微量蛋白電泳，尿免疫固定電泳，尿輕鏈測定子宮頸癌無推薦TMSCC（見于鱗狀細胞宮頸癌）SCC（鱗狀細胞宮頸癌）SCC（鱗狀細胞宮頸癌）SCC（鱗狀細胞宮頸癌）黑色素瘤無推薦TMLDH，TA90-ICMIA，S100，TA90-ICMIA，TA90-ICTA90-IC腫瘤標志物在臨床常見惡性腫瘤中的應用第二十七頁，共四十八頁，2022年，8月28日分析前管理——患者因素重視患者的基線水平治療前的水平和最低水平隨訪前的水平如果實驗室更換了檢測系統(tǒng)，所有正在隨訪中的患者都應當重新建立基線值。第二十八頁，共四十八頁，2022年，8月28日分析前管理——患者因素注意樣本的采集時機多數(shù)腫瘤標志物沒有證據(jù)表明存在明顯的晝夜差異，可在一天中任何時間采血如需進行與前列腺有關(guān)的任何操作，應在操作之前采血檢測PSA

不應當在經(jīng)期采血檢測CA125第二十九頁，共四十八頁，2022年，8月28日分析前管理——患者因素了解患者的臨床情況第三十頁，共四十八頁，2022年，8月28日分析前管理——患者因素5α還原酶抑制劑導致PSA濃度下降（≈50%）化療后腫瘤標志物濃度可能短暫升高大麻可能使血清hCG濃度短暫升高吸煙可能使CEA的測定值輕度升高（與測定方法有關(guān)）藥物、治療措施及生活方式的影響第三十一頁，共四十八頁，2022年，8月28日分析前管理——患者因素避免樣本污染唾液污染

SCC升高

CA19-9升高

CEA升高

TPS升高汗液污染

SCC升高第三十二頁，共四十八頁，2022年，8月28日內(nèi)容腫瘤標志物簡介腫瘤標志物的應用——影響因素

-分析前的影響因素分析中的影響因素分析后的影響因素第三十三頁，共四十八頁，2022年，8月28日檢測方法的選擇與確認室內(nèi)質(zhì)量控制室間質(zhì)量評價分析中管理第三十四頁，共四十八頁，2022年，8月28日為什么不同的檢測方法，檢測結(jié)果相差很大？腫瘤標志物的溯源性存在很大困難各廠家使用的抗體差別很大檢測方法的設(shè)計存在差異第三十五頁，共四十八頁，2022年，8月28日腫瘤標志物檢測的溯源性第三十六頁，共四十八頁，2022年，8月28日為什么不同的檢測方法，檢測結(jié)果相差很大？腫瘤標志物的溯源性存在很大困難各廠家使用的抗體差別很大檢測方法的設(shè)計存在差異第三十七頁，共四十八頁，2022年，8月28日TnIantibodies-epitopesNCAutoantibodiesAssayAQT90FLEX41-49137-149190-196Access24-4041-49Architect24-4041-4987-91AxSYM2ndgeneration24-4041-4987-91i-STAT27-3941-4969-8688-91Immulite24-40Liaison

27-39OrthoClinicalECi24-4041-4987-91Stratus41-56TnIUltra27-4041-4987-91TosohAIA41-4987-91

CaptureAb

TracerAb27-32Epitopes80-11080-110第三十八頁，共四十八頁，2022年，8月28日為什么不同的檢測方法，檢測結(jié)果相差很大？腫瘤標志物的溯源性存在很大困難各廠家使用的抗體差別很大檢測方法的設(shè)計存在差異第三十九頁，共四十八頁，2022年，8月28日控制檢測的影響因素

保證檢測結(jié)果的改變反應患者自身狀態(tài)的改變進行系列血清監(jiān)測，堅持使用同一儀器/檢測系統(tǒng)使用相同的樣本類型進行嚴格的室內(nèi)質(zhì)量控制與室間質(zhì)評（批內(nèi)變異<5%，批間變異<10%)第四十頁，共四十八頁，2022年，8月28日1.制造商應提供用于檢測的抗體特異性的說明2.使用者應了解交叉反應的影響并幫助解釋結(jié)果1.定期評估攜帶污染2.使用一次性槍頭避免攜帶污染發(fā)生交叉反應樣本攜帶污染分析中管理——分析干擾第四十一頁，共四十八頁，2022年，8月28日高濃度hook效應1.制造商應采用足夠的示蹤和捕捉抗體避免Hook效應2.對于可能出現(xiàn)鉤狀效應的樣本進行至少兩個濃度的稀釋分析中管理——分析干擾第四十二頁，共四十八頁，2022年，8月28日可能臨床結(jié)果:監(jiān)測結(jié)果的錯誤分類非必要的隨訪檢測錯誤的治療決策不當?shù)募膊☆A后嗜異性抗體或人抗鼠抗體（HAMA)的干擾分析中管理——分析干擾第四十三頁，共四十八頁，2022年，8月28日試劑的選擇——優(yōu)秀的抗HAMA干擾性能采用阻斷蛋白，捕捉片段/示蹤抗體和嵌合抗體三種方法無保護

阻斷蛋白

(<1in10.000)

抗體片段

(<1in100.000)

嵌合抗體

(<<1in1.000.000)干擾程度:

高