2020新冠病毒核酸檢測規(guī)范

新冠病毒核酸檢測工作規(guī)范需求，特制定本工作規(guī)范。一、技術(shù)人員基本要求（一）采樣人員。從事新冠病毒核酸檢測標(biāo)本采集的技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)經(jīng)過生物安全培訓(xùn)（培訓(xùn)合格），熟悉標(biāo)本種類和采集方法，熟練掌握標(biāo)本采集操作流程及注意事項(xiàng)，做好標(biāo)本信息的記錄，確保標(biāo)本質(zhì)量符合要求、標(biāo)本及相關(guān)信息可追溯。（二）檢測人員2二、標(biāo)本采集基本要求（一）基本原則測結(jié)果反饋遲緩等問題。他患者、“愿檢盡檢”人群分區(qū)采樣，避免交叉感染。要求。（二）采樣點(diǎn)設(shè)置設(shè)置新冠病毒采樣點(diǎn)應(yīng)當(dāng)遵循安全、科學(xué)、便民的原則。采樣點(diǎn)應(yīng)當(dāng)為獨(dú)立空間，具備通風(fēng)條件，內(nèi)部劃分相應(yīng)的清潔區(qū)和污染區(qū)，配備手衛(wèi)生設(shè)施或裝置。采樣點(diǎn)需設(shè)立清晰的指引標(biāo)識，并明確采樣流程和注意事項(xiàng)。設(shè)立獨(dú)立的等候區(qū)域，盡可能保證人員單向流動(dòng)，落實(shí)“1米線”間隔要求，嚴(yán)控人員密度。（三）人員配置及防護(hù)要求1-22-41N95或更換手套。（四）采樣流程應(yīng)當(dāng)建立新冠病毒核酸檢測采樣操作流程制度，根據(jù)采樣對象類別確定具體采樣流程，包括預(yù)約、繳費(fèi)、信息核對、采樣、送檢、報(bào)告發(fā)放等。應(yīng)當(dāng)利用條碼掃描等信息化手段采集受檢者信息。標(biāo)本采集前，采樣人員應(yīng)當(dāng)對受檢者身份信息進(jìn)行核對，并在公共區(qū)域以信息公告形式告知核酸檢測報(bào)告發(fā)放時(shí)限和發(fā)放方式。每個(gè)標(biāo)本應(yīng)當(dāng)至少記錄以下信息：1.受檢者（患者）姓名、身份證號、居住地址、聯(lián)系方式；2.采樣單位名稱、標(biāo)本編號，標(biāo)本采集的日期、時(shí)間、采集部位、類型、數(shù)量等。（五）采集方法應(yīng)當(dāng)采集呼吸道標(biāo)本，包括上呼吸道標(biāo)本（口咽拭子、鼻咽拭子等）或下呼吸道標(biāo)本（呼吸道吸取物、支氣管灌洗液、肺泡灌洗液、深咳痰液等）。其中，重癥病例優(yōu)先采集下呼吸道標(biāo)本；根據(jù)臨床需要可留取便標(biāo)本。口咽拭子水中濕潤(禁止將拭子放入病毒保存液中，避免抗生素引起過敏)，被采集人員頭部微仰，嘴張大，并發(fā)“啊”音，露出兩側(cè)咽扁桃體，將拭子越過舌根，在被采集者332～3ml（也可使用等滲鹽溶液、組織培養(yǎng)液或磷酸鹽緩沖液）的管中，尾部棄去，旋緊管蓋。鼻咽拭子沿下鼻道的底部向后緩緩深入，由于鼻道呈弧形，不可用力過猛，以免發(fā)生外傷出血。待拭子頂端到達(dá)鼻咽腔后壁時(shí)，輕輕旋轉(zhuǎn)一周（如遇反射性咳嗽，應(yīng)停留片刻），2～3ml深咳痰液3ml50ml2～3ml1g/LK沖液將痰液化。鼻咽或呼吸道抽取物。用與負(fù)壓泵相連的收集器從鼻咽部抽取粘液或從氣3ml1（50ml）。支氣管灌洗液。將收集器頭部從鼻孔或氣管插口處插入氣管（30cm5ml1（50ml集）。肺泡灌洗液或左肺舌段的支管，將其頂端契入支氣管分支開口，經(jīng)氣管活檢孔緩緩加入滅菌生30～50ml100～250ml，300ml。三、標(biāo)本管理基本要求（一）標(biāo)本包裝。所有標(biāo)本應(yīng)當(dāng)放在大小適合的帶螺旋蓋內(nèi)有墊圈、耐冷凍的標(biāo)本采集管里，擰緊。容器外注明標(biāo)本編號、種類、姓名及采樣日期。將密閉后的標(biāo)本放入大小合適的塑料袋內(nèi)密封，每袋裝一份標(biāo)本。（二）標(biāo)本送檢42-4h包裝運(yùn)輸。（三）標(biāo)本接收。標(biāo)本接收人員的個(gè)人防護(hù)按采樣人員防護(hù)裝備執(zhí)行。標(biāo)本運(yùn)送人員和接收人員對標(biāo)本進(jìn)行雙簽收。（四）標(biāo)本保存。用于病毒分離和核酸檢測的標(biāo)本應(yīng)當(dāng)盡快進(jìn)行檢測，能在244℃保存；24-70℃或以下保存（如無-70℃保存條件，則于-20℃冰箱暫存）保存標(biāo)本。標(biāo)本運(yùn)送期間避免反復(fù)凍融。（五）混檢標(biāo)本的采集和檢測。采樣方法。按本手冊“第二部分（五）采集方法”進(jìn)行樣本采集。樣本混合。將采集的數(shù)個(gè)樣本（5）200ul合，形成混合待檢樣本。Ct四、實(shí)驗(yàn)室管理基本要求（一）實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)要求開展核酸檢測的實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)當(dāng)符合《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》（國務(wù)院令第424號）和《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理辦法》（衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號）有關(guān)規(guī)定，具備經(jīng)過衛(wèi)生健康行政部門審核備案的生物安全二級及以上實(shí)驗(yàn)室條件，以及臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室條件。獨(dú)立設(shè)置的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室還應(yīng)當(dāng)符合《醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本標(biāo)準(zhǔn)（試行）》《醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范（試行）》等要求。（二）實(shí)驗(yàn)室分區(qū)要求原則上開展新冠病毒核酸檢測的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)設(shè)置以下區(qū)域：試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備3立的，不能有空氣的直接相通。各區(qū)的功能是：備，以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準(zhǔn)備。等。擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)：核酸擴(kuò)增和產(chǎn)物分析。根據(jù)使用儀器的功能，區(qū)域可適當(dāng)合并。如采用標(biāo)本處理、核酸提取及擴(kuò)增檢測為一體的自動(dòng)化分析儀，標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)可合并。（三）主要儀器設(shè)備實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)配備與開展檢驗(yàn)項(xiàng)目相適宜的儀器設(shè)備，包括核酸提取儀、醫(yī)用PCR（如水浴鍋等）和冰柜、離心機(jī)、不間斷電源（UPS）或備用電源等。（四）實(shí)驗(yàn)室檢測實(shí)驗(yàn)室接到標(biāo)本后，應(yīng)當(dāng)在生物安全柜內(nèi)對標(biāo)本進(jìn)行清點(diǎn)核對，并對標(biāo)本進(jìn)行滅活處理。按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本前處理、核酸提取、核酸擴(kuò)增、結(jié)果分析及報(bào)告。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)建立可疑標(biāo)本和陽性標(biāo)本復(fù)檢的流程。保存液和滅活方式相關(guān)，有些核酸提取試劑（如磁珠法或者一步法），保存液。進(jìn)行滅活處理，直接進(jìn)行核酸提取，而使用非滅活型標(biāo)本保存液的實(shí)驗(yàn)室，則有56℃30PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系中。1mol/L五、實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制與管理應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)核酸檢測質(zhì)量控制。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對檢測體系進(jìn)行必要的性能驗(yàn)證，性能指標(biāo)包括但不限于精密度和最低檢測限。實(shí)驗(yàn)室要做好日常室內(nèi)質(zhì)控，按照《國家衛(wèi)生健康委辦公廳關(guān)于開展新型冠狀病毒核酸檢測有關(guān)要求的通知》（國衛(wèi)辦醫(yī)函〔2020〕53號）要求規(guī)范開展室內(nèi)質(zhì)控。應(yīng)常態(tài)化接受國家級或省級檢驗(yàn)質(zhì)量控制。不按照本地要求參加室間質(zhì)評的，或室間質(zhì)評結(jié)果不合格的，或檢測結(jié)果質(zhì)量問題突出的，不得開展核酸檢測。質(zhì)量管理包括人員的操作技能和生物安全培訓(xùn)，標(biāo)本采集、運(yùn)輸、接收和保規(guī)則，結(jié)果的報(bào)告、解釋與建議等。六、核酸檢測結(jié)果反饋基本要求（一）61224（二）檢測報(bào)告（見附件），在衛(wèi)生健康行政部門的規(guī)定下，互認(rèn)檢測結(jié)果?？刹捎眉?2七、核酸檢測安全管理（一）標(biāo)本安全管理75%0.2%Doc9284PI602A24結(jié)果為陽性，剩余標(biāo)本應(yīng)進(jìn)行復(fù)核檢測。（二）實(shí)驗(yàn)室檢測安全管理室環(huán)境消毒處理記錄。0.2%75%240.2%75%和標(biāo)本采集密封袋進(jìn)行噴灑消毒。取出標(biāo)本采集管后應(yīng)首先檢查標(biāo)本管外壁是否有破損、管口是否泄露或有管壁殘留物。確認(rèn)無滲漏后，推薦用0.2%含氯消毒劑噴灑、擦拭消毒樣品管外表面（此處不建議使用75%酒精，以免破壞樣品標(biāo)識）。如發(fā)現(xiàn)滲漏應(yīng)立即用吸水紙覆蓋，并噴灑有效氯含量為0.55%的含氯消毒劑進(jìn)行消毒處理，不得對標(biāo)本繼續(xù)檢測操作，做好標(biāo)本不合格記錄后需立即進(jìn)行密封打包，壓力蒸汽滅菌處理后銷毀。10110min行后續(xù)核酸提取。安全柜內(nèi)進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后安全要求。需對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境進(jìn)行清潔消毒。3010.275%面、地面消毒。生物安全柜消毒。實(shí)驗(yàn)使用后的耗材廢棄物放入醫(yī)療廢物垃圾袋中，包0.2%75%75%300.275%酒精進(jìn)行擦拭或噴灑消毒。0.2化氫擦拭或噴灑消毒。（三）實(shí)驗(yàn)室醫(yī)療廢物管理HEPA充分掌握生物安全廢棄物的分類，并嚴(yán)格執(zhí)行相應(yīng)的處理程序。廢液的處理。實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的廢液可分為普通污水和感染性廢液。普通污后進(jìn)行排放。感染性廢液即在實(shí)驗(yàn)操作過程中產(chǎn)生的廢液，需采用化學(xué)消毒（0.55%含氯消毒劑處理）或物理消毒（30）GB18466《水污染物排放標(biāo)準(zhǔn)》相關(guān)規(guī)定進(jìn)行評價(jià)。固體廢物的處理。實(shí)驗(yàn)室固體廢物應(yīng)當(dāng)分類收集。固體廢物的收集容器實(shí)驗(yàn)室。HEPA理單位進(jìn)行處置。（四）實(shí)驗(yàn)室污染的處理標(biāo)本污染生物安全柜的操作臺造成局限污染時(shí)：立即用吸水紙覆蓋，并使用0.55%含氯消毒劑進(jìn)行噴灑消毒。消毒液需要現(xiàn)用現(xiàn)配，24小時(shí)內(nèi)使用。0.55%含氯消毒劑的毛巾覆蓋污染區(qū)。必要時(shí)（如大量溢撒時(shí)）可用過2g/m320g/L8ml/m31-28g/m3，放入耐熱耐腐蝕容器（陶罐或玻璃容器），后加入甲醛（40%）10ml/m3460%-80%。并進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室換氣等，防止次生危害。八、核酸檢測信息化管理應(yīng)當(dāng)在衛(wèi)生健康行政部門統(tǒng)籌下，做好標(biāo)本采集、核酸檢測、檢測報(bào)告的信息對接工作。建立統(tǒng)一的信息采集掃碼