實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基的配制

實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基的配制第一頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日重要考點(diǎn)3：培養(yǎng)基的配制組內(nèi)合作：1、說(shuō)出培養(yǎng)基配制流程；2、討論消毒與滅菌的區(qū)別，小結(jié)常用滅菌方法。第二頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日1、計(jì)算2、稱量牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0gH2O1000mL瓊脂2.0g第三頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日3、熔化4、調(diào)節(jié)pH第四頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日5、分裝第五頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日6、滅菌第六頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日滅菌——高壓滅菌1.05kg/cm2、121℃，15—30min滅菌鍋高壓滅菌作用：殺死所有活的微生物及芽孢第七頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日（補(bǔ)充：倒“平板”）超凈工作臺(tái)第八頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日倒平板約50℃防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠滴落污染培養(yǎng)基灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基第九頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日7、恒溫培養(yǎng)（恒溫培養(yǎng)箱）第十頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日培養(yǎng)基的配制

稱量

熔化

滅菌

調(diào)節(jié)pH

分裝加熱熔化瓊脂（攪拌）倒入三角燒瓶，與其他器具一起放入滅菌鍋高壓滅菌定容調(diào)節(jié)PH至計(jì)算恒溫培養(yǎng)第十一頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日（一般需要作無(wú)菌檢查）核心：保證無(wú)菌操作超凈工作臺(tái)超凈工作臺(tái)、酒精燈火焰旁操作第十二頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日分析與討論1、如何檢驗(yàn)培養(yǎng)基是無(wú)菌的？2、常用滅菌方法有哪些？將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫培養(yǎng)箱中適宜條件下培養(yǎng)2-3d，如果無(wú)菌落產(chǎn)生，則培養(yǎng)基是無(wú)菌的。高壓（蒸氣）滅菌灼燒滅菌用于培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、錐形瓶等用于接種環(huán)等金屬器具第十三頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日3、消毒與滅菌的區(qū)別（1）消毒（如巴氏消毒法62℃，30min、酒精擦拭等）僅殺死活的微生物，不能殺死芽孢。（2）滅菌（高壓滅菌1.05kg/cm2、121℃、15-30min；灼燒滅菌、干熱滅菌等）能殺死所有微生物及其芽孢。第十四頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)2——微生物的培養(yǎng)掌握劃線法接種方法與作用第十五頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日單個(gè)菌體2.特征：大小、形狀、光澤度、顏色、硬度、透明度等。3.功能：1.定義：補(bǔ)充：菌落鑒定菌種的重要依據(jù)固體培養(yǎng)基上大量繁殖子細(xì)胞群體菌落是由單個(gè)細(xì)胞分裂形成的種群第十六頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日常用工具圖示接種環(huán)玻璃刮鏟第十七頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日微生物（如大腸桿菌）的培養(yǎng)：㈠制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基1.計(jì)算2.稱量3.熔化4.調(diào)節(jié)pH5.分裝6.滅菌7.恒溫培養(yǎng)第十八頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日二.大腸桿菌的培養(yǎng)：㈠制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基㈡培養(yǎng)大腸桿菌：（超凈工作臺(tái)上、酒精燈火焰旁進(jìn)行）劃線法菌種1.接種：接種環(huán)劃線法接種冷卻后刮取菌苔劃線法接種：使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后出現(xiàn)單個(gè)菌落第十九頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日枯草桿菌菌落菌落灰白色，較大，邊緣比較粗糙大腸桿菌菌落菌落灰白色，圓形，透明或半透明滕黃八疊球菌菌落菌落黃色，圓形、邊緣光滑第二十頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日問(wèn)題討論為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了防止接種環(huán)上的微生物污染培養(yǎng)物殺死殘留的菌種，保證使下一次劃線時(shí)，菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后得到單個(gè)菌落。避免接種環(huán)上的細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。第二十一頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日劃線法二.大腸桿菌的培養(yǎng)：㈠制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基㈡培養(yǎng)大腸桿菌：1.接種：2.培養(yǎng)：將接種后的平板倒置放入37℃恒溫箱中培養(yǎng)2～3d第二十二頁(yè)，共二十三頁(yè)，2022年，8月28日Q：為什么劃線法接種能觀察到單個(gè)菌落？劃線法接種時(shí)，使接種物逐漸稀釋