2023年電泳實驗報告

化學實驗報告之電泳實驗目的：結識膠體粒子是帶電粒子實驗原理：帶電顆粒在電場作用下，向著與其電性相反的電極移動實驗器材及藥品：鐵架臺、u形管、石墨碳棒、粗銅絲、滴管、導線、直流電源、fe(oh)3膠體、定量nacl溶液實驗操作：1、將燒杯中的蒸儲水加熱至沸騰，向沸水中逐滴滴加入6滴fecl3飽和溶液。繼續(xù)煮沸至溶液呈紅褐色，停止加熱。觀測制得的fe(oh)3膠體2、取一支u形管，注入fe(oh)3膠體到距離管口5.0cm處，固定在鐵架臺上，用滴管給u形管的兩端沿壁慢慢注入一定濃度的nac1溶液，使u形管兩端明顯分層，形成清楚的液面3、給u形管兩端插入碳棒電極，并分別連接電源的正負極，觀測現(xiàn)象并記錄時間。實驗現(xiàn)象：u形管和陰極連接的一端液面上升，出現(xiàn)明顯的液面差，陰極一端顏色加深，陽極一端顏色變淺實驗分析：在外加直流電源的作用下.，fe(oh)3膠體微粒在分散介質里向陰極作定向移動，注意碳棒不要和膠體接觸，，否則膠體放電或電解水，nacl溶液的濃度不要太大最佳是51毫摩每升。篇二：電泳實驗報告實驗十二電泳一、目的規(guī)定1)掌握電泳法測c電勢的原理和技術；2)從實驗現(xiàn)象中加深對膠體的電學性質的理解，即在外電場作用下，膠粒和介質分別向帶相反電荷的電極移動，就產(chǎn)生了電泳和電滲的電動現(xiàn)象(因電而動)。二、基本原理.電泳由于膠粒帶電，而溶膠是電中性的，則介質帶與膠粒相反的電荷。在外電場作用下，膠粒和介質分別向帶相反電荷的電極移動，就產(chǎn)生r電泳和電滲的電動現(xiàn)象。影響電泳的因素有：帶電粒子的大小、形狀；粒子表面電荷的數(shù)目；介質中電解質的種類、離子強度，ph值和粘0.97-0.56-0.44-0.2.03-0.1.制備瓊脂糖凝膠：稱取瓊脂糖，加入lx電泳緩沖液，待水合數(shù)分鐘后，置微波爐中將瓊脂糖融化均勻。在加熱過程中要不時搖動，使附「瓶壁上的瓊脂糖顆粒進入溶液；加熱時應蓋上封口膜，以減少水份蒸發(fā)。.膠板的制備：將膠槽置.于制膠板上，插上樣品梳子，注意觀測梳子齒下緣應與膠槽底面保持1mm左右的間隙，待膠溶液冷卻至50°Gr：右時，加入最終濃度為0.5微克/毫升的eb（也可不把eb加入凝膠中，而是電泳后再用0.5pg/ml的eb溶液浸泡染色15分鐘），搖勻，輕輕倒入電泳制膠板上，除掉氣泡；待凝膠冷卻凝固后，垂直輕拔梳子；將凝膠放入電泳槽內，加入1x電泳緩沖液，使電泳緩沖液液面剛高出瓊脂糖凝膠面；.加樣：點樣板或薄膜上混合dna樣品和上樣緩沖液，上樣緩沖液的最終稀釋倍數(shù)應不小于lx。用10pl微量移液器分別將樣品加入膠板的樣品小槽內，每加完一個樣品，應更換一個加樣頭，以防污染，加樣時勿碰壞樣品孔周邊的凝膠面。（注意：加樣前要先記下加樣的順序和點樣量）。.電泳：加樣后的凝膠板立即通電進行電泳，dna的遷移速度與電壓成正比，最高電壓不超過5v/cm。當瓊脂糖濃度低于0.5%,電泳溫度不能太高。樣品由負極（黑色）向正極（紅色）方向移動。電壓升高，瓊脂糖凝膠的有效分離范圍減少。當溟酚藍移動到距離膠板下沿約1cm處時，停止電泳。.觀測和拍照：電泳完畢，取出凝膠。在波長為254nm的紫外燈下觀測染色后之。（二）在具有甲醛的凝膠上進行的rna電泳（選做）配制23ml甲醛電泳膠：0.336g瓊脂糖溶于20mldePc水中，冷卻至60?c,力口入5ml的5x甲醛變性膠電泳緩沖液和5.5ml的甲醛，在通風櫥內倒膠，冷卻30分鐘后使用。甲醛變性膠rna樣品的制備：imrna,5?甲醛變性膠電泳緩沖液0.5口1,甲醛0.7pl,甲酰胺2|ilz65oc加熱15min,迅速冰浴，加lp1上樣緩沖液和0.2口】的eb。環(huán)節(jié)：.用3%過氧化氫浸泡電泳槽、膠板、梳子30分鐘以上。.膠板的制備：按常規(guī)瓊脂糖電冰法。.預電泳：lx甲醛變性膠電泳緩沖液，預電泳1。min。電壓為5v/cm。.小心地進行點樣，記錄樣品順序與點樣量；然后開始電泳，電壓為3-4v/cm。.觀測和拍照：在波長為254nm的紫外燈下觀測電泳膠板并拍照保存圖片?！咀⒁馐马椗c提醒】（l）eb是強誘變劑并有中檔毒性，易揮發(fā)，配制和使用時都應戴手套，并且不要把eb灑到桌面或地面上。凡是沾污了eb的容淵或物品必須經(jīng)專門解決后才干清洗或丟棄。簡樸解決方法為：加入大量的水進行稀釋（達成0.5mg/m1以下），然后加入0.2倍體積新鮮配制的5%次磷酸（由50%次磷酸配制而成）和0.12倍體積新鮮配制的0.5m。1/1的亞硝酸鈉，混勻，放置1天后，加入過量的lmol/1碳酸氫鈉。如此解決后的eb的誘變活性可降至本來的1/200左右。（2）由于eb會嵌入到堆積的堿基對之間并拉長線狀和帶缺口的環(huán)狀dna,使dna遷移率減少。因此，假如要準確地測定dna的分子量，應當采用跑完電泳后再用0.5口g/ml的eb溶液浸泡染色的方法。（3）總rna的分析：哺乳動物的rna由28srrna、18srrna和mrna以及其它小分子rna組成，28s和18srrna處為明顯的亮帶（相稱于4.5kb和1.9kb）,28s/l8s應為1.5-2.5/1；植物、昆蟲、酵母和兩棲動物的rna帶分布較小，約為0.5-3.Okb左右；假如28s/18s小于1/I,或者出現(xiàn)拖帶，說明rna已有部分降解，假如28s和18srrna大部分己降解，則需重新制備?！緦嶒灠才拧恐恍枰惶欤荷衔缗湓噭┑鼓z，下午跑電泳并觀測拍照。【實驗報告規(guī)定與思考題】1、附上電泳結果的圖片并進行對的的標注（如下圖）（2）的或已加有eb的電泳膠板。dna存在處顯示出肉眼可辨的桔紅色熒光條帶。于凝膠成像系統(tǒng)中拍照并保存m：1kbdnaladder；I：質粒dna2、瓊脂糖凝膠電泳中dna分子遷移率受哪些因素的影響？3、假如樣品電泳后很久都沒有跑出點樣孔，你認為有哪兒方面的因素？電泳流程圖：凝膠加樣緩沖液使用以上凝膠加樣緩沖液的H的有三：增大樣品密度；以保證dna均勻進入樣品孔內；使樣品呈現(xiàn)顏色，從而使加樣操作更為便利，具有在電塊中能以可預知速率向陽極泳動的染料飛浪酚藍在瓊脂糖中移動的速率約為二甲苯青ff的2.2倍，而與瓊脂糖濃度無關。以0.5xtbf作電泳液時，澳酚藍在瓊脂糖中的泳動速率約與長300bp的雙鏈線狀dna相同，而二甲苯青ff的泳動則與長4kb的雙鏈線狀dna相同。在瓊脂糖濃度為0.5恭?1.4%的范圍內，這些相應關系受凝膠濃度變化的影響并不顯著。選用哪一種加樣染料純屬個人喜惡。但是，對于堿性凝膠應當使用澳甲酚綠作為示蹤染料?，由于在堿性ph條件下其顯色較澳酚更藍為鮮明。篇五：dna的提取和電泳實驗報告基因組dna的提取和電泳(實驗五)實驗報告一、實驗目的了解dna提取的方法，以及瓊脂糖凝膠電泳分析dna技術。二、器材和試劑.器材水平瓊脂糖電泳儀，離心機，水浴鍋，研缽，離心管、移液槍、水稻幼苗等.試劑1mol/1tris.cl(ph8.0)的配制：稱取12.11g的tris,置于80ml的ddh20,力口入濃鹽酸(約4.2ml),調節(jié)ph值至8.0,定容至100ml。0.5mol/1edta(ph8.0)的配制：18.6lgna2edta-2h2o,加入80ml的ddh2。，用naoh顆粒調ph值至8.0(約需2g)，定容至100mlo提取緩沖液的配制：100mmol/1tris.cl(ph8.0),20mmo1/ledta,500mmo1/Inacl?5%sds80/4/16氯仿：異戊醇：乙醉.6?loadingbuffer:0.153澳酚藍，0.15%二甲苯青ff,5mmoI/1edta,50%甘油三、實驗環(huán)節(jié).在15ml的離心管中加入5ml的提取緩沖液，60°GK浴預熱。.植物葉l-2g,剪碎，在缽體中加入石英砂，加入預熱的提取緩沖液，磨成粉末狀，6O°GK浴保溫20min,其間不時緩慢搖動。.5000rpm離心5分鐘，仔細吸取上清液至另一離心管中，.加入5ml氯仿/戊醇/乙醇溶液，顛倒混勻（需帶手套，防止皮膚損傷），室溫下靜置—10分鐘，使水相和有機相混勻。.室溫下離心5000rpm離心5分鐘。.仔細吸取上清液至另一離心管中，加入一倍體積異丙醇，混勻，室溫下放置半晌即出現(xiàn)絮狀沉淀。.離心5000rpm,離心5min,棄去異兩醇，室溫晾干。.視沉淀多少，加入Im1左右ddh2o溶解，可在60℃K浴中放置15分鐘以上助溶。.取dna樣品5口1,力口入1|116?loadingbuffer,混勻，加入0.7宅的瓊脂糖凝膠加樣孔中，電泳，檢測dna的分子大小。4、實驗結果和討論實驗分析：本次實驗由于種種因素我是和植保102班的同學一起做的，我們組3人，實驗過程比較嚴謹，受到了老師的表揚，實驗結果也很令人滿意。下面是實驗過程中的注意點：1、研磨不能太久太用力，會導致dna片段斷掉。2、實驗室的某些試劑，如氯仿，有毒性，應帶手套進行。電泳的時候不知是時間的因素還是都做得不錯，結果相差不是很遠（如上圖），第五組和第六組是我們的，第六組是我自己加的。實驗過程中要耐心細心，這樣才干得到滿意的結果。度；電泳的溫度和外加電壓等。從電泳現(xiàn)象可以獲得膠?；虼蠓肿拥慕Y構、大小和形狀等有關信息。.三種電勢，固體表面相對溶液的電勢，？0=f（固體表面電荷密？0：熱力學電勢（或平衡電勢）度，電勢決定離子濃度）。??：斯特恩電勢。離子是有一定大小的，并且離子與質點表面除了靜電作用外，尚有范德華吸引力。所以在靠近表面1-2個分子厚的區(qū)域內，反離子由于受到強烈的吸引，會牢固的結合在表面，形成一個緊密的吸附層，稱為固定吸附層或斯特恩層：在斯特恩層中，除反離子外，尚有一些溶劑分子同時被吸附。反離子的電性中心所形成的假想面，稱為斯特恩面。在斯特恩面內，電勢呈直線下降，由表面的？0直線下降到斯特恩面？?<>??稱為斯特恩電勢。?：電動電勢。當固、液兩相發(fā)生相對移動時，緊密層中吸附在固體表面的反離子和溶劑分子與質點作為一個整體一起運動，其滑動面在斯特恩面梢靠外一些?；瑒用媾c溶液本體之間的電勢差，稱為？電勢。？電勢與？？電勢在數(shù)值.卜.相差甚小，但卻具有不同的含義。應當指出，只有在固、液兩相發(fā)生相對移動時，才干呈現(xiàn)出？電勢。?電勢的大小，反映了膠粒帶電的限度。？電勢越高，表白膠粒帶電越多，其滑動面與溶液本體之間的電勢差越大，擴散層也越厚。當溶液中電解質濃度增長時，介質中反離子的濃度加大，將壓縮擴散層使其變薄，把更多的反離子擠進滑動面以內，使？電勢在數(shù)值上變小當電解質濃度足夠大時，可使？電勢為零。此時相應的狀態(tài)，稱為等電態(tài)。處在等電態(tài)的膠體質點不帶電，因此不會發(fā)生電動現(xiàn)象，電泳、電滲速度也必然為零，這時的溶膠非常容易聚沉。.電泳公式當帶電膠粒在外電場作用下遷移時，膠粒受到的靜電力fl為：fl?qe（1）其中q為膠粒的電荷，e為甩場強度（或稱為電位梯度）本次實驗研究的fe（oh）3為棒形膠粒。棒形膠粒在介質中運動受到的阻力f2按stokes定律為:(2)f2?4??r?(2)其中r為膠粒的半徑，？為電泳速度，？為介質的粘度，當膠粒運動速度即電泳速度達成穩(wěn)定期，fl=f2,結合(1)、(2)式得到：??qe(3)4??r根據(jù)靜電學原理可知??q(4)?r其中r為膠粒的半徑，？為介質的界電常數(shù)，所以有????e(5)4??4???(6)?e??由該式可知，若已知？、？，可通過測定？和e算出？電勢。該式只適合于c單位制，且得出？電勢的單位為靜電伏特。若各物理量都采用si單位，r的單位為m；?的單位為m-s-1;?的單位為pas;e的單位為v-m-1此時公式為：??三、儀器與試劑4????9?109伏特(7)?e界面移動電泳儀；213型鈉電極兩個；高壓數(shù)顯穩(wěn)壓電源；滴管2根；燒杯(250m1)；-1玻璃棒一根；fee13溶液(10%)：kc1溶液(0.02mo1-1);四、實驗環(huán)節(jié).儀器裝置圖如下。圖1.實驗裝置圖.溶膠的制備：在不斷攪拌的條件下、將fecl3稀溶液滴入沸騰的水中水解，即可生成棕紅色、透明「e(oh)3溶膠：fecl3+3h2ofe(oh)3j+3hcl部分氫氧化鐵跟鹽酸作用fe(oh)3+hcl=feocl+2h2ofeocl=feo++c1-氫氧化鐵吸附溶液中帶正電荷的離子（feo+）,膠團結構為：{[fe（oh）3]m?yfeo+,（y-z）cl-}z+?zc1-分子團選擇吸附離子緊密層擴散層膠粒帶正電荷，因此在電場作用下向陰極移動，出現(xiàn)電泳現(xiàn)象。.測定電泳速度和電位梯度打開活塞，在電泳儀中裝上待測fe（oh）3溶膠至一定高度（便于觀測界面的移動）。用滴管將kcl溶液從電泳儀兩臂的玻璃管壁等量緩慢加入，出現(xiàn)清楚界面才可以，否則重新灌裝，繼續(xù)加入kc1溶液至接近支管，注意不能擾動界面，保持界面清楚并使兩臂界面等高。輕輕地將Pt電極垂直插入kcl溶液，記下兩邊界面的高度位置。接通電源，調節(jié)電壓至180v左右，開始記時?，觀測液面的變化。根據(jù)通電時間和界面下降的刻度計算電泳速度。注意事項：a:氫氧化鐵膠體的電泳速度跟氫氧化鐵膠粒的帶電量有關，膠粒帶電量越大，電泳速度越大。滲析可以減少膠粒中的氯離子，增大膠粒的帶電量。b:實驗時，一旦通電，手就不能再觸及電極，拆卸裝置時也一定要先切斷電源。c:要使氯化鉀溶液浮在膠體的液面上，并跟膠體之間保持清楚的界面.，實驗時應注意使膠體的密度比使氯化鉀溶液的密度大。這樣，使氯化鉀溶液加入后不會下沉而跟膠體混在一起。為此，氯化鉀溶液的濃度不能太大。五、數(shù)據(jù)記錄與解決從直流電源讀得電壓u=v,用直尺測得兩電極間的距離1=m,計算e=u/1=-1-lv-m;記錄界面下降高度m,通電時間s,計算？=將e、？數(shù)據(jù)代入？？據(jù)代入求出？。m-1?（20℃水）=80.37f?4???,?為介質的界電常數(shù)，？為介質的粘度，初略地以水的數(shù)？e?（20。。水）=0.001「8上篇三：氫氧化鐵膠體電動電位的測定（電泳法）實驗報告深圳大學實驗報告課程名稱：實驗項H名稱：氫氧化鐵膠體電動電位的測定(電泳法)學院：化學與化工學院專業(yè)：指導教師：報告人：學號：班級：同組人：實驗時間：實驗報告提交時間：教務處制氫氧化鐵膠體電動電位的測定(電泳法)一、目的規(guī)定(1)掌握電泳法測定fe(oh)3溶膠電動電勢的原理和方法。(2)通過實驗觀測并熟悉膠體的電泳現(xiàn)象。二、基本原理在膠體溶液中，分散在介質中的微粒由了自身的電離或表面吸附其他粒子而形成帶一定電荷的膠粒，同時在膠粒附近的介質中必然分布有與膠粒表面電性相反而電荷數(shù)量相同的反離子，形成一個擴散雙電層。在外電場作用下，荷點的膠粒攜帶起周邊一定厚度的吸附層向帶相反電荷的電極運動，在荷電膠粒吸附層的外界面與介質之間相對運動的邊界處相對J：均勻介質內部產(chǎn)生一電勢，為＜電勢。它隨吸附層內離子濃度，電荷性質的變化而變化。它與膠體的穩(wěn)定性有關，C絕對值越大，表白膠粒電荷越多，膠粒間斥力越大，膠體越穩(wěn)定。本實驗用界面移動法測該膠體的電勢。在膠體管中，以kcl為介質，用fe(oh)3溶膠通電后移動，借助測高儀測量膠粒運動的距離，用秒表記錄時間，可算出運動速度。當帶電膠粒在外電場作用下遷移時，膠粒電荷為q,兩極間的的電位梯度為e,則膠粒受到靜電力為f1=eq膠粒在介質中受到的阻力為f2=knr]ru若膠粒運動速率u恒定，則fl=f2qe=knr|ruC=q/gfC=q/gfC=q/gf(1)根據(jù)靜電學原理將(2)代入(1)得u=C?e/knr)C=q/gf(3)利用界面移動法測量時，測出時間t時膠體運動的距離s,兩伯極間的電位差cp和電極間的距離1,則有e=<p/1,u=s/t(4)代入(3)得s=(C<pe/4nn1)?t作s—t圖，由斜率和已知得E和n,可求C電勢。三、儀器及試劑fe(oh)3膠體，kcl輔助溶液，高位瓶，電泳管，直尺，電泳儀。.電極2kc1溶液3fe(oh)3溶膠三、實驗環(huán)節(jié)1.洗凈電泳管和高位瓶，然后在電泳管中加入kcl輔助溶液，使其高度至電泳管的一半，將電泳管固定在鐵架臺上。插入電極。(注意兩電極口必須水平)2.在高位瓶中加入40ml的fe(oh)3膠體溶液，趕走導管中的氣泡，將其固定在鐵架臺上。.將高位瓶的毛細管由電泳管中間插入底部。緩慢打開活塞入fe(oh)3膠體,一直沒過電極。將導管從電泳管中慢慢取出。.打開電泳儀，將電壓設立60v,將電泳管比較清楚的一極插入陰極中，另一端插陽極。.調好測高儀的水平儀，并記錄電冰管陰極溶液界面的初始位置。6.將電泳儀置于I：作位置，同時記時，每4分鐘記一次界面高度。.測量7個點后停止實驗，關閉電泳儀開關，用細繩測量電極兩端的距離，測三次，記錄數(shù)據(jù)。.拋棄電泳管中的試液，并沖洗干凈。、四、數(shù)據(jù)記錄與解決實驗前溫度：28.3℃大氣壓：101.87kpa實驗后溫度：27.7℃大氣壓：100.76kpa電壓：60.00兩極間距離1(cm):32.90cm已知：？=0.000894pa.s?=78.36u=60v1=32.90cm根據(jù)上表作圖得：依據(jù)公式：s=(<(pe/4nr|i)?t和已知的n和5就可算出《電位:由圖得斜率：k=4(p￡/4nr|l=0.0531cm-min-1查得：￡=78.36f/mq=0.8904mpa.s測得電極間距為：1=32.90cm實驗電壓：(p=60v將數(shù)值代入得：<=4.172xiO-6v五.結果與討論實驗測得fe(oh)3的電動勢《=4.172x10-6V。通過本次實驗，掌握了電泳法測定fe(oh)3溶膠電動電勢的原理和方法，同時觀測和熟悉了膠體的電泳現(xiàn)象。導致誤差的也許因素：(1)儀器的干凈限度規(guī)定很高，否則也許發(fā)生膠體凝聚，導致毛細管堵塞。故?定要將儀器清洗干凈。(2)觀測界面移動時，應由同一個人觀測，從而減小誤差。(3)實驗中輔助液的選擇十分重要，規(guī)定輔助液的電導率與溶膠的?致，避免因界面處電場強度的突變導致兩臂界面移動速度不等產(chǎn)生界面模糊。(4)fe(Oh)3膠體帶正電。六、思考題：1、要準確測定膠體的電泳速度必須注意哪些問題？答：碘壓要足夠，穩(wěn)定；②也路暢通；酬液保證暢通無氣泡：篇四：瓊脂糖凝膠電泳實驗瓊脂糖凝膠電泳實驗2023-11-0309：43：56來源：生物秀評論：0我要評論實驗二瓊脂糖凝膠電泳實驗【實驗目的】Q)學習瓊脂糖凝膠電泳的基本原理”2)掌握使用水平式電泳儀的方法；(3)學習在具有甲醛的凝膠上進行rna電泳的方法?！緦嶒炘怼凯傊悄z電泳是基因工程實驗室中分離鑒定核酸的常規(guī)方法。核酸是兩性電解質，其等電點為ph2-2.5,在常規(guī)的...實驗二瓊脂糖凝膠電泳實驗【實驗目的】(1)學習瓊脂糖凝膠電泳的基本原理；(2)掌握使用水平式電泳儀的方法；（3）學習在具有甲醛的凝膠上進行rna電泳的方法?！緦嶒炘怼凯傊悄z電泳是基因工程實驗室中分離鑒定核酸的常規(guī)方法。核酸是兩性電解質，其等電點為ph2-2.5,在常規(guī)的電泳緩沖液中（ph約8.5）,核酸分子帶負電荷，在電場中向正極移動。核酸分子在瓊脂糖凝膠中泳動時，具有電荷效應和分子篩效應，但重要為分子篩效應。因此，核酸分子的遷移率由下列幾種因素決定：（1）dna的分子大小。線狀雙鏈dna分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與dna分子量對數(shù)成反比，分子越大則所受阻力越大，也越難于在凝膠孔隙中移動，因而遷移得越慢。（2）dna分子的構象。當dna分子處在不同構象時，它在電場中移動距離不僅和分子量有關，還和它自身構象有關。相同分子量的線狀、開環(huán)和超螺旋質粒dna在瓊脂糖凝膠中移動的速度是不同樣的，超螺旋dna移動得最快，而開環(huán)狀dna移動最慢。如在電泳鑒定質粒純度時發(fā)現(xiàn)凝膠上有數(shù)條dna帶難以擬定是質粒dna不同構象引起還是由于具有其他dna引起時.，可從瓊脂糖凝膠上將dna帶逐個回收，用同一種限制性內切酶分別水解，然后電泳，如在凝膠上出現(xiàn)相同的dna圖譜，則為同一種dna。（3）電源電壓。在低電壓時■，線狀dna片段的遷移速率與所加電壓成正比。但是隨著電場強度的增長，不同分子量的dna片段的遷移率將以不同的幅度增長，片段越大，因場強升高引起的遷移率升高幅度也越大，因此電壓增長，瓊脂糖凝膠的有效分離范圍將縮小。要使大于2kb的dna片段的分辨率