獸醫(yī)免疫學(xué)修改

獸醫(yī)免疫學(xué)修改第一頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日一、免疫及免疫學(xué)的概念（一）免疫的概念

1、古典免疫：免疫一詞最早來自拉丁文Immunis，意思是免除兵役、免除賦稅。免疫學(xué)Immunology來自該詞。

2、傳統(tǒng)免疫：指有機(jī)體免除傳染病感染、抵抗傳染病的能力。

3、現(xiàn)代免疫：免疫是有機(jī)體識別自身（自身組織）和非自身（非自身物質(zhì)），并保持自身完整性的生物生理學(xué)反應(yīng)。第二頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日(二)免疫學(xué)的概念

免疫學(xué)是研究有機(jī)體如何識別和排斥“非已”抗原物質(zhì)的一門科學(xué)。動物在長期進(jìn)化過程中，形成了一套完整的組織器官結(jié)構(gòu)，稱為免疫系統(tǒng)，具有精確的識別自身和非自身的能力。對自身組織不發(fā)生任何反應(yīng)，稱為天然免疫耐受現(xiàn)象，對非自身物質(zhì)（外來侵入者：微生物、寄生蟲、有害理化因素、致癌物質(zhì)等；內(nèi)部破壞者：衰老破損細(xì)胞、突變細(xì)胞）進(jìn)行排除和消滅。第三頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日三、免疫的基本特性和基本功能（一）免疫的基本特性1、識別特性：精確地識別自身和非自身物質(zhì)。2、特異性：某種抗原物質(zhì)剌激機(jī)體所產(chǎn)生的免疫力，只針對相應(yīng)的抗原物質(zhì)。3、免疫記憶：某種抗原物質(zhì)剌激機(jī)體而使機(jī)體的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫記憶，相同抗原物質(zhì)再次進(jìn)入時，將其更快速、更有效地消滅和排除。第四頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（二）免疫的基本功能1、免疫防疫（抗感染免疫）：機(jī)體抗感染的功能是通過三個環(huán)節(jié)發(fā)揮作用的。（1）阻止病原微生物進(jìn)入體內(nèi)。（2）抑制病原微生物在體內(nèi)繁殖。（3）消滅在體內(nèi)繁殖的病原微生物。*:抗感染功能過高，引起傳染性變態(tài)反應(yīng)；抗感染功能過低，反復(fù)發(fā)生傳染病。2、免疫自身穩(wěn)定：清除機(jī)體正常代謝過程中產(chǎn)生的衰老、破損細(xì)胞，保持自身環(huán)境穩(wěn)定。該功能失調(diào)，則引起自身免疫病。3、免疫監(jiān)視：清除機(jī)體正常代謝過程中產(chǎn)生的突變細(xì)胞。該功能失調(diào)，則引起腫瘤和癌癥。第五頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日第一章非特異性免疫概念和特點第一節(jié)防御屏障第二節(jié)吞噬細(xì)胞與吞噬作用第三節(jié)K細(xì)胞和NK細(xì)胞第四節(jié)補(bǔ)體系統(tǒng)第五節(jié)正常體液中殺微生物物質(zhì)第六節(jié)影響非特異性免疫的因素第七節(jié)增強(qiáng)非特異性免疫的方法第六頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日非特異性免疫的概念和特點一、概念：動物在長期的進(jìn)化過程中，在同外來侵入者、內(nèi)部破壞者的斗爭中所建立的、對多種異物都能發(fā)揮防御作用的免疫力，稱為非特異性免疫。二、特點：

1、作用發(fā)生迅速。

2、作用范圍廣、不具特異性。

3、受遺傳控制，很穩(wěn)定。

4、作用強(qiáng)度弱，對毒力強(qiáng)、數(shù)量大的微生物作用小。第七頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日第一節(jié)防御屏障一、皮膚粘膜屏障（一）作用：阻止病原微生物進(jìn)入機(jī)體內(nèi)。但個別微生物（布氏桿菌、鼻疽桿菌等）例外。（二）作用機(jī)理

1、皮膚角質(zhì)層的機(jī)械阻擋作用。

2、正常皮膚粘膜上正常菌群的拮抗作用。

3、特殊結(jié)構(gòu)（鼻毛、氣管纖毛、粘液）的機(jī)械排除作用。

4、胃液、唾液、乳汁、淚液中乳酸、溶菌酶的抑菌和殺菌作用。第八頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日二、血腦屏障（一）作用保護(hù)大腦、免除血液中病原微生物對大腦的侵襲作用。（二）作用機(jī)理由大腦毛細(xì)血管緊密排列的內(nèi)皮細(xì)胞層通過胞飲作用，吞噬和消滅異物的。第九頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日三、胎盤屏障（一）作用

阻止母體病原微生物進(jìn)入胎兒，對胎兒保護(hù)作用。但個別微生物（布氏桿菌、沙門氏菌）例外。（二）作用機(jī)理

母體子宮內(nèi)膜、胎兒絨毛尿囊膜組成屏障結(jié)構(gòu)，阻止病原微生物人母體進(jìn)入胎兒。第十頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日第二節(jié)吞噬細(xì)胞與吞噬作用一、概念二、吞噬細(xì)胞的來源、分化和特點三、吞噬細(xì)胞的結(jié)構(gòu)及吞噬消毀異物的過程四、吞噬細(xì)胞的作用第十一頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日第二章特異性免疫第一節(jié)特異性免疫的概念與特點第二節(jié)特異性免疫的組織結(jié)構(gòu)第三節(jié)抗原第四節(jié)抗體第五節(jié)特異性免疫應(yīng)答第六節(jié)變態(tài)反應(yīng)

返回第十二頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日第一節(jié)特異性免疫的概念與特點一、概念

機(jī)體在生活過程中接觸某種抗原物質(zhì)產(chǎn)生一系列免疫應(yīng)答連鎖反應(yīng)，從而對該抗原物質(zhì)再次進(jìn)入反應(yīng)強(qiáng)烈，并大大加強(qiáng)對該抗原物質(zhì)的排斥和清除的過程，稱特異性免疫。

第十三頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日二、特異性免疫的特點（1）后天獲得，又稱后天免疫；（2）具有特異性；（3）具有一定的免疫期；（4）不具遺傳性，不能傳遞給后代，但與動物進(jìn)化有關(guān)。動物越高級，特異性免疫越完善。第十四頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日第二節(jié)特異性免疫的組織結(jié)構(gòu)一、免疫器官（一）中央免疫器官（primaryimmuneorgans）

1、骨髓（bonemarrow）

2、胸腺(thymus)

3、法氏囊（bursaofFabricius）

（二）外周免疫器官（secondaryimmuneorgans）

1、脾臟（spleen）

2、淋巴結(jié)（lymphnode）

二、免疫細(xì)胞三、免疫分子第十五頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（一）中央免疫器官

胸腺、腔上囊和骨髓。

特點：胚胎早期出現(xiàn)，是誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞分化增殖為免疫活性細(xì)胞的器官，對機(jī)體免疫反應(yīng)具有控制作用。淋巴細(xì)胞成熟后移入外周免疫器官。

（二）外周免疫器官

淋巴結(jié)、脾臟。

特點：為混合結(jié)構(gòu)，由胸腺依賴性和非胸腺性淋巴細(xì)胞菌核組成，存在于整個成年期。雞沒有淋巴結(jié)，淋巴組織廣泛分布于體內(nèi)。第十六頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日二、免疫細(xì)胞所有直接或間接參與免疫應(yīng)答的細(xì)胞統(tǒng)稱為免疫細(xì)胞，有T細(xì)胞、B細(xì)胞、K細(xì)胞、NK細(xì)胞、單核吞噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和粒細(xì)胞等。根據(jù)參與免疫應(yīng)答的功能不同可進(jìn)一步區(qū)分為：免疫活性細(xì)胞——T細(xì)胞、B細(xì)胞抗原遞呈細(xì)胞其他免疫細(xì)胞

第十七頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（一）免疫活性細(xì)胞淋巴細(xì)胞受抗原刺激后分化為各種功能性細(xì)胞：

T細(xì)胞免疫母細(xì)胞效應(yīng)細(xì)胞釋放淋巴因子

記憶細(xì)胞

B細(xì)胞漿母細(xì)胞漿細(xì)胞抗體

記憶細(xì)胞

活化的T、B淋巴細(xì)胞壽命僅2－6天，記憶細(xì)胞可達(dá)數(shù)月。T、B淋巴細(xì)胞表面有多種抗原和受體（表面標(biāo)志），可以此辨認(rèn)不同類型的T、B淋巴細(xì)胞。

T細(xì)胞可分為輔助性T細(xì)胞（Th）、抑制性T細(xì)胞（Ts）、細(xì)胞毒性T細(xì)胞（Tk）、記憶性T細(xì)胞（Tm)。第十八頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日T細(xì)胞的幾種表面標(biāo)志（1）TCR(T細(xì)胞抗原受體)

：所有T細(xì)胞表面具有識別和結(jié)合特異性抗原的分子結(jié)構(gòu)。TCR識別抗原的MHC限制性：TCR識別和結(jié)合抗原的性質(zhì)是有條件的，即只有當(dāng)抗原片段或決定簇與抗原遞呈細(xì)胞上的MHC分子結(jié)合在一起時，T細(xì)胞的TCR才能識別或結(jié)合MHCII類分子(或I類分子)與抗原片段復(fù)合物中的抗原部分。第十九頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日T細(xì)胞的幾種表面標(biāo)志（2）CD2(紅細(xì)胞受體)

：一些人和動物的T細(xì)胞在體外能與綿羊紅細(xì)胞結(jié)合，形成紅細(xì)胞花環(huán)（E花環(huán)試驗）。（3）CD3

：功能是把TCR與外來結(jié)合的抗原信息傳遞到細(xì)胞內(nèi)，啟動細(xì)胞內(nèi)的活化過程。（4）CD4和CD8(MHCII類分子和MHCI類分子的受體)

：同一T細(xì)胞表面只表達(dá)其中一種，因此T細(xì)胞可分成兩大亞群。

第二十頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日T細(xì)胞亞群及功能1、CD4+T細(xì)胞：按功能分為3個亞群。（1）輔助性T細(xì)胞（Th）

：協(xié)助其他免疫細(xì)胞發(fā)揮功能。（2）誘導(dǎo)性T細(xì)胞（TI）

：能誘導(dǎo)Th和TS細(xì)胞的成熟。（3）遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)性T細(xì)胞（TD）

：在免疫應(yīng)答的效應(yīng)階段和IV型超敏反應(yīng)中能釋放多種淋巴因子導(dǎo)致炎癥反應(yīng)，發(fā)揮排除抗原的功能。第二十一頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日T細(xì)胞亞群及功能2、CD8+T細(xì)胞：按功能分為2個亞群。（1）抑制性T細(xì)胞（TS）

：抑制B細(xì)胞產(chǎn)生抗體和其他T細(xì)胞分化增殖，從而調(diào)節(jié)體液免疫和細(xì)胞免疫。（2）細(xì)胞毒性T細(xì)胞（TC）

：又稱為殺傷性T細(xì)胞（Tk）

，活化后稱為細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL

）

。在免疫效應(yīng)階段，TC活化產(chǎn)生CTL，對靶細(xì)胞（如被病毒感染的細(xì)胞或癌細(xì)胞）發(fā)揮殺傷作用，CTL能連續(xù)殺傷多個靶細(xì)胞。第二十二頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日CD4和CD8分別出現(xiàn)在具有不同功能亞群的T細(xì)胞表面。CD4和CD8的比值是一重要的評估機(jī)體免疫狀態(tài)的依據(jù)。在正常情況下，此比值為2：1。第二十三頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日B細(xì)胞的表面標(biāo)志SmIg：B細(xì)胞表面的抗原受體是細(xì)胞表面的免疫球蛋白。第二十四頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日B細(xì)胞亞群及功能目前根據(jù)B細(xì)胞表面膜免疫球蛋白與是否依賴T細(xì)胞分為2個亞群。（1）B1細(xì)胞（T細(xì)胞非依賴性細(xì)胞）：在接受胸腺非依賴性抗原刺激后活化增殖，不需Th細(xì)胞的幫助。（2）B2細(xì)胞（T細(xì)胞依賴性細(xì)胞）

：這類細(xì)胞在接受胸腺依賴性抗原刺激后發(fā)生免疫應(yīng)答，必須有Th細(xì)胞的協(xié)助。第二十五頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日在免疫應(yīng)答中將抗原遞呈給抗原特異性淋巴細(xì)胞，對抗原進(jìn)行捕捉、加工和處理，這些細(xì)胞稱為輔佐細(xì)胞。（1）單核吞噬細(xì)胞

：包括血液中的單核細(xì)胞和組織中的巨噬細(xì)胞。

吞噬和殺傷作用抗原加工和遞呈合成和分泌各種活性因子（2）樹突狀細(xì)胞

：朗罕氏細(xì)胞、間質(zhì)樹突細(xì)胞、濾泡樹突細(xì)胞（二）抗原遞呈細(xì)胞（APC）第二十六頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（三）其他免疫細(xì)胞K細(xì)胞（殺傷細(xì)胞）除T、B細(xì)胞外，在免疫應(yīng)答中起重要作用的淋巴細(xì)胞還有K細(xì)胞，K細(xì)胞表面具有IgG的Fc受體，它同抗體結(jié)合參與殺傷靶細(xì)胞的作用，該殺傷作用強(qiáng)大，稱為抗體依賴性介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用——ADCC。第二十七頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（三）其他免疫細(xì)胞NK細(xì)胞（自然殺傷細(xì)胞）對細(xì)胞抗原的殺傷作用完全是非特異性的，即不依賴特異性抗體就具有殺傷作用，又稱自發(fā)的細(xì)胞毒作用（SCMC)。主要生物功能為非特異性殺傷腫瘤細(xì)胞。第二十八頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（三）其他免疫細(xì)胞粒細(xì)胞：

胞漿中含有顆粒的白細(xì)胞統(tǒng)稱粒細(xì)胞。嗜中性粒細(xì)胞：血液中的主要吞噬細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞：與IgE的Fc受體結(jié)合，引起過敏反應(yīng)。嗜酸性粒細(xì)胞：寄生蟲感染及I型超敏反應(yīng)性疾病。第二十九頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日三、免疫分子補(bǔ)體補(bǔ)體：存在于正常動物和人血清中的一組不耐熱具有酶活性的球蛋白。C1和C9均以不活動形式存在于血清中，受抗原抗體復(fù)合物激活后，發(fā)揮免疫學(xué)功能，表現(xiàn)殺菌、加強(qiáng)吞噬細(xì)胞和抗體作用等。

生物學(xué)活性：細(xì)胞溶解：殺菌、溶菌、溶血作用；調(diào)理作用：產(chǎn)生許多具有生物學(xué)活性的片斷，如調(diào)理素、過敏素等參與免疫反應(yīng)；細(xì)胞黏附；中和病毒。第三十頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日三、免疫分子細(xì)胞因子細(xì)胞因子：是指由免疫細(xì)胞（如單核/巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞等）和某些非免疫細(xì)胞（如血管內(nèi)皮細(xì)胞、表皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等）合成和分泌的一類高活性多功能蛋白質(zhì)多肽分子。生物學(xué)功能：介導(dǎo)和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答；介導(dǎo)炎癥反應(yīng)；抗病毒；造血等。第三十一頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日A、作用于巨噬細(xì)胞的淋巴因子a、巨噬細(xì)胞移動抑制因子（MIF）：主要是抑制巨噬細(xì)胞的移動，使之停留在抗原性異物所在部位，發(fā)揮更大的吞噬作用。b、巨噬細(xì)胞趨化因子（MCF）：作用是吸引巨噬細(xì)胞至反應(yīng)部位。c、巨噬細(xì)胞激活因子（MAF）：增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬銷毀能力。d、巨噬細(xì)胞武裝因子（SMAF）：使巨噬細(xì)胞獲得特異性吞噬抗原性異物和殺傷靶細(xì)胞的能力。這個因子是在研究腫瘤時發(fā)現(xiàn)的，正常時，巨噬細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞無殺傷作用，但該因子能使之獲得特異性殺傷腫瘤的作用。第三十二頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日B、作用于白細(xì)胞的因子

1979年，在瑞士舉行的第二界國際淋巴因子專題討論會上，將作用于白細(xì)胞的因子統(tǒng)稱為白細(xì)胞介素（interleukin,IL）。a、IL-1：IL-1為一種蛋白質(zhì)，由一條多肽鏈組成，分子量12000~18000，可由細(xì)菌脂多糖、抗原抗體復(fù)合物和某些細(xì)菌激活單核巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞產(chǎn)生，其作用是作為Tc激活的第二信號，通過激活Th細(xì)胞，以促進(jìn)Bc產(chǎn)生抗體，并誘導(dǎo)Th細(xì)胞產(chǎn)生IL-2。第三十三頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日b

、IL-2IL-2為一種糖蛋白，是IL-1誘導(dǎo)Th產(chǎn)生的，其作用有：ⅰ誘導(dǎo)產(chǎn)生Tk細(xì)胞，并使致敏的Tk活性大大加強(qiáng)，并維持其持續(xù)增長和在體外長期生長。ⅱ促進(jìn)Th增殖，并維持其在體外長期生長。ⅲ增強(qiáng)干擾素的生成。ⅳ增強(qiáng)NKc的功能，為腫瘤治療提供手段。由于IL-2在生產(chǎn)中應(yīng)用很廣，現(xiàn)已利用細(xì)胞雜交技術(shù)獲得了產(chǎn)生IL-2的雜交細(xì)胞株,但I(xiàn)L-2對休止期淋巴細(xì)胞無作用。第三十四頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日c、IL-3

是新近發(fā)現(xiàn)的一類作用于淋巴細(xì)胞的因子，是IL-1激活Th后產(chǎn)生的，其促進(jìn)多種淋巴細(xì)胞分化、增殖方面與IL-2相同，但I(xiàn)L-3主要作用于未成熟的淋巴細(xì)胞，使之分化，并對嗜堿性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞的生長有調(diào)節(jié)作用。第三十五頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日C、作用于淋巴細(xì)胞的淋巴因子a、促分裂因子（MF）：促進(jìn)淋巴細(xì)胞合成DNA，使正常Tc轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞，激活的淋巴母細(xì)胞又能合成、釋放非特異性淋巴因子以擴(kuò)大效應(yīng)。

b、轉(zhuǎn)移因子（TF）：使正常Tc轉(zhuǎn)化為致敏淋巴細(xì)胞，從而增強(qiáng)細(xì)胞免疫反應(yīng)。轉(zhuǎn)移因子易提純，不具抗原性，不引起免疫反應(yīng)，人醫(yī)上用于傳染病的輔助治療。第三十六頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日D、作用于靶細(xì)胞的淋巴因子a、淋巴毒素（LT）：又稱細(xì)胞毒淋巴因子，對靶細(xì)胞進(jìn)行胞外殺傷，還能通過靶細(xì)胞膜進(jìn)入胞內(nèi)，抑制靶細(xì)胞分解。

b、干擾素：Tc受抗原刺激后能分泌一種干擾素，稱為Ⅱ型干擾素，區(qū)別于其它細(xì)胞受病毒作用產(chǎn)生的干擾素（稱Ⅰ型干擾素），Ⅱ型干擾素常分泌到體液中，作為有機(jī)體的正常抗微生物物質(zhì)，也可進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，干擾病毒繁殖。第三十七頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日E、作用于血管的淋巴因子使血管通透性增強(qiáng)，血液中吞噬細(xì)胞和正常抗微生物物質(zhì)易進(jìn)入組織間隙，在組織間隙發(fā)揮作用。第三十八頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日第三節(jié)抗原一、抗原的概念二、構(gòu)成抗原的條件三、抗原的分類四、抗原的交叉性第三十九頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日一、抗原的概念抗原的概念：凡能刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體或致敏淋巴細(xì)胞，并能與之結(jié)合引起特異性免疫反應(yīng)的物質(zhì)，稱為抗原?？乖男再|(zhì)：凡是抗原，均具有兩個性質(zhì)：（1）免疫原性：抗原物質(zhì)進(jìn)入有機(jī)體，能刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生免疫反應(yīng)，稱為抗原的免疫原性。（2）免疫反應(yīng)性：能同其刺激有機(jī)體產(chǎn)生的抗體、致敏淋巴細(xì)胞發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)，稱抗原的特異反應(yīng)性。第四十頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日二、構(gòu)成抗原的條件（一）構(gòu)成抗原免疫原性的條件

1、異物性

2、大分子物質(zhì)

3、具有特定結(jié)構(gòu)（二）構(gòu)成抗原特異反應(yīng)性的條件第四十一頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（一）構(gòu)成抗原免疫原性的條件1、異物性：異物即指機(jī)體外來物質(zhì)，只有外來異物才能刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)，異物程度越高，免疫原性越強(qiáng)。（1）異種物質(zhì)：如異種動物的組織、細(xì)胞及蛋白質(zhì)，各種病原微生物及其產(chǎn)物，如外毒素。（2）同種異體抗原：同種動物不同個體之間由于遺傳基因的不同，其某些組織成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)也有差異，如血型抗原、組織移植抗原，在器官移植時，發(fā)生移植排斥反應(yīng)。

（3）自身抗原：如眼球晶體蛋白、甲狀腺蛋白、精子蛋白等。第四十二頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（一）構(gòu)成抗原免疫原性的條件

2、必須是大分子物質(zhì)：分子量越大，免疫原性越強(qiáng)，分子量10000u以上為強(qiáng)抗原，5000~10000u為弱抗原，5000u以下不具抗原性。如牛血清白蛋白為70000u，丙種球蛋白為160000u，均是強(qiáng)抗原。而胰島素是5700u，為弱抗原。因分子量大的物質(zhì)具兩個特點：（a）表面具較多的化學(xué)活性基團(tuán)。（b）進(jìn)入有機(jī)體后，不易為有機(jī)體分解，保存時間長，有更多的機(jī)會同免疫系統(tǒng)的細(xì)胞成分接觸，而激發(fā)免疫反應(yīng)。

第四十三頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（一）構(gòu)成抗原免疫原性的條件3、具有特定的結(jié)構(gòu)：“抗原決定簇”和“載體”（1）抗原決定簇（抗原表位）：在抗原分子表面具有特殊立體構(gòu)型和免疫活性的化學(xué)基團(tuán)稱為抗原決定簇。（2）載體：載體是抗原決定簇所依賴的基本結(jié)構(gòu)，起穩(wěn)定抗原決定簇、激活巨噬細(xì)胞及免疫記憶作用。第四十四頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（二）構(gòu)成抗原特異反應(yīng)性的條件

抗原的特異反應(yīng)性是免疫反應(yīng)的基礎(chǔ)，是由抗原決定簇的種類和數(shù)量決定的。在抗原的表面和內(nèi)部一般存在一種或幾種抗原決定簇，有幾種抗原決定簇，進(jìn)入機(jī)體后，就能刺激機(jī)體產(chǎn)生幾種不同的特異性抗體。抗原決定簇性質(zhì)不穩(wěn)定，易受酸、堿、日光、溫度的影響而發(fā)生結(jié)構(gòu)改變，結(jié)構(gòu)改變了的抗原決定簇使機(jī)體產(chǎn)生另一種抗體，失去抗原的原來特異性。第四十五頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日三、抗原的分類（一）根據(jù)抗原的性質(zhì)和結(jié)構(gòu)分類1完全抗原：既具有免疫原性，又具有特異反應(yīng)性的抗原。如各種微生物及其毒素、異種動物血清。2半抗原：只具有特異反應(yīng)性，不具免疫原性的抗原。如多糖、類脂、藥物等，但半抗原與載體蛋白質(zhì)結(jié)合后具有了免疫原性，則轉(zhuǎn)變成完全抗原，半抗原根據(jù)特異反應(yīng)性是否出現(xiàn)可見反應(yīng)分：（1）復(fù)合半抗原：與抗體結(jié)合出現(xiàn)可見反應(yīng)的半抗原。這種復(fù)合抗原具有兩個以上的抗原決定簇，與抗體的結(jié)合價為多價，如細(xì)胞表面的多糖。（2）簡單半抗原：與抗體結(jié)合不出現(xiàn)可見反應(yīng)的半抗原。這種簡單半抗原只有一個抗原決定簇，與抗體的結(jié)合價為單價，如青霉素。這種簡單半抗原可抑制抗體與相應(yīng)的完全抗原或復(fù)合半抗原結(jié)合，不再出現(xiàn)可見反應(yīng)，故又稱阻抑半抗原。第四十六頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日三、抗原的分類（二）根據(jù)對胸腺（T細(xì)胞)的依賴性分類

1、T細(xì)胞依賴性抗原（TD抗原）：又稱胸腺依賴性抗原，這種抗原需要Th細(xì)胞的幫助才能刺激B細(xì)胞活化，大多數(shù)抗原均屬此類。

2、非Tc依賴性抗原（TI抗原）：又稱非胸腺依賴性抗原，這種抗原可直接刺激B細(xì)胞，使之活化，而不需Th協(xié)同，如大腸桿菌LPS、肺炎球菌莢膜多糖。第四十七頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日三、抗原的分類（三）根據(jù)與抗原加入和遞呈的關(guān)系分類

1、外源性抗原：存在于細(xì)胞間，自細(xì)胞外被APC吞噬、捕獲或與B細(xì)胞特異性結(jié)合后而進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的抗原。包括所有自體外進(jìn)入的微生物、疫苗、異種蛋白等。

2、內(nèi)源性抗原：自身細(xì)胞內(nèi)合成的抗原。如胞內(nèi)菌和病毒感染細(xì)胞所合成的細(xì)菌抗原、病毒抗原，腫瘤細(xì)胞合成的腫瘤抗原，自身隱蔽抗原，變性的自身成分等。第四十八頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日四、抗原的交叉性不同抗原物質(zhì)之間可能出現(xiàn)不同程度的交叉反應(yīng)，稱為抗原的交叉性。原因在于：（一）不同物質(zhì)存在共同的抗原組成：如不同株大腸桿菌常具有K88、K99抗原。（二）不同抗原分子存在共同的抗原決定簇：如沙門氏菌屬的A、B、D三群沙門氏菌除各具其特異的抗原決定簇外，決定簇12為三群所共有。（三）不同決定簇間部分構(gòu)型相同：因蛋白質(zhì)Ag的抗原決定簇主要決定于多肽末端的氨基酸組成，如末端氨基酸相似，則可出現(xiàn)交叉反應(yīng)，交叉反應(yīng)強(qiáng)度與相似程度成正比。第四十九頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日重要的天然抗原（一）微生物抗原

1.細(xì)菌抗原：0抗原、H抗原、K抗原、菌毛抗原。外毒素、類毒素2.病毒抗原

囊膜抗原（V抗原）：囊膜纖突，有型和亞型特異性，如流感病毒囊膜上的血凝素（HA）、神經(jīng)氨酸酶（NA）。

衣殼抗原（VC抗原）

：無囊膜病毒

核蛋白抗原（NP抗原）

：核衣殼是完整病毒的衣殼蛋白—核酸的復(fù)合體。3.其他

如真菌抗原、原蟲抗原和蠕蟲抗原，但免疫原性弱，特異性不強(qiáng)，交叉反應(yīng)多。第五十頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（二）高等生物的抗原

1.動物血清與組織抗原：常與過敏反應(yīng)有關(guān)

2.各種酶：

3.激素：蛋白類激素，有免疫原性；脂溶性激素，無免疫原性（半抗原）4.AB0血型抗原（三）人工抗原1.合成抗原：依據(jù)蛋白質(zhì)的AA序列，用人工方法合成蛋白質(zhì)肽鏈或合成一段短肽后與大分子載體連接。

2.結(jié)合抗原：將天然的半抗原（如藥物分子、化學(xué)元素等）與大分子的蛋白質(zhì)載體連接，使其具有免疫原性。第五十一頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日第四節(jié)抗體（Antibody:Ab）一、抗體的概念二、有機(jī)體產(chǎn)生抗體的一般規(guī)律三、抗體產(chǎn)生的理論四、抗體的基本結(jié)構(gòu)和功能五、抗體的種類六、各種抗體的特性七、抗體的抗原性八、抗體的生物學(xué)活性九、單克隆抗體（Monoclonalantibody）第五十二頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日一、抗體的概念抗體是有機(jī)體在抗原刺激下產(chǎn)生的，并能與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的一類球蛋白的總稱?？贵w存在于血清、淋巴液、粘膜分泌物和組織中，但以血清中含量最高，制備抗體也常從血清中獲得，所以抗體又常稱為抗血清。因抗體活性部位位于球蛋白的γ區(qū)，所以抗體又稱為γ-球蛋白或丙種球蛋白。1964年，將具抗體活性以及與抗體有關(guān)的球蛋白統(tǒng)稱免疫球蛋白（Immunoglobulin,Ig）,Ig對酸、堿、熱、光都較敏感，易為之破壞。第五十三頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日二、有機(jī)體產(chǎn)生抗體的一般規(guī)律（一）初次反應(yīng)：某種抗原首次進(jìn)入機(jī)體內(nèi)引起的抗體產(chǎn)生過程。

1、有一定潛伏期：潛伏期指抗原進(jìn)入機(jī)體到血清中出現(xiàn)抗體所持續(xù)的時間，一般病毒的潛伏期2天，細(xì)菌3-5天，類毒素2-3周，而且死菌潛伏期比活菌更長。

2、產(chǎn)生的抗體總量不高，只能達(dá)到最大量的20-30%。

3、先產(chǎn)生IgM，當(dāng)其將消失時，IgG達(dá)最大量，再過2周才出現(xiàn)IgA。

第五十四頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（二）再次反應(yīng)

動物機(jī)體第二次接觸相同的抗原，體內(nèi)產(chǎn)生的抗體過程稱為再次反應(yīng)。

1、無潛伏期，抗體量先急劇下降（由于第二次進(jìn)入的抗原與機(jī)體中抗體發(fā)生了抗原抗體結(jié)合），約2-3天后，又急劇上升。

2、抗體量可達(dá)初次反應(yīng)的10-50倍，是由于第一次的記憶細(xì)胞被激活，發(fā)揮作用。

3、抗體高峰期維持時間長，下降緩慢。

4、主要是IgG。第三次注入相同抗原時所發(fā)生的反應(yīng)與再次反應(yīng)一樣，依此類推。但不能無限地注射抗原，否則發(fā)生免疫耐受，一般最多5次，不超過6次，高免血清就是依此原理制成的。第五十五頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（三）回憶反應(yīng)抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體經(jīng)一定時間后，在體內(nèi)逐漸消失，此時若機(jī)體再次接觸相同的抗原物質(zhì)，可使已消失的抗體快速回升稱為回憶反應(yīng)?；貞浄磻?yīng)的特點與再次反應(yīng)基本相同。血清中抗體量急劇上升，且量很大，也是記憶細(xì)胞的作用。高峰期維持時間長，下降緩慢，主要是IgG。但有較短的潛伏期，一般2-3天。第五十六頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日抗體產(chǎn)生規(guī)律圖示第五十七頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日四、抗體的基本結(jié)構(gòu)和功能（一）抗體分子的基本結(jié)構(gòu)每個抗體分子由兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈組成，重鏈之間，輕重鏈之間，鏈內(nèi)均由二硫鍵聯(lián)結(jié)。第五十八頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日第五十九頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（四）抗體的抗原結(jié)合部位抗體的抗原結(jié)合是由重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)構(gòu)成與抗原決定簇表面互補(bǔ)的分子構(gòu)型而與抗原結(jié)合的，一個抗體分子單體有兩個抗原結(jié)合位點。第六十頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（五）抗體分子的酶解片段（1）木瓜蛋白酶酶解：用木瓜蛋白酶酶解IgG，可獲得3個片段，兩個單體的Fab段，能結(jié)合抗原；一個包含CH1、CH2的可結(jié)晶片段，稱Fc段。（2）胃蛋白酶酶解：用胃蛋白酶酶解IgG，獲得一個雙價的能結(jié)合抗原的片段，稱F(ab‘)2片段和數(shù)段小分子多肽。第六十一頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日第六十二頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日五、抗體的種類（一）根據(jù)抗體與抗原結(jié)合后，是否出現(xiàn)可見反應(yīng)分類：

1、完全抗體：又稱二價或多價抗體，因完全抗體的單體都具有兩個或兩個以上的抗原結(jié)合位點，而且與抗原結(jié)合后，能出現(xiàn)可見反應(yīng)，如凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)。屬IgM或IgG，一般所稱的抗體都是完全抗體。

2、不完全抗體（Imcomplateantibody）：又稱單價抗體或封閉抗體，因IgG的兩個抗原結(jié)合位點之一不活動而失去功能，只一個位點能與抗原結(jié)合，故不能形成大的抗原抗體復(fù)合物，故不出現(xiàn)可見反應(yīng)。但不完全抗體能封閉抗原的抗原決定簇，阻止抗原與完全抗體結(jié)合，而不出現(xiàn)可見反應(yīng)。第六十三頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（二）根據(jù)抗原抗體反應(yīng)類型分類1、沉淀素（precipitin）：即能與可溶性抗原發(fā)生沉淀反應(yīng)的抗體。2、凝集素（agglutinim）：指與顆粒性抗原發(fā)生凝集反應(yīng)的抗體。3、補(bǔ)體結(jié)合抗體（complementlikingantibody）：指與抗原結(jié)合后能吸引補(bǔ)體，引起補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)的抗體。4、中和抗體（neutralizingantibody）：指能與病毒結(jié)合，并使病毒喪失對易感細(xì)胞感染力的抗體。5、溶解素（lysin）：指與細(xì)胞膜上抗原結(jié)合，在補(bǔ)體作用下使細(xì)胞裂解的抗體。第六十四頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（三）根據(jù)抗體來源不同分類1、免疫抗體：指機(jī)體在后天生活過程中，受抗原刺激而產(chǎn)生的抗體。2、天然抗體：指先天獲得的，不須后天抗原刺激即具有的抗體。第六十五頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（四）根據(jù)抗體組成結(jié)構(gòu)不同分類1、類：根據(jù)抗體重鏈穩(wěn)定區(qū)的氨基酸組成不同分為亞類：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。2、亞類(subclass)：根據(jù)抗體重鏈穩(wěn)定區(qū)結(jié)構(gòu)上較微細(xì)的差異分為亞類：IgG：分成IgG1、IgG2、IgG3、IgG4IgA：分成IgA1、IgA2IgM：分成IgM1、IgM2IgD和IgE還未發(fā)現(xiàn)亞類。第六十六頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日3、型(type)：根據(jù)Ig輕鏈穩(wěn)定區(qū)結(jié)構(gòu)不同，將Ig分為兩個型，即K型和λ型。一個Ig分子的兩條輕鏈同為K型或λ型。4、亞型(subtype)：在Ig的λ型中，根據(jù)輕鏈穩(wěn)定區(qū)氨基酸微細(xì)差異分為亞型。OZ(+)亞型：190位氨基酸為亮氨酸OZ(-)亞型：190位氨基酸為精氨酸Kern(+)亞型：154位氨基酸為甘氨酸Kern(-)亞型：154位氨基酸為絲氨酸5、亞群(subgroup)：根據(jù)Ig重鏈和輕鏈可變區(qū)結(jié)構(gòu)特點，分為數(shù)組不同亞群。第六十七頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日六、各種抗體的特性（一）IgG：由一個抗體分子構(gòu)成。是抗體的主要抗感染抗體，能對細(xì)菌、病毒、毒素發(fā)揮免疫功能，占血清Ig總量的75-80%作用，特點是半衰期長，約25天，人的IgG能通過胎盤傳給胎兒，但家畜不能，但人畜的初乳中IgG含量均較高，所以家畜主要從初乳中獲得母源IgG，對新生胎兒抗感染起重要作用，分為IgG1、IgG2

、IgG3、IgG4四個亞類。第六十八頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（二）IgA

1、血清型IgA：在血清中含量僅次于IgG，約占5-25%。主要由一個抗體分子構(gòu)成。主要來自腸系膜淋巴組織的漿細(xì)胞，主要為IgA1（占血清IgA總量的約80%）。

2、分泌型IgA：存在于唾液、淚液、初乳、呼吸道、胃腸道、胃液等分泌液中，是機(jī)體粘膜局部抗感染的重要因素，故又稱局部抗體，其含量比血清型IgA高6-8倍，主要為IgA2

，由兩個抗體分子和一個分泌片，一個J鏈組成，抗感染作用比血清型IgA強(qiáng)。第六十九頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（三）IgM

主要存在于血清，是分子量最大的Ig，故又稱巨球蛋白，以五聚體通過J鏈聯(lián)結(jié)形成，常表現(xiàn)五個抗原結(jié)合價，所以在凝結(jié)作用，活化補(bǔ)體，溶菌作用等方面比IgG大250倍，特別在感染初期，控制菌血癥，敗血癥上起重要作用。第七十頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（四）IgD

只在人、小白鼠中發(fā)現(xiàn)少量的游離IgD，其它動物未發(fā)現(xiàn)，量少，半衰期短，僅3天，因此研究困難，目前未發(fā)現(xiàn)具免疫活性。發(fā)生過敏反應(yīng)，自身免疫疾病的個體，IgD增加，但作用仍不清。第七十一頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（五）IgE為單體，正常人畜IgE含量很低，只是在引起I型變態(tài)反應(yīng)時其量才顯著升高，因IgE對肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞具親嗜性，易與之結(jié)合，當(dāng)同種抗原再次進(jìn)入時，能與結(jié)合在肥大細(xì)胞上的IgE結(jié)合成復(fù)合物，使肥大細(xì)胞脫顆粒，釋放組織胺等活性物質(zhì)，引起I型變態(tài)反應(yīng)。IgE主要由鼻咽部、扁桃體、氣管、支氣管、胃腸道等粘膜固有層的漿細(xì)胞產(chǎn)生，血清中半衰期僅2-3天。第七十二頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日七、抗體的抗原性（一）概念：抗體的抗原性指抗體進(jìn)入機(jī)體后，可作為抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體，稱為抗抗體，這種抗抗體且能與相應(yīng)的抗體發(fā)生結(jié)合產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)。一種抗體常由于結(jié)構(gòu)不同而具有幾種抗原型。第七十三頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日七、抗體的抗原性（二）抗原型分類

1、同種型：指同種動物的不同個體Ig之間具有的共同抗原。前面提到的Ig的類、亞類、型、亞型、亞群所涉及的抗原，都屬同種型抗原，這種抗原對同種個體不具抗原性，對異種動物具抗原性，可用之生產(chǎn)抗抗體。

2.、同種異型：指同種動物的不同個體之間，由于Ig重鏈和輕鏈穩(wěn)定區(qū)上1-2個氨基酸的不同而表現(xiàn)的不同抗原性，如IgG的CH上發(fā)現(xiàn)有1-25個同種異型抗原，分別為Gm1~Gm25。

3、個體型：指同一個體產(chǎn)生的特異性不同的Ig分子，其可變區(qū)氨基酸組成不同，構(gòu)成了種類繁多的不同專一特異性的抗原。第七十四頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日八、抗體的生物學(xué)活性（一）與特異性抗原結(jié)合：抗體的抗原結(jié)合部位與抗原決定簇的結(jié)構(gòu)是互補(bǔ)的，決定了其結(jié)合的特異性，這種互補(bǔ)結(jié)構(gòu)是由遺傳決定的，一個抗原分子能與多個抗體結(jié)合，相互聯(lián)結(jié)起來，呈現(xiàn)可見的免疫反應(yīng)，如沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)等。第七十五頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日八、抗體的生物學(xué)活性（二）激活補(bǔ)體：IgG（IgG4除外）和IgM能激活補(bǔ)體經(jīng)典途徑，是由于抗體與抗原結(jié)合成復(fù)合物后，原來呈“T”狀態(tài)，轉(zhuǎn)變成“Y”狀態(tài)，使原來被掩蓋的Fc段補(bǔ)體結(jié)合位點暴露，從而與C1q結(jié)合引起的。IgG4、IgA、IgE、IgD能以Fab段激活補(bǔ)體替代途徑。第七十六頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日八、抗體的生物學(xué)活性（三）細(xì)胞結(jié)合：

1、IgG結(jié)合Kc：ADCC

2、IgE能同組織中肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞等結(jié)合，引起I型變態(tài)反應(yīng)。

3、結(jié)合吞噬細(xì)胞：調(diào)理作用，指增強(qiáng)吞噬細(xì)胞吞噬作用稱調(diào)理作用，具調(diào)理作用的物質(zhì)稱調(diào)理素，機(jī)體中抗體和補(bǔ)體是主要的調(diào)理素，其調(diào)理機(jī)制有兩個方面：

①抗體與顆粒性抗原結(jié)合成復(fù)合物后，能改變抗原的表面電荷，使之靜電排斥力減弱，有利于吞噬細(xì)胞靠近抗原，發(fā)揮更大的吞噬作用。

②抗體與抗原結(jié)合后，F(xiàn)c段暴露，與吞噬細(xì)胞的Fc受體結(jié)合，抗原與吞噬細(xì)胞間距離縮短。第七十七頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日單抗的制備過程動物免疫與親本細(xì)胞的選擇細(xì)胞融合：淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備雜交瘤細(xì)胞的篩選：有限稀釋法等單克隆抗體的制備和凍存單克隆抗體的純化第七十八頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日第五節(jié)特異性免疫應(yīng)答一、細(xì)胞免疫應(yīng)答（一）概念：Tc接受抗原刺激后產(chǎn)生的免疫反應(yīng)，稱為細(xì)胞免疫應(yīng)答。細(xì)胞內(nèi)寄生菌、立克次氏體、腫瘤，則多以細(xì)胞免疫為主。（二）細(xì)胞免疫過程（三）細(xì)胞免疫的主要作用第七十九頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（二）細(xì)胞免疫過程1、感應(yīng)階段2、反應(yīng)階段（reactivestage）3、效應(yīng)階段（effectivestage）第八十頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日抗原遞呈細(xì)胞（APC）

是指能攝取、加工和處理抗原，并將處理后的抗原肽遞呈給淋巴細(xì)胞而使淋巴細(xì)胞活化的一類免疫細(xì)胞。一類是帶有MHCII類分子的細(xì)胞，包括巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、B細(xì)胞、朗罕氏細(xì)胞，主要進(jìn)行外源性抗原遞呈，抗原肽被遞呈給CD4+T細(xì)胞識別。

另一類是帶有MHCI類分子的細(xì)胞，包括所有的有核細(xì)胞，血小板，網(wǎng)織紅細(xì)胞等，可作為內(nèi)源性感染的遞呈細(xì)胞。內(nèi)源性抗原被加工、處理，并被遞呈給CD8+T

細(xì)胞。第八十一頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日1、感應(yīng)階段指Tc接受抗原信息的階段。需要巨噬細(xì)胞對抗原的加工和傳遞，在血液中進(jìn)行。過程：巨噬細(xì)胞吞噬抗原，多數(shù)抗原被消化分解，失去抗原性，少數(shù)抗原的抗原決定簇與巨噬細(xì)胞的MHC形成抗原決定簇——MHC復(fù)合物，稱超抗原，具有更強(qiáng)的免疫原性。因這種復(fù)合物常濃集于巨噬細(xì)胞表面，保護(hù)了抗原決定簇不被分解，從而更有效地為Tc所識別，形成超抗原的巨噬細(xì)胞能吸引Tc，并通過細(xì)胞表面接觸將抗原信息傳遞給Tc，此乃Tc活化的第一信號。巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的淋巴細(xì)胞活化因子（LAF）作為Tc活化的第二信號，Tc在此雙信號系統(tǒng)的刺激下，成為致敏淋巴細(xì)胞，進(jìn)入反應(yīng)階段。第八十二頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日2、反應(yīng)階段（reactivestage）致敏淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞，一部分轉(zhuǎn)化為效應(yīng)Tc（包括Tk、Ts、TD），一部分轉(zhuǎn)化為記憶細(xì)胞，前者進(jìn)入效應(yīng)階段，后者不再繼續(xù)分化，存在于機(jī)體中保持記憶，其壽命為數(shù)月或數(shù)年。當(dāng)相同抗原再次進(jìn)入后，發(fā)揮更強(qiáng)的免疫作用，很快就轉(zhuǎn)化為效應(yīng)淋巴細(xì)胞。第八十三頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日3、效應(yīng)階段（effectivestage）即細(xì)胞免疫發(fā)揮免疫作用的階段，在血液中進(jìn)行。（1）效應(yīng)Tc的殺傷作用：又稱細(xì)胞毒作用，主要是Tk的作用。首先識別攜帶有特異性抗原的靶細(xì)胞，并于其周圍活動，但不能對靶細(xì)胞發(fā)揮殺傷作用，只有在Th的輔助下，才能對靶細(xì)胞攻擊，并粘附于其上，破壞其細(xì)胞膜，膜受損傷，Na入K出，隨后水大量進(jìn)入，從而改變靶細(xì)胞內(nèi)滲透壓，靶細(xì)胞破裂。但Tk細(xì)胞并未損傷，脫落下來，繼續(xù)對其它靶細(xì)胞發(fā)揮作用。由于靶細(xì)胞破裂，其內(nèi)的特異性抗原（如胞內(nèi)寄生菌）暴露，為致敏淋巴因子進(jìn)一步殺傷提供條件。第八十四頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（2）淋巴因子的作用于效應(yīng)淋巴細(xì)胞早期形成，并貯存于其內(nèi)，當(dāng)受到同種抗原的刺激時，才從胞內(nèi)釋放出來，由于其產(chǎn)量較低，且不管有無抗原存在，釋放的淋巴因子立即作用于周圍各種靶細(xì)胞。隨著被細(xì)胞吸附及體液稀釋，其活性難以持久，不易抵達(dá)遠(yuǎn)離組織，故認(rèn)為淋巴因子主要在局部免疫中起顯著作用。由于其研究只有十多年的歷史，且在體外進(jìn)行，故其命名也是根據(jù)體外作用進(jìn)行的。第八十五頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（三）細(xì)胞免疫的主要作用1、細(xì)胞性抗感染免疫：（1）對胞內(nèi)菌的抗感染免疫：如結(jié)核、布氏、李氏、馬鼻疽。（2）對病毒的抗感染免疫。2、免疫監(jiān)視和腫瘤免疫：Tk細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞的作用。3、引起Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)。4、同種移植免疫：致敏Tc對移植組織的主要組織相容性抗原進(jìn)行識別，產(chǎn)生各種淋巴因子，配合Tk細(xì)胞的細(xì)胞毒作用，引起移植組織細(xì)胞傷害，從而排除移植組織。第八十六頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日細(xì)胞免疫應(yīng)答圖示第八十七頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日二、體液免疫應(yīng)答（一）概念：Bc接受抗原刺激后引起的免疫反應(yīng)。（二）體液免疫過程

1、感應(yīng)階段

2、反應(yīng)階段

3、效應(yīng)階段第八十八頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（二）體液免疫過程1、感應(yīng)階段（1）抗原的加工與傳遞：

a、非Tc依賴性抗原（如肺炎雙球菌莢膜抗原，大腸桿菌脂多糖抗原）：直接活化Bc，原因在這類抗原的抗原性強(qiáng)，表面有多個相同的、重復(fù)排列的抗原決定簇，能與Bc表面的特異性抗原受體牢固結(jié)合，使Bc表面受體位移，交聯(lián)，并引起B(yǎng)c活化，但這類抗原較少。

b、Tc依賴性抗原：抗原進(jìn)入機(jī)體后，首先為吞噬細(xì)胞吞噬，大部分被消化降解，失去抗原性，少部分形成抗原決定簇-MHC復(fù)合物（超抗原），傳給Th，再傳給Bc。此類抗原較多。

第八十九頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（2）細(xì)胞的活化

除非Tc依賴性抗原外，BC活化，需雙信號系統(tǒng)的刺激，第一信號來自超抗原的抗原決定簇特異性刺激，第二信號來自：（1）非T細(xì)胞依賴抗原：無，但多個相同的抗原決定簇構(gòu)成鏈狀抗原分子，與B細(xì)胞表面抗原受體發(fā)生交叉聯(lián)結(jié)，引起抗原受體移動，最后形成帽狀結(jié)構(gòu)，激發(fā)Bc活化，相當(dāng)于第二信號。（2）Tc依賴抗原：巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的淋巴細(xì)胞激活因子（LAF），TH產(chǎn)生的BC活化因子，激活的補(bǔ)體細(xì)胞。第九十頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日2、反應(yīng)階段

無活性的Bc在雙信號刺激下活化，增殖分化為漿母細(xì)胞，多數(shù)再分化成漿細(xì)胞，少數(shù)分化成記憶Bc細(xì)胞，前者產(chǎn)生抗體，后者保持記憶，但不同的抗原刺激產(chǎn)生抗體的規(guī)律不一樣：（1）非Tc依賴性抗原：主要產(chǎn)生IgM，IgG很少，但缺乏免疫記憶，即不分化出記憶Bc。（2）Tc依賴性抗原：產(chǎn)生抗體有一定規(guī)律，先IgM，后IgG。受抗原刺激的某一個Bc增殖的后代，稱為單克隆無性細(xì)胞系，其產(chǎn)生的抗體具相同的特異性，即都特異地針對該抗原，但這種單克隆細(xì)胞產(chǎn)生抗體的類型可發(fā)生改變，或IgM，或IgG、D、E、A，第九十一頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日3、效應(yīng)階段

指漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體進(jìn)入血循環(huán)或粘膜表面，發(fā)揮作用的階段?？贵w發(fā)揮作用有以下幾個特性：（1）高度特異性：只作用于相應(yīng)的抗原，甚至抗原決定簇。（2）幾種抗體分工合作：

IgM：產(chǎn)生早，作用強(qiáng)，只存在于血液，能結(jié)合補(bǔ)體，但含量低，半衰期短，主要對細(xì)菌、螺旋體等細(xì)胞性抗原起作用。

IgG：產(chǎn)生晚，但含量多，半衰期長，血液、組織中均存在，能結(jié)合補(bǔ)體，主要對抗細(xì)菌，中和病毒和毒素。

IgA：主要在粘膜表面及分泌液中發(fā)揮抗感染作用。

IgE：主要抗寄生蟲感染。第九十二頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（3）作用方式的多樣性

A、中和作用：指抗毒素或病毒中和抗體與外毒素或病毒結(jié)合成抗原抗體復(fù)合物，使之失去致病性的作用。但這種復(fù)合物只能限制毒素或病毒的迅速擴(kuò)散，不能徹底消滅，必須依靠非特異性免疫系統(tǒng)，如補(bǔ)體、吞噬細(xì)胞的作用，其中和機(jī)理是：外毒素：外毒素引起致病是由毒性基團(tuán)引起的。產(chǎn)生抗毒素是由抗原決定簇決定的，抗原抗體復(fù)合物的形成，使外毒素失去毒性，并非直接作用于毒性基團(tuán)，而是掩蓋鄰近的毒性基團(tuán)，或使毒素發(fā)生分子構(gòu)型的改變而失去毒性。病毒：病毒必須進(jìn)入機(jī)體細(xì)胞大量繁殖，才能發(fā)揮致病作用，抗原抗體復(fù)合物的形成，使病毒失去活性和致病力。第九十三頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（3）作用方式的多樣性

B、凝集作用：抗體與細(xì)菌抗原在體內(nèi)凝集形成團(tuán)塊，限制細(xì)菌的活性，在補(bǔ)體和吞噬細(xì)胞協(xié)助下消滅。

C、ADCC效應(yīng)：指IgG與細(xì)胞性抗原結(jié)合后，暴露IgG的Fc段，易與Kc的Fc段受體結(jié)合，通過KC進(jìn)行胞外殺傷的作用。

D、調(diào)理作用：指IgG與抗原性異物結(jié)合后，暴露Fc段，易與吞噬細(xì)胞的Fc段受體結(jié)合，從而促進(jìn)吞噬功能的作用。

E、免疫粘聯(lián)作用：指抗原抗體復(fù)合物易激活補(bǔ)體，形成抗原抗體補(bǔ)體復(fù)合物，再與有補(bǔ)體受體的紅、白細(xì)胞、血小板結(jié)合成大的復(fù)合物，從而徹底消滅抗原的作用。

F、溶解作用：指抗體與細(xì)胞性抗原結(jié)合后，活化補(bǔ)體，使細(xì)胞溶解的作用。第九十四頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（4）抗體作用的不徹底性：（5）作用的雙重性：一方面消滅抗原性異物，對機(jī)體有利，另一方面，引起炎癥，組織壞死，如Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型變態(tài)反應(yīng)，對機(jī)體不利。第九十五頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日體液免疫過程第九十六頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（二）細(xì)胞免疫與體液免疫的關(guān)系1.協(xié)同作用：一種病原體常有多種抗原決定簇，能同時激發(fā)機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫，二者協(xié)同作用，最終達(dá)到徹底消滅病原的同一目的，但不同的病原，常以某種免疫為主，或同時存在。（1）細(xì)菌：胞外寄生菌：如巴氏桿菌，以體液免疫為主。胞內(nèi)寄生菌，如結(jié)核分支桿菌，以細(xì)胞免疫為主。（2）外毒素：體液免疫為主。（3）病毒：體液免疫和細(xì)胞免疫同樣重要，前者對進(jìn)入細(xì)胞前和從細(xì)胞內(nèi)釋放的病毒起中和作用，后者通過干擾素對胞內(nèi)病毒起作用，以及淋巴因子促進(jìn)巨噬細(xì)胞吞噬消滅的作用。第九十七頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日2、拮抗作用是對機(jī)體不利的，如機(jī)體正常細(xì)胞變異為腫瘤細(xì)胞后，作為一種新的抗原，刺激機(jī)體體液免疫產(chǎn)生抗體，但抗體與腫瘤細(xì)胞結(jié)合不能殺傷腫瘤細(xì)胞，且不斷生長。腫瘤細(xì)胞與抗體結(jié)合后，一方面，其表面抗原被占據(jù)，Tk細(xì)胞受體難于與之結(jié)合，另一方面，表面抗原從腫瘤細(xì)胞上脫落，與Tk細(xì)胞受體結(jié)合，減少了能殺傷腫瘤細(xì)胞的Tk細(xì)胞數(shù)量，從而抑制了細(xì)胞免疫。第九十八頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日三、抗體產(chǎn)生的理論（一）側(cè)鏈學(xué)說：最先于1900年由Erlich提出，認(rèn)為產(chǎn)生抗體的細(xì)胞表面有特異性受體，抗原與受體特異性結(jié)合，以后脫落，脫落的受體就是抗體。（二）模板學(xué)說（Templatetheory）：

1、直接模板學(xué)說：最初于1930年Celexunder提出，認(rèn)為機(jī)體免疫細(xì)胞以抗原為模板，合成在空間結(jié)構(gòu)上與抗原分子互補(bǔ)的抗體，所以二者能特異性結(jié)合。

2、間接模板學(xué)說：于1940年Bernet提出，認(rèn)為抗原作用于抗體形成細(xì)胞，使之產(chǎn)生適應(yīng)酶或mRNA，再由酶催化或以mRNA為模板形成與抗原分子能特異結(jié)合的抗體。第九十九頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（三）克隆選擇學(xué)說（Cloneselectiontheory）最先于1955年用Jerne提出，自然選擇學(xué)說（Naturalselectiontheory），后于1957年由Bernet對之修訂，提出克隆選擇學(xué)說，是目前認(rèn)為比較合理，為大家所公認(rèn)的學(xué)說。該學(xué)說既解釋了機(jī)體為什么能識別多種多樣的抗原，產(chǎn)生相應(yīng)抗體，又解釋了對自身抗原的不攻擊，以及自身免疫病的發(fā)生。第一百頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（三）克隆選擇學(xué)說

1、對多種多樣抗原的識別：認(rèn)為動物體內(nèi)存在著大量（約107）的淋巴細(xì)胞克隆，每一克隆表面都帶有特異的Sig，進(jìn)入體內(nèi)的外來抗原或內(nèi)源性抗原能選擇性激活帶相應(yīng)受體的淋巴細(xì)胞克隆，使之分化增殖，產(chǎn)生相應(yīng)抗體。第一百零一頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（三）克隆選擇學(xué)說

2、識別自身和非自身：認(rèn)為胚胎期的淋巴細(xì)胞有與抗原結(jié)合的能力，但不具備產(chǎn)生抗體的潛能，在此期接觸相應(yīng)抗原，則該克隆反而損傷而被消除，所以，胚胎期出現(xiàn)的自身抗原使相應(yīng)的淋巴細(xì)胞損傷，從而消除對自身抗原起反應(yīng)的細(xì)胞，只留下針對非自身抗原起反應(yīng)的細(xì)胞，稱為天然免疫耐受。同樣道理，如在胚胎期人工給予非自身抗原，也可使其喪失對該抗原相應(yīng)的細(xì)胞，稱人工免疫耐受。第一百零二頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（三）克隆選擇學(xué)說3、自身免疫?。杭磳ψ陨砜乖鸱磻?yīng)而引起的病理變化，認(rèn)為是由于胚胎期自身抗原對相應(yīng)淋巴細(xì)胞反應(yīng)，本應(yīng)被消除，但由于這種淋巴細(xì)胞在機(jī)體清除功能下降的情況下，大量增殖，而殘留下來，出生后對自身抗原識別，產(chǎn)生抗體，引起自身免疫病。第一百零三頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日第三章

免疫學(xué)防治

（Immunologicprophylaxisandtherapy）

一、概述二、天然自動免疫三、人工自動免疫四、天然被動免疫五、人工被動免疫第一百零四頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日一、概述免疫學(xué)防治就是應(yīng)用免疫學(xué)知識對疾病進(jìn)行預(yù)防和治療。傳統(tǒng)免疫學(xué)時期，只限于防治傳染病，60年代后，發(fā)展到了防治非傳染病，如變態(tài)反應(yīng)性疾病、自身免疫病、免疫缺陷病、腫瘤等，第一百零五頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日二、天然自動免疫

動物隱性傳染或傳染病康復(fù)而自動獲得的免疫力，稱為天然自動免疫。不同病原微生物使動物獲利的天然自動免疫力和免疫期不同，有的免疫力低、免疫期短，有的免疫力堅強(qiáng)、免疫期長。第一百零六頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日三、人工自動免疫將疫苗、類毒素等生物制品接種于動物，使其產(chǎn)生針對相應(yīng)抗原的免疫力，以達(dá)到預(yù)防傳染病的目的，稱人工自動免疫。如豬瘟兔化弱毒接種豬預(yù)防豬瘟等。第一百零七頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日四、天然被動免疫新生兒和幼畜通過胎盤和初乳從母體獲得抗某種病原體的特異性抗體（主要IgG）而建立的對該種病原體在一段時間內(nèi)的不感受性。第一百零八頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日五、人工被動免疫（免疫治療）注射抗血清、丙種球蛋白、轉(zhuǎn)移因子等而建立的免疫力。對已患某種傳染病的人或動物通過注入特異性抗血清起特異性治療作用。第一百零九頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日五、人工被動免疫獸醫(yī)學(xué)上常用的人工被動免疫生物制品1、抗菌血清：將病原菌多次免疫動物獲得的含較高特異性抗體的高免血清，如抗炭疽血清，現(xiàn)用得較少，為抗菌素所替代。

2、抗病毒血清：用弱毒或強(qiáng)毒多次免疫動物獲得，如抗豬瘟高免血清。

3、抗毒素：用類毒素多次免疫動物獲得，如破傷風(fēng)類毒素。

4、其它：如禽的卵黃制品，獸醫(yī)上較常用，因經(jīng)濟(jì)實惠，如用雛鴨肝炎病毒免疫產(chǎn)蛋母鴨，其蛋中含有較高特異性抗體，用來緊急治療雛鴨病毒性肝炎。第一百一十頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日第四章

免疫學(xué)診斷（Immunologicdiagnosis）

第一節(jié)血清學(xué)反應(yīng)概述第二節(jié)凝集實驗第三節(jié)沉淀反應(yīng)第四節(jié)熒光抗體技術(shù)第五節(jié)酶標(biāo)抗體技術(shù)第一百一十一頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日第一節(jié)血清學(xué)反應(yīng)概述

一、血清學(xué)反應(yīng)的一般特點二、血清學(xué)試驗的應(yīng)用三、血清學(xué)試驗的發(fā)展趨向第一百一十二頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日一、血清學(xué)反應(yīng)的一般特點（一）特異性和交叉性：一種微生物抗原只與其相應(yīng)的抗體發(fā)生結(jié)合，稱為血清學(xué)反應(yīng)的特異性。但有些微生物抗原之間含有部分相同的抗原，或部分相同的抗原決定簇，或抗原決定簇間有相同或相似的構(gòu)型。則發(fā)生血清學(xué)的交叉反應(yīng)。親緣關(guān)系越近，交叉反應(yīng)程度越高。免疫學(xué)診斷應(yīng)盡量選擇無交叉反應(yīng)的抗原。交叉反應(yīng)一般是雙向的，但也有單向的。第一百一十三頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（二）結(jié)合力和離解力1、結(jié)合力：抗原抗體的結(jié)合力決定于抗原決定簇和抗體的抗原結(jié)合位點之間所形成非共價鍵的數(shù)量，性質(zhì)和距離。非共價鍵數(shù)量多，高能結(jié)合鍵（氫鍵、離子鍵）比例高，分子間距離近，則結(jié)合力強(qiáng)，不易離解，稱高親和力。反之，為低親和力。介于二者之間為中親和力。

2、離解力：抗原抗體這種表面結(jié)合，最適于0~40℃，pH4~9范圍內(nèi)進(jìn)行，溫度高于60℃，或pH＜3，則發(fā)生離解。根據(jù)這一特性，用免疫吸附層析提取免疫純的抗原或抗體。

第一百一十四頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（三）抗原抗體結(jié)合的最適比和帶現(xiàn)象

抗原抗體須在適當(dāng)比例下才出現(xiàn)可見反應(yīng)，比例越合適，反應(yīng)越明顯，這個比例稱為抗原抗體反應(yīng)最適比。在最適比時，抗原抗體才能形成大的復(fù)合物。如果抗原過多或抗體過多，則抗原抗體不能形成大的復(fù)合物而不呈現(xiàn)可見反應(yīng)，稱為帶現(xiàn)象。如果抗體過剩，一個抗體分子只能結(jié)合一個抗原，形成可溶性小分子復(fù)合物，稱為前帶。如果抗原過剩，兩個抗原分子只能與一個抗體結(jié)合，仍為小分子復(fù)合物，稱后帶。在凝集反應(yīng)中，?？贵w過剩而出現(xiàn)前帶，一般固定抗原濃度，抗體第近稀釋。沉淀反應(yīng)中，常抗原過多而出現(xiàn)后帶，一般固定抗體濃度，抗原遞近稀釋?；蚨咄瑫r第近稀釋，用方陣測定最適比。第一百一十五頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日最適比和帶現(xiàn)象圖示第一百一十六頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日

（四）反應(yīng)的二階段性：抗體反應(yīng)分兩個階段，第一階段為抗原抗體特異結(jié)合，但無可見反應(yīng)，第二階段為抗原抗體的可見階段，表現(xiàn)為凝集，沉淀，補(bǔ)體結(jié)合等反應(yīng)。前者快，幾秒至幾分鐘，后者慢，幾分鐘，幾十分鐘或更久。（五）反應(yīng)的敏感性：具極高的敏感性，不僅可定性，還可檢測極微量的抗原或抗體。第一百一十七頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（六）影響抗原抗體反應(yīng)的因素

1、電解質(zhì)：沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)時，一般用0.15M的NaCl，但禽類血清須8-10%NaCl，主要是降低抗原抗體結(jié)合物表面負(fù)電荷，促進(jìn)沉淀、凝集。補(bǔ)反或溶血反應(yīng)時，稀釋液加少量Ca+、Mg+，以增強(qiáng)補(bǔ)體活性。

2、PH值：最適pH6-8，如pH5-5.5時，蛋白質(zhì)發(fā)生等電點沉淀，＜2.5時離解。

3、溫度：常用37℃或低溫，56℃離解。

4、機(jī)械振蕩：增加分子間碰撞，但強(qiáng)烈振蕩時離解。

5、雜質(zhì)：引起非特異性反應(yīng)。

第一百一十八頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日二、血清學(xué)試驗的應(yīng)用1、抗原抗體的快速檢測。

2、生物活性物質(zhì)的超微定量：如測定激素、藥物等。

3、抗原或抗體在細(xì)胞和亞細(xì)胞水平的定位。

4、抗原組成成分分析。

5、微生物鑒定和抗原分型。

6、血型鑒定。第一百一十九頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日三、血清學(xué)試驗的發(fā)展趨向1、質(zhì)量上：向高度特異性、敏感性、精密分辨能力，高水平定位和簡易快速方面發(fā)展。2、實驗方法上：向微量法方面發(fā)展，以微量滴定板代替試管。3、檢測儀器上：從手工操作向自動血清學(xué)反應(yīng)設(shè)備發(fā)展，如自動化血清學(xué)反應(yīng)儀可進(jìn)行多種血清學(xué)實驗，只須提供樣品和試驗材料即可自動進(jìn)行。反應(yīng)結(jié)果用電子儀器自動記錄，分析。

4、方法的標(biāo)準(zhǔn)化和試劑的商品化，如標(biāo)準(zhǔn)的商品試劑盒。第一百二十頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日第二節(jié)凝集實驗（一）凝集實驗概念（二）直接凝集試驗：（Directagglutinationtest）（三）間接凝集實驗第一百二十一頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（一）凝集實驗概念細(xì)菌、紅細(xì)胞等顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后，在有電解質(zhì)存在下，抗原顆粒相互凝集成肉眼可見的凝集小塊，稱為凝集反應(yīng)。參加反應(yīng)的抗原稱凝集原，抗體稱凝集素。第一百二十二頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（二）直接凝集試驗1、玻片凝集實驗2、試管凝集實驗第一百二十三頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日1、玻片凝集實驗用已知的抗原（抗體）與待檢的血清（或菌液）各一滴在玻片上混合，數(shù)分鐘后，出現(xiàn)顆粒性或絮狀凝集，即為陽性反應(yīng)。如血型鑒定，沙門氏菌分型，布氏桿菌、雞白痢檢疫等，此法簡便快速，但只能定性。第一百二十四頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日玻片凝集實驗圖示第一百二十五頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日2、試管凝集實驗（1）用于抗體的定性和定量：檢測待檢血清中是否存在相應(yīng)抗體和測定抗體的效價。將待檢血清用生理鹽水作倍比稀釋，加入等量抗原，370C水浴數(shù)小時，視不同凝集程度記錄為++++（100%）、+++（75%）、++（50%）、+（25%）、－（不凝集）。發(fā)生50%凝集的血清最大稀釋度稱為該血清凝集價（或稱滴度）。由于某些細(xì)菌常發(fā)生自身凝集，或酸凝集，故實驗時必須設(shè)陽性抗原、陰性抗原、生理鹽水對照。反應(yīng)中最初幾管常由于抗體過剩而不凝集，為前帶現(xiàn)象。有些細(xì)菌與其它菌含共同抗原，發(fā)生交叉凝集，出現(xiàn)假陽性反應(yīng)，應(yīng)注意區(qū)別。但交叉凝集的凝集價一般比特異性凝集價低。第一百二十六頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日試管凝集實驗圖示第一百二十七頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（三）間接凝集實驗將可溶性抗原（抗體）吸附于與免疫無關(guān)的小顆粒載體表面，此吸附抗原（抗體）的載體顆粒與相應(yīng)的抗體（抗原）結(jié)合，在電解質(zhì)存在的適宜條件下發(fā)生的凝集反應(yīng)，稱間接凝集反應(yīng)，又稱被動凝集反應(yīng)。吸附抗原的常用載體有動物紅細(xì)胞，聚苯乙烯乳膠，活性炭等。吸附抗原后的顆粒稱致敏顆粒。第一百二十八頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日（三）間接凝集實驗1、乳膠凝集試驗：利用聚苯乙烯乳膠微球，吸附某些抗原（抗體），用以檢測相應(yīng)的抗體（抗原）。常用玻片法，也可用試管法。

2、炭素凝集實驗：利用活性炭顆粒表面有許多蜂窩狀結(jié)構(gòu)，能吸附抗原或抗體，制成致敏炭素，用以檢測相應(yīng)的抗體或抗原。如腺病毒抗體檢測。第一百二十九頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日3、間接血凝實驗（1）正向間接血凝：用紅細(xì)胞（如綿羊、兔、雞、O型人血液）吸附抗原，檢測相應(yīng)抗體的方法。吸附抗原的紅細(xì)胞稱致敏血球。多糖，類脂等半抗原可直接吸附于紅細(xì)胞上，蛋白質(zhì)抗原須用鞣酸處理使其表面活化，或用偶氮聯(lián)苯胺等聯(lián)結(jié)劑，才能吸附于紅細(xì)胞表面。紅細(xì)胞常用甲醛、或戊二醛、丙酮等固定，使之易較長時間保存。試驗常在微孔型塑料板上進(jìn)行，結(jié)果判定用試管凝集反應(yīng)的方法。第一百三十頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日3、間接血凝實驗（4）固相間接血凝：利用聚苯乙烯塑料板做固相載體，吸附抗原或抗體，在吸附板上進(jìn)行的血凝試驗，稱固相間接血凝，常用抗抗體或SPA致敏紅細(xì)胞，使一種致敏紅細(xì)胞能用于多種抗體系統(tǒng)的檢測，使檢測試劑商品化，通用化，同時既有間接血凝簡易快速，又有ELISA高度敏感性和特異性的優(yōu)點。

A、夾層法：抗體（IgG）包板+封閉液+待檢抗原+抗體致敏紅細(xì)胞

B、雙抗體法：抗原包板+待檢血清+抗抗體致敏紅細(xì)胞第一百三十一頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日4、協(xié)同凝集實驗大多數(shù)金黃色葡萄球菌具有蛋白A（SPA），利用SPA能與IgGFc段結(jié)合而制成致敏SPA菌懸液，與待檢抗原在平板上混合，互相聯(lián)結(jié)，凝集作用增強(qiáng)，稱協(xié)同凝集實驗。廣泛用于細(xì)菌性疾病的快速診斷。第一百三十二頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日第三節(jié)沉淀反應(yīng)一、概念二、環(huán)狀沉淀實驗三、瓊脂擴(kuò)散沉淀實驗四、對流免疫電泳第一百三十三頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日一、概念可溶性抗原（細(xì)菌外毒素、菌體懸浮液、病毒、血清、組織液等）與相應(yīng)抗體結(jié)合，在適量電解質(zhì)存在下，形成肉眼可見的白色沉淀，稱沉淀實驗。所用抗原稱沉淀原，抗體稱沉淀素。沉淀反應(yīng)?？乖^剩，形成后帶現(xiàn)象，故通常稀釋抗原，并以抗原稀釋度為沉淀實驗效價。第一百三十四頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日二、環(huán)狀沉淀實驗在小口徑試管內(nèi)加入已知抗血清，然后小心加入待檢抗原于血清表面，使之成為分界明顯的兩層，數(shù)分鐘后，兩層液面交界處出現(xiàn)白色環(huán)狀沉淀，即為陽性反應(yīng)。主要用于抗原定性，如炭疽Ascoli氏反應(yīng)，也可用于沉淀素效價滴定，出現(xiàn)白色沉淀帶的最高抗原稀釋倍數(shù)，即為血清的沉淀價。第一百三十五頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日環(huán)狀沉淀實驗圖示第一百三十六頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日三、瓊脂擴(kuò)散沉淀實驗（一）原理：即雙向雙擴(kuò)散，為當(dāng)今常用。用生理鹽水制成1%瓊脂液，倒于平板內(nèi)制成凝膠，該凝膠孔徑約85nm，能允許抗原抗體在其中自由擴(kuò)散，并由近及遠(yuǎn)形成濃度梯度，當(dāng)二者在比例適當(dāng)處相遇，發(fā)生沉淀反應(yīng)，形成的沉淀顆粒較大，在凝膠中不再擴(kuò)散，而形成白色沉淀帶，沉淀帶一經(jīng)形成，就象特異性屏障，繼續(xù)擴(kuò)散來的相同抗原、抗體，只能使沉淀帶加濃加厚，而不再向外擴(kuò)散，但對其它抗原抗體系統(tǒng)無屏障作用。一種抗原抗體系統(tǒng)只出現(xiàn)一條沉淀帶，多種抗原抗體系統(tǒng)則形成多條沉淀帶。第一百三十七頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日三、瓊脂擴(kuò)散沉淀實驗2、操作：制成瓊脂板后，一般打成梅花形孔，直徑約5㎜，孔距4㎜，中間孔加標(biāo)準(zhǔn)抗原（抗體），周圍孔加待檢抗體（抗原），置于濕盒，24-48小時觀察結(jié)果。3、應(yīng)用及結(jié)果觀察：（1）抗原定性檢測：傳染病診斷，結(jié)果觀察時，注意沉淀線形態(tài)，確定是否有交叉。（2）抗體定性檢測：用于傳染病診斷及檢疫，注意沉淀線形狀，反應(yīng)血清強(qiáng)弱。（3）用于抗原或抗體純度檢測：如果抗原不純，與制備的抗血清之間出現(xiàn)兩條或以上的沉淀線。（4）抗體效價測定。

第一百三十八頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日三、瓊脂擴(kuò)散沉淀實驗

4、沉淀線形狀與抗原抗體濃度及擴(kuò)散速度的關(guān)系：（1）抗原、抗體濃度及擴(kuò)散速度相似時，沉淀線呈直線，位于兩孔正中。（2）如抗原抗體濃度不平衡，必定是濃度高的一側(cè)反應(yīng)物過剩，使局部沉淀線或全部溶解，隨著沉淀物的溶解，擴(kuò)散的繼續(xù)，新的沉淀物重新形成，沉淀線向濃度低的一側(cè)移動。所以，如果沉淀線偏向孔間的一側(cè)，必定是該側(cè)反應(yīng)物濃度低于對側(cè)。如果沉淀線是全部溶解，向前推進(jìn)又重新形成，沉淀線常出現(xiàn)前緣呈刀刃狀和較分散的尾巴。如果沉淀線部分溶解，則形成較寬的沉淀線。（3）如抗原抗體擴(kuò)散速度不同，沉淀線則彎向擴(kuò)散速度慢的一側(cè)。第一百三十九頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日瓊脂擴(kuò)散沉淀實驗圖示第一百四十頁，共一百五十六頁，2022年，8月28日1.雙擴(kuò)散用于疾病診斷：以IBD診斷為例，中心孔加IBD標(biāo)準(zhǔn)陽性血清，周圍孔分別加IBD標(biāo)準(zhǔn)抗原、生理鹽水、待檢抗原。2.雙擴(kuò)散用于抗體檢測：以免疫雞IBD抗體檢測為例，中心孔加IBD標(biāo)準(zhǔn)抗原，周