標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 20395-2006 桑蠶微粒子病病原鑒定方法》是一項(xiàng)由中國(guó)發(fā)布的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，旨在為桑蠶微粒子病的病原體鑒定提供一套統(tǒng)一、科學(xué)的方法。該標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了如何識(shí)別和確認(rèn)導(dǎo)致桑蠶微粒子病的病原體——微粒子蟲(chóng)（Bombyx mori nucleopolyhedrovirus，簡(jiǎn)稱BmNPV），以確保診斷的準(zhǔn)確性和一致性。以下是該標(biāo)準(zhǔn)的主要內(nèi)容概覽：

  1. 適用范圍：本標(biāo)準(zhǔn)適用于桑蠶養(yǎng)殖過(guò)程中出現(xiàn)的微粒子病疫情診斷，以及相關(guān)科研、教學(xué)活動(dòng)中對(duì)該病原體的鑒定工作。

  2. 術(shù)語(yǔ)和定義：明確了微粒子病、微粒子蟲(chóng)、感染性多角體等專業(yè)術(shù)語(yǔ)的定義，為后續(xù)操作提供了統(tǒng)一的詞匯基礎(chǔ)。

  3. 試劑與材料：列出了進(jìn)行病原鑒定所需的各種化學(xué)試劑、實(shí)驗(yàn)器材及特定培養(yǎng)條件，確保實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備的標(biāo)準(zhǔn)化。

  4. 樣本采集與處理：詳細(xì)說(shuō)明了如何從患病桑蠶的不同組織（如脂肪體、中腸）采集樣本，以及樣本的預(yù)處理步驟，包括固定、保存和運(yùn)輸要求，以保持樣本的病原體活性和完整性。

  5. 病原檢測(cè)方法：

    • 顯微鏡觀察法：利用光學(xué)顯微鏡直接觀察樣本中是否存在典型的微粒子蟲(chóng)多角體結(jié)構(gòu)。
    • 組織病理學(xué)檢查：通過(guò)組織切片、染色技術(shù)觀察組織病變情況及病原體特征。
    • 分子生物學(xué)方法：如PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）技術(shù)，用于特異性檢測(cè)病原體的核酸序列，提高鑒定的靈敏度和準(zhǔn)確性。

  6. 鑒定結(jié)果判定：根據(jù)上述檢測(cè)方法的結(jié)果，制定了明確的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)判斷樣品是否感染微粒子蟲(chóng)，包括觀察指標(biāo)、陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)及可能的假陽(yáng)性和假陰性情況的考慮。

  7. 質(zhì)量控制：強(qiáng)調(diào)了實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)采取的質(zhì)量控制措施，確保每次檢測(cè)的可靠性和重復(fù)性，包括使用陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照、操作人員的技術(shù)培訓(xùn)等。

  8. 安全與防護(hù)：提到了在處理病原體樣本時(shí)應(yīng)采取的安全防護(hù)措施，以防止人畜共患風(fēng)險(xiǎn)和實(shí)驗(yàn)室污染。


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  • 2006-05-26 頒布
  • 2006-12-01 實(shí)施
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文檔簡(jiǎn)介

ICS65.020.30B47中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T20395-3—2006桑蠶微粒子病病原鑒定方法Identificationofthepathogenofpebrineforsilkworm（Bombyxmoril.)2006-05-26發(fā)布2006-12-01實(shí)施中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局愛(ài)布中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)桑蠶微粒子病病原鑒定方法GB/T20395-2006中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行北京西城區(qū)復(fù)興門(mén)外三里河北街16號(hào)郵政編碼：100045電話：010)51299090、685220062006年12月第一版書(shū)號(hào)：155066·1-28334版權(quán)專有侵權(quán)必究舉報(bào)電話：（010)68522006

GB/T20395一2006前桑蠶微粒子病是我國(guó)進(jìn)境動(dòng)物檢疫危險(xiǎn)性病害,為防止該病隨桑蠶繭進(jìn)境而傳人我國(guó),在進(jìn)境動(dòng)物檢疫時(shí)需正確掌握桑蠶微粒子病原孢子的檢疫和鑒定方法。本標(biāo)準(zhǔn)在制定過(guò)程中，總結(jié)了多年桑蠶苗檢疫的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，根據(jù)桑蠶微粒子孢子的形態(tài)學(xué)特征和遇酸溶解的化學(xué)特性，確定了檢疫和鑒定桑蠶微粒于病原孢子的各項(xiàng)技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A是規(guī)范性附錄，本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)提出并歸口本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中華人民共和國(guó)遼寧出入境檢驗(yàn)檢疫局本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：吳希君、邊玉民、李廣華、王寶忠。本標(biāo)準(zhǔn)是首次發(fā)布的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。

GB/T20395-2006桑蠶微粒子病病原鑒定方法范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了桑蠶中微粒子病原孢子的檢疫和鑒定方法、本標(biāo)準(zhǔn)適用于桑蠶繭中感染微粒子病的檢疫和鑒定規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單(不包括勒誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn).然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件.其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB6682一1992分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T18088-2000出入境動(dòng)物檢疫采樣3原理微粒子病的病原體微孢子蟲(chóng)是一種原生動(dòng)物,分類地位屬于原生動(dòng)物門(mén).單絲孢子蟲(chóng)亞門(mén).微孢子蟲(chóng)綱,微孢子蟲(chóng)目.單絲孢子蟲(chóng)亞目.微孢子蟲(chóng)科.微孢子蟲(chóng)屬。它的生活周期中有孢子、孢子發(fā)芽、裂殖體、孢子形成期。袍子呈卵形或長(zhǎng)卵圓形，大小為(3.6gm～3.8m)X（2.0m～2.3m),單細(xì)胞結(jié)構(gòu)，見(jiàn)附錄A其大小在一定范圍內(nèi)是相對(duì)穩(wěn)定的.但由于寄主發(fā)育階段及寄生部位不同而有差異。在顯微鏡下呈淡藍(lán)色.折光性強(qiáng)，密度1.30～1.35.遇酸溶解。孢子進(jìn)入桑蠶消化道后.受消化液的作用而發(fā)芽，彈出極絲，放出孢原質(zhì),進(jìn)一步形成裂殖體,裂殖體常以二分裂法增殖,進(jìn)入孢子形成階段形成孢子。孢子是微粒子原蟲(chóng)的休眠體。由孢子侵人蠶體至新孢子形成，一般需要4d~8d。微粒子病的傳染源包括患病的蠶、、蛾的尸體、排泄物(如：蠶糞、熟蠶尿、蛾尿)、脫離物(如：皮殼、蠅殼、鱗毛等)。其傳播途徑主要是食人傳染和胚種傳染。被微粒子孢子感染的病蠶上族結(jié)繭后,隨桑蠶繭進(jìn)境而傳播。在進(jìn)境桑蠶繭檢疫工作中，該病原孢子的形態(tài)特征、特性是本標(biāo)準(zhǔn)鑒定方法的依據(jù)。4試劑4.1依鹽酸（HCI）4.220%的氫氧化鈉(NaOH)4.3分析用水按GB/T6682-1992規(guī)定執(zhí)行5儀器、設(shè)備

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