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第3節(jié)DNA的復(fù)制本節(jié)聚焦:1)怎樣證明DNA是半保留復(fù)制的?2)DNA的復(fù)制過程是怎樣的?3)DNA的半保留復(fù)制對遺傳信息的穩(wěn)定傳遞有什么意義?第3章基因的本質(zhì)問題探討沃森和克里克在發(fā)表DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的那篇著名短文的結(jié)尾處寫道:“值得注意的是,我們提出的這種堿基特異性配對方式,暗示著遺傳物質(zhì)進行復(fù)制的一種可能的機制?!眎nthefollowingcommunications.Wewerenotawareofthedetailsoftheresultspresentedtherewhenwedevisedourstructure,whichrestsmainlythoughnotentirelyonpublishedexperimentaldataandstereo-chemicalarguments.
Ithasnotescapedournoticethatthespecificpairingwehavepostulatedimmediatelysuggestsapossiblecopyingmechanismforthegengticmaterial.Fulldetailsofthestructure,includingthecon-ditionsassumedinbuildingit,togetherwithasetofco-ordinatesfortheatoms,willbepublishedelsewhere.《核酸的分子結(jié)構(gòu)》論文節(jié)選討論1.堿基互補配對原則暗示DNA的復(fù)制機制可能是怎樣的?
堿基互補配對原則是指DNA兩條鏈的堿基之間有準確的一一對應(yīng)關(guān)系,暗示DNA的復(fù)制可能需要先解開DNA雙螺旋的兩條鏈,然后通過堿基互補配對合成互補鏈。2.這句話中為什么要用“可能”二字?這反映科學(xué)研究具有什么特點?
科學(xué)研究需要大膽的想象,但得出結(jié)論必須建立在確鑿的證據(jù)之上。一、DNA半保留復(fù)制的實驗證據(jù)
1.沃森和克里克的假說——半保留復(fù)制DNA復(fù)制時,DNA雙螺旋解開,互補的堿基之間的氫鍵斷裂,解開的兩條單鏈分別作為復(fù)制的模板,游離的脫氧核苷酸根據(jù)堿基互補配對原則,通過形成氫鍵,結(jié)合到作為模板的單鏈上。2.其他人的觀點——全保留復(fù)制DNA復(fù)制以DNA雙鏈為模板,子代DNA的雙鏈都是新合成的。第一步:提出問題(DNA如何復(fù)制?)第二步:提出假說(幾種復(fù)制推測)
14N和15N是氮元素的兩種穩(wěn)定同位素,這兩種同位素的相對原子質(zhì)量不同,含15N的DNA比含14N的DNA密度大,因此,利用離心技術(shù)可以在試管中分離開含有不同氮元素的DNA。15N/15N-DNA(重鏈)、15N/14N-DNA(中鏈)、14N/14N-DNA(輕鏈)、這3種DNA離心后在試管在位置如右圖所示:14N/14N—DNA15N/14N—DNA15N/15N—DNA輕帶中帶重帶知識.背景
將1個含15N/15N-DNA的親代大腸桿菌置于含14NH4Cl的普通培養(yǎng)液中培養(yǎng)。在不同時刻收集大腸桿菌并提取DNA進行離心。在右表中標(biāo)記(DNA所在位置+寬度)代數(shù)全保留復(fù)制半保留復(fù)制親代子一代子二代溫馨提示:用不同顏色筆或?qū)嵕€虛線區(qū)分14N、15N。一、DNA半保留復(fù)制的實驗證據(jù)
利用“假說-演繹”法演繹推理15N/14N14N/14N15N/14N一半輕帶一半重帶將15N標(biāo)記的1個DNA分子在14N中培養(yǎng)2代,請預(yù)測3種推測中,子一代、子二代DNA的離心結(jié)果(位置及寬度)。預(yù)測離心結(jié)果全保留復(fù)制半保留復(fù)制子一代子二代15N/15N14N/14N15N/15N14N/14N3/4輕帶1/4重帶全部中帶一半輕帶一半中帶一、DNA半保留復(fù)制的實驗證據(jù)演繹推理原理:用
技術(shù)和
技術(shù),根據(jù)復(fù)制后DNA分子
即可確定復(fù)制方式。同位素標(biāo)記離心在試管中的位置第四步:實驗驗證
1958年,科學(xué)家以大腸桿菌為實驗材料。實驗結(jié)果與半保留復(fù)制(沃森、克里克提出)預(yù)期結(jié)果一致?。篋NA分子是以半保留的方式進行復(fù)制的!第五步:實驗結(jié)論DNA的復(fù)制是怎樣進行的?沃森、克里克:DNA雙鏈解開→子鏈延伸→形成新DNA解旋模板:2條母鏈(以兩條母鏈為模板,以細胞中4種游離的脫氧核苷酸為原料,按照堿基互補配對原則,在能量的驅(qū)動和DNA聚合酶的催化下,各自合成與母鏈互補的一條子鏈)——4個條件互補子鏈延伸二、DNA分子復(fù)制的過程(在解旋酶的作用下,氫鍵斷裂,螺旋的雙鏈解開)螺旋化,形成子代DNA特點2:半保留復(fù)制(隨著模板鏈解旋過程的進行,新合成的子鏈也在不斷延伸。同時,每條新鏈與其對應(yīng)的模板鏈螺旋成雙螺旋結(jié)構(gòu)。)特點1:邊解旋邊復(fù)制母鏈子鏈母鏈子鏈
二、DNA復(fù)制的過程1、概念:2、場所(真核):3、時期:4、條件5、復(fù)制過程:6、復(fù)制特點:細胞分裂前的間期模板:原料:能量:酶:DNA的兩條母鏈4種游離的脫氧核苷酸ATP細胞核(主)、線粒體、葉綠體以親代DNA為模板合成子代DNA的過程(DNA→DNA)解旋酶、DNA聚合酶解旋→子鏈延伸→螺旋化,形成子代DNA①邊解旋邊復(fù)制②半保留復(fù)制TCTTGCTCAGAACGAG1)規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)為復(fù)制DNA提供精確的模板。
DNA通過復(fù)制,會將遺傳信息從親代細胞傳遞給子代細胞,從而保持了遺傳信息的連續(xù)性。因此,DNA必須準確復(fù)制,請從下面結(jié)構(gòu)中,找出其準確復(fù)制的因素:2)嚴格的堿基互補配對保證了復(fù)制能夠準確無誤地進行。AGAACGAGTCTTGCTCAGAACGAGTCTTGCTC+
二、DNA復(fù)制的過程1、概念:2、場所(真核):3、時期:4、條件5、復(fù)制過程:6、復(fù)制特點7、準確復(fù)制原因8、復(fù)制的生物學(xué)意義:細胞分裂前的間期模板:原料:能量:酶:DNA的兩條母鏈4種游離的脫氧核苷酸ATP細胞核(主)、線粒體、葉綠體以親代DNA為模板合成子代DNA的過程(DNA→DNA)解旋酶、DNA聚合酶解旋→子鏈延伸→螺旋化,形成子代DNA①獨特的雙螺旋提供精確的模板①邊解旋邊復(fù)制②半保留復(fù)制②嚴格遵循堿基互補配對原則保持遺傳信息的連續(xù)性
人體細胞某DNA的長度為200×10-9m,復(fù)制速度為5×10-9m/s,但經(jīng)檢測卻發(fā)現(xiàn)此DNA的復(fù)制只需5s的時間。此事實說明什么?具多個復(fù)制起點。若共有4個復(fù)制起點,則又可說明什么?進行雙向復(fù)制。
具有互補堿基序列的DNA單鏈,可以通過堿基對之間形成氫鍵等,形成穩(wěn)定的雜合雙鏈區(qū)。不能互補的區(qū)域則會形成環(huán)。
常作為鑒定不同物種間親緣關(guān)系遠近的證據(jù)。雜合雙鏈區(qū)的比例越大,則親緣關(guān)系越近。DNA分子雜交技術(shù)教材P62科學(xué).技術(shù).社會分析甲乙丙三種生物的親緣關(guān)系科學(xué)思維訓(xùn)練有關(guān)DNA半保留復(fù)制的計算方法(1)1個DNA分子連續(xù)復(fù)制n代,共產(chǎn)生
個子代DNA分子,子代DNA分子中共有單鏈
條;其中,舊鏈
條,新鏈
條。(2)若一個親代DNA分子含有某種脫氧核苷酸m個,則:①經(jīng)過連續(xù)n次復(fù)制,需消耗游離的該脫氧核苷酸數(shù)目為
個。②第n次復(fù)制時,需消耗游離的該脫氧核苷酸
個。2n2n+122n+1-2m·(2n-1)m·2n-1例1.用15N標(biāo)記的一個DNA分子,放在含有14N的培養(yǎng)基中復(fù)制三次,則子代中,1)含有15N的DNA分子占全部DNA分子的比例是2)含15N鏈占全部DNA單鏈的比例是3)含有14N的DNA分子占全部DNA分子的比例是4)只含14N的DNA分子占全部DNA分子的比例是5)含14N鏈占全部DNA單鏈的比例是1/41/813/47/81.下
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