第九章甾體及其苷類

第九章本章內(nèi)容第一節(jié)概述第二節(jié)甾體皂苷第三節(jié)強(qiáng)心苷類第一節(jié)概述一、結(jié)構(gòu)與分類甾體類在結(jié)構(gòu)中都具有環(huán)戊烷駢多氫菲的甾核。又名類固醇化合物（steroids），因其結(jié)構(gòu)中都具有環(huán)戊烷駢多氫菲的甾核，1936年給這類化合物提出一個(gè)總稱“甾體化合物”，“甾”字很形象化地表示了這類化合物的骨架，即在含有四個(gè)稠合環(huán)“田”字上面連有三個(gè)支鏈“〈〈〈”。C10、C13上各有一個(gè)甲基，稱為角甲基。C17位有側(cè)鏈。甾核四個(gè)環(huán)可以有不同的稠合方式。天然甾類成分可分許

多類型，如下表所示：甾體基本母核天然甾類化合物的分類及甾核的稠合方式

C17側(cè)鏈A/BB/CC/DC21甾類羥甲基衍生物反反順強(qiáng)心苷類不飽和內(nèi)酯環(huán)順,反反順甾體皂苷類含氧螺雜環(huán)順,反反反植物甾醇脂肪烴順,反反反昆蟲(chóng)變態(tài)激素脂肪烴順?lè)捶茨懰犷愇焖犴樂(lè)捶寸摅w母核有七個(gè)手性碳原子，C5、C8、C9、C10、C13、C14、C17,故理論上應(yīng)有27=128種光學(xué)異構(gòu)體，但由于稠環(huán)的存在及其引起的空間阻礙，實(shí)際上可能存在的異構(gòu)體大大減少，一般只以穩(wěn)定的構(gòu)型存在。

母核的構(gòu)型：甾體化合物的四個(gè)環(huán)之間，每?jī)蓚€(gè)環(huán)以碳碳單鍵稠和時(shí)，可以是順式的，也可以是反式的。A/B環(huán)有順式(5-βH)或反式(5-αH)稠和。B/C環(huán)是反式稠和（8-βH/9-αH)。C/D環(huán)有順式(14-βH)或反式稠和(14-αH)。

二、生物合成途徑甾類是通過(guò)甲戊二羥酸的生合成途徑轉(zhuǎn)化而來(lái)甲戊二羥酸角鯊烯（squalene）2，3-氧化角鯊烯（2，3-oxidosqualene）羊毛甾醇（三萜）+CH3COOH

羊毛甾醇

甾醇類C21甾類[O]

甾體皂苷元

甲型強(qiáng)心苷元乙型強(qiáng)心苷元

+C3

三、甾體類化合物的顏色反應(yīng)

甾體類化合物在無(wú)水條件下用酸處理，經(jīng)加熱后能產(chǎn)生各種顏色反應(yīng)。這類顏色反應(yīng)的機(jī)理較復(fù)雜，1976年日本人建議此類反應(yīng)的機(jī)理是甾類化合物與酸（硫酸或Lewis酸）作用，經(jīng)脫水、縮合、氧化等過(guò)程生成陽(yáng)碳離子鹽有色物。3,5-膽甾二烯(Ⅰ)

3,3′-雙（2，4）膽甾二烯（Ⅱ）1.Liebermann-Burchard反應(yīng)

樣品（氯仿）+硫酸－乙酐（1：20）紅→紫→藍(lán)→綠→污綠（最后褪色）也可將樣品溶于冰乙酸，加硫酸-乙酐（1:20）試劑產(chǎn)生同樣的反應(yīng)。

2.Salkowski反應(yīng)

3.Tschugaev反應(yīng)

4.Rosen-Heimer反應(yīng)

5.Kahlenberg反應(yīng)

第二節(jié)甾體皂苷（一）概述（二）甾體皂苷化學(xué)結(jié)構(gòu)類型（三）甾體皂苷的理化性質(zhì)（四）甾體皂苷的提取與分離（五）甾體皂苷的波譜特征第二節(jié)甾體皂苷㈠概述新定義甾體皂苷是一類螺旋甾烷（spirostane）及其生源相似的甾族化合物的低聚糖苷。老定義

甾體皂苷為植物界存在的一類,其水溶液振搖后可產(chǎn)生大量持久性肥皂樣泡沫，具溶血作用，能與膽甾醇形成復(fù)合物沉淀的苷類化合物。

分布——主要分布在單子葉植物中，大多存在于百合科、薯蕷科、石蒜科和龍舌蘭科，菠蘿科、棕櫚科、茄科、玄參科、菝葜科、豆科、姜科、延齡草科等植物中也有存在。此外，由多種海洋生物和動(dòng)物體內(nèi)亦分離到一系列結(jié)構(gòu)特殊的甾體皂苷。

生理活性——六七十年代，用于合成甾體避孕藥和激素類藥物的原料。九十年代發(fā)現(xiàn)了新的生物活性，特別是防治心腦血管疾病、抗腫瘤、降血糖和免疫調(diào)節(jié)等作用。二、甾體皂苷例如：

地奧心血康膠囊是由黃山藥植物中提取的甾體皂苷制成的，內(nèi)含8種甾體皂苷（含量在90%以上），對(duì)冠心病心絞痛發(fā)作療效顯著。薤白皂苷經(jīng)體外試驗(yàn)顯示具有較強(qiáng)的抑制ADP誘導(dǎo)的人血小板聚集作用。心腦舒通為蒺藜[Tribulus

terres

tres]果實(shí)中提取的總皂苷制劑，臨床用于心腦血管病的防治。大蒜的甾體皂苷(降血糖、降膽固醇)歐鈴蘭次甾體皂苷(抗菌)蜘蛛抱蛋甾體皂苷(殺滅釘螺)重樓甾體皂苷Ⅰ和甾體皂苷Ⅳ(細(xì)胞毒)甾體皂苷元是合成甾體激素的原料（如薯蕷甾體皂苷元）甾體皂苷一般都能產(chǎn)生溶血作用（少數(shù)例外，反而抗溶血），因此又稱皂毒素，不能做成靜脈注射劑。甾體皂苷分子不具-COOH，故稱又中性皂苷。二、甾體皂苷（一）概述（二）甾體皂苷化學(xué)結(jié)構(gòu)類型（三）甾體皂苷的理化性質(zhì)（四）甾體皂苷的波譜特征（五）甾體皂苷的提取與分離第二節(jié)甾體皂苷甾體皂苷的皂苷元基本骨架屬螺甾烷的衍生物。

①27個(gè)碳

②B/C、C/D環(huán)——反式

③C17側(cè)鏈——β構(gòu)型

④C22是E與F環(huán)共享的碳以螺縮酮的形式相聯(lián)一、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：

1、分子中都有A、B、C、D、E、F六個(gè)環(huán)，C1~C17組成A~D環(huán)形成環(huán)戊烷駢多氫菲的母核，C17上的側(cè)鏈C22與C16結(jié)成駢合的五元含氧環(huán)（E環(huán)），E環(huán)與F環(huán)以螺縮酮形式相連，C18和C19兩個(gè)角甲基均為β-型。組成螺旋甾烷結(jié)構(gòu)或異螺旋甾烷結(jié)構(gòu)。

2、環(huán)的稠合方式：

A/B環(huán)有順式（5β-OH）也有反式駢合（5α-OH）。

B/C環(huán)，C/D環(huán)一般都為反式（故個(gè)別C/D為順式）。3、官能團(tuán)：①羥基:常為1～3個(gè)，多連在C3，且多為β-型并常連糖成苷，其他位也可取代（也有α、β-方向）。

②雙鍵：多為Δ5（6）,也有Δ9(11)，Δ25(27)型

③羰基：C12最常見(jiàn)（有利于合成皮質(zhì)激素）

④一般不具-COOH因此稱中性甾體皂苷。

⑤新近發(fā)現(xiàn)有取代.

4、側(cè)鏈（C20~C27）

螺旋甾

:按Fischer投影式規(guī)定，C26氧化態(tài)最高為頂端投影，取代基在左側(cè)為β-型，右側(cè)為α-型，C25連-CH3左取向?yàn)長(zhǎng)-型，右取向?yàn)镈-型。

（1）C25-CH3:25βF

(25L,25S,neo、L-型)

（2）C22-O:22αF(3)C20-CH3:20βF

異螺旋甾

（1）C25-CH325αF（25R,iso、D-型）。（2）C22-O:

同螺旋甾烷

(3)C20-CH3:二、分類依螺甾烷結(jié)構(gòu)中C25的構(gòu)型和環(huán)的環(huán)合狀態(tài)，將其分為以下類型：1．螺甾烷醇類（spirostanols）2．異螺甾烷醇類（isospirostanols）C25位甲基二種差向異構(gòu)體：C25位上甲基位于F環(huán)平面上的豎鍵時(shí)——為β定向，絕對(duì)構(gòu)型為S型——螺甾烷醇又稱L型或neo型（25S、25L、25βF、neo）C25位上甲基位于F環(huán)平面下的橫鍵時(shí)——α定向，絕對(duì)構(gòu)型為R型——異螺甾烷醇又稱D型或iso型（25R、25D、25αF、iso）例如：劍麻皂苷元(sisalagenin),是合成激素的原料化學(xué)名:3β-羥基5α,20βF,22αF,25βF螺旋甾12-酮簡(jiǎn)稱:3β羥基，5α-螺旋甾12-酮例如：薯蕷皂苷元(diosgenin)制藥工業(yè)中重要原料化學(xué)名:△5-20βF，22αF，25αF螺旋甾烯-3β-醇簡(jiǎn)稱:△5-異螺旋甾烯-3-β-醇3．呋甾烷醇類（furostanols）由Ｆ環(huán)裂環(huán)而衍生的皂苷——稱為呋甾烷醇皂苷（furostanol

saponins）。Ｆ環(huán)開(kāi)環(huán)的雙糖鏈皂苷，植物根莖經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間的貯存，其主要的皂苷是薯蕷皂苷，而不再是原薯蕷皂苷。F環(huán)裂解的雙糖鏈皂苷產(chǎn)生的顯色反應(yīng)：

E試劑——鹽酸二甲氨基苯甲醛試劑

A試劑——茴香醛（Anisaldehyde）試劑F環(huán)裂解的雙糖鏈皂苷黃色黃色A試劑E試劑F環(huán)閉環(huán)的單糖鏈皂苷和螺旋甾烷衍生皂苷元黃色A試劑不顯色E試劑F環(huán)裂解的雙糖鏈皂苷不具有某些皂苷的通性：①?zèng)]有溶血作用②不能與膽甾醇形成復(fù)合物③沒(méi)有抗菌活性螺旋甾烷衍生的單糖鏈皂苷，則具有明顯抗菌作用。如：原菝葜皂苷——無(wú)溶血作用、不能與膽甾醇形成復(fù)合物、無(wú)抗菌活性4.變形螺旋甾烷醇類（F環(huán)為四氫呋喃環(huán)）

5.C25上可連-OH（不連H），可連羥甲基（不連-CH3）,或Δ25(27)

組成甾體皂苷常見(jiàn)的糖及成苷方式

1.單糖

D-glc,D-gal,L-Rha,D-xyl,L-ara,L-Fuc,D-glcA，這些糖可以不同的方式與甾體皂苷元上的-OH縮合成苷。

2.成苷形式：（多為單糖鏈甾體皂苷，少為雙糖鏈甾體皂苷）

（1）單糖鏈甾體皂苷:多在C3-OH成苷,且多為支鏈鏈糖,也有直鏈糖(少)

。(2)雙糖鏈甾體皂苷：（為數(shù)不多，有些是呋甾烷連糖成苷）

另外甾體皂苷水解一部分糖（單糖鏈甾體皂苷縮短糖鏈，雙糖鏈甾體皂苷成為單糖鏈）生成的次級(jí)苷，稱次皂苷。三．性質(zhì)

1.性狀

甾體皂苷多為白色或乳白色無(wú)定形粉末,但甾體皂苷元大多有完好的結(jié)晶。2．發(fā)泡性（表面活性作用）

甾體皂苷可降低水溶液的表面張力，。其水溶液經(jīng)振搖能產(chǎn)生持久性的泡沫，并不因加熱而消失（可作甾體皂苷鑒別用）：

泡沫試驗(yàn)：

區(qū)別中性皂苷和酸性皂苷：

3．溶解性

甾體皂苷由于連糖的數(shù)目及種類不同，以及水解程度不同而產(chǎn)生次皂苷或甾體皂苷元，在結(jié)構(gòu)上都有一定的差異，因此在溶解性上也有所不同，一般說(shuō)：

4．溶血作用

絕大多數(shù)甾體皂苷稀的水溶液能使血液中紅細(xì)胞破裂而出現(xiàn)溶血：

不同的甾體皂苷溶血作用不同，溶血作用的強(qiáng)弱可用溶血指數(shù)表示。

并不是所有的甾體皂苷都有溶血作用。

酯甾體皂苷苷元部分的酯鍵水解后失去溶血作用。。

某些萜類（如三萜皂苷），胺類和酸敗的油脂類也可因起溶血，因此在進(jìn)行溶血試驗(yàn)時(shí)要注意將甾體皂苷純化后再做（膽甾醇沉淀，沉淀得到的甾體皂苷再作溶血試驗(yàn)）。

5．沉淀反應(yīng)

（1）金屬鹽沉淀

甾體皂苷可與鉛鹽產(chǎn)生沉淀，酸性和中性皂苷的沉淀反應(yīng)有差異。利用此性質(zhì)可鑒別或分離中性和酸性皂苷（2）膽甾醇沉淀（C3-OH為β-型的甾醇都可產(chǎn)生沉淀）：

甾體皂苷可與膽甾醇生成分子復(fù)合物而產(chǎn)生沉淀，而且沉淀作用有如下規(guī)律：

具3β-OH，A/B環(huán)反式或Δ5結(jié)構(gòu)的甾醇與甾體皂苷形成的分子復(fù)合物穩(wěn)定。

具3α-OH，或3β-OH被酯化成苷的甾醇，不能與甾體皂苷產(chǎn)生沉淀。

可用于純化皂苷和檢查是否有皂苷類成分存在反應(yīng)條件：甾醇需有C3-β-OH三萜皂苷與甾醇形成的分子復(fù)合物不及甾體皂苷穩(wěn)定6．水解反應(yīng)

(1)酸水解

但甾體皂苷所連多是α-OH糖，因此要進(jìn)行劇烈水解：

由于條件劇烈，因此常使苷元產(chǎn)生脫水，雙鍵移位，構(gòu)型異構(gòu)，環(huán)合的反應(yīng)。由于劇烈水解產(chǎn)生苷元結(jié)構(gòu)的變化，因此常尋求溫和條件的水解方法：可將糖和完全水解掉。

（2）酶解：

A.利用植物體內(nèi)的酶

能酶解部分糖得到次甾體皂苷。

如：

B.糖苷酶水解

可全部水解糖與苷元得所有苷鍵而苷元不影響。

（3）Smith降解法

（4）微生物培養(yǎng)酶水解

7．熔點(diǎn)和旋光度

（1）

熔點(diǎn)

甾體皂苷的熔點(diǎn)一般都高達(dá)200～350℃,熔融前,已開(kāi)始分解,所以：熔點(diǎn)不明顯，或測(cè)得的多為分解點(diǎn)，甾體皂苷混熔點(diǎn)和乙?；锘烊埸c(diǎn)往往不下降，用熔點(diǎn)判斷純度不可靠。

（2）旋光度

旋光度與對(duì)照品旋光度值對(duì)照比熔點(diǎn)鑒定可靠

8．顏色反應(yīng)

甾體皂苷顏色反應(yīng)與強(qiáng)心苷有些相同，都是一些強(qiáng)酸或Lewis酸，其機(jī)理目前還是不太清楚（水解苷元、脫水、雙鍵移位、分子縮合形成共軛陽(yáng)炭離子顯色等）（1）醋酐－濃硫酸反應(yīng)（Liebermann-Burchard反應(yīng)）

此反應(yīng)可鑒別甾體和三萜甾體皂苷。

（2）三氯醋酸反應(yīng)(Rosen-Heimen)

(3)氯仿－濃硫酸反應(yīng)（salkowski）

(4)冰醋酸－乙酸氯反應(yīng)（Tcchugaeff）

（5）五氯化銻(Kahlenberg)(6)Ehrlich試劑反應(yīng)螺旋甾型皂苷無(wú)此反應(yīng)。四、甾體皂苷的提取與分離（一）甾體皂苷的提取：

苷及苷元的提取方法不同

1、

苷的提取主要利用甾體皂苷易溶于熱的EtOH,MeOH進(jìn)行提取，實(shí)驗(yàn)室和工業(yè)生產(chǎn)中多采用溶劑法提取

注意：（1）含油脂高的原料可事先用石油醚脫脂以后再用醇提

（2）過(guò)濾時(shí)要趁熱

（3）含量較高的甾體皂苷醇提液經(jīng)濃縮后可直接析出沉淀，過(guò)濾即可得粗甾體皂苷。因此濾除物最好用TLC檢查是否有甾體皂苷

（4）將皂苷水液通過(guò)大孔樹(shù)脂柱，先用水洗去部分糖和其它水溶性雜質(zhì)，再用甲醇或乙醇進(jìn)行梯度洗脫純化（低～高）

2、苷元的提取

利用苷元易溶與石油醚、苯、溶劑汽油、CHCl3等弱極性有機(jī)溶劑的性質(zhì)進(jìn)行提取，但須水解苷鍵

或先將植物用酸水解，再用弱極性有機(jī)溶劑提?。?/p>

注意：

1、事先可酶解后再酸水解

2、要用TLC監(jiān)測(cè)控制水解條件，防止異構(gòu)化，以及是否水解徹底。（二）甾體皂苷的分離及精制

1、有機(jī)溶劑分段（級(jí)）沉淀法（醇－醚沉淀法）

MeOH（EtOH

）

Et2O（Me2CO）或Et2O－Me2CO（1：1）

甾體皂苷大小雜質(zhì)大大甾體皂苷A大小甾體皂苷B大大

多糖，多糖皂苷先析出，短糖鏈皂苷后析出，色素，單、雙糖等留在母液里。例：洋地黃甾體皂苷與吉托甾體皂苷的分離

不易分到很純的單體，而且用的溶劑量較大，但用此法還是較多的。2、鉛鹽沉淀法

利用Pb(AC)2和Pb(OH)AC能分離中性，酸性皂苷

所得沉淀可用如下方法脫鉛：

3、膽甾醇沉淀法

利用甾體皂苷能與膽甾醇生成不溶性分子復(fù)合物進(jìn)行分離

4、Girard腙法：

有些甾體皂苷元帶有>=O，因此可用Girard試劑T或P與之反應(yīng)成腙，進(jìn)行與非羰基類甾體皂苷元分離

5、色譜法

（1）固定相：

降活性氧化鋁（偏于分苷元）

濕法裝柱降活性硅膠（偏于分苷）（2）移動(dòng)相：

分離苷CHCl3-MeOH-H2O（各種比例用得較多）。分離苷元一般多用氯仿，苯，乙酸乙酯，作基元試劑。

例：劍麻中甾體皂苷元的分離

苯 新提果甾體皂苷元酮 Ⅱ洗脫劑化學(xué)成分部位苯－氯仿（98:2～98:5） β-谷甾醇 Ⅴ

新提果甾體皂苷元 Ⅵa

提果甾體皂苷元 Ⅵb

（95:5～90:10）劍麻甾體皂苷元 Ⅶa

?？社摅w皂苷元Ⅶb(90:10～80:20)洛可甾體皂苷元 Ⅹ苯－甲醇(99.5～0.5) 洛可甾體皂苷元

12-表洛可甾體皂苷元 Ⅺ

（98～2）綠蓮甾體皂苷元 ⅩⅥ

（97～3）海可甾體皂苷元 ⅩⅧa

紅光甾體皂苷元ⅩⅧb劍麻甾體皂苷元：

6、提取分離實(shí)例：

(1)甾體皂苷：

實(shí)例1百合皂苷Ⅰ及Ⅱ的提取分離百合皂苷Ⅰ

百合皂苷Ⅱ

實(shí)例2：大蒜皂苷的提取分離從新鮮大蒜（Allium

satyvum）鱗莖的水溶性部位中分得的呋甾皂苷protoisoeruboside-B（Ⅰ）和螺甾皂苷eruboside-B（Ⅱ）、isoeruboside-B（Ⅲ）3個(gè)甾體皂苷。其中protoisoeruboside-B有顯著的提高纖溶活性，isoeruboside-B有明顯的延長(zhǎng)血液凝固時(shí)間和提高纖溶活性。proto-iso-eruboside-B（Ⅰ）25R：eruboside-B（Ⅱ）

25S：iso-eruboside-B（Ⅲ）（2）甾體皂苷元的提取實(shí)例：薯蕷甾體皂苷元的提取薯蕷甾體皂苷元本身沒(méi)有多大的生物活性，但它是合成甾體激素的原料，因此提取薯蕷甾體皂苷元有較好的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。薯蕷科薯蕷屬的Stenophosa

的較多植物都全有薯蕷甾體皂苷，但只有盾葉薯蕷（黃姜）和穿龍薯蕷（穿山龍）（約含甾體皂苷元量少）可供生產(chǎn)。薯蕷甾體皂苷元的提取和甾體皂苷不同，必須先水解，再用低極性有機(jī)溶劑提取（溶劑汽油、甲苯、石油醚等）工業(yè)流程如下：

以上是常規(guī)酸水解法，收率為2％較低。因此工廠生產(chǎn)使讓原料濕潤(rùn)后，堆放發(fā)酵水解，后再進(jìn)行酸水解提取，可提高收得率為40％～54％。近年來(lái)除用上述移、固相色譜條件分離外，還多用：1.大孔吸附樹(shù)脂（非極性），水－乙醇洗脫2.葡聚糖凝膠SephadexLH－20，水－甲醇洗脫3.制備HPLC，反相柱（C18），甲醇－水洗脫4.DCCC，氯仿－苯－乙酸乙酯－甲醇－水，分配五.甾體皂苷的檢識(shí)

1．理化檢識(shí)（1）泡沫反應(yīng)（2）溶血試驗(yàn)（3）顏色反應(yīng)2．色譜檢識(shí)

主要用硅膠G及氧化鋁TLC檢識(shí)

（1）固定相甾體皂苷硅膠G（極性大的皂苷用降活性的硅膠G）甾體皂苷元硅膠氧化鋁（2）移動(dòng)相甾體皂苷CHCl3-MeOH-H2O(65:35:10下層)

水飽和正丁醇，丁醇－乙酸乙酯－水（4：1：5）甾體皂苷元環(huán)己烷、苯或氯仿配不同比例的乙酸乙酯、乙醚或甲醇等（3）顯色劑10％濃硫酸乙醇100℃5min三氯化銻試劑（或20％氯仿飽和溶液）90℃5min三氯醋酸或三氯醋酸－醋酸（1：2）100℃20min25％磷鉬酸乙醇液140℃5～10min氯磺酸－乙酸（1：2）130℃5min以上顯色反應(yīng)不同皂苷顯不同顏色（紫、橙、褐，藍(lán)等）并多有熒光。

甾體皂苷元由于母核一般都為螺旋甾烷或異螺旋甾烷，骨架是比較固定的，那么各種甾體皂苷結(jié)構(gòu)上的差別主要是由F環(huán)的差向異構(gòu)，－OH的取代，雙鍵的有無(wú)、羰基有無(wú)、糖的不同種類和連接方式等等造成的，因此定結(jié)構(gòu)主要是定這些結(jié)構(gòu)上的差異。1.紫外光譜六、甾體皂苷元的波譜特征甾體皂苷元多無(wú)共軛體系，無(wú)紫外吸收，但與濃H2SO4反應(yīng)后（脫水，雙鍵移位，生成共軛結(jié)構(gòu)），在220～260nm出現(xiàn)較大吸收※六、甾體皂苷元的波譜特征⑴飽和的甾體化合物在200~400nm無(wú)吸收⑵不飽和的甾體：孤立雙鍵——205~225nm

共軛二烯——235nm

>C=O——285nm(弱吸收)

α,β不飽和酮基——240nm(特征吸收)⑶制備成衍生物。如：含-OH化合物，經(jīng)脫-OH

后在結(jié)構(gòu)中產(chǎn)生雙鍵。借此判斷-OH位置。六、甾體皂苷元的波譜特征2.紅外光譜甾體皂苷元含有螺縮酮結(jié)構(gòu)的側(cè)鏈，在IR中有四個(gè)特征吸收譜帶：

A—980B—920C—900D—860cm-1應(yīng)用：⑴區(qū)別C25的兩種立體異構(gòu)體的構(gòu)型⑵判斷C11或C12位的>C=O是否成共軛體系⑶C3-OH與A/B環(huán)構(gòu)型的關(guān)系六、甾體皂苷元的波譜特征⑴區(qū)別C25的兩種立體異構(gòu)體的構(gòu)型①C25——Me-取代

吸收強(qiáng)度：C25-SB帶>C帶

C25-RC帶>B帶②C25——CH2OH(羥甲基)取代（無(wú)法用上述四條譜帶來(lái)區(qū)別）

C25-S有——995強(qiáng)吸收

C25-R有——1010強(qiáng)吸收

(若F環(huán)開(kāi)裂即無(wú)螺縮酮結(jié)構(gòu)，則無(wú)995或1010吸收)③

Δ25（27）：920cm－1強(qiáng)吸收。

六、甾體皂苷元的波譜特征⑵判斷C-11或C-12位的>C=O是否成共軛體系①非共軛體系——1705~1715cm-1有一個(gè)峰

②C-12羰基共軛——產(chǎn)生二個(gè)峰

1600~1605（雙鍵）

1673~1679（羰基）(α,β不飽和酮結(jié)構(gòu))六、甾體皂苷元的波譜特征⑶C3-OH與A/B環(huán)構(gòu)型的關(guān)系當(dāng)C3-OH構(gòu)型已知時(shí)，可利用C3-OH來(lái)推測(cè)A/B環(huán)的構(gòu)型，見(jiàn)下表：*石臘糊，其余為CS2溶液。e—橫鍵；a—豎鍵（4）C=C：

580cm－1～1680cm－1、3070cm－1～3085cm－1（較弱）、680cm－1～980cm－1（較弱）

（5）苷元-OH——伸展頻率：3625cm-1

彎曲頻率：1030~1080cm-1六、甾體皂苷元的波譜特征3.1H-NMR高場(chǎng)區(qū)的特征信號(hào)：21－CH3d鄰位氫偶合低場(chǎng)19－CH3s次低場(chǎng)18－CH3s次高場(chǎng)27－CH3d鄰位氫偶合高場(chǎng)

sC25－OH取代，無(wú)鄰位氫偶合25R(25αF)0.70

區(qū)別D、L－型螺旋甾

25S(25βF)1.1013C－NMR

13C－NMR的測(cè)定譜寬比1H－NMR寬（30倍），用全去偶及偏共振等技術(shù)可測(cè)出甾體皂苷元結(jié)構(gòu)上27C幾乎全部信號(hào)，例如：常見(jiàn)的甾體皂苷元和皂苷的13C－NMR數(shù)據(jù)（400MHz，C5D5N）

1.(25R)－5α－螺甾－3－醇6.薤白苷J(rèn)C20-C22–H2.(25R)－5α－螺甾－25－醇7.薤白苷LC20=C223.(25R)－5β－螺甾－3β－醇4.(25S)－5β－螺甾－3β－醇3β－羥基－(25R)－5α－螺甾－12－酮其中對(duì)鑒定結(jié)構(gòu)有鑒別意義的信號(hào)規(guī)律為：C－OH低移40～45C－O－糖低移40～45＋6～10（GS）>C＝C<115～150>C＝O20018－CH3，19－CH3（5α－H）

<20(鑒別A/B環(huán)稠合方式)21－CH3，27－CH316－C－O80

特征信號(hào)，易識(shí)別（螺甾特征）22－C－O109C27C23C24C25C2625R，22α－O17.1+0.131.3+0.328.8+0.330.3+0.366.9+0.225β,22α－O16.2+0.227.3+0.325.8+0.326.1+0.365.1+0.1A/B順（5β－H）C5C9C19A/B反（5α－H）C5C9C1936.542.223.944.954.312.3呋甾烷型

22－C90.322－C－OH110.822－C－OCH3113.5（－OCH347.2±0.2）

變形螺甾烷

22－C120.925－C85.6六、甾體皂苷元的波譜特征4.質(zhì)譜（1）EI－MS

甾體皂苷元由于分子中有螺甾烷側(cè)鏈，在質(zhì)譜中均出現(xiàn)：

m/z：139（強(qiáng)，基峰）115（中強(qiáng)）126（弱）輔助離子峰這些峰的裂解途徑如下：（主要是由F環(huán)產(chǎn)生）六、甾體皂苷元的波譜特征六、甾體皂苷元的波譜特征除C-23有羥基取代的甾體皂苷元外，其它苷元都產(chǎn)生這兩個(gè)裂解產(chǎn)物，通過(guò)這兩個(gè)產(chǎn)物，可了解F環(huán)取代的情況。例：除上述三個(gè)碎片峰外還會(huì)出現(xiàn)

可利用c、d、e、f、g、h碎片峰的質(zhì)量位移推測(cè)甾核及E環(huán)的取代狀態(tài)。（2）FD－MS

軟離子源適合測(cè)定甾體皂苷譜中可出現(xiàn)

[M+Na]+,[M+H]+[M+Na－糖基]+根據(jù)準(zhǔn)分子離子峰[M+Na]+及[M+H]+推斷[M+2H－糖基]+分子量確定單糖數(shù)目(分子量結(jié)合單糖定性)[M+2Na]2+各種失糖的碎片峰推測(cè)連糖順序注意：A.裂解1個(gè)己糖[M－162]+

，裂解1個(gè)去氧己糖[M－146]+

B.苷鍵斷裂，常伴隨1H的轉(zhuǎn)移及脫去1～2H2O。例：

Balanitin－1的FD－MS：

m/z1053(基峰)、1031、907、885、745、

723、601、538及4151053－1031＝22，22＋1＝23（Na）MW1030[M+Na]+－[M+H]+－1＝Na538＝（1030＋23×2）/2＝[M+2Na]2+

907＝1053－146＝[M+Na－去氧己糖(Rha)]+1個(gè)Rha處糖鏈

885＝1031－146＝[M+1－去氧己糖(Rha)]+末端

745＝1053－146－162＝[M+Na－Rha－己糖

(glc)]+末端Rha前

723=1031-146-162=[M+1－Rha－己糖

(glc)]+

接glc

601＝[M+Na－452，M+Na－2個(gè)去氧己糖1個(gè)己糖（2Rha，glc）]+

另有1個(gè)末端Rha

415＝[苷元+H]+至此可推測(cè)出4個(gè)單糖的連接順序：FD－MS難給出苷元結(jié)構(gòu)碎片峰（3）FAB－MS

目前皂苷準(zhǔn)分子離子峰[M+Na23]+、[M+K39]+、[M+H]+

多用糖碎片峰苷元碎片峰5.實(shí)例：薤白苷J(rèn)結(jié)構(gòu)研究薤白為百合科小根蔥（allium

macorastenmon）干燥根莖。具通陽(yáng)散結(jié)，行氣導(dǎo)滯功效，常用于治療心血管系統(tǒng)疾病，2000年姚新生院士等以薤白中分離出十幾種單體化合物，其中單體化合物I為：白色無(wú)定形粉末，mp230～232℃Liebermann-Burchard

反應(yīng)：陽(yáng)性Ehelich

反應(yīng)：陽(yáng)性Molish

反應(yīng)：陽(yáng)性1H-MNR(400MHz)δ:0.87(3H，S),0.97(3H，S),0.99(3H，d，J=6.6Hz),1.34(3H，d，J=6.8Hz),4.84(1H，d，J=7.8Hz)，5