企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)魚蛋白粉20111219修改后

Q/HTS湖北泰爾生物工程有限公司企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)Q/HTS0003S—2011魚蛋白粉2012-01-08實施2011-12-202012-01-08實施湖北泰爾生物工程有限公司發(fā)布湖北泰爾生物工程有限公司發(fā)布本標(biāo)準(zhǔn)在內(nèi)容結(jié)構(gòu)和編制規(guī)則方面均按GB1.1-2000《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第一部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編制規(guī)則》和GB1.2-2002《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第二部分：標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)范性技術(shù)要素的確定方法》的要求進行編寫。本標(biāo)準(zhǔn)由湖北泰爾生物工程有限公司品控部提出。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：劉方群、張軍、王學(xué)毅。本標(biāo)準(zhǔn)為首次發(fā)布。魚蛋白粉1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了魚蛋白（肽）粉的術(shù)語和定義、技術(shù)要求、檢驗方法、檢驗規(guī)則、標(biāo)簽標(biāo)識、包裝、儲存、運輸?shù)确矫娴囊?。本?biāo)準(zhǔn)適用于以淡水魚的魚皮、魚鱗、魚肉為原料，采用酶解技術(shù)和微生物發(fā)酵脫腥技術(shù)制得的多肽蛋白粉產(chǎn)品的生產(chǎn)、檢驗和銷售。2規(guī)范性引用文件本標(biāo)準(zhǔn)中引用的文件對于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)；凡不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修訂單）均適用于本標(biāo)準(zhǔn)。JJF1070-2005定量包裝商品凈含量計量檢驗規(guī)則國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局[2005]75號令《定量包裝商品計量監(jiān)督辦法》GB2762GB2762GB2733GB2760GB/T191-2008GB4789.2GB4789.3GB4789.4鮮、凍動物性水產(chǎn)品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)包裝運輸圖示標(biāo)志食品微生物學(xué)檢驗菌落總數(shù)測定食品微生物學(xué)檢驗大腸菌群計數(shù)食品微生物學(xué)檢驗沙門氏菌檢驗GB/T4789.5-2003 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗志賀氏菌檢驗GB/T4789.7-2008食品微生物學(xué)檢驗副溶血性弧菌檢驗GB4789.15 食品微生物學(xué)檢驗霉菌和酵母計數(shù)GB5009.3 食品中水分的測定GB5009.4 食品中灰分的測定GB/T5009.11-2003GB5009.12GB/T5009.11-2003GB5009.12GB/T5009.15-2003GB/T5009.17-2003GB/T5009.18-2003GB7718GB/T9695.23-2008食品中鉛的測定食品中鎘的測定食品中總汞及有機汞的測定食品中氟的測定預(yù)包裝食品標(biāo)簽通則肉與肉制品羥脯氨酸含量測定GB14881 食品企業(yè)通用衛(wèi)生規(guī)范3術(shù)語和定義本標(biāo)準(zhǔn)采用下列術(shù)語和定義。魚蛋白粉以魚肉、魚鱗、魚皮為主要原料，用生物酶解技術(shù)和微生物發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)的，以相對分子量低于2KDa肽段為主要組分的粉末狀產(chǎn)品。酶解法在一定條件下，利用蛋白酶的定向剪切作用把蛋白質(zhì)分解成肽及氨基酸分子等物質(zhì)的過程為酶解。發(fā)酵在一定條件下，以魚類酶解液為底物，添加有益微生物菌群來分解魚特有腥味物的生化過程。4技術(shù)要求原輔料要求原料應(yīng)符合表1的要求。表1原料的質(zhì)量要求項目指 標(biāo)a外觀新鮮、無腐敗變質(zhì)無機砷/(mg/kg) &0.1甲基汞/(mg/kg) &0.5鉛/(mg/kg) &0.5鎘/(mg/kg) &0.1氟/(mg/kg) W2.0輔料應(yīng)符合國家相關(guān)的食品安全標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。食品添加劑食品添加劑的質(zhì)量應(yīng)符合相應(yīng)的國家標(biāo)準(zhǔn)和有關(guān)規(guī)定。食品添加劑的品種和使用量應(yīng)符合GB2760的規(guī)定。包裝材料包裝材料應(yīng)符合國家相應(yīng)的食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)和食品安全標(biāo)準(zhǔn)。其他要求不得使用非食品原料。不得超范圍、超量使用食品添加劑和營養(yǎng)強化劑。感官要求應(yīng)符合表2的要求。表2感官指標(biāo)要求項目指標(biāo)要求組織形態(tài)呈均一的粉末狀，無結(jié)塊色澤白色或微黃色滋味與氣味具有與本產(chǎn)品相符的滋味與氣味，無腥味，無其他異雜味雜質(zhì)無正常視力肉眼可見的外來雜質(zhì)理化指標(biāo)

應(yīng)符合表3的要求。表3理化指標(biāo)要求項目指標(biāo)要求優(yōu)級品合格品粗蛋白質(zhì)（以干基計，Nx6.25）%三8075肽含量（以干基計）％ 三7065相對分子質(zhì)量小于2KDa的蛋白質(zhì)水解物所占比例（%） 三6560水分（%） W5.05.5灰分（以干基計）％ W4.04.5羥脯氨酸（g/100g） 三3.02.5總砷（以As計）（mg/kg） &0.50.5鉛(Pb) (mg/kg) &1.01.0鎘(mg/kg) &0.10.1甲基汞（mg/kg） &0.50.5微生物指標(biāo)應(yīng)符合表4的要求。表4微生物指標(biāo)要求項目指標(biāo)要求菌落總數(shù)（cfu/g） &4000大腸菌群（MPN/100g） &30霉菌(cfu/g) &30致病菌（沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血性弧菌）不得檢出凈含量應(yīng)符合國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局[2005]75號令。單件定量商品凈含量絕對偏差允許值不超過標(biāo)示凈含量的±3%；同批次產(chǎn)品的平均凈含量不低于標(biāo)簽上明示的凈含量值。污染物限量要求符合GB2762《食品中污染物限量》的相關(guān)規(guī)定。生產(chǎn)要求生產(chǎn)加工過程應(yīng)符合GB14881的規(guī)定。5檢驗方法感官檢驗稱取5g左右的被測樣品置于一潔凈的白色磁盤中，在自然光線下迎光用肉眼觀察其色澤和外觀形態(tài)，并取2g?3g被測試樣，置于潔凈玻璃燒杯中，用80℃左右的蒸餾水沖溶后，立即嗅其氣味，辨其滋味，靜置2min后，觀察并記錄溶液的狀態(tài)。理化指標(biāo)檢驗粗蛋白的測定： 按GB5009.5規(guī)定的方法測定。肽的測定： 按附錄A和附錄B規(guī)定的方法測定。水分的測定： 按GB5009.3規(guī)定的方法測定。灰分的測定： 按GB5009.4規(guī)定的方法測定。羥脯氨酸的測定：按GB/T9695.23-2008規(guī)定的方法測定?？偵榈臏y定： 按GB/T5009.11-2003規(guī)定的方法測定。鉛的測定： 按GB5009.12規(guī)定的方法測定。鎘的測定： 按GB/T5009.15-2003規(guī)定的方法測定。甲基汞的測定： 按GB/T5009.17-2003規(guī)定的方法測定。菌落總數(shù)： 按GB4789.2規(guī)定的方法測定。大腸菌群：按GB4789.3規(guī)定的方法測定。霉菌： 按GB4789.15規(guī)定的方法測定。致病菌：沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血性弧菌分別按GB4789.4、GB4789.5、GB4789.10、GB4789.7規(guī)定的方法測定。6檢驗規(guī)則抽樣組批同一批原料、同一班次生產(chǎn)的同一規(guī)格的產(chǎn)品為一批。抽樣方法和數(shù)量從每批產(chǎn)品中隨機抽取不少于3個最小包裝單位樣品，用取樣工具伸入每袋的3/4處取樣，所取試樣不應(yīng)少于100g。出廠檢驗應(yīng)逐批檢驗，并出具檢驗報告。檢驗合格，方可出廠。出廠檢驗項目包括：感官要求、粗蛋白質(zhì)、水分、灰分、菌落總數(shù)和大腸菌群。型式檢驗型式檢驗項目包括4.1.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9中規(guī)定的全部項目。產(chǎn)品每半年應(yīng)進行一次型式檢驗，遇到下列情況之一時，也應(yīng)進行型式檢驗。a）新產(chǎn)品投產(chǎn)時；b）停產(chǎn)半年以上，恢復(fù)生產(chǎn)時；c）當(dāng)原料、設(shè)備、工藝有較大變化并有可能影響質(zhì)量時；d）出廠檢驗結(jié)果與上次型式檢驗有較大差異時；e）國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗機構(gòu)提出要求時。判斷規(guī)則出廠檢驗判定和復(fù)檢出廠檢驗項目全部符合標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，判為合格品。出廠檢驗項目中（除菌落總數(shù)、大腸菌群）有一項不符合本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，可在同批產(chǎn)品中加倍抽取樣品復(fù)檢，仍有一項不合格者，判該批產(chǎn)品為不合格產(chǎn)品。型式檢驗判定和復(fù)檢型式檢驗項目全部符合本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，判為合格產(chǎn)品。型式檢驗項目中（除菌落總數(shù)、大腸菌群）有二項不符合本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，可在同批產(chǎn)品中加倍抽取樣品復(fù)檢，仍有不合格者，判定產(chǎn)品為不合格產(chǎn)品。7標(biāo)簽標(biāo)識預(yù)包裝產(chǎn)品標(biāo)簽應(yīng)符合GB7718的規(guī)定。標(biāo)志應(yīng)符合GB/T191的規(guī)定。8包裝、儲存和運輸包裝包裝材料應(yīng)符合相應(yīng)的食品衛(wèi)生要求和國家食品安全標(biāo)準(zhǔn)，包裝容器應(yīng)大小合適，且確保產(chǎn)品在貯存和運輸過程中保持干燥和不受污染。儲存應(yīng)儲存在通風(fēng)、干燥、清潔的地方，嚴禁與有異味、有毒物品一同存放。運輸運輸工具應(yīng)滿足清潔，防曬、防雨、防潮等《食品安全法》中有關(guān)產(chǎn)品防護的規(guī)定，且不得與有毒、有異味的物品混運。9保質(zhì)期在本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的條件下貯存，保質(zhì)期為24個月。附錄A（規(guī)范性附錄）相對分子質(zhì)量小于2kDa的蛋白質(zhì)水解物所占比例（高效凝膠過濾色譜法）A1方法提要凝膠過濾色譜法是利用凝膠把分子大小不同的物質(zhì)分離開的一種方法。凝膠是一種具有立體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)且呈多孔的不溶性珠狀顆粒物質(zhì)，對于某種型號的凝膠，一些大分子不能進入凝膠顆粒內(nèi)部而完全被排阻在外，只能沿著顆粒間的縫隙流出柱外；而一些小分子不被排阻，可自由擴散，滲透進入凝膠內(nèi)部的篩孔，然后又被流出的洗脫液帶走。分子越小，進入凝膠內(nèi)部越深，所走的路程越多，故小分子最后流出柱外，而大分子先從柱中流出。一些中等大小的分子介于大分子與小分子之間，只能進入一部分凝膠較大的孔隙，亦即部分排阻，因此這些分子從柱中流出的順序也介于大、小分子之間。因此，樣品經(jīng)過凝膠層析后，分子便按照從大到小的順序依次流出，達到分離的目的。相對分子量小于2kDa的蛋白質(zhì)水解物（包括肽及少量游離氨基酸）所占比例，可采用凝膠過濾色譜法測定，在肽鍵的紫外吸收波長214nm條件下檢測，使用凝膠色譜測定相對分子質(zhì)量分布的專用數(shù)據(jù)處理軟件對色譜圖及其數(shù)據(jù)進行處理，計算得到蛋白質(zhì)水解物的相對分子質(zhì)量大小及分布范圍，進而得到相對分子質(zhì)量小于2卜口2的蛋白質(zhì)水解物（包括肽和少量游離氨基酸）所占比例。A2儀器與設(shè)備A.2.1Amersham蛋白質(zhì)分析純化系統(tǒng)，配有UNICORN5.0GPC數(shù)據(jù)處理軟件的色譜工作站。A.2.2柱管：Superdex_peptide_10/300_GL。A.2.3流動相真空抽濾脫氣裝置。A.2.4分析天平：感量0.0001g。A3試劑A.3.1水：超純級或二次蒸餾水。A.3.2緩沖液：0.25mol/LNaCl、pH7.2磷酸鹽緩沖液。A.3.3柱封存液：20%乙醇。A.3.4相對分子質(zhì)量校正曲線所用標(biāo)準(zhǔn)品：A.3.4.1細胞色素C（Cytochrcome,MW12384）。A.3.4.2抑肽酶（Aprotinin,MW6512）。A.3.4.3維生素B12（VitaminB12MW1355）。A.3.4.4甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸（（Gly）3MW189）。A4實驗操作A.4.1流動相處理：配制流動相，用孔徑0.45微米有機膜真空抽濾脫氣。A.4.2色譜條件（推薦條件）：A.4.2.1色譜柱：Superdex_peptide_10/300_GL。A.4.2.2流動相：0.25mol/LNaCl、pH7.2磷酸鹽緩沖液。A.4.2.3檢測波長：214nm。A.4.2.4流速：0.5ml/min。A.4.2.5洗脫體積：30ml。A.4.2.6進樣體積：100同。A.4.2.7柱溫：室溫。A.4.3樣品處理：準(zhǔn)確稱取樣品10mg,加流動相10ml稀釋定容，用孔徑0.22間有機膜過濾，配制最終含多肽濃度約為1mg/ml,備用。A.4.4分子量標(biāo)準(zhǔn)校正曲線制作:分別用流動相配制成質(zhì)量分數(shù)為1mg/ml的上述不同分子量肽標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按一定比例混合后，用孔徑0.22間有機膜過濾后進樣，得到標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖。以分子量的對數(shù)（lgMW）對洗脫體積作圖或作線性回歸得到相對分子量校正曲線及其方程。A5相對分子質(zhì)量分布的計算將分子量標(biāo)準(zhǔn)校正曲線制備的樣品溶液在上述色譜條件下分析，然后用UNICORN5.0GPC數(shù)據(jù)處理軟件，將樣品的色譜圖數(shù)據(jù)代入校正曲線中進行計算，即可得到樣品的分子量及其分布范圍。用峰面積歸一法可計得不同肽段相對分子量的分布情況，按下式進行計算：X=—100

A總式中：X——試樣中某相對分子質(zhì)量肽段所占肽段的質(zhì)量分數(shù)，%A——某相對分子質(zhì)量肽段的峰面積；A總一一各相對分子質(zhì)量肽段的峰面積之和。A6重復(fù)性在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對值不得超過兩次測定結(jié)果算術(shù)平均值的15%。附錄B（規(guī)范性附錄）低聚肽的測定B1方法提要較低分子量的蛋白質(zhì)水解物（其中包含肽類及游離氨基酸）可溶于三氯乙酸溶液；高分子量蛋白質(zhì)在三氯乙酸溶液中易沉淀。樣品經(jīng)三氯乙酸溶解后，離心分離出沉淀物質(zhì)，清液中的酸溶蛋白質(zhì)含量減去游離氨基酸含量即為低聚肽含量。B2分析步驟酸