第一章 樣品前處理支撐液液萃取和蛋白質(zhì)沉淀

第一章

樣品前處理方法

專題介紹三：支撐液液萃取、

蛋白質(zhì)沉淀一、支撐液液萃取Solid-supportedliquidliquidextraction(SLE)以傳統(tǒng)液液萃取原理為基礎(chǔ)，結(jié)合固相萃取支撐體易于相分離的特點(diǎn)，以一種吸附性高、惰性好、比表面積大的多孔填料為介質(zhì)，從而實(shí)現(xiàn)快速和高通量樣品制備；硅藻土-SLE

TheprocessofsampleanalysisbySLEandHPLCFirstreportedin1997byJohnsonandco-workersSLEhasmanyadvantagescomparedwithLLESimpleoperationNoemulsificationHighrecoveryrate硅藻土-SLE

InvestigationofpackingandfilledmethodCharacterizationofpacking(A)Inertpackingtreatedbyhightemperatureburningandacidcleaningand(B)DetailviewoftheinertpackingABSLE樣品前處理方法惰性材料：種類(lèi)、顆粒、裝填量等；萃取劑種類(lèi)、體積；萃取后處理；SLE應(yīng)用（1）：蔬菜、果汁中苯并咪唑類(lèi)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)：水蜜桃多菌靈SLE應(yīng)用（2）：血清中中性藥物醋酸地塞米松的萃取SLE應(yīng)用（2）：血清中堿性藥物馬來(lái)酸氯苯那敏的萃取SLE應(yīng)用（2）：血清中酸性藥物吲哚美辛的萃取SLE應(yīng)用（2）：雞肉、蜂蜜、牛奶中硝基呋喃類(lèi)代謝物的分析：呋喃唑酮代謝物（AOZ）、呋喃它酮代謝物（AMDZ）、呋喃妥因代謝物（AHD）、呋喃西林代謝物（SEM）SLE應(yīng)用（3）：白酒中塑化劑的分析化合物tR（min）S1（%）S2（%）化合物tR（min）S1（%）S2（%）鄰苯二甲酸二甲酯8.3139.4122.1鄰苯二甲酸二己酯15.687.562.3鄰苯二甲酸二乙酯9.1121.2138.3鄰苯二甲酸丁基芐基酯15.7129.496.0鄰苯二甲酸二異丁酯10.9171.8159.6鄰苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯17.2164.3125.4鄰苯二甲酸二丁酯11.6176.4138.0鄰苯二甲酸二環(huán)己酯17.8111.186.3鄰苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯12.0131.099.5鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯18.1105.989.6鄰苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯12.797.883.9鄰苯二甲酸二苯酯18.2170.6117.7鄰苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯13.1130.8102.7鄰苯二甲酸二正辛酯20.5123.899.9鄰苯二甲酸二戊酯13.4105.866.3鄰苯二甲酸二壬酯23.023121.197.9鄰苯二甲酸丁酯填料回收率（%）C18100.40PS-DVB123.53SLE158.37二、蛋白質(zhì)沉淀Proteinprecipitationtube，PPT蛋白質(zhì)沉淀的原理是沉淀劑與蛋白質(zhì)的一部分直接或間接的相互作用，從而使蛋白質(zhì)聚集沉淀。生物樣品中小分子物質(zhì)的分析減少生物樣品中的蛋白質(zhì)的含量蛋白質(zhì)標(biāo)記物的分析將不同的蛋白質(zhì)分開(kāi)將蛋白質(zhì)溶液進(jìn)行濃縮生物化學(xué)熱聚集鹽析酸變性法使生物樣品中所有蛋白質(zhì)整體變性蛋白質(zhì)沉淀的一般步驟溶劑的加入如內(nèi)標(biāo)物、反應(yīng)物、2-5倍樣品體積的有機(jī)溶劑；震蕩增加蛋白質(zhì)變性沉淀的速度，也可以將震蕩后的樣品液進(jìn)行冷凍從而增加蛋白質(zhì)祛除的效率；離心或者過(guò)濾除沉淀過(guò)濾法效率與離心法相當(dāng)或者更優(yōu)于離心法，且過(guò)濾法更易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化PPT

wasintroducedin2000by3MCompany.ComparedtotraditionalcentrifugationmethodtheadvantagesofPPTareasfollows:SimpleEasyFastHighThroughput(HTP)快速蛋白質(zhì)沉淀

TheprocessofproteinsampleanalysisbysinglePPTandHPLC高通量蛋白質(zhì)沉淀Highthroughputdevice血清中頭孢氨芐的分析RecoveryoftheCephalexininFetalcalfserumwithdifferentprecipitatorsPPTvsCentrifugationmethodRecoveryoftheCephalexininBSAwithdifferentmethods血清中馬來(lái)酸氯苯那敏C(μg/mL)Therecovery(%)RSD%(intra-day,n=6)RSD%(inter-day,n=6)