標(biāo)準(zhǔn)解讀

GB/T 19564-2004 是一項(xiàng)中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，全稱(chēng)為《落葉松種子鑒定實(shí)驗(yàn)方法 隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA法》。這項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)主要規(guī)定了利用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（Random Amplified Polymorphic DNA, RAPD）技術(shù)對(duì)落葉松種子進(jìn)行種質(zhì)鑒定的實(shí)驗(yàn)方法和要求，旨在為落葉松種子的品種鑒定、遺傳多樣性分析以及林木育種提供科學(xué)依據(jù)和統(tǒng)一的操作規(guī)范。

標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容概覽

  1. 范圍：明確了該標(biāo)準(zhǔn)適用于落葉松屬植物種子的真實(shí)性和純度鑒定，通過(guò)RAPD分子標(biāo)記技術(shù)來(lái)分辨不同種類(lèi)或品種間的遺傳差異。

  2. 規(guī)范性引用文件：列出了實(shí)施本標(biāo)準(zhǔn)時(shí)所依據(jù)的其他相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)文檔，確保實(shí)驗(yàn)方法的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。

  3. 術(shù)語(yǔ)和定義：對(duì)關(guān)鍵術(shù)語(yǔ)如RAPD、引物、DNA擴(kuò)增等進(jìn)行了明確界定，便于讀者理解。

  4. 試劑與材料：詳細(xì)說(shuō)明了實(shí)驗(yàn)所需的各種化學(xué)試劑、DNA提取套件、引物設(shè)計(jì)原則及其合成要求，以及實(shí)驗(yàn)器材的具體規(guī)格。

  5. 樣品采集與處理：規(guī)定了落葉松種子樣本的正確采集、保存、預(yù)處理及DNA提取的方法，確保DNA質(zhì)量滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)需求。

  6. RAPD反應(yīng)體系與程序：詳述了PCR反應(yīng)體系的組成，包括模板DNA、引物、緩沖液、酶等成分的濃度與體積，以及PCR循環(huán)參數(shù)設(shè)置，確保實(shí)驗(yàn)操作的一致性和高效性。

  7. 電泳與結(jié)果分析：指導(dǎo)如何通過(guò)凝膠電泳分離擴(kuò)增產(chǎn)物，并利用成像系統(tǒng)記錄結(jié)果，進(jìn)一步對(duì)得到的多態(tài)性條帶進(jìn)行比較分析，以識(shí)別遺傳差異。

  8. 數(shù)據(jù)處理與種子鑒定：介紹了如何根據(jù)RAPD圖譜的相似性或差異，利用特定軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，從而對(duì)落葉松種子進(jìn)行品種或種源的鑒定。

  9. 質(zhì)量控制：強(qiáng)調(diào)了實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的質(zhì)量控制措施，包括陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照的設(shè)置，以及實(shí)驗(yàn)重復(fù)次數(shù)的要求，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。

  10. 安全要求：簡(jiǎn)要提及實(shí)驗(yàn)室操作過(guò)程中的生物安全和個(gè)人防護(hù)措施，確保實(shí)驗(yàn)人員安全。

實(shí)施意義

該標(biāo)準(zhǔn)的出臺(tái)，為落葉松種子的分子水平鑒定提供了一套標(biāo)準(zhǔn)化流程，有助于提高種子鑒定的精確度和效率，促進(jìn)林業(yè)資源的合理利用和遺傳資源的保護(hù)。同時(shí)，也為相關(guān)科研工作者、種子生產(chǎn)商及質(zhì)量監(jiān)管機(jī)構(gòu)提供了統(tǒng)一的技術(shù)參考和操作指南，推動(dòng)了林木育種工作的規(guī)范化發(fā)展。


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  • 廢止
  • 已被廢除、停止使用，并不再更新
  • 2004-06-22 頒布
  • 2004-12-01 實(shí)施
?正版授權(quán)
GB/T 19564-2004落葉松種子鑒定實(shí)驗(yàn)方法隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA法_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

ICS65.020.20B61中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T19564—2004落葉松種子鑒定實(shí)驗(yàn)方法隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA法Experimentalidentificationmethodforspeciesoflarchsecd-RAPD2004-06-22發(fā)布2004-12-01實(shí)施中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T19564一2004前本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A為規(guī)范性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局提出本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：國(guó)家農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化監(jiān)測(cè)與研究中心（黑龍江)黑龍江省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局.本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：王慶貴、徐品、姜雯、李光宇、石紹業(yè)、王衛(wèi)國(guó)。

GB/T19564一2004目前,我國(guó)林木種子的鑒定多采用感官鑒定、理化水平鑒定等方法。這些方法所需的檢驗(yàn)周期較長(zhǎng)，不具備分子水平鑒定的諸多優(yōu)點(diǎn)。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，特別是20世紀(jì)90年代以來(lái)，分子生物學(xué)的相關(guān)技術(shù)已被廣泛應(yīng)用.其檢測(cè)對(duì)象為DNA大分子—-生物的遺傳基礎(chǔ)。以DNA為檢測(cè)對(duì)象，具有許多其他檢測(cè)水平所不具備的優(yōu)點(diǎn)：首先，可供探測(cè)DNA標(biāo)記的數(shù)量可能是無(wú)限的·這是同工酶技術(shù)所無(wú)法比擬的；其二,DNA分析技術(shù)不像其他技術(shù)那樣隨組織或發(fā)育階段而異，植物體任何部位、任何時(shí)期提供的DNA均可用于分析.其檢測(cè)結(jié)果都是一樣的：第三.DNA分析不受環(huán)境影響.其變異只源于等位基因DNA序列的變異這種穩(wěn)定性便于揭示品種間的遺傳變異,從而排除了環(huán)境變異所造成的表型變異?；谏鲜鰞?yōu)點(diǎn)·DNA分析技術(shù)是農(nóng)、林、牧、漁等品種鑒定的先進(jìn)方法

GB/T19564一2004落葉松種子鑒定實(shí)驗(yàn)方法隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA法1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了落葉松種子鑒定的具體實(shí)驗(yàn)方法本標(biāo)準(zhǔn)適用于利用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（RAPD)法對(duì)落葉松種子鑒定的實(shí)驗(yàn)過(guò)程術(shù)語(yǔ)、定義和縮略語(yǔ)2.1術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)2.1.1聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)polymerasechainreaction一種可以從少量至一個(gè)拷貝的特定堿基順序的DNA片斷在體外花費(fèi)幾個(gè)小時(shí)即可擴(kuò)增出數(shù)百萬(wàn)個(gè)分子的酶催化反應(yīng).即DNA合成反應(yīng)。2.1.2隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNArandomamplifiedpolymorphicDNA是以聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)為基礎(chǔ)，用隨機(jī)排列的寡聚脫氧核首酸單鏈作為引物擴(kuò)增基因組中不同位點(diǎn)的DNA,進(jìn)而揭示多個(gè)位點(diǎn)等位基因間多態(tài)性的一種分子標(biāo)記方法2.1.3核谷酸nucleotide是構(gòu)成核酸的基本單元，由三部分組成：五碳糖、磷酸和環(huán)狀的含氮堿基2.1.4引物Primer一條互補(bǔ)結(jié)合在模板DNA鏈上的短的單鏈·提供3'-0H末端作為DNA合成的起點(diǎn)·延伸合成模板DNA的互補(bǔ)鏈。2.1.5多態(tài)性polymorphism一對(duì)引物在兩個(gè)或兩個(gè)以上不同材料基因組DNA之間擴(kuò)增，得到數(shù)目不同或長(zhǎng)度不同的DNA片斷。2.2縮略語(yǔ)下列縮略語(yǔ)適用于本標(biāo)準(zhǔn)RAPD隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(RandomAmplifiedPolymorphismDNA)PCR：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PolymeraseChainReaction)DNA脫氧核糖核酸(DeoxyribonucleicAcid)OD光密度(OpticalDens

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