檢疫性細(xì)菌病害

第六章

檢疫性細(xì)菌病害

植物檢疫性病原細(xì)菌的檢驗(yàn)方法

梨火疫病FireBlight

玉米細(xì)菌性枯萎病Stewart’sbacterialwiltofcorn

柑橘黃龍病CitrusYellowshoot

椰子致死黃化病CoconutLethalYellowing復(fù)習(xí)思考題植物病原細(xì)菌檢疫檢驗(yàn)技術(shù)直接檢測(cè)：直觀檢驗(yàn)和生長(zhǎng)檢驗(yàn)間接檢測(cè)活菌檢測(cè)免疫吸附分離法噬菌體檢驗(yàn)非活菌檢測(cè)血清學(xué)檢測(cè)1、活菌檢測(cè)分離培養(yǎng)法：營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基或鑒別培養(yǎng)基分離純化得到的細(xì)菌濃縮接種及離體葉檢測(cè)：提取液濃縮接種感病植物，觀測(cè)發(fā)病情況。例如：浙江大學(xué)等在1％滅菌水瓊脂中加75×10－6的苯并咪唑，做平板，加感病植物葉片，針刺＋摩擦接種，培養(yǎng)（光、溫、濕度），短期獲得癥狀。主要應(yīng)用于水稻細(xì)菌性條斑病菌和小麥細(xì)菌性黑穎病菌的檢測(cè)。2.免疫吸附分離法原理：接合血清學(xué)與平板分離技術(shù)，利用與抗原高度親和性的抗體，來(lái)捕獲目標(biāo)細(xì)菌，樣本中其他細(xì)菌均被沖洗掉，再將目標(biāo)細(xì)菌轉(zhuǎn)移或釋放到培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。方法：平皿免疫吸附評(píng)價(jià)測(cè)定法和免疫吸附稀釋培養(yǎng)法平皿免疫吸附評(píng)價(jià)測(cè)定法簡(jiǎn)略流程如下：常用溶入丙酮的硝酸纖維素或指甲油作包被洗滌液使用包被緩沖液3.噬菌體檢驗(yàn)原理：噬菌體侵染細(xì)菌，裂解寄主細(xì)胞，在液體培養(yǎng)時(shí)，會(huì)使渾濁的細(xì)菌懸浮液變清，在固體平板上培養(yǎng)，則出現(xiàn)許多邊緣整齊、透明光亮的噬菌斑。噬菌體具有專(zhuān)化性，利用此特點(diǎn)，可鑒別細(xì)菌的種類(lèi)。4.非活菌檢測(cè)非活菌檢測(cè)的方法很多，下表是檢測(cè)病原細(xì)菌常用的一些方法，前9種血清學(xué)方法，均屬非活菌檢測(cè)。它們既能用于病原鑒定，又能直接用于病種或病株，甚至是無(wú)癥感染組織的檢測(cè)。5.血清學(xué)檢驗(yàn)原理：方法：酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）、免疫熒光抗體法免疫熒光抗體法：將熒光染料（異硫氫酸熒光黃或羅丹明）與抗體以化學(xué)方法接合，再與抗體反應(yīng)，形成有熒光標(biāo)記的抗體—抗原復(fù)合物，在熒光顯微鏡下，可觀察到黃綠色熒光。梨火疫病

Fireblightofpear分布：1878年首先由burrill描述，在紐約發(fā)生，后由Erwin命名，是第一個(gè)被確定的植物細(xì)菌病害。主要分布于北美洲于西北歐，中歐、地中海、東南歐及大洋州和亞洲也有分布。大約40多個(gè)國(guó)家。梨火疫病的地理分布寄主：梨火疫病菌寄主范圍很廣，能為害梨、蘋(píng)果、山楂、木旬子、李等４０多個(gè)屬220多種植物，大部分屬薔薇科Pomoideae亞科。危害性：仁果類(lèi)果樹(shù)的一種毀滅性病害。一棵多年生的梨和蘋(píng)果樹(shù)發(fā)病后可在幾星期內(nèi)死亡癥狀：侵害花、果實(shí)、枝條和葉片。花:侵染后變深褐色，枯萎。葉片:從葉緣沿葉脈擴(kuò)展，先呈水浸狀，后黑褐色。嫩稍:先水浸狀，后褐色至黑色，向下彎曲，呈魚(yú)鉤狀。果實(shí)：病部褐色凹陷，擴(kuò)展到全果，潮濕時(shí)病部生粘稠的細(xì)菌溢，初乳白色，后紅褐色。病枝:葉片凋萎，幼果僵化，但病葉病果不脫落，遠(yuǎn)望似火燒狀，故稱(chēng)火疫病。傷口：初期水浸狀，后下陷，呈潰瘍斑，病健交界處產(chǎn)生龜裂紋，韌皮部紅褐色，有黏液狀菌膿。嚴(yán)重時(shí)，病害從嫩稍很快擴(kuò)展到枝條、主干，直至根部，全株死亡。Advancedfireblightonfruit-notebacterialoozeonfruit.

Fireblightinnurserystock

主要鑒定特征：

梨火疫病最典型的癥狀是花、果實(shí)和葉片受火疫病菌侵害后，很快變黑褐色枯萎，猶如火燒一般，但仍?huà)煸跇?shù)上不落，故此得名。目前國(guó)際上將其癥狀據(jù)受侵害的部位，分成５個(gè)階段。（1）花枯萎：侵染開(kāi)放的花引起花枯萎。一般發(fā)生于早春，病菌直接從花器侵入，初為水漬狀斑，花基部或花柄暗色，不久萎蔫。病菌可擴(kuò)展至花梗及花簇中其它的花；在溫曖潮濕條件下，花梗上有菌膿滲出。隨著枯萎發(fā)展，花梗、花等變褐至黑褐色，條件適宜時(shí)可繼續(xù)侵染殺死小枝并形成小潰瘍斑。（2）潰瘍枯萎：是指前一季越冬潰瘍邊緣的病菌重新復(fù)活的結(jié)果。初癥是在復(fù)活的潰瘍附近的健康樹(shù)皮組織上出現(xiàn)窄的水漬狀區(qū)，幾天后，樹(shù)皮內(nèi)部組織出現(xiàn)褐色條斑，隨后病菌侵入附近繁殖枝內(nèi)部并引起萎蔫死亡。這些枝條特別是嫩枝與下面談及的枝枯萎有明顯區(qū)別，即在萎蔫之前枝尖芽褪色（黃至桔黃色）。（3）枝枯萎：細(xì)菌直接侵入前1～3葉的枝尖，然后殺死整個(gè)枝條及支持枝。初癥是枝尖萎蔫，但萎蔫前不褪色，象拐杖狀。條件適宜時(shí)，幾天內(nèi)可移動(dòng)15～30cm，造成整枝死亡，病枝、枝皮、葉通常變黑。潮濕時(shí)，枝條上出現(xiàn)菌膿。后期，終芽前出現(xiàn)的枝枯萎一般不會(huì)萎蔫，且僅在枝最上部出現(xiàn)壞死。隨著病菌不斷深入，并侵染主干，皮層收縮，下陷，形成潰瘍斑。（4）病菌亦可直接從氣孔、水孔等自然孔口或蕾苞，或由風(fēng)引起的傷口侵入葉片，初葉邊壞死，并向中脈、中柄、莖擴(kuò)展，后變黑，通常有菌膿。（5）損傷枯萎和砧木枯萎：這二種比較特殊，前者主要是由于晚霜、冰雹或大風(fēng)損傷引起，如果實(shí)很容易引起果實(shí)枯萎。后者僅限于高感品種EMAL-26、EMLA-9和MARK-39砧木。通常是由感病的接穗在這些砧木上發(fā)病后引起，最終成潰瘍帶而殺死樹(shù)體。病原菌：學(xué)名：Erwiniaamylovora（Burrill）Winslow

異名：MicrococcusamylovorusBurrilBacillusamylovorus(Burrill)TrevisanBacteriumamylovorus(Burrill)Chester

分類(lèi)地位：原核生物界(Procaryotes),薄壁菌門(mén)(Gracilicutes),腸桿菌科(Enterobacteriaceae)歐文氏菌屬(Erwinia)解淀粉歐文氏菌

形態(tài)特征：直桿菌，有莢膜，周生鞭毛，能運(yùn)動(dòng)，大小為0.9-1.8×0.6-1.5μm，多數(shù)單生，有時(shí)成雙或短時(shí)間內(nèi)3-4個(gè)呈鏈狀。革蘭氏染色陰性。在蔗糖培養(yǎng)基上27℃下培養(yǎng)3d，菌落直徑3～4mm，白色至奶油色，半球形隆起，有黏性，表面光滑，邊緣整齊，中心絨環(huán)狀。

生物學(xué)特性：兼性厭氧，過(guò)氧化物酶陽(yáng)性，氧化酶陰性，好氣條件下利用葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，厭氧條件產(chǎn)酸緩慢。明膠碟形液化緩慢。不產(chǎn)生硫化氫，不利用丙二酸鹽。葡萄糖酸鹽氧化和七葉苷水解不穩(wěn)定。氯化鈉濃度高于2％以上時(shí)生長(zhǎng)延緩，至6％－7%時(shí)則完全抑制。抗青霉素，對(duì)氯霉素、鏈霉素和土霉素敏感。細(xì)菌生長(zhǎng)的溫度范圍6～37℃，最適溫度25～27.5℃，致死溫度45～50℃，10min，最適酸堿度為PH6.0。

梨火疫病菌以簡(jiǎn)單的細(xì)胞分裂繁殖，一個(gè)細(xì)胞在條件適宜時(shí)，３天內(nèi)在寄主植物組織中能達(dá)到109細(xì)胞，每個(gè)細(xì)胞都是一個(gè)侵染源，感染寄主而引起病害的發(fā)展。除蛋白酶外，病菌不產(chǎn)任何有助于侵入寄主的酶，主要是在環(huán)境條件適宜時(shí)，通過(guò)胞間組織侵入薄壁組織的病菌產(chǎn)生胞外多糖。胞外多糖在病害發(fā)展過(guò)程中起重要的作用，其是菌膿的重要成份。菌膿的理化性質(zhì)隨濕度變化而變化，干時(shí)皺、硬，大時(shí)膨脹易被雨水?dāng)U散，中等濕度的菌膿粘易被昆蟲(chóng)、風(fēng)傳播。發(fā)病規(guī)律：病菌在病株病疤邊緣組織處越冬，掛在樹(shù)上的病果也是越冬場(chǎng)所，如果冬季溫和，病菌還能在病株樹(shù)皮上度過(guò)，來(lái)年早春病菌在上年的潰瘍處迅速繁殖，遇到潮濕、溫和的天氣，從病部滲出大量乳白色粘稠狀的細(xì)菌分泌物，即為當(dāng)年的初侵染源，通過(guò)昆蟲(chóng)、雨滴、風(fēng)、鳥(niǎo)類(lèi)以及人的田間操作將病菌傳給健株。病菌亦通過(guò)傷口、自然孔口（氣孔、蜜腺、水孔）、花侵入寄主組織，有一定損傷的花、葉、幼果和茂盛的嫩枝最易感病。傳播途徑

近距離傳播：雨水是果園短距離傳播的主要因子，其次風(fēng)亦是中短距離傳播的重要因子，往往在沿著盛行風(fēng)的方向，病原菌以單個(gè)菌絲、菌膿或菌絲束被風(fēng)攜帶到較遠(yuǎn)距離。除次之外，昆蟲(chóng)對(duì)病菌的傳播擴(kuò)散起一定的作用。傳病昆蟲(chóng)包括蜜蜂在內(nèi)有77個(gè)屬的100多種昆蟲(chóng)，其中密蜂的傳病距離約為200~400m。遠(yuǎn)距離傳播：主要是感病寄主繁殖材料，包括種苗、接穗、砧木、水果、被污染的運(yùn)輸工具、候鳥(niǎo)等。梨火疫病的遠(yuǎn)距離傳播發(fā)生條件：受傷的花朵、幼果和嫩稍最易受病菌侵染。經(jīng)冰雹襲擊，病害蔓延更加迅速。較高氣溫（18～24℃）和較高的濕度（70％以上）有利于病菌侵染。檢驗(yàn)方法：

1.產(chǎn)地檢驗(yàn)：

2.癥狀觀察：梨火疫病的癥狀很典型，是鑒定的重要方法，但必須與其他癥狀相似的梨梢枯病區(qū)分開(kāi)。梨梢枯病僅限于危害花器、葉片和嫩梢，不危害枝條和莖干，病部無(wú)細(xì)菌溢膿，葉片上最初為深褐色斑點(diǎn)，周?chē)屑t色暈圈，枯死的病葉不會(huì)長(zhǎng)期掛在樹(shù)上3.分離培養(yǎng)可采用選擇性培養(yǎng)基和鑒別性培養(yǎng)基進(jìn)行。

MS培養(yǎng)基菌落為紅橙色，背景為蘭綠色。配方：瓊脂20g，甘露醇10g，L-天門(mén)冬酰胺3g，牛膽酸鈉2.5g，磷酸氫二鉀2.0g，煙酸0.5g，MgSO4·7H2O0.2g，次氮基三乙酸0.2g，硫酸十七烷基鈉0.1ml，0.5%溴麝香草酚蘭水溶液9ml，0.5%中性紅2.5ml，蒸餾水970ml，pH7.3滅菌后加1%放線(xiàn)菌酮5ml，1%硝酸銫水溶液1.75ml。

CG培養(yǎng)基在29℃培養(yǎng)48小時(shí)后形成典型的火山口狀菌落。配方：水380ml，蔗糖160g，營(yíng)養(yǎng)瓊脂12g，結(jié)晶紫0.8ml（1%乙醇溶液），0.1%放線(xiàn)菌酮20ml。4.致病性實(shí)驗(yàn)梨火疫病菌致病性試驗(yàn)可用梨片或梨嫩枝測(cè)定，亦可用煙草過(guò)敏反映檢查。NA上培養(yǎng)48小時(shí)的細(xì)菌配成108cells/ml的懸液，注入煙草葉片或接種于1cm厚梨片、或針刺接種于１丈長(zhǎng)的巴黎枝條，28℃下培養(yǎng)，一般10~12小時(shí)后，煙草注射區(qū)出現(xiàn)白色壞死斑。1~3天后，梨片或枝條上出現(xiàn)白色菌膿，則可確診。5.血清學(xué)檢驗(yàn)：免疫熒光、ELISA、ODD和凝集實(shí)驗(yàn)6.分子生物學(xué)方法：核酸探針和PCR技術(shù)檢疫和防治

1.嚴(yán)格檢疫，禁止從疫區(qū)引入薔薇科仁果類(lèi)果樹(shù)樹(shù)苗。

2.剪除病梢病枝。

3.藥劑防治：120mg/kg鏈霉素噴霧，或花期用波爾多液噴霧防治，效果很好。

4.種植抗病品種：

5.避免在低洼易澇地定植。芽前刮除發(fā)病樹(shù)皮，在生長(zhǎng)季節(jié)每隔7天檢查1次各種發(fā)病新梢和組織，發(fā)現(xiàn)后及時(shí)剪除。對(duì)因各種農(nóng)事操作造成的傷口都要進(jìn)行涂藥保護(hù)等。玉米細(xì)菌性枯萎病

Stewart’sbacterialwiltofcorn分布：1889年紐約首先報(bào)道，現(xiàn)已20多個(gè)國(guó)家。分布于美國(guó)、加拿大、墨西哥、越南、泰國(guó)、馬來(lái)西亞、前蘇聯(lián)、波蘭、瑞士、意大利、前南斯拉夫、羅馬尼亞、希臘、、哥斯達(dá)黎加、波多黎各、圭亞那、秘魯、巴西。寄主植物

主要是甜玉米，也侵染馬齒玉米、粉質(zhì)玉米、硬粒玉米和爆裂玉米。危害：維管束病害、毀滅性病害。癥狀：整個(gè)生育期都可危害，以開(kāi)花期癥狀最明顯。早期癥狀表現(xiàn)為植株矮化，萎蔫，雄穗退色早枯，葉片邊緣產(chǎn)生波紋狀不規(guī)則病斑，初期水浸狀，黃色，與葉脈平行，貫穿全葉，寬1～10mm，嚴(yán)重時(shí)病葉萎蔫死亡。生長(zhǎng)后期，葉片產(chǎn)生許多小病斑，結(jié)合成大塊，火燒狀干枯死亡。髓部有空腔，導(dǎo)管被黃色黏液阻塞，萎蔫植株的下部切口有黃色細(xì)菌溢膿。果穗的菌膿可通過(guò)內(nèi)層包葉的氣孔滲出，籽粒表面沾滿(mǎn)細(xì)菌菌膿，病籽粒變形、皺縮和變色。Necroticlesionsonmatureleaves;secondphaseofStewart'swiltdisease.病原菌：玉米細(xì)菌性枯萎病菌學(xué)名

Pantoeastewartii(Smith)Mertaertetal.

異名

Erwiniastewartii(Smith)Dye；PseudomonasstewartiiSmith;Apalnobacterstewartii(Smith)McCulloch;Bacillusstewartii(Smith)Holland;Bacteriumstewartii(Smith)Smith;Phytomonasstewartii(Smith)Bergyeetal;Pseudobacteriumstewartii(Smith)Hrasil’nikov,1949;Xanthomomasstewartii(Smith)Dowson

英文名

Stewart’sbacterialwiltofcorn

分類(lèi)地位

原核生物界(Procaryoces)，薄壁菌門(mén)(Gracilicutes)，腸桿菌科(Enterobacteri-aceae)，泛菌屬(Pantoea)形態(tài)特征：好氣性短桿菌，兩端鈍圓，無(wú)鞭毛，有莢膜，G－，單生或雙生，0.4~0.8×0.9~2.2?。在牛肉膏培養(yǎng)基上形成黃色圓形菌落，全緣，表面扁平光滑，能利用葡萄糖、蔗糖、乳糖、半乳糖、甘露糖、木糖、甘油鶴甘露糖、醇等產(chǎn)酸，但不產(chǎn)生氣體。在肉湯培養(yǎng)液中生長(zhǎng)微弱，形成灰色環(huán)和黃色沉淀物。

細(xì)菌生長(zhǎng)溫度最低溫度8～9℃，最適溫度30℃，最高溫度39℃，致死溫度53℃10min，適宜PH4.5～8.5，最適6.0～8.0。發(fā)病規(guī)律：初侵染來(lái)源——帶菌的種子和昆蟲(chóng)。土壤和病原殘?bào)w不能越冬，昆蟲(chóng)是病原細(xì)菌的傳播介體和重要的越冬場(chǎng)所。最重要的傳病昆蟲(chóng)是玉米葉甲，它以成蟲(chóng)帶菌越冬，細(xì)菌存在于消化道中。越冬后現(xiàn)在早播玉米苗上取食，引起初侵染，并產(chǎn)卵發(fā)育成新一代成蟲(chóng)，繼續(xù)向其它植株傳病。Cornfleabeetle(Chatocnemapulicaria)vectoroftheStewart'swiltbacterium(Pantoeastewartii).流行條件：發(fā)病與流行主要決定于冬季氣溫（12、1、2月）的高低，若平均氣溫總和在37℃以上，有利蟲(chóng)媒越冬，帶菌昆蟲(chóng)成活率高，有可能引起發(fā)病。低于32℃則很少流行。此外有利于發(fā)病的條件包括土壤氮肥水平偏高，鉀肥水平偏低，高溫高濕等。檢驗(yàn)方法：產(chǎn)地檢驗(yàn)：種植檢驗(yàn)：種子長(zhǎng)出的植株有明顯的癥狀。分離培養(yǎng)基：采用伊凡諾夫選擇培養(yǎng)基，其成分如下：甘油30ml檸檬酸鐵銨10g磷酸氫二鉀2.5g,氯化鈉15g硫酸鎂0.1g,瓊脂17g氯化鈣0.1g,蒸餾水1000ml,PH7.0

為了抑制雜菌的污染,還可采用選擇性黑色素培養(yǎng)基,其成分如下:酵母浸膏1g甘油30ml制霉菌素200mg/ml牛膽酸鈉3g氯化鈉15g1%水溶性黑色素20ml瓊脂17g蒸餾水1000mlPH6.730℃下培養(yǎng)7d，對(duì)光觀察，菌落中心呈黑色，邊緣透明，菌落圓形，表面光滑，呈粘狀。將分離的細(xì)菌接種在玉米苗上，驗(yàn)證是否發(fā)病。4.噬菌體檢驗(yàn)法：用專(zhuān)化性噬菌體，如ZP6、ZP82等檢驗(yàn)。5.血清學(xué)檢驗(yàn)：用酶聯(lián)免疫法等檢驗(yàn)。檢疫和防治1.禁止從國(guó)外疫區(qū)進(jìn)口玉米種子2.種子處理：（1）微波爐70℃處理10min，效果很好。（2）環(huán)氧乙烷熏蒸：（3）恒溫處理：50℃下處理4d，消滅種子內(nèi)部細(xì)菌效果顯著，不影響發(fā)芽。（4）抗菌素溫浸法：3.防治傳播媒介昆蟲(chóng)：4.種植抗病品種：柑橘黃龍病

CitrusYellowshoot分布：1939年在中國(guó)廣東發(fā)現(xiàn)該病，現(xiàn)已擴(kuò)展到亞洲和非洲37個(gè)國(guó)家和地區(qū)，中國(guó)主要發(fā)生在廣東、廣西、福建、臺(tái)灣、海南、云南、貴州、四川、浙江、湖南、江西等省。寄主：主要是柑橘屬、金柑屬和枳屬。草本植物有長(zhǎng)春花。危害：是柑橘的毀滅性病害，感病的柑桔品種得病后可在3－5年內(nèi)喪失結(jié)果能力，甚至枯死。癥狀：典型癥狀是在濃綠的樹(shù)冠中出現(xiàn)1－2條或多條的發(fā)黃枝梢，有兩種類(lèi)型：一種是整張葉片均勻黃化，另一種是葉片呈黃綠相間的斑駁狀。共同特點(diǎn)是葉質(zhì)硬化、無(wú)光澤，但在黃梢下部的老葉仍呈正常綠色。病果小，果皮光滑，畸形，無(wú)光澤，味酸，果皮著色時(shí)黃綠不均勻或在果蒂附近變橙紅色，而其余部份仍為青綠色的青果

病原Liberobacterasiaticum

（亞洲）、Liberobacterafricanum（非洲）分類(lèi)地位：原核生物界(Procaryoces)，薄壁菌門(mén)(Gracilicutes)，韌皮部桿菌屬

Liberobacter英文名稱(chēng)：CitrusHuanglongbing；CitrusYellowshoot；Citrusgreening未能在人工培養(yǎng)基上分離獲得純培養(yǎng)，在電鏡下為橢圓形或短桿狀的細(xì)菌，大小為30－600×500－1400m，細(xì)胞壁厚度為25－30m。革蘭氏染色陰性，對(duì)四環(huán)素及青霉素敏感。根據(jù)其對(duì)熱的反應(yīng)和傳病木虱的不同，分為兩個(gè)株系：在亞洲，其發(fā)病的最適溫度為27－32℃，傳播介體為亞洲木虱（Diaphorinacitri），病原為柑桔黃龍病原亞洲株系（L.asiaticum）；在非洲，其發(fā)病的最適溫度為20－24℃,傳播介體為非洲木虱（Triozaaryteae）病原為柑橘黃龍病非洲株系（L.africanum）?？梢酝ㄟ^(guò)嫁接及菟絲子傳播，但不能通過(guò)汁液和土壤傳播。傳播：遠(yuǎn)距離傳播主要是來(lái)自病區(qū)調(diào)運(yùn)的苗木、接穗；大田主要依靠柑橘木虱進(jìn)行傳播，在亞洲是亞洲木虱，在非洲是非洲木虱。發(fā)生條件：亞洲多發(fā)生在熱帶亞熱帶地區(qū)，喜高溫；在非洲多在冷涼氣候下發(fā)生，30℃以上高溫病害受抑制。檢驗(yàn)與檢測(cè)：1.產(chǎn)地檢驗(yàn)：每年10～12月癥狀表現(xiàn)最明顯2.生物學(xué)診斷：鑒別寄主法3.電鏡檢查：4.熒光顯微鏡檢查：黃色熒光5.化學(xué)診斷：染色法6.血清學(xué)檢測(cè)：檢疫與防治：1、實(shí)行檢疫

禁止病區(qū)苗木及一切帶病材料進(jìn)入新區(qū)和無(wú)病區(qū)，新開(kāi)辟的果園要種植無(wú)病苗。2、建立無(wú)病苗圃，培育無(wú)病苗木要切實(shí)做到①對(duì)優(yōu)良單株進(jìn)行脫毒（莖尖嫁接脫毒或熱力脫毒）并經(jīng)鑒定證明不帶菌；②在網(wǎng)室內(nèi)建立種質(zhì)圃；③在隔離地方或在網(wǎng)室內(nèi)建立無(wú)病母本園；④在隔離地方或在網(wǎng)室內(nèi)建立無(wú)病苗圃。3、挖除病株

發(fā)現(xiàn)病株或可疑病株，應(yīng)立即挖除，用無(wú)病苗進(jìn)行補(bǔ)植。4、防治柑桔木虱

通過(guò)水肥管理控梢以減少木虱繁殖和傳播。新梢期噴布1－2次殺蟲(chóng)劑。果園四周栽種防護(hù)林帶，對(duì)木虱的遷飛也有阻礙作用。椰子致死黃化病

CoconutLethalYellowing分布

椰子致死黃化病的名稱(chēng)來(lái)源于NutmanandRoberts(1955)。他們首次用致死黃化（lethalyellowing）命名在加勒比海、牙買(mǎi)加西部地區(qū)發(fā)生的一種椰子致死黃化型的毀滅性病害。該病害在加勒比海地區(qū)至少已有100年的歷史，在西非也有50年的歷史。目前分布在拉丁美洲開(kāi)曼群島、巴哈馬群島、古巴、多半尼加、海地，非洲和西印度群島，亞洲的印度尼西亞、辛都、馬來(lái)西亞、美國(guó)佛羅里達(dá)洲南部地區(qū)等地也有報(bào)道。寄主范圍：

除為害椰子樹(shù)(CocosnuciferaL.)外，還可以為害油棕、棗椰子、扇棕、馬尼拉棕、海棕等30多種棕櫚科植物。大部分椰子品種抗病性差，在棕櫚科的15個(gè)主要類(lèi)群中，至少有7個(gè)是感病的。感病寄主屬包括：Allagoptera，桄榔屬Arenga，Arikuryroba，Boraxxus，魚(yú)尾屬Caryota，散尾屬Chrysalidocarpus，椰子屬Cocos，Corypha，Dictyosperma，Gaussia，Hyophorbe，Latania，薄葵屬Livistona，Mascarena，Nannorrhops，刺葵屬Phoenix，Pritchardia，棕櫚屬Trachycrpus，Veitchia。

危害情況:

是椰子和棕櫚科植物的毀滅性病害。在牙買(mǎi)加，據(jù)統(tǒng)計(jì)1961年的600萬(wàn)株感病的JamaicaTall椰子中的90％在1981年因感染黃化植原體而死亡。在加納，在過(guò)去的30年中，已有約100萬(wàn)株椰子因感病而死亡；在多哥，截至1964年，約60000株或50％的椰子樹(shù)因感病而死亡；在Florida，到1973年，至少20000株(約6％)的椰子樹(shù)感病。在墨西哥和坦桑尼亞，成千上萬(wàn)公頃的椰子已被病害侵襲而死亡。癥狀：各齡椰子樹(shù)均可感病。病害早期的典型癥狀是花序干枯。開(kāi)始時(shí)頂部復(fù)葉有褐色枯死斑，可深入到裹在里邊的羽狀葉，再向深處擴(kuò)展，最后致死生長(zhǎng)點(diǎn)，未成熟的果實(shí)脫落。開(kāi)花的花序軸從頂端開(kāi)始?jí)乃?、變黑，佛焰苞未成熟就提前開(kāi)放，然后凋萎、落花、落果。以后葉片開(kāi)始黃化，下層的葉片迅速發(fā)展到主株葉片，直至脫落。芽片感染后表現(xiàn)有不規(guī)則的褐色水浸狀條斑，逐漸發(fā)展到芽腐，并有惡臭味。此時(shí)新葉很容易被剝離掉。在葉部呈現(xiàn)黃化癥狀時(shí)，根系出現(xiàn)壞死，不久腐爛，根系受害死亡?？傊?葉片黃化癥狀是植原體侵入根系后導(dǎo)致生理學(xué)、生物化學(xué)變化的結(jié)果。一般椰子黃化植原體病癥狀發(fā)展過(guò)程如下：大多數(shù)感病植株在果實(shí)成熟前提前落果新開(kāi)的花序黑化從下部葉片到上部葉片逐漸黃化針形葉死亡和脫落，可能僅保留少量綠葉整個(gè)樹(shù)冠脫落，僅留赤裸的呈線(xiàn)桿狀枝干病原：椰子致死黃化植原體學(xué)名

CoconutlethalyellowingPhytoplasma

英文名

Coconutlethalyellowing

分類(lèi)地位

原核生物界，無(wú)壁菌門(mén)，軟球菌綱，植原體屬（MLO）

形態(tài)特征

電鏡下，典型的植原體顆粒存在于病株的篩管中。顆粒是卵形、橢圓形、及絲狀，由三層結(jié)構(gòu)組成即：兩層電子密集層，中間隔一層透明層。在感病椰子樹(shù)韌皮部篩管細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)植原體的存在，形狀包括絲狀、念珠狀及近球狀，大小為400-2000nm。在新近成熟的韌皮部篩管細(xì)胞中常見(jiàn)有植原體，而在薄壁組織中未見(jiàn)植原體存在。傳播途徑

在自然條件下，椰子致死黃化病的介體為麥蠟蟬（Mynduscrudus）。葉蟬（Gyponasp）也有可能是潛在介體。葉蟬介體在美洲的地理分布與病害植原體的分布相吻合。在非洲西部，葉蟬Myndusadiopodoumeensis被懷疑也是一種傳播介體。有報(bào)道表明化學(xué)防治昆蟲(chóng)介體可明顯降低病害的傳播速度。在國(guó)際貿(mào)易中帶病的植物材料，包括觀賞樹(shù)種，能傳帶病菌。檢驗(yàn)與檢測(cè)

1．產(chǎn)地檢疫根據(jù)植物受侵染后的癥狀，鑒定是否感病。

2．生物學(xué)方法利用介體昆蟲(chóng)麥蠟蟬在可疑的植物上取食后，接種到長(zhǎng)春花上，誘發(fā)長(zhǎng)春花產(chǎn)生植原體病害的典型癥狀，但潛伏期較長(zhǎng)。

3．電鏡觀察用電鏡觀察植物韌皮部組織中是否有植原體存在。

4．核酸雜交和PCR檢測(cè)技術(shù)Harrison等1992年報(bào)道用5種DNA探針可用于椰子和其他棕櫚科植物上的椰子致死黃化植原體的檢測(cè)；Rohde等1993年報(bào)道應(yīng)用PCR技術(shù)成功的檢測(cè)椰子致死黃化植原體。檢疫措施

1、嚴(yán)禁從疫區(qū)進(jìn)口椰子果和苗木。

2、嚴(yán)格把關(guān)，加強(qiáng)檢疫。

3、科研單位特殊需要進(jìn)口，應(yīng)由檢疫機(jī)關(guān)審批隔離試種一年以上，證明種苗是健康的，方能進(jìn)口。防治方法

1、種植抗病品種。

2、防治昆蟲(chóng)介體。用殺蟲(chóng)劑防治介體葉蟬能限制或降低病害的傳播速度。

3、注射抗生素：可注射四環(huán)素(500ppm)，每株椰子樹(shù)注射的最大劑量為8克，加水1000毫升。每株病樹(shù)進(jìn)行保護(hù)性注射抗生素1－3克可降低病害蔓延速度3－5倍。也有報(bào)道用土霉素－鹽酸注射液對(duì)病株的樹(shù)干進(jìn)行注射處理，能抑制植原體病的癥狀，處理過(guò)的植株又能重新健康生長(zhǎng)，每4個(gè)月處理一次能保持植株不表現(xiàn)癥狀。

4、衛(wèi)生措施：及早清除病枝、病枝，重病樹(shù)應(yīng)砍伐燒毀復(fù)習(xí)思考題1．試述玉米細(xì)菌性萎蔫病在國(guó)外的分布狀況、癥狀表現(xiàn)特點(diǎn)、病原分類(lèi)地位、檢驗(yàn)方法和防治措施。2．試述梨火疫病在國(guó)外的分布狀況、癥狀表現(xiàn)特點(diǎn)、病原分類(lèi)地位、檢驗(yàn)方法和防治措施。3．試述柑橘黃龍病在國(guó)外的分布狀況、癥狀表現(xiàn)特點(diǎn)、病原分類(lèi)地位、檢驗(yàn)方法和防治措施。4.細(xì)菌病害的傳播特點(diǎn)是什么？6．試述細(xì)菌病害的檢驗(yàn)與診斷要點(diǎn)。7．植原體的病害為何檢驗(yàn)？6E3B+y(v%r#oWlTiQeNbK8G5D1A-x*t$qZnVkSgPdMaI7F4C0z)v&s!pXmUjRfOcL9H6E2B+y(u%r#oWlThQeNbJ8G5D1A-w*t$qYnVkSgPdLaI7F3C0z)v&s#pXmUiRfOcK9H5E2B+x(u%rZoWkThQeMbJ8G4D1A-w*t!qYnVjSgPdLaI6F3C0y)v&s#pXlUiRfNcK9H5E2A+x(u$rZoWkThPeMbJ7G4D1z-w&t!qYmVjSgOdL9I6F3B0y)v%s#oXlUiQfNcK8H5E2A+x*u$rZnWkThPeMaJ7G4C1z-w&t!pYmVjRgOdL9I6E3B0y(v%s#oXlTiQfNbK8H5D2A-x*u$qZnWkShPdMaJ7F4C1z)w&t!pYmUjRgOcL9I6E3B+y(v%r#oXlTiQeNbK8G5D2A-x*t$qZnVkShPdMaI7F4C0z)w&s!pXmUjRfOcL9H6E2B+y(u%r#oWlTiQeNbJ8G5D1A-x*t$qYnVkSgPdMaI7F3C0z)v&s!pXmUiRfOcK9H6E2B+x(u%rZoWlThQeMbJ8G4D1A-w*t!qYnVjSgPdLaI6F3C0y)v&s#pXmUiRfNcK9H5E2B+x(u$rZoWkThQeMbJ7G4D1z-w*t!qYmVjSgOdLaI6F3B0y)v%s#pXlUiQfNcK8H5E2A+x*u$rZnWkThPeMbJ7G4C1z-w&t!qYmVjRgOdL9I6F3B0y(v%s#oXlUiQfNbK8H5D2A+x*u$qZnWkShPeMaJ7F4C1z)w&t!pYmUjRgOcL9I6E3B0y(v%r#oXlTiQfNbK8G5D2A-x*u$qZnVkShPdMaJ7F4C0z)w&s!pYmUjRfOcL9H6E3B+y(u%r#oWlTiQeNbJ8G5D1A-x*t$qYnVkSgPdMaI7F4C0z)v&s!pXmUjRfOcK9H6E2B+y(u%rZoWlThQeNbJ8G4D1A-w*t$qYnVjSgPdLaI7F3C0y)v&s#pXmUiRfNcK9H5E2B+x(u%rZrZoWkThQeMbJ7G4D1z-w*t!qYnVjSgOdLaI6F3C0y)v%s#pXlUiRfNcK8H5E2A+x(u$rZnWkThPeMbJ7G4C1z-w&t!qYmVjRgOdL9I6F3B0y(v%s#oXlUiQfNcK8H5D2A+x*u$rZnWkShPeMaJ7G4C1z)w&t!pYmVjRgOcL9I6E3B0y(v%r#oXlTiQfNbK8G5D2A-x*u$qZnVkShPdMaJ7F4C1z)w&s!pYmUjRgOcL9H6E3B+y(v%r#oWlTiQeNbK8G5D1A-x*t$qZnVkSgPdMaI7F4C0z)v&s!pXmUjRfOcK9H6E2B+y(u%rZoWlThQeNbJ8G5D1A-w*t$qYnVkSgPdLaI7F3C0z)v&s#pXmUiRfOcK9H5E2B+x(u%rZoWkThQeMbJ8G4D1z-w*t!qYnVjSgOdLaI6F3C0y)v&s#pXlUiRfNcK9H5E2A+x(u$rZoWkThPeMbJ7G4D1z-w&t!qYmVjSgOdL9I6F3B0y)v%s#oXlUiQfNcK8H5D2A+x*u$rZnWkShPeMaJ7G4C1z-w&t!pYmVjRgOdL9I6E3B0y(v%s#oXlTiQfNbK8H5D2A-x*u$qZnWkShPdMaJ7F4C1z)w&s!pYmUjRgOcL9H6E3B+y(v%r#oXlTiQeNbK8G5D2A-x*t$qZnVkShPdMaI7F4C0z)w&s!pXmUjRfOcL9H6E2B+y(u%r#oWlThQeNbJ8G5D1A-w*t$qYnVkSgPdMaI7F3C0z)v&s!pXmUiRfOcK9H6E2B+x(u%rZoWlThQeMbJ8G4D1A-w*t!qYnVjSgPdLaI6F3C0y)v&s#pXlUiRfNcK9H5E2A+x(u$rZoWkThQeMbJ7G4D1z-w*t!qYmVjSgOdLaI6F3B0y)v%s#pXlUiQfNcK8H5E2A+x*u$rZnWkThPeMeMaJ7G4C1z-w&t!pYmVjRgOdL9I6E3B0y(v%s#oXlUiQfNbK8H5D2A+x*u$qZnWkShPeMaJ7F4C1z)w&t!pYmUjRgOcL9I6E3B+y(v%r#oXlTiQeNbK8G5D2A-x*t$qZnVkShPdMaI7F4C0z)w&s!pYmUjRfOcL9H6E3B+y(u%r#oWlTiQeNbJ8G5D1A-x*t$qYnVkSgPdMaI7F3C0z)v&s!pXmUiRfOcK9H6E2B+x(u%rZoWlThQeNbJ8G4D1A-w*t$qYnVjSgPdLaI7F3C0y)v&s#pXmUiRfNcK9H5E2B+x(u$rZoWkThQeMbJ7G4D1z-w*t!qYmVjSgOdLaI6F3B0y)v%s#pXlUiRfNcK8H5E2A+x(u$rZnWkThPeMbJ7G4C1z-w&t!qYmVjRgOdL9I6F3B0y(v%s#oXlUiQfNbK8H5D2A+x*u$qZnWkShPeMaJ7G4C1z)w&t!pYmVjRgOcL9I6E3B0y(v%r#oXlTiQfNbK8G5D2A-x*u$qZnVkShPdMaJ7F4C0z)z)w&s!pYmUjRfOcL9H6E3B+y(u%r#oWlTiQeNbJ8G5D1A-x*t$qZnVkSgPdMaI7F4C0z)v&s!pXmUjRfOcK9H6E2B+y(u%rZoWlThQeNbJ8G4D1A-w*t$qYnVjSgPdLaI7F3C0y)v&s#pXmUiRfOcK9H5E2B+x(u%rZoWkThQeMbJ8G4D1z-w*t!qYnVjSgOdLaI6F3C0y)v%s#pXlUiRfNcK8H5E2A+x(u$rZnWkThPeMbJ7G4C1z-w&t!qYmVjSgOdL9I6F3B0y)v%s#oXlUiQfNcK8H5D2A+x*u$rZnWkShPeMaJ7G4C1z)w&t!pYmVjRgOcL9I6E3B0y(v%r#oXlTiQfNbK8H5D2A-x*u$qZnWkShPdMaJ7F4C1z)w&s!pYmUjRgOcL9H6E3B+y(v%r#oWlTiQeNbK8G5D1A-x*t$qZnVkSgPdMaI7F4C0z)w&s!pXmUjRfOcL9H6E2B+y(u%r#oWlThQeNbJ8G5D1A-w*t$qYnVkSgPdLaI7F3C0z)v&s#pXmUiRfOcK9H5E2B+x(u%rZoWkThQeMbJ8G4D1A-w*t!qYnVjSgPdLaI6F3C0y)v&s#pXlUiRfNcK9H5E2A+x(u$rZoWkThPeMbJ7G4D1z-w&t!qYmVjSgOdL9I6F3B0y)v%s#pXlUiQfNcK8H5E2A+x*u$rZnWkThPeMaJ7G4C1z-w&t!pYmVjRgOdL9I6E3B0y(v%s#oXoXlTiQfNbK8H5D2A-x*u$qZnWkShPdMaJ7F4C1z)w&s!pYmUjRgOcL9I6E3B+y(v%r#oXlTiQeNbK8G5D2A-x*t$qZnVkShPdMaI7F4C0z)w&s!pXmUjRfOcL9H6E2B+y(u%r#oWlThQeNbJ8G5D1A-x*t$qYnVkSgPdMaI7F3C0z)v&s!pXmUiRfOcK9H6E2B+x(u%rZoWlThQeMbJ8G4D1A-w*t!qYnVjSgPdLaI6F3C0y)v&s#pXlUiRfNcK9H