感染性眼病細(xì)菌學(xué)檢查操作專家共識(shí)(2015年)

感染性眼病細(xì)菌學(xué)檢查操作專家共識(shí)(2015年)眼科檢驗(yàn)協(xié)助組為準(zhǔn)確檢出病原菌，避免漏檢及誤診，臨床醫(yī)護(hù)人員及實(shí)驗(yàn)室工作人員必須正確掌握臨ft大學(xué)中ft眼科中心2014124月在廣州組織國(guó)內(nèi)臨床微生物學(xué)專家、眼科專細(xì)菌學(xué)檢查標(biāo)本采集基本原則及指征基本原則①應(yīng)在病程早期、急性期，且盡可能在使用抗菌藥物之前采集標(biāo)本。如果已使用抗菌藥(15min。由于大多數(shù)眼部標(biāo)本的取材量較少，采樣指征常見(jiàn)標(biāo)本類型采集方法及采集量結(jié)膜囊分泌物采集(trypticsoy等。rSB等預(yù)先)等濕潤(rùn)過(guò)的無(wú)菌拭()，避免接好標(biāo)記立即送往微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室。淚道標(biāo)本采集壓迫淚囊或淚小管皮膚面．用另一預(yù)先濕潤(rùn)過(guò)的拭子擦取淚小點(diǎn)處反流物。結(jié)膜／角膜刮片采集15號(hào)手術(shù)圓刀片。結(jié)膜刮片采集刮取前，使用表面麻醉藥滴眼液(對(duì)結(jié)膜進(jìn)行角膜刮片采集刮取前．使用表面麻醉藥滴眼液()；用手指將房水采集1ml射器，于角鞏膜緣平行虹膜平面穿刺入前房，避開(kāi)膿性液抽取房水約0.1。玻璃體采集注射器抽取法由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的眼科醫(yī)生在手術(shù)室內(nèi)完成：麻醉并進(jìn)行常規(guī)結(jié)膜囊清潔后，用221ml10mm(0.2ml)。1ml無(wú)菌注射器；標(biāo)準(zhǔn)三通道切口，在向眼內(nèi)灌注眼0.5ml(1.0ml)。異物采集由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的眼科醫(yī)生在手術(shù)室內(nèi)完成，嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作。常見(jiàn)標(biāo)本類型的預(yù)處理措施結(jié)膜囊分泌物(已用無(wú)菌生理鹽水或TSB在血瓊脂平板、普通巧克力瓊脂平板(需5％～10％的CO2

環(huán)境)、厭氧血瓊脂平板(必要時(shí))表面以拭子滾動(dòng)的方式涂布接種后，取潔凈的玻片．用同一個(gè)拭子未接觸平板的部分或另取一個(gè)拭子制成涂片送形態(tài)學(xué)檢查。若由于實(shí)際需要需將拭子接種于增菌培養(yǎng)基，則報(bào)告時(shí)需注明。淚道標(biāo)本淚道分泌物基礎(chǔ)培養(yǎng)基接種及制作涂片方法同結(jié)膜囊分泌物。淚道結(jié)石，使用研磨器研磨后。一份用壓片的方式進(jìn)行形態(tài)學(xué)檢查，一份以折線路徑涂布接種于普通巧克力瓊脂平板(需5％一10％的CO2環(huán)境)。有條件的實(shí)驗(yàn)室增加接種于巰基乙酸鹽肉湯進(jìn)行厭氧菌培養(yǎng)同。結(jié)膜及角膜刮片用刀片采集盡可能多的標(biāo)本后即時(shí)接種，或?qū)⒐稳∥镏糜谵D(zhuǎn)運(yùn)試管(帶轉(zhuǎn)運(yùn)拭子和運(yùn)送培養(yǎng)基)，并確保標(biāo)本浸入液體轉(zhuǎn)運(yùn)介質(zhì)中。置于轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基中的標(biāo)本經(jīng)研磨或充分震蕩后，實(shí)驗(yàn)室人員將標(biāo)本接種于血瓊脂平板、普通巧克力瓊脂平板以及制作涂片做形態(tài)學(xué)檢查(推薦用標(biāo)本直接涂片)，必要時(shí)進(jìn)行厭氧菌培養(yǎng)。房水及玻璃體(0.1～0.2(0.5m1)，量盡可能多，分別用注射器0.05)))[5閣和真(盡快送至實(shí)驗(yàn)室。異物異物取出后。放入1ml液體增菌培養(yǎng)液充分振搖1min，異物交還臨床，培養(yǎng)液分別接種于血瓊脂平板、普通巧克力瓊脂平板以及制作涂片做形態(tài)學(xué)檢查。涂片制作要求1.0～1.5cm()，制成2張涂片，做955min10％甲醇直接固定。標(biāo)本運(yùn)送置于室溫保存，不可冷藏或冷凍，且不應(yīng)超過(guò)12。運(yùn)送過(guò)程需符合生物安全要求。標(biāo)本常規(guī)檢查項(xiàng)目及報(bào)告方式染色方法的選擇實(shí)驗(yàn)室接到標(biāo)本后，根據(jù)不同需要選擇不同的染色方法，常規(guī)推薦革蘭染色和瑞氏吉姆薩染色，必要時(shí)增加抗酸染色等(可在前2種染色基礎(chǔ)上直接進(jìn)行抗酸染色)，也可根據(jù)臨床醫(yī)師的建議選擇其他特殊染色方法。涂片及刮片鏡檢報(bào)告格式病原學(xué)報(bào)告細(xì)菌：找到革蘭陽(yáng)／陰性球／桿菌，要描述排列方式，細(xì)菌與白細(xì)胞及吞片區(qū)未找到細(xì)菌，則報(bào)告未找到。細(xì)胞學(xué)報(bào)告根據(jù)瑞氏吉姆薩染色結(jié)果嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等分別報(bào)告。報(bào)告形式常規(guī)使用文字描述報(bào)告：有條件的單位，建議發(fā)圖文報(bào)告，圖片采用油鏡(x1000)下形態(tài)．1h內(nèi)報(bào)告。細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的操作及要求常規(guī)標(biāo)本培養(yǎng)標(biāo)本采集后應(yīng)盡快接種于血瓊脂平板和普通巧克力瓊脂平板并及時(shí)送到微生物實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)室收到標(biāo)本后，血瓊脂平板置普通孵箱35～37瓊脂平板置5％～10％CO孵箱培養(yǎng)48h(結(jié)果陰性但臨床高度懷疑感染的標(biāo)本需要再繼續(xù)培224h5d)24h112h1次。如果有菌落生長(zhǎng)則規(guī)范處理。()的標(biāo)本，置于(至少3次35～375％～10％CO2環(huán)境孵箱中培7d5d革蘭染色并盲傳血平板和巧克力平板，如盲傳陽(yáng)性則補(bǔ)發(fā)報(bào)告單，并和臨床做好溝通。厭氧菌培養(yǎng)厭氧菌培養(yǎng)標(biāo)本接種于厭氧平板置厭氧環(huán)境中48hl，5d7d報(bào)告，具體根據(jù)厭氧菌操作規(guī)程進(jìn)行。病原診斷報(bào)告分泌物、結(jié)石、角膜刮片等標(biāo)本陽(yáng)性結(jié)果有保存原始記錄)，結(jié)合標(biāo)本涂片結(jié)果進(jìn)行分析后報(bào)告可疑的致病菌并給出建議，同時(shí)報(bào)告藥敏試驗(yàn)結(jié)果。48h()，未見(jiàn)致病菌生長(zhǎng)。房水、玻璃體、異物等標(biāo)本陽(yáng)性結(jié)果有時(shí)報(bào)告藥敏試驗(yàn)結(jié)果。48h()7、儀器5d，報(bào)告無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。如果涂片找到細(xì)菌，培養(yǎng)未見(jiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)，應(yīng)備注提示。分枝桿菌懷疑分枝桿菌感染的標(biāo)本建議按照分枝桿菌的常規(guī)方法處理。危急值報(bào)告包括房水、玻璃體、異物及其他眼內(nèi)容物等培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果，按危急值報(bào)告程序處理。拒收標(biāo)本標(biāo)準(zhǔn)則需添加備注“已通知臨床。結(jié)果僅供參考生物安全所有標(biāo)本均應(yīng)視為具有潛在生物危害的標(biāo)本，必須按照標(biāo)準(zhǔn)