侵襲性深部真菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷

侵襲性深部真菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷第一頁，共二十八頁，2022年，8月28日侵襲性真菌病的致病菌—條件致病菌—致病性雙相真菌念珠菌組織胞漿菌曲霉球孢子菌隱球菌芽生菌接合菌馬內(nèi)菲青霉鐮刀菌孢子絲菌暗色真菌酵母菌毛孢子菌枝頂孢霉第二頁，共二十八頁，2022年，8月28日侵襲性真菌病(IFD)主要包括：念珠菌病隱球菌病侵襲性曲霉病第三頁，共二十八頁，2022年，8月28日高危人群+高危因素=IFD第四頁，共二十八頁，2022年，8月28日IFD的高危人群和高危因素廣譜抗生素應(yīng)用入住ICU血液系統(tǒng)腫瘤病人（粒缺、骨髓移植）器官移植HIV感染應(yīng)用皮質(zhì)激素糖尿病靜脈插管第五頁，共二十八頁，2022年，8月28日第六頁，共二十八頁，2022年，8月28日尸體解剖中侵襲性真菌感染的發(fā)生率78798081828384858687888990919202468Aspergillusspp.Candida

spp.AllotherPrevalenceatAutopsy[%]PrevalenceofinvasiveaspergillosisatnecropsyatJWGeotheUniversityHospital,Frankfurt,Germany(Lancet,2000;335:2076)第七頁，共二十八頁，2022年，8月28日54.84%12.9%3.23%9.68%19.35%國內(nèi)西南醫(yī)院尸解資料，(1971-2000)，郝飛教授提供AspergillusCryptococcusMucorCandidaAllothers第八頁，共二十八頁，2022年，8月28日侵襲性真菌病的流行病學(xué)特點(diǎn)危險因素不斷增多，發(fā)生率逐年增高趨勢，確切資料有待收集整理白念珠菌仍然是最常見臨床分離致病菌非白念珠菌增加（帶來的問題）曲霉已成為重要的致死真菌第九頁，共二十八頁，2022年，8月28日真菌感染的實(shí)驗(yàn)診斷方法及問題形態(tài)學(xué)檢查：經(jīng)驗(yàn)？陽性率？培養(yǎng)+鑒定：時間長，敏感性？血清學(xué)檢查：敏感性？特異性？分子生物學(xué)檢查：標(biāo)準(zhǔn)化？第十頁，共二十八頁，2022年，8月28日真菌抗原、細(xì)胞壁成分檢測GM試驗(yàn)：血漿、血清、BAL、胸水、CSF，用于曲霉檢測；G試驗(yàn):用于曲霉、念珠菌檢測，對隱球菌、接合菌無意義；乳膠凝集試驗(yàn):檢測隱球菌；第十一頁，共二十八頁，2022年，8月28日新生隱球菌乳膠凝集試驗(yàn)第十二頁，共二十八頁，2022年，8月28日血清GM作為診斷的早期標(biāo)志物MarrandLeisenringClinInfectDis2005;41:S381第十三頁，共二十八頁，2022年，8月28日在BAL中檢測GM作為早期診斷標(biāo)志Musheretal.JClinMicrobiol2004:42(12):5517-22敏感性(%)特異性(%)陽性預(yù)測(%)陰性預(yù)測(%)血清47937382BAL8510010088Beckeretal.BrJHaematol2003;121:448第十四頁，共二十八頁，2022年，8月28日關(guān)于GM試驗(yàn)與G試驗(yàn)可作為推定診斷的標(biāo)準(zhǔn);GM:

檢測半乳甘露聚糖，對曲霉感染診斷特異性強(qiáng)，假陽性反應(yīng)可以在青霉菌屬中出現(xiàn)；部分含青霉烷砜衍生物的抗菌藥物可以誘發(fā)陽性反應(yīng)；G試驗(yàn):

檢測(1,3)-?-D-葡聚糖，在很多真菌中都可以出現(xiàn)陽性反應(yīng)，但在隱球菌、接合菌、毛霉、根霉呈陰性反應(yīng)；第十五頁，共二十八頁，2022年，8月28日Prospectiveutilityof(1-3)-B-D-Glucan(BG),galactomannan(GM)andanti-Candidaalbicansgermtubeantibodies(CAGT)forthediagnosisofinvasivefungaldisease(IFD)inhaemato-oncologyadultpatientsA.Alhambra1,M.S.Cuétara2,J.M.Moreno1,A.DelPalcioPerez-Medel1,I.Moragues3,J.Pontón3,A.DelPalacio11HospitalUniversitarioDocedeOctubre,MADRID,Spain2HospitalUniversitarioSeveroOchoa,LEGANES,Spain3UniversidaddelPaisVasco,BILBAO,Spain第十六頁，共二十八頁，2022年，8月28日InvasiveCandidiasisSSPPPVNPVCAGT(%)57934496BG(%)77863997InvasiveAspergillosisSSPPPVNPVGM(%)92947398BG(%)57844291第十七頁，共二十八頁，2022年，8月28日CONCLUSIONSTheincidenceofIFDcorrelateddirectlyandsignificantly(x2p=0.0005)withriskstratificationgroup:highestproportioninthehigh-riskgroup.Sinceallthebiomarkershaveinherentlimitations,abetterdiagnosisyieldisachievedcombiningthebiomarkers.AllthreebiomarkerssharehighnegativepredictivevalueandcanexcludereasonablyIFDinhaematologyadultpatientstreatedwithwidespectrumantifungals.第十八頁，共二十八頁，2022年，8月28日EvaluationoftwoserologictestfordiagnosisinvasiveAspergillosisC.Castro,A.Romero,A.Aller,T.Gonzalez,A.González,E.Martín-MazuelosH.U.Valme,SEVILLA,Spain第十九頁，共二十八頁，2022年，8月28日Atotalof236serafrom51patientsinriskofIAweretestedforGMusingPlateliaAspergilluskit(BioRad,France)which36sera(10patients)weretestedforBGalsousingFungitellkit(AssociatesofCapeCod.,USA).PatientswereattendedattheUniversityHospitalofValmefromSevillefromJanuaryof2008toDecember2008.PatientswithGMindex≥0.5intwoconsecutivesampleshavebeenmarkedasGMpositiveandsampleswithresults≥80pg/mlweremarkedasBGpositive.AllGMpositivepatientswereclassifiedaccordingtoEORTC/MSGcriteria(2008)forprobabilityofIA.第二十頁，共二十八頁，2022年，8月28日GMtestFrom51patientstudied,16ofthemshowedatleastonepositivespecimen(33sera).Only6patientsshowedtwoconsecutivepositiveresults(≥0.5GMtest)andtheyshowclinicalsignsormicrobiologicalcriteriaforAIproven(3patients)andprobable(3patients).第二十一頁，共二十八頁，2022年，8月28日BGassayTheBGassaywereusedinparallelwithGMin36serawhich26showedpositiveresultfrom9patients,(3withAIprovenand6AIprobable).3patientsshowedpositiveresultsbeforeforBGtest(3,5days)and6patientspresentedsimultaneouslybothantigens.NevertheGMtestwasthefirstserologicaltesttoshowapositiveresult.G試驗(yàn)陽性的9名患者中，G試驗(yàn)單獨(dú)陽性的有3個病人，兩種抗原同時陽性有6個病人，未出現(xiàn)單獨(dú)GM試驗(yàn)陽性的情況。第二十二頁，共二十八頁，2022年，8月28日ConclusionCalculatingsignificantsensitivityforbothdetectionmethodswasnotfeasibleduetoalownumberofproven/probableAI.BGdetectionshowedpositiveresultsbeforeGMtestandpresentthegreatadvantagetobea“panfungal”antigen.BGdetectionshouldbeusedwithothertechniquesfordetectionofinvasiveAspergillosisinfections.第二十三頁，共二十八頁，2022年，8月28日真菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)示意圖第二十四頁，共二十八頁，2022年，8月28日深部真菌感染患者血漿

1-3-β-D葡聚糖檢測

病例選擇深部真菌感染患者35例，年齡12－88歲，來自我院2004年1月到5月住院患者，均經(jīng)培養(yǎng)證實(shí)存在深部真菌感染，感染部位包括呼吸道、泌尿道、血液及靜脈插管引起的系統(tǒng)性感染。正常健康對照組30人，來自我院健康查體者。第四軍醫(yī)大學(xué)

第二十五頁，共二十八頁，2022年，8月28日檢測結(jié)果正常對照組血漿1-3-β-D葡聚糖含量最高為7.29pg/ml，最低為0.45pg/ml，平均值為2.83±2.57pg/ml；深部真菌感染組血漿1-3-β-D葡聚糖含量最高為168.9pg/ml，最低為14.93pg/ml，平均值為54.06±36.13pg/ml。經(jīng)SPSS統(tǒng)計軟件T-檢驗(yàn)分析，對照組與深部真菌感染組1-3-β-D葡聚糖平均值差異非常顯著（t=7.741,P＜0.001）。第二十六頁，共二十八頁，2022年，8月28日討論入選的深部真菌感染患者均經(jīng)細(xì)