藥物代謝酶和藥物作用靶點(diǎn)基因檢測(cè)項(xiàng)目列舉

藥物代謝酶和藥物作用靶點(diǎn)基因檢測(cè)項(xiàng)目列舉1.藥物代謝酶與轉(zhuǎn)運(yùn)體基因多態(tài)性檢測(cè)1.1ALDH2*2多態(tài)性檢測(cè)線粒體乙醛脫氫酶2（ALDH2）同時(shí)具有乙醛脫氫酶和酯酶活性，參與乙醇、硝酸甘油等藥物的代謝。ALDH2代謝活化硝酸甘油成其活性代謝產(chǎn)物一氧化氮。ALDH2*2（Glu504Lys，rs671）多態(tài)導(dǎo)致所編碼蛋白質(zhì)504位谷氨酸被賴氨酸所取代，攜帶突變等位基因（ALDH2*2）的個(gè)體ALDH2酶活性下降，雜合子個(gè)體酶活性僅為野生型個(gè)體的10％，突變純合子個(gè)體酶活性缺失。因此，攜帶ALDH2*2等位基因的個(gè)體酒精代謝能力下降，少量飲酒即出現(xiàn)臉紅、心跳加速等不適；代謝硝酸甘油的能力下降，硝酸甘油抗心肌缺血的效應(yīng)減弱。亞洲人群中ALDH2*2等位基因的攜帶率為30~50％。攜帶ALDH2*2等位基因的心絞痛患者應(yīng)盡可能改用其他急救藥物，避免硝酸甘油含服無(wú)效。1.2CYP2C9*3多態(tài)性檢測(cè)CYP2C9是細(xì)胞色素P450酶（CYP）第二亞家族中的重要成員，占肝微粒體P450蛋白總量的20％。CYP2C9參與抗凝血藥、抗驚厥藥、降糖藥、非甾體類解熱鎮(zhèn)痛抗炎藥、抗高血壓藥以及利尿藥等多種藥物的羥化代謝，其中華法林、甲苯磺丁脲和苯妥因均為治療指數(shù)較窄的藥物。CYP2C9活性變化可導(dǎo)致這些藥物體內(nèi)濃度出現(xiàn)較大變化，甚至導(dǎo)致嚴(yán)重藥物不良反應(yīng)的發(fā)生。CYPC2C9*2（rs1799853，C430T，Arg144Cys）和CYP2C9*3（rs1057910，A1075C，Ile359Leu）均導(dǎo)致CYP2C9酶活性降低，CYP2C9*3純合子個(gè)體酶活性僅為該位點(diǎn)野生型純合子基因型個(gè)體（攜帶CYP2C9*1或Arg144/Ile359等位基因）的4~6％。中國(guó)人群中CYPC2C9*2的頻率為0％，CYPC2C9*3的頻率為3％。CYP2C9遺傳多態(tài)性導(dǎo)致其酶活性變化，從而導(dǎo)致藥物代謝種族和個(gè)體差異現(xiàn)象。華法林是臨床上常用的抗凝藥物，是深靜脈血栓、心房纖顫、心臟瓣膜置換術(shù)和肺栓塞等疾病的一線用藥，其臨床療效和不良反應(yīng)存在很大的個(gè)體差異，血藥濃度過(guò)高或敏感性增加可導(dǎo)致嚴(yán)重出血事件。華法林由S-和R-兩種消旋體構(gòu)成，其中S-華法林的抗凝活性約為R-華法林的5倍。85％以上的S-華法林在體內(nèi)經(jīng)CYP2C9代謝為無(wú)活性的代謝產(chǎn)物，CYP2C9*3純合子和雜合子基因型個(gè)體S-華法林的口服清除率分別下降90％和66％，因此華法林的給藥劑量需相應(yīng)降低[2-4]。美國(guó)FDA已批準(zhǔn)修改華法林產(chǎn)品說(shuō)明書，推薦在使用華法林前進(jìn)行CYP2C9基因檢測(cè)[5]。測(cè)定CYP2C9*3等位基因可用于指導(dǎo)中國(guó)人群確定華法林的起始用藥劑量，并預(yù)測(cè)藥物毒性，結(jié)合國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值（Internationalnormalizedratio，INR）檢測(cè)值，估計(jì)華法林的維持劑量，確保用藥安全。塞來(lái)昔布是昔布類非甾體類抗炎藥，通過(guò)特異性抑制環(huán)氧酶-2而發(fā)揮解熱、鎮(zhèn)痛和抗炎作用，其不良反應(yīng)涉及心血管系統(tǒng)、胃腸道、中樞神經(jīng)系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)，如引起高血壓、消化不良、頭疼等。塞來(lái)昔布在肝臟中主要由CYP2C9代謝。建議攜帶CYP2C9低酶活性基因型的患者降低塞來(lái)昔布的用藥劑量，從而降低藥物不良反應(yīng)的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。洛沙坦是一種常用的抗高血壓藥物，在體內(nèi)主要經(jīng)CYP2C9代謝活化為具有降壓作用的代謝產(chǎn)物E-3174。攜帶CYP2C9*3等位基因的個(gè)體服用洛沙坦后E-3174的生成減少，洛沙坦的代謝率降低。口服單劑量洛沙坦后1h~6h后，CYP2C9*1/*3基因型個(gè)體中洛沙坦的降壓作用下降，需適當(dāng)增加用藥劑量以增強(qiáng)降壓療效。1.3CYP2C19*2和CYP2C19*3多態(tài)性檢測(cè)CYP2C19參與氯吡格雷、S-美芬妥英、奧美拉唑、伏立康唑、安定、去甲安定等藥物的代謝。CYP2C19遺傳變異可導(dǎo)致酶活性的個(gè)體差異，使人群出現(xiàn)超快代謝者（ultrarapidmetabolizer，UM）、快代謝者（extensivemetabolizer，EM）、中間代謝者（intermediatemetabolizer，IM）和慢代謝者（poormetabolizer，PM）4種表型。CYP2C19*2（rs4244285，c.681G>A）和CYP2C19*3（rs4986893，c.636G>A）是中國(guó)人群中存在的2種導(dǎo)致CYP2C19酶缺陷的主要等位基因。CYP2C19*2導(dǎo)致剪接缺失，CYP2C19*3為終止密碼子突變。EM個(gè)體只攜帶CYP2C19*1等位基因，IM個(gè)體攜帶CYP2C19*2或CYP2C19*3雜合子基因型；PM個(gè)體包括CYP2C19*2/*2、CYP2C19*2/*3和CYP2C19*3/*3基因型。東方人群中75~85％的PM由CYP2C19*2所致，約20~25％的PM由CYP2C19*3所致。氯吡格雷是一種抗血小板藥物，廣泛用于急性冠脈綜合征、缺血性腦血栓、閉塞性脈管炎和動(dòng)脈硬化及血栓栓塞引起的并發(fā)癥。心臟支架手術(shù)后的患者需長(zhǎng)期服用氯吡格雷以防止支架內(nèi)再梗。氯吡格雷主要經(jīng)CYP2C19代謝活化后發(fā)揮抗血小板效應(yīng)。CYP2C19PM患者應(yīng)用常規(guī)劑量的氯吡格雷后體內(nèi)活性代謝物生產(chǎn)減少，對(duì)血小板的抑制作用下降。美國(guó)FDA和美國(guó)心臟病學(xué)會(huì)建議，對(duì)于CYP2C19慢代謝基因型患者需考慮改變治療方案[5]，具體意見(jiàn)為：CYP2C19*1/*1基因型個(gè)體應(yīng)用氯吡格雷有效，可常規(guī)使用；CYP2C19*2或*3基因型個(gè)體對(duì)氯吡格雷療效降低，建議更換成普拉格雷或替卡格雷；CYP2C19*2或*3突變型純合子個(gè)體應(yīng)用氯吡格雷效果差，建議換用普拉格雷或替卡格雷。阿米替林為三環(huán)類抗抑郁藥，主要用于焦慮性或激動(dòng)性抑郁癥的治療。阿米替林在體內(nèi)主要經(jīng)CYP2C19代謝為活性代謝產(chǎn)物去甲替林。CYP2C19活性的高低可通過(guò)影響血液中阿米替林與去甲替林的濃度比，影響阿米替林的療效和不良反應(yīng)的產(chǎn)生。CYP2C19PM個(gè)體血漿阿米替林與去甲替林濃度的比值顯著升高，5-羥色胺再攝取的抑制作用顯著增強(qiáng)。由于三環(huán)類抗抑郁藥具有多種不良反應(yīng)如抗膽堿作用、中樞神經(jīng)系統(tǒng)不良反應(yīng)和心血管不良反應(yīng)，與治療失敗密切相關(guān)。調(diào)整攜帶CYP2C19突變等位基因患者阿米替林的起始用藥劑量有助于降低初始治療的失敗率。CPIC指南建議CYP2C19EM和IM基因型患者應(yīng)用常規(guī)起始劑量的阿米替林，而CYP2C19PM基因型個(gè)體阿米替林的起始劑量應(yīng)降低至常規(guī)劑量的50％，并進(jìn)行治療藥物監(jiān)測(cè)[1]。伏立康唑是一種廣譜三唑類抗真菌藥，CYP2C19是其主要代謝酶之一。CYP2C19EM與PM個(gè)體間伏立康唑的血液濃度存在顯著差異，PM個(gè)體在應(yīng)用常規(guī)劑量藥物時(shí)可能出現(xiàn)毒副反應(yīng)，建議減少用藥劑量；EM和IM個(gè)體可給予常規(guī)劑量。在常規(guī)劑量治療時(shí)，若EM個(gè)體出現(xiàn)毒副反應(yīng)或PM療效不佳，均應(yīng)考慮更換藥物。FDA批準(zhǔn)的藥物說(shuō)明書中指出應(yīng)用伏立康唑前需檢測(cè)CYP2C19基因型，以確保用藥安全[5]。1.4CYP2D6*10多態(tài)性檢測(cè)CYP2D6又稱異喹胍4’-羥化酶,CYP第二亞家族中的重要成員。人群中CYP2D6的活性呈現(xiàn)強(qiáng)代謝者（EM）、中間代謝者（IM）、弱代謝者（PM）和超強(qiáng)代謝者（UM）四態(tài)分布的現(xiàn)象。白種人群中CYP2D6PM的發(fā)生率高達(dá)5~10％，而在東方人群中PM的發(fā)生率約為1％。目前已發(fā)現(xiàn)了CYP2D6基因的70多種遺傳變異。不同突變類型對(duì)酶活性和藥物代謝的影響不一。中國(guó)人群中CYP2D6常見(jiàn)的導(dǎo)致酶活性降低的等位基因包括CYP2D6*3（A2637deletion）、CYP2D6*4（G1934A）、CYP2D6*5（CYP2D6deletion）和CYP2D6*10（C188T），等位基因頻率分別為1％、1％、6％和53％。其中，CYP2D6*5為基因缺失多態(tài)，導(dǎo)致PM表型；CYP2D6*10為該酶第34位脯氨酸被絲氨酸所替代所致，導(dǎo)致IM表型。導(dǎo)致CYP2D6酶活性缺失的多態(tài)性可影響安替比林、可待因、β受體阻滯劑如美托洛爾和卡維地洛、氯丙咪嗪、去甲替林、地昔帕明、多慮平、丙咪嗪、馬普替林、奧匹哌醇、三甲丙咪嗪、昂丹司瓊、曲馬多和他莫昔芬等的體內(nèi)代謝，從而影響這些藥物的療效和不良反應(yīng)的發(fā)生，臨床需根據(jù)個(gè)體的基因型進(jìn)行劑量的調(diào)整。他莫昔芬通過(guò)與雌激素競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合雌激素受體，從而抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖，廣泛應(yīng)用于雌激素受體陽(yáng)性乳腺癌的治療。他莫昔芬主要通過(guò)其活性代謝產(chǎn)物4-羥他莫昔芬和吲哚昔芬發(fā)揮作用，其活性產(chǎn)物抑制細(xì)胞增殖的活性是他莫昔芬的100倍以上。CYP2D6活性下降可導(dǎo)致他莫昔芬的療效下降[6,7]。美國(guó)FDA建議雌激素受體陽(yáng)性的乳腺癌患者在接受他莫昔芬治療前進(jìn)行CYP2D6基因型檢測(cè)，以確保藥物的療效[5]。CYP2D6可將三環(huán)類抗抑郁藥阿米替林代謝為無(wú)活性的代謝產(chǎn)物，因此IM和PM個(gè)體血漿中阿米替林的濃度升高；同時(shí)，CYP2D6也是阿米替林活性代謝物去甲替林的主要代謝酶。CPIC指南建議EM基因型個(gè)體使用常規(guī)劑量的阿米替林，IM基因型個(gè)體阿米替林的起始劑量降低至常規(guī)劑量的75％，PM基因型個(gè)體選用其他不經(jīng)CYP2D6代謝的藥物，或?qū)⒚滋媪值钠鹗紕┝拷档椭脸Ｒ?guī)起始劑量的50％，以避免不良反應(yīng)的發(fā)生[1]。昂丹司瓊為一種高度選擇性的5-羥色胺受體拮抗劑，用于防治術(shù)后、化療及放療引起的惡心嘔吐，然而其在部分患者中療效不理想。CYP2D6是昂丹司瓊的主要藥物代謝酶之一，CYP2D6UM個(gè)體由于體內(nèi)攜帶3個(gè)拷貝的CYP2D6基因，藥物代謝加速，昂丹司瓊的預(yù)防惡心嘔吐的作用減弱。CPIC指南指出攜帶3個(gè)CYP2D6等位基因的UM基因型個(gè)體昂丹司瓊的療效下降[1]。1.5CYP3A5*3多態(tài)性檢測(cè)CYP3A5參與他克莫司、咪達(dá)唑侖、氨苯砜、可的松、尼菲地平等多種藥物的代謝。CYP3A5基因第3內(nèi)含子內(nèi)22893位存在6986A>G的突變（rs776746，CYP3A5*3），該SNP可導(dǎo)致CYP3A5mRNA異常剪接，引起終止密碼子過(guò)早剪切CYP3A5蛋白，從而使其失去酶的活性，因此CYP3A5*3純合子個(gè)體肝臟和腸道CYP3A5蛋白表達(dá)和活性顯著下降。CYP3A5*1等位基因頻率存在顯著種族差異，白種人群中為10%--15%，中國(guó)人群中為28％，而黑種人群則高達(dá)60%--80%。他克莫司（tacrolimus，F(xiàn)K506）為大環(huán)內(nèi)酯類免疫抑制劑，臨床上廣泛用于肝、腎、心、肺、胰等器官移植患者的免疫抑制治療，其主要不良反應(yīng)包括繼發(fā)性感染、腎毒性、神經(jīng)毒性、胃腸反應(yīng)、代謝障礙以及淋巴增生性疾病和腫瘤等。器官移植患者應(yīng)用他克莫司后血藥濃度偏低可導(dǎo)致急性排斥反應(yīng)和藥物敏感性降低；血藥濃度偏高則容易發(fā)生腎毒性、神經(jīng)毒性、糖尿病、高血脂癥、高血壓和胃腸道紊亂等不良反應(yīng)。導(dǎo)致他克莫司毒副作用的發(fā)生。CYP3A5在他克莫司的代謝中起重要作用，其活性降低可導(dǎo)致他克莫司的血藥濃度升高，不良反應(yīng)增加。CPIC指南建議攜帶CYP3A5*3/*3基因型的移植患者減少他克莫司的用藥劑量，以避免發(fā)生藥物不良反應(yīng)[1]。具體而言，可根據(jù)歐洲科學(xué)家委員會(huì)的建議或中國(guó)人群他克莫司用藥劑量計(jì)算公式進(jìn)行他克莫司劑量的調(diào)整。歐洲科學(xué)家委員會(huì)的建議：CYP3A5*3/*3基因型患者他克莫司的起始劑量為0.15mg/kg/day；CYP3A5*1/*3基因型患者他克莫司的起始劑量為0.20mg/kg/day；CYP3A5*1/*1基因型患者他克莫司的起始劑量為0.25mg/kg/day。中國(guó)人群根據(jù)CYP3A5*3基因型給予初始劑量：CYP3A5*3/*3基因型患者他克莫司的起始劑量為0.075mg/kg/day；CYP3A5*1/*3和CYP3A5*1/*1基因型患者基因型患者他克莫司的起始劑量為0.15mg/kg/day；基于中國(guó)人群的他克莫司用藥劑量公式：他克莫司穩(wěn)定劑量=5.409–2.584*CYP3A5GGa–1.732*CYP3A5GAb+0.279*ABCB1C1236Tc+0.205*ABCB1G2677Td-0.163*donortypee-0.149*CCBf-0.140*infectiong-0.197*Hypertensionha.CYP3A5GG：AA=0，GG=1；b. CYP3A5AG：AA=0，AG=1；c. ABCB1C1236T:0forCC,1forCTorTT;d.ABCB1G2677T:1forGGorGT,2forTTe. 移植類型：活體移植=1，其他=0；fCCB:合并使用鈣通道阻滯劑為1，不合并為0.f. 感染：感染=1，未出現(xiàn)=0；g. 高血壓：高血壓=1，未出現(xiàn)=0。1.6CYP4F2*3多態(tài)性檢測(cè)CYP4F2為維生素K單氧酶，可氧化底物生成-羥基衍生物。CYP4F2*3（rs2108622C>T，V433M）可導(dǎo)致酶活性降低，野生型純合子基因型個(gè)體代謝活性最高，CYP4F2*3雜合子其次，CYP4F2*3純合子活性最低。CYP4F2*3純合子個(gè)體酶活性下降導(dǎo)致維生素K濃度升高，華法林的抗凝效果增強(qiáng)。臨床研究提示，CYP4F2*3多態(tài)性與華法林穩(wěn)態(tài)劑量相關(guān)，可解釋1~10％的華法林劑量個(gè)體差異[4]。攜帶CYP4F2*3等位基因的個(gè)體應(yīng)用華法林時(shí)出血的風(fēng)險(xiǎn)顯著增加。CPIC指南建議降低CYP4F2*3純合子基因型個(gè)體華法林及香豆素類抗凝藥（醋硝香豆素、苯丙香豆素）的用藥劑量[1]。1.7DPYD*2A多態(tài)性檢測(cè)氟尿嘧啶（5-FU）、卡培他濱和替加氟都為嘧啶類似物，屬抗代謝類抗腫瘤藥物?？ㄅ嗨麨I為5-FU的前體，在體內(nèi)可活化代謝為5-FU，用于結(jié)腸癌和對(duì)紫杉醇及多柔比星等無(wú)效的晚期乳腺癌的治療。替加氟為5-FU的衍生物，在體內(nèi)經(jīng)肝臟活化轉(zhuǎn)變?yōu)?-FU而發(fā)揮抗腫瘤作用。85％的5-FU經(jīng)二氫嘧啶脫氫酶（DPYD）代謝滅活。DYPD酶活性低下的結(jié)腸癌和胃癌患者應(yīng)用5-FU、卡培他濱或替加氟后出現(xiàn)體內(nèi)5-FU蓄積，引起嚴(yán)重粘膜炎、粒細(xì)胞減少癥、神經(jīng)系統(tǒng)癥狀甚至死亡。DPYD位于1號(hào)染色體短臂，該基因14外顯子1986位A>G多態(tài)性（DPYD*2A）是最常見(jiàn)的引起酶活性下降的遺傳變異，等位基因攜帶率為3％。約40％低DPYD酶活性的個(gè)體攜帶DPYD*2A等位基因，其中有60％的患者應(yīng)用5-FU治療后出現(xiàn)4級(jí)嚴(yán)重的粒細(xì)胞減少；而在DPYD酶活性正?；颊咧?，5-FU所致嚴(yán)重毒副反應(yīng)的發(fā)生率僅為10％[8,9]。因此，對(duì)DPYD*2A多態(tài)性進(jìn)行檢測(cè)可預(yù)測(cè)5-FU治療導(dǎo)致致命性毒性反應(yīng)發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。FDA已批準(zhǔn)在5-FU說(shuō)明書中增加在用藥前對(duì)DPYD多態(tài)性進(jìn)行檢測(cè)的建議[5]。CPIC指南也建議在應(yīng)用5-FU、卡培他濱和替加氟前對(duì)DPYD多態(tài)性進(jìn)行檢測(cè)，攜帶DPYD*2A等位基因的患者慎用5-FU、卡培他濱和替加氟，或降低用藥劑量，以避免嚴(yán)重不良反應(yīng)或毒性的發(fā)生[1]。1.8NAT1和NAT2多態(tài)性檢測(cè)N-乙?；D(zhuǎn)移酶是一種II相藥物代謝酶，催化多種藥物的乙?；x。人類有兩個(gè)編碼N-乙?；D(zhuǎn)移酶的基因，分別是NAT1和NAT2，兩者具有87％的同源性。NAT1表達(dá)于大多數(shù)組織中，其中以紅細(xì)胞和淋巴細(xì)胞中最豐富，主要參與異煙肼、吡嗪酰胺、利福平、氨基水楊酸和對(duì)氨基苯甲酸等藥物的代謝；NAT2僅表達(dá)于肝臟和腸道，參與異煙肼、普魯卡因胺、磺胺等20多種肼類化合物的乙酰化代謝。人群中N-乙?；D(zhuǎn)移酶活性呈多態(tài)分布，根據(jù)乙?；硇偷牟煌瑢⑷巳簞澐譃槿悾郝鸵阴；x者、快型乙?；x者和中間型乙?；x者。亞洲人中慢型乙?；x者的發(fā)生率為10~30％。NAT1基因具有高度多態(tài)型，國(guó)際芳香胺N-乙?；D(zhuǎn)移酶基因命名委員會(huì)已發(fā)布了28種NAT1的基因型，其中NAT1*4是NAT1的野生型等位基因。NAT1*20、*21、*23、*24、*25、*27與NAT1*4功能類似，而*14A、*14B、*15、*17和*22導(dǎo)致慢乙?；硇?，*10和*11導(dǎo)致酶活性升高。此外，還存在編碼無(wú)酶活性的截短蛋白的基因型。通常將NAT1*10和NAT1*11純合子和雜合子基因型視為快型乙?；x基因型，而其余等位基因的組合則被認(rèn)為是慢型乙?；x基因型。因此，對(duì)NAT1基因進(jìn)行分型不能局限于單個(gè)SNP，而應(yīng)同時(shí)對(duì)多個(gè)SNP進(jìn)行檢測(cè)和分型。異煙肼受NAT1多態(tài)性影響最大，快乙?；x型個(gè)體口服藥物后，血漿半衰期為45~110分鐘，而慢乙酰化代謝型個(gè)體口服藥物后血漿半衰期可長(zhǎng)達(dá)4.5小時(shí)。慢代謝型個(gè)體反復(fù)給藥后易引起蓄積中毒，引起周圍神經(jīng)炎。FDA已將NAT1基因列為藥物基因組生物標(biāo)記[4]。NAT2基因也具有高度多態(tài)性，國(guó)際芳香胺N-乙?；D(zhuǎn)移酶基因命名委員會(huì)已發(fā)布了87種NAT2基因型，其中NAT2*4是野生型等位基因，屬快代謝型等位基因；已知的慢代謝型等位基因包括NAT2*5B、*5B、*5C、*5D、*5E、*5F、*5G、*5H、*5I、*6A、*6B、*6C、*6D、*6E、*7B、*12D