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選修三《現(xiàn)代生物技術》基因工程(2019浙江卷)1.天然的玫瑰沒有藍色花,這是由于缺少控制藍色色素合成的基因B,而開藍色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B?,F(xiàn)用基因工程技術培育藍玫瑰,下列操作正確的是提取矮牽牛藍色花的mRNA,經逆轉錄獲得互補的DNA,再擴增基因B利用限制性核酸內切酶從開藍色花矮牽牛的基因文庫中獲取基因B利用DNA聚合酶將基因B與質粒連接后導入玫瑰細胞將基因B直接導入大腸桿菌,然后感染并轉入玫瑰細胞(2019四川卷)2、將大腸桿菌的質粒連接上人生長激素的基因后,重新置入大腸桿菌的細胞內,通過發(fā)酵就能大量生產人生長激素。下列敘述正確的是A、發(fā)酵產生的生長激素屬于大腸桿菌的初級代謝產物B、大腸桿菌獲得的能產生人生長激素的變異可以遺傳C、大腸桿菌質粒標記基因中腺嘌吟與尿嘧啶含量相等D、生長激素基因在轉錄時需要解旋酶和DNA連接酶(2019江蘇卷)3?圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度(bp即堿基對)和部分堿基序列,圖2表示一種質粒的結構和部分堿基序列?,F(xiàn)有MspI、BamHI、MboI、SmaI4種限制性核酸內切酶切割的堿基序列和酶切位點分別為C/CGG、G/GATCC、問題:(GATC、CCC/GGG。請回答下列Ir11[111i>miIiii;111i>mi'iiii'i*"111111111GGATCCqdCGGGCCCGGGGGATCCCCTAGG(iGGCCCI..Jl;liI\..11.1lrilIIIITIIb芍亍4如”_山i—^79匕bpn—二血bp,』CCCGGGGGGCCCCCTAGG(1)圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個堿基之間依次由連接。(2)若用限制酶SmaI完全切割圖1中DNA片段,產生的末端是..末端,其產物長度為若圖1中虛線方框內的堿基對被T—A堿基對替換,那么基因D就突變?yōu)榛騞。從雜合子分離出圖1及其對應的DNA片段,用限制酶SmaI完全切割,產物中共有種不同DNA片段。若將圖2中質粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進行,形成重組質粒,那么應選用的限制酶是。在導入重組質粒后,為了篩選出含重組質粒的大腸桿菌,一般需要用添加-1-ByV_First

的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。經檢測,部分含有重組質粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達,其最可能的原因是。(2019?天津卷,4、生物分子間的特異性結合的性質廣泛用于生命科學研究。以下實例為體外處理“蛋白質-DNA復合體”獲得DNA片段信息的過程圖。ATGCTTC-TACGAAGATGCTTC-TACGAAG據圖回答:""過程①酶作用的部位是鍵,此過程只發(fā)生在非結合區(qū)DNA,過程②酶作用的部位是鍵。①、②兩過程利用了酶的特性。若將得到的DNA片段用于構建重組質粒,需要過程③的測序結果與酶的識別序列進行對比,已確定選用何種酶。如果復合體中的蛋白質為RNA酶聚合,則其識別、結合DNA序列位基因的—以下研究利用了生物分子間的特異性結合的有(多選)A、分離得到核糖體,用蛋白酶酶解后提rRNAB、用無水乙醇處理菠菜葉片,提取葉綠體基粒膜上的光合色素通過分子雜交手段,用熒光物質標記的目的基因進行染色體定位將抑制成熟基因導入番茄,其mRNA與催化成熟酶基因的mRNA互補結合,終止后者翻譯,延遲果實成熟。5、圖為某種質粒表達載體簡圖,小箭頭所指分別為限制性內切酶EcoRI、BamHI的酶切位點,ampR為青霉素抗性基因,tctR為四環(huán)素抗性基因,P為啟動因子,T為終止子,ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內的多種酶的酶切位點。(1)將含有目的基因的DNA與質粒表達載體分別用EcoRI酶切,酶切產物用DNA連接酶進行連接后,其中由兩個DNA片段之間連接形成的產物有、、三種。若要從這些連接產物中分離出重組質粒,需要對這些連接產-2-ByV_First

TOC\o"1-5"\h\z物進行。用上述3種連接產物與無任何抗藥性的原核宿主細胞進行轉化實驗。之后將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中,能生長的原核宿主細胞所含有的連接產物是;若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中,能生長的原核宿主細胞所含有的連接產物是。目的基因表達時,RNA聚合酶識別和結合的位點是其合成的產物是。在上述實驗中,為了防止目的基因和質粒表達載體在酶切后產生的末端發(fā)生任意連接,酶切時應選用的酶是。轉基因抗病香蕉的培育過程如圖所示。質粒上有PstI、SmaI、EcoRI、ApaI等四種限制酶切割位點。請回答:構建含抗病基因的表達載體A時,應選用限制酶,對進行切割。培養(yǎng)板中的卡那霉素會抑制香蕉愈傷組織細胞的生長,欲利用該培養(yǎng)篩選已導入抗病基因的香蕉細胞,應使基因表達載體A中含有,作為標記基因。香蕉組織細胞具有,因此,可以利用組織培養(yǎng)技術將導入抗病基因的香蕉組織細胞培育成植株。圖中①、②依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細胞的.。為擴大可耕地面積,增加糧食產量,黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)利用備受關注。我國科學家應用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。獲得耐鹽基因后,構建重組DNA耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。獲得耐鹽基因后,構建重組DNA分h用的限制性內切酶作用于圖中的DNA連接酶作用于處。(填“a”或丁將重組DNA分子導入水稻受體細胞用方法有農桿菌轉化法和為了確定耐鹽轉基因水稻是否培育成功,q?子所q■!9-e931LrP1V■11J處,*cAtcGTc亍“b”)a的常法。既要用放射性同位素標記的作探針進行分-3-ByV_First

子雜交檢測,又要用方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。在培育轉基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kan)常作為標記基因,只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。下圖為獲得抗蟲棉的技術流程??瓜x基因含kan質粒A構建重組質粒導入土壤農桿菌培養(yǎng)選擇含重組質粒土壤農桿菌抗蟲基因含kan質粒A構建重組質粒導入土壤農桿菌培養(yǎng)選擇含重組質粒土壤農桿菌轉基因抗蟲植株檢:則再生植株分化愈傷組織誘導選擇離體棉花葉片組織請據圖回答:A過程需要的酶有。B過程及其結果體現(xiàn)了質粒作為運載體必須具備的兩個條件C過程的培養(yǎng)基除含有必要營養(yǎng)物質、瓊脂和激素外,還必須加入如果利用DNA分子雜交原理對再生植株進行檢測,D過程應該用'乍為探針??茖W家發(fā)現(xiàn)轉基因植株的卡那霉素抗性基因的傳遞符合孟德爾遺傳規(guī)律。將轉基因植株與雜交,其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為1:1。若該轉基因植株自交,則其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為___。若將該轉基因植株的花藥在卡那霉素培養(yǎng)基上作離體培養(yǎng),則獲得的再生植株群體中抗卡那霉素型植株占%。以重組DNA技術為核心的基因工程正在改變著人類的生活。請回答下列問題。TOC\o"1-5"\h\z獲得目的基因的方法通常包括和。切割和連接DNA分子所使用的酶分別和。運送目的基因進入受體細胞的載體一般選用病毒,后者的形狀成。由于重組DNA分子成功導入受體細胞的頻率,所以在轉化后通常需要進行—操作。

將人胰島素基因分別導入大腸桿菌與酵母菌,從兩者中生產的胰島素在功能和序列上是是子鏈合成延伸的基礎。相同的。10、(2011年江蘇卷)33.(8分)請回答基因工程方面的有關問題:(1)相同的。10、(2011年江蘇卷)33.(8分)請回答基因工程方面的有關問題:(1)利用PCR技術擴增目的基因,其原理與細胞內DNA復制類似(如右圖所示)。圖中引物為單鏈DNA片段,它-4-第_輪循環(huán)<iiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiii引物B[」I[111」ILI變性退火延伸irstTOC\o"1-5"\h\z從理論上推測,第四輪循環(huán)產物中含有引物A的DNA片段所占的比例為。在第輪循環(huán)產物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段。(2)設計引物是PCR技術關鍵步驟之一。某同學設計的兩組引物(只標注了部分堿基序列)都不合理(如下圖),請分別說明理由。第1組:;第2組:。(3)PCR反應體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶,下面的表達式不能正確反映DNA聚合酶的功能,這是因為。⑷用限制酶EcoRV、Mbol單獨或聯(lián)合切割同一種質粒,得到的DNA片段長度如下圖(1kb即1000個堿基對),請在答題卡的指定位置畫出質粒上EcoRV、Mbol的切割位點。屁oRVMbol2.5kb14kb11.5kb屁oRV+Mbo\屁oRVMbol2.5kb14kb11.5kb屁oRV+Mbo\r2.5kb5.5kb6kb11、(11年北京卷)T-DNA可能隨機插入植物基因組內,導致被插入基因發(fā)生突變。用此方法誘導擬南芥產生突變體的過程如下:種植野生型擬南芥,待植物形成花蕾時,將■11、(11年北京卷)T-DNA可能隨機插入植物基因組內,導致被插入基因發(fā)生突變。用此方法誘導擬南芥產生突變體的過程如下:種植野生型擬南芥,待植物形成花蕾時,將■地上部分浸入農桿菌(其中的T-DNA上帶有抗除草劑基因)懸浮液中以實現(xiàn)轉化。在適宜條件下培養(yǎng),收獲種子(稱為、代)

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