季花藥培養(yǎng)公開課

季花藥培養(yǎng)公開課第一頁，共二十七頁，2022年，8月28日離體的植物器官、組織或細胞（外植體）愈傷組織根、芽植物體脫分化植物激素：細胞分裂素、生長素再分化遮光光照植物組織培養(yǎng)的過程知識回顧第二頁，共二十七頁，2022年，8月28日1、細胞分裂素和生長素使用順序不同，結果不同:使用順序實驗結果先使用生長素，后使用細胞分裂素先使用細胞分裂素，后使用生長素同時使用有利于細胞分裂，但細胞不分化細胞既分裂也分化分化頻率加快第三頁，共二十七頁，2022年，8月28日生長素>細胞分裂素：生長素=細胞分裂素：

生長素<細胞分裂素：2、細胞分裂素和生長素使用比例不同，發(fā)育方向不同利于根的分化和抑制芽的形成促進愈傷組織的生長有利于芽的分化、抑制根的形成第四頁，共二十七頁，2022年，8月28日大自然為我們創(chuàng)造了千姿百態(tài)的植物，許多植物都會開出鮮艷、芳香的花朵。月季牡丹導入新課第五頁，共二十七頁，2022年，8月28日百合第六頁，共二十七頁，2022年，8月28日你知道這些絢麗、芬芳的鮮花用人工方法是怎樣產(chǎn)生的嗎？花藥

花藥是花絲頂端膨大呈囊狀的部分，是雄蕊產(chǎn)生花粉的主要部分。第七頁，共二十七頁，2022年，8月28日花藥培養(yǎng)采用植物組織培養(yǎng)技術，把發(fā)育到一定階段的花藥，通過無菌操作技術，接種在人工培養(yǎng)基上，以改變花藥內花粉粒的發(fā)育程序，誘導其分化，形成細胞團，進而形成愈傷組織，隨后使愈傷組織分化成完整的植株的技術。什么是花藥培養(yǎng)呢？第八頁，共二十七頁，2022年，8月28日課題2月季的花藥培養(yǎng)第九頁，共二十七頁，2022年，8月28日花的結構第十頁，共二十七頁，2022年，8月28日閱讀：P37-38被子植物的花粉發(fā)育重點掌握：被子植物花粉的發(fā)育過程第十一頁，共二十七頁，2022年，8月28日花絲花藥：囊狀結構，內有很多花粉2、由花粉母細胞（即小孢子母細胞）花粉，即：單倍體的生殖細胞。（一）被子植物的花粉發(fā)育1、雄蕊一、基礎知識減數(shù)分裂3、階段：四分體時期、單核期、雙核期第十二頁，共二十七頁，2022年，8月28日4、過程：減數(shù)分裂有絲分裂第十三頁，共二十七頁，2022年，8月28日花粉：是小孢子母細胞經(jīng)過減數(shù)分裂而形成的，因此，花粉是單倍體的生殖細胞。1花粉母細胞4個小孢子減數(shù)分裂有絲分裂4個花粉管細胞核4個生殖細胞核有絲分裂8個精子過程總結：注意：精子和營養(yǎng)核的基因型相同。第十四頁，共二十七頁，2022年，8月28日閱讀：P38產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑重點掌握：花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑第十五頁，共二十七頁，2022年，8月28日（二）產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑①②移栽花藥中的花粉胚狀體脫分化愈傷組織花藥中的花粉脫分化分化

叢芽再分化

叢芽誘導生根體細胞胚（胚狀體）：在組織培養(yǎng)過程中，某些細胞在形態(tài)上轉變?yōu)榕c合子發(fā)育成的胚非常相似的結構，它的發(fā)育過程也與合子胚類似，胚芽、胚根、胚軸等結構完整，就像一顆種子。這兩種途徑之間沒有絕對的界限，主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及濃度配比。第十六頁，共二十七頁，2022年，8月28日1、材料的選擇不同植物的誘導成功率不同.

同一植物的不同生理狀況也對誘導成功率有直接的影響.(三)、影響花藥培養(yǎng)的主要因素——材料的選擇與培養(yǎng)基的組成從花藥看：從花粉看：從花蕾看：此外，植株生長條件、材料低溫預處理、接種密度等對誘導成功率有一定影響。月季的初花期（五月初到五月中旬）單核期（一般來說，細胞核從中央移向細胞一側的時期，花藥培養(yǎng)成功率最高）完全未開放的第十七頁，共二十七頁，2022年，8月28日選擇哪個做材料？第十八頁，共二十七頁，2022年，8月28日答：花瓣松動后，微生物就可能侵入到花藥，給材料的消毒帶來困難。思考為什么花瓣松動會給材料的消毒帶來困難？第十九頁，共二十七頁，2022年，8月28日二、實驗操作（一）材料的選?。ǘ┎牧系南荆ㄈ┙臃N和培養(yǎng)第二十頁，共二十七頁，2022年，8月28日閱讀教材P39-40回答以下問題：1.如何確定花粉是否處于適宜的發(fā)育期。2.確定花粉發(fā)育時期的最常用方法是？如果某些花粉細胞核不易著色，需要采用什么方法？能將花粉細胞核染成什么顏色？3.為什么要徹底除去花絲？4.是否一直需要光照？5.什么時候把植株移栽到新的培養(yǎng)基上？6.為什么還要進一步的鑒定和篩選？第二十一頁，共二十七頁，2022年，8月28日（一）材料的選取1.選擇花藥一般通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。2.最常用的方法：醋酸洋紅法（將染色體染成紅色）焙花青—鉻礬法。某些植物的花粉細胞核不易著色，需采用焙花青—鉻礬法，這種方法能將花粉細胞核染成藍黑色。第二十二頁，共二十七頁，2022年，8月28日（二）材料的消毒5、無菌水沖洗3～5次

花藥的外面有花萼、花瓣保護，通常處于無菌狀態(tài)1、花蕾用體積分數(shù)為70%的酒精浸泡30秒2、無菌水清洗3、無菌吸水紙吸干花蕾表面的水分4、放入質量分數(shù)為0.1%的氯化汞溶液中2～4分鐘（質量分數(shù)為1%的次氯酸鈣溶液或飽和漂白粉溶液）第二十三頁，共二十七頁，2022年，8月28日（三）接種和培養(yǎng)1、滅菌后花蕾，要在

下除去萼片和花瓣，并立即將花藥接種到培養(yǎng)基上。3、通常每瓶接種花藥

，溫度控制在

左右，

。幼小植株形成后才

。2、在剝離花藥時，要盡量

（否則接種后，容易從受傷部位產(chǎn)生二倍體的愈傷組織），同時還要徹底

，因為與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成。無菌條件不損傷花藥去除花絲7-10個25℃不需要光照需要光照4、一般經(jīng)過20-30天培養(yǎng)后，會發(fā)現(xiàn)花藥開裂，長出愈傷組織或釋放出胚狀體。將愈傷組織及時轉移到分化培養(yǎng)基上，以便進一步分化出再生植株。5、對培養(yǎng)出來的幼苗進一步的鑒定和篩選。第二十四頁，共二十七頁，2022年，8月28日植物組織培養(yǎng)技術與花藥培養(yǎng)技術的比較項目植物組織培養(yǎng)花藥培養(yǎng)技術相同點不同點1、離體培養(yǎng)的外植體為體細胞。2、有絲分裂的過程，染色體數(shù)量不變。1、花粉是生殖細胞，得到的單倍體植株，弱小且高度不育。2、秋水仙素處理，染色體加倍，恢復正常的染色體數(shù)，為純種。離體的植物組織經(jīng)脫分化形成愈傷組織（或胚狀體），再分化（或分化）成叢芽，誘導出根，然后進行移栽。第二十五頁，共二十七頁，2022年，8月28日基礎知識實驗操作被子植物的花粉發(fā)育花粉雙核期其他因素接種密度小孢子四分體時期影響因素花粉發(fā)育經(jīng)歷的時期花粉囊單核期親本植株的生長條件材料低溫預處理月季的花藥培養(yǎng)材料與培養(yǎng)基材料的選取產(chǎn)生途徑結果分析與評價消毒花粉培養(yǎng)條件接種和培養(yǎng)課堂小結第二十六頁，共二十七頁，2022年，8月28日1、關于被子植物花粉發(fā)育的說法，不正確的是（）A、花粉粒是在花藥中的花粉囊里形成的B、被子植物精子的形成是直接減數(shù)分裂的結果C、被子植物的花粉的