生物化學(xué)：7血漿脂蛋白代謝紊亂

第五章血漿脂蛋白代謝紊亂的生物化學(xué)檢驗(yàn)

2基本概念血脂血漿脂蛋白載脂蛋白脂蛋白受體3血脂1.定義：指血清/漿中所有脂類物質(zhì)。2.種類：總膽固醇（游離膽固醇FC＋膽固醇酯CE）

甘油三酯磷脂糖脂游離脂肪酸類固醇

4血漿脂蛋白（lipoprotein,LP）定義共同特征分類5血漿脂蛋白（lipoprotein,LP）定義：脂類不溶或微溶于水，無論是內(nèi)源性或外源性脂類均以溶解度較大的脂蛋白復(fù)合體形式在血液循環(huán)中運(yùn)輸。6LP共同特征：

核心：不溶于水的TG和CE

外殼：少量蛋白質(zhì)和極性的PL、FFA

橋梁：PL的極性部分與Prot結(jié)合，非極性部分與其他脂類結(jié)合7LP分類：

超速離心法：

CM→VLDL→LDL→HDL→Alb-FFAcomplex

瓊脂糖電泳法：

CM→β→前β→α即：

CM→VLDL→IDL→LDL→LP(a)→HDL

CM

前β

β

α

8HDL-C、LDL-C、VLDL-C在LP中有prot、ch、PL等，其中ch含量較為穩(wěn)定，目前以測(cè)定LP中ch含量的方法作為L(zhǎng)P的定量依據(jù)。（一）血脂和脂蛋白檢測(cè)前應(yīng)注意的問題分析前主要影響因素有：

1．生物學(xué)因素如個(gè)體間、性別、年齡和種族等。

2．行為因素如飲食、肥胖、吸煙、緊張、飲酒、飲咖啡和鍛煉等。

3．臨床因素如①疾病繼發(fā)；②藥物誘導(dǎo)。

4．標(biāo)本收集與處理建議：

1．抽血前2周保持平時(shí)的飲食習(xí)慣。

2．抽血前3天避免高脂飲食，24小時(shí)內(nèi)不飲酒，不作劇烈運(yùn)動(dòng)。

3．應(yīng)在禁食12～14小時(shí)后空腹抽血。

4．除臥床的患者外，一般應(yīng)坐位休息5分鐘后抽血。

5．抽血前最好停用影響血脂的藥物數(shù)天或數(shù)周，否則應(yīng)記錄用藥情況。（二）檢測(cè)項(xiàng)目的合理選擇血漿靜置實(shí)驗(yàn)可作為高脂血癥的一種初篩實(shí)驗(yàn)。臨床常規(guī)血脂測(cè)定：TC、TG、HDL-C及LDL-C這四項(xiàng)，有條件的實(shí)驗(yàn)室可測(cè)定ApoAⅠ、ApoB及Lp(a)。特殊檢查項(xiàng)目，如Apo（AⅡ、CⅠ、CⅡ、CⅢ和E）、FFA、CETP、LPL、LCAT測(cè)定等，多用于科研或臨床特殊病例研究。第二節(jié)

脂蛋白代謝紊亂的主要檢測(cè)指標(biāo)一、總膽固醇二、甘油三酯三、血漿脂蛋白測(cè)定四、ApoB/ApoA-I、TC／HDL-CTg/HDL-C、LDL-C/HDL-C比值五、磷脂檢測(cè)六、游離脂肪酸測(cè)定七、過氧化脂質(zhì)檢測(cè)八、脂蛋白-X測(cè)定九、卵磷脂膽固醇轉(zhuǎn)移酶測(cè)定十、脂蛋白代謝相關(guān)基因檢測(cè)十一、脂肪酸結(jié)合蛋白十二、其他血漿脂蛋白和脂質(zhì)測(cè)定是臨床檢驗(yàn)

的常規(guī)測(cè)定項(xiàng)目，其臨床意義主要是：早期發(fā)現(xiàn)與診斷高脂蛋白血癥協(xié)助診斷動(dòng)脈粥樣硬化癥評(píng)價(jià)動(dòng)脈粥樣硬化疾病的危險(xiǎn)度檢測(cè)評(píng)價(jià)飲食與藥物治療效果等

一、血漿脂質(zhì)測(cè)定總膽固醇（totalcholesterol,TC）是血液中各脂蛋白所含膽固醇之總和，分為酯化型膽固醇（CE）和游離型膽固醇（FC），其中CE占60%～70%，F(xiàn)C占30%～40%，兩種類型的比例在健康個(gè)體或個(gè)體之間是恒定的。【測(cè)定方法】化學(xué)法和酶法。目前常規(guī)應(yīng)用酶法測(cè)定，快速準(zhǔn)確。動(dòng)物膽固醇(27碳)

固醇共同結(jié)構(gòu)環(huán)戊烷多氫菲分布：LDL中最多,其次是HDL和VLDLCM最少意義：

TC高低通常反映LDL-C的高低，但在一定程度上也受HDL-C和VLDL-C水平的影響。16總膽固醇（TC）測(cè)定方法同位素稀釋-質(zhì)譜分析法（ID-MS）：是決定性方法化學(xué)法：其中ALBK法為參考方法

LB反應(yīng)直接法為常規(guī)方法酶法：其中膽固醇氧化酶法為常規(guī)方法TC測(cè)定的化學(xué)試劑顯色法

（強(qiáng)酸試劑顯色法）步驟：

1.抽提（正己烷、乙醇、石油醚等）

↓

2.皂化（KOH）↓

3.洋地黃皂苷沉淀純化↓

4.顯色比色

Zak反應(yīng)：

ch+濃H2so4+Fe3++冰醋酸→紫色（563nm）

L-B反應(yīng)：

ch+濃H2so4+醋酸酐+冰醋酸→綠色（410nm）

四步法三步法（正己烷抽提L-B反應(yīng)顯色法，即ALBK法為公認(rèn)的參考方法）（無3步）二步法（無2、3步）一步法：其中LB反應(yīng)直接法為常規(guī)方法（無1、2、3步）ALBK法方法學(xué)評(píng)價(jià)公認(rèn)的參考方法1.準(zhǔn)確度：與決定性方法相比﹤1％2.精密度：室內(nèi)CV﹤1.5％，室間﹤3.0％3.線性范圍：5g/L本法現(xiàn)在主要用于參考血清或校準(zhǔn)物的定值，方法學(xué)評(píng)價(jià)，試劑鑒定及其他準(zhǔn)確測(cè)定的需要。氣液色譜法也是參考方法2.總膽固醇酶法測(cè)定（1）CE在膽固醇酯酶(cholesterolesterase，CHE)作用下水解成FC和FFA；（2）FC再經(jīng)膽固醇氧化酶(cholesteroloxidase，COD)氧化成△4膽甾烯酮和H2O2；（3）再分別定量O2的消耗或者H2O2的生成量，或者△4膽甾烯酮生成量，以作為FC的定量依據(jù)。A.測(cè)定△4膽甾烯酮法240nmB.定量O2的消耗電位測(cè)量C.測(cè)定H2O2的生成量*CEH對(duì)CE的水解作用不完全TC測(cè)定的膽固醇氧化酶法原理：

CE膽固醇酯酶（CEH）FC＋FFA

ch＋O2

膽固醇氧化酶（CHOD）膽烷-4-烯-3-酮＋H2O2

氧電極

240nm比色

Trinder反應(yīng)

（即CHOD-PAP法，最常用）評(píng)價(jià)：快速、準(zhǔn)確、標(biāo)本用量少，便于自動(dòng)化。

CHOD-PAP法的方法學(xué)評(píng)價(jià)中華醫(yī)學(xué)會(huì)推薦的常規(guī)方法，取代了化學(xué)常規(guī)方法。1.準(zhǔn)確度：以ALBK法定值的血清為校準(zhǔn)品時(shí)，與ALBK法相比基本一致2.精密度：終點(diǎn)法批內(nèi)CV﹤1.5％，批間CV﹤2.5％3.線性范圍：13mmol/L(5g/L)4.特異性：常規(guī)測(cè)定中非膽固醇甾醇的影響不計(jì)；CEH對(duì)CE的水解作用不完全5.干擾因素：終點(diǎn)法中Hb（﹥2g/L)、膽紅素（﹥0.1g/L）高VitC有影響；在速率法中上述因素影響較小?！緟⒖挤秶?007年《中國(guó)成人血脂異常防治指南》規(guī)定成人TC水平：在5.18mmol/L（200mg/dl）以下為合適范圍；在5.18～6.19mmol/L（200～239mg/dl）范圍屬于邊緣升高；在6.22mmol/L（240mg/dl）以上為TC升高?！九R床意義】TC濃度增高冠心病等心血管疾病發(fā)生的危險(xiǎn)性增高。影響TC水平的因素：(1)年齡與性別：新生兒TC很低，哺乳后很快接近成人水平，之后常隨年齡而上升，但到70歲后不再上升甚或有所下降。中青年期女性低于男性，女性絕經(jīng)后TC水平較同年齡男性高。(2)飲食習(xí)慣：長(zhǎng)期高膽固醇、高飽和脂肪酸攝入可造成TC升高。⑶種族：黑人的總膽固醇水平要高于白人。⑷遺傳因素。評(píng)價(jià)

在終點(diǎn)法中血紅蛋白高于2g/L，引起正干擾；膽紅素高于0.1g/L，明顯負(fù)相關(guān)；血維生素C,甲基多巴胺濃度高于治療水平，會(huì)導(dǎo)致加工偏低。但速率法中上述干擾影響較小，高TG血癥無明顯影響。總脂質(zhì)（totallipids）主要包括FC、CE、PL和TG等。所采用的測(cè)定方法不同，正常參考值有一定的差異。（測(cè)定方法）脂質(zhì)抽提法和直接測(cè)定法（參考范圍）成人4.0～7.5g/L；兒童3.0～6.0g/L.⒈利用甲醇或乙醇使其與蛋白結(jié)合的脂質(zhì)分離，再利用甲醇或乙醇的非極性有機(jī)溶媒使脂質(zhì)溶于其中。Bloor溶劑（醚：醇為1：3，V/V）或FovCh溶劑（氯仿：甲醇為2：1，v/V）的醚氯仿等非極性溶劑的混合液，可提高切斷脂質(zhì)與蛋白質(zhì)的結(jié)合的能力，達(dá)到抽提的目的。血清脂質(zhì)抽提入有機(jī)溶液后，蒸發(fā)干固，除去有機(jī)溶液，通過加熱氧化，再顯色定量。⒉脂質(zhì)直接測(cè)定法如Sulfo-phospho-Vanillin法是加濃硫酸入血清加熱，冷卻后，加試劑顯色（即SPV反應(yīng)）直接測(cè)定出血清總脂質(zhì)?！九R床意義】1升高：高脂血癥、動(dòng)脈粥樣硬化、糖尿病、糖原貯積病、腎小球腎炎、腎病綜合征、甲狀腺功能減退、高血壓等。2降低：甲狀腺功能亢進(jìn)癥、急性肝炎、肝硬化、惡病質(zhì)、吸收不良綜合征等?！驹u(píng)價(jià)】1.正常情況下，血總脂一般隨年齡增加而升高，40歲以上者顯著增加，65～70歲者反而降低；2．血清總脂質(zhì)測(cè)定除作為脂質(zhì)代謝紊亂及有關(guān)疾患的協(xié)助診斷，還可用于血總脂增加的原發(fā)性膽汁酸肝硬化、腎病綜合征等的嚴(yán)重肝實(shí)質(zhì)性損害、惡病質(zhì)、甲狀腺功能亢進(jìn)和吸收不良綜合征等疾患的協(xié)助診斷。二、甘油三酯(triglyceride,TG)基本操作步驟包括：①抽提分離（有機(jī)溶劑），去除干擾物—PL、FG等（吸附劑）或分溶抽提；②皂化使TG水解生成甘油；氧化甘油氧化成甲醛；④顯色定量甲醛。

A.甲醛與變色酸在硫酸溶液中加熱產(chǎn)生紫紅色（Eegriwe反應(yīng)），570nm測(cè)定吸光度。

B.甲醛與乙酰丙酮在銨離子存在下加熱生成黃色的產(chǎn)物（Hantgsch反應(yīng)），412nm測(cè)定吸光度。2．甘油三酯酶法測(cè)定評(píng)價(jià)：操作簡(jiǎn)便，快速準(zhǔn)確，并能在自動(dòng)化生物化學(xué)分析儀上進(jìn)行批量測(cè)定。

TG參考范圍與臨床意義血清TG參考范圍：目前《中國(guó)成人血脂異常防治指南》仍沿用1997年《血脂異常防治建議》的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定我國(guó)成人TG水平：在1.7mmol/L（150mg/dl）以下為合適范圍；1.7～2.25mmol/L（150～199mg/dl）為邊緣升高；2.26mmol/L（200mg/dl）以上為升高。TG升高可見于家族性高TG血癥、家族性混合性高脂血癥、冠心病、動(dòng)脈粥樣硬化、糖尿病、腎病綜合癥、甲狀腺功能減退、膽道梗塞、糖原累積癥、妊娠、口服避孕藥、酗酒等。三、血漿脂蛋白測(cè)定（一）電泳法（二）超速離心法（三）脂蛋白膽固醇測(cè)定1．沉淀分離法

2．均相測(cè)定法

3．間接法（四）Lp(a)測(cè)定二、血漿脂蛋白測(cè)定

（一）電泳分離法原理：根據(jù)血漿脂蛋白電泳遷移率不同予以判斷確認(rèn)。方法：（1）預(yù)染、電泳:如蘇丹黑B等預(yù)染后電泳；（2）掃描、計(jì)算：置于光密度計(jì)內(nèi)進(jìn)行掃描，計(jì)算出各種脂蛋白的百分比。電泳支持物一般常用醋酸纖維薄膜、瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠。脂蛋白電泳分型【測(cè)定方法】瓊脂糖凝膠電泳【參考范圍】電泳法：α-脂蛋白占26%～45%，β-脂蛋白占43%～58%，前β-脂蛋白占6%～22%?！九R床意義】用于高脂蛋白血癥的診斷分型的參考（二）超速離心分離純化法操作方法：將血漿置于密度梯度的鹽溶媒介質(zhì)中，在強(qiáng)大離心力作用下，各脂蛋白分散于離心管中的密度梯度溶媒層，達(dá)到分離純化的目的。超速離心法是分離純化脂蛋白的有效技術(shù),目前廣泛應(yīng)用于脂蛋白、載脂蛋白代謝的研究中。

（三）血漿脂蛋白膽固醇測(cè)定脂蛋白中膽固醇含量較為穩(wěn)定，因此目前以測(cè)定脂蛋白中膽固醇總量的方法作為脂蛋白的定量依據(jù)。高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C)低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-C)極低密度脂蛋白-膽固醇(VLDL-C)高密度脂蛋白膽固醇(HighDensityLipopmteincholesterol,HDL-C)高密度脂蛋白是血清中顆粒最小密度最大的一組脂蛋白,被視為人體內(nèi)具有抗動(dòng)脈粥樣硬化的脂蛋白，同時(shí)大量的流行病資料表明，血清HDL-C水平與冠心病發(fā)病成負(fù)相關(guān),因而HDL-C被稱為“好的膽固醇”。【測(cè)定方法】勻相測(cè)定法。勻相測(cè)定法

血漿高密度脂蛋白膽固醇測(cè)定

原理：CM、VLDL、LDL在多聚陰離子存在下與試劑Ⅰ發(fā)生凝集形成遮避圈，抑制其表面的游離膽固醇反應(yīng)或試劑Ⅰ與CM、VLDL、LDL中的膽固醇反應(yīng)生成H2O2，并將H2O2清除；試劑Ⅱ與HDL形成可溶性復(fù)合體，使HDL中的膽固醇直接與酶試劑反應(yīng)。過氧化物酶清除法測(cè)定HDL-C在血清中加入試劑Ⅰ，在反應(yīng)促進(jìn)劑（合成的多聚物/表面活性劑）的作用下，血清中CM、VLDL及LDL與試劑形成可溶性復(fù)合物，其表層的FC在CHOD的催化下反應(yīng)生成H2O2，H2O2在POD的作用下被清除。加入試劑Ⅱ，與HDL顆粒成為可溶性復(fù)合物，HDL中的膽固醇與膽固醇酯酶、膽固醇氧化酶反應(yīng)，生成H2O2，并作用于色原體產(chǎn)生顏色反應(yīng)，其顏色的深淺與HDL-C的含量成正比?！緟⒖挤秶縃DL-C合適范圍為>1.04mmol/L（40mg/dl）--1.55mmol/L（60mg/dl）1.55mmol/L（60mg/dl）以上為升高1.04mmol/L（40m/dl）以下為降低【臨床意義】隨著HDL-C水平降低，缺血性心血管病發(fā)病危險(xiǎn)增加，HDL-C＜1.04mmol/L的人群與HDL-C≥1.55mmol/L的人群相比，缺血性心血管病危險(xiǎn)增加50%?！驹u(píng)價(jià)】影響血漿（清）HDL-C水平的因素很多，主要有①年齡和性別②種族③飲食④肥胖⑤飲酒與吸煙⑥運(yùn)動(dòng)⑦藥物⑧疾病低密度脂蛋白膽固醇（LowDensityLipoproteincholesterol,LDL-C）【原理】參考方法為超速離心法。可供選擇的方法：表面活性劑清除法(SUR法)，過氧化氫酶清除法(CAT法)，杯芳烴法(CAL法)，可溶性反應(yīng)法(SOL法)和保護(hù)性試劑法(PRO法)【參考范圍】合適范圍為<3.37mmol/L（130mg/dl）邊緣升高（危險(xiǎn)閾值）為3.37~4.12mmol/L升高為>4.14mmol/L。NCEPATPⅢ：高脂血癥患者血LDL-C的治療目標(biāo)值定為2.6mmol/L（100mg/dl）沉淀分離法原理：脂蛋白的組成及理化性質(zhì)不同，在不同的聚陰離子、2價(jià)金屬離子(Mn2+，Mg2+、Ca2+、Ni2+、Co2+)及不同pH值條件下，使脂蛋白與聚陰離子結(jié)合形成復(fù)合物沉淀，以達(dá)到分離定量各種脂蛋白的目的。方法：

聚乙烯硫酸鹽沉淀LDL，離心去上清液留沉淀。再定量沉淀其中的LDL-C，即血漿的LDL量。評(píng)價(jià)：操作簡(jiǎn)單，無需昂貴的儀器，是臨床應(yīng)用的檢測(cè)方法。

（2）血漿LDL-C測(cè)定——表面活性劑清除法SUR法檢測(cè)原理：試劑Ⅰ中的表面活性劑1能改變LDL以外的脂蛋白（HDL、CM和VLDL等）結(jié)構(gòu)并解離，所釋放出來的微?；懝檀挤肿优c膽固醇酶試劑反應(yīng)，產(chǎn)生的H2O2在缺乏偶聯(lián)劑時(shí)被消耗而不顯色；加試劑Ⅱ，表面活性劑2使LDL顆粒解離釋放膽固醇，參與Trinder反應(yīng)而顯色，色澤深淺與LDL-C量呈比例?！九R床意義】LDL-C水平與缺血性心血管病發(fā)生相對(duì)危險(xiǎn)及絕對(duì)危險(xiǎn)上升趨勢(shì)及程度與TC相似。LDL-C水平增高見于家族性高膽固醇血癥（TC增高，LDL-C增高，伴有HDL-C減低），Ⅱa型高脂蛋白血癥（TC增高，LDL-C增高，TG正常或輕度增高）?！驹u(píng)價(jià)】和HDL測(cè)定相同，高脂血癥對(duì)LDL檢測(cè)可產(chǎn)生干擾。生理?xiàng)l件下LDL-C水平隨年齡增高而上升，青年與中年男性高于女性，老年前期與老年期女性高于男性。小而密低密度脂蛋白（smallDense

lowdensitylipoprotein，sdLDL）【測(cè)定方法】密度梯度超速離心；梯度凝膠電泳；肝素-鎂沉淀法臨床上常將高TG、低HDL-C及sdLDL增多三者同時(shí)存在合稱為致動(dòng)脈粥樣硬化脂蛋白表型或脂質(zhì)三聯(lián)癥。sdLDL-C∝AS

sdLDL-C水平是冠心病患者檢測(cè)代謝綜合征的有效指標(biāo)脂蛋白（a）（Lp（a）【測(cè)定方法】免疫濁度法和ELISA【參考范圍】健康成人血清Lp（a）<300mg/L【臨床意義】1.生理性改變一般認(rèn)為L(zhǎng)p（a）對(duì)同一個(gè)體相當(dāng)恒定，但個(gè)體間差異很大，波動(dòng)范圍在0～1.0mg/L。Lp（a）水平高低主要有遺傳因素決定，基本不受性別、年齡、飲食、營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境影響；2.病理性增高缺血性心腦血管疾病、心肌梗死、外科手術(shù)、急性創(chuàng)傷、急性炎癥、糖尿病腎病等3.病理性減低肝臟疾?。愿窝壮猓┤?、載脂蛋白測(cè)定血清載脂蛋白(Apo)包括ApoAI、AⅡ、B100、CⅡ、CⅢ、E和(a)，已屬常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目。血清中載脂蛋白均結(jié)合于脂蛋白中，測(cè)定時(shí)要加用解鏈劑，使脂蛋白中Apo暴露再進(jìn)行測(cè)定。目前測(cè)定血清中載脂蛋白的含量的方法是利用相應(yīng)特異抗體試劑進(jìn)行測(cè)定?，F(xiàn)有羊抗人ApoAI、AⅡ、B100、CⅡ、CⅢ、E和(a)等抗體試劑。測(cè)定原理是將某一特異抗體加到待測(cè)人血清中，即與血清中相應(yīng)抗原形成抗原抗體復(fù)合物，根據(jù)復(fù)合物的量，即可測(cè)出血清中某一Apo含量。ApoAⅠ

檢測(cè)方法：決定性方法：氨基酸分析，

常規(guī)方法：免疫投射比濁法

血清ApoAⅠ參考范圍：成人1.20~1.60g/LApoAⅠ的含量不一定與HDL-C成比例，同時(shí)測(cè)定ApoAⅠ與HDL-C對(duì)病理發(fā)生狀態(tài)的分析更有幫助。ApoAⅠ降低主要見于Ⅰ型和Ⅱa型高脂蛋白血癥、冠心病、腦血管病、感染、血液透析、慢性腎炎、吸煙、糖尿病、藥物治療、膽汁郁積阻塞、慢性肝炎、肝硬化等。ApoAⅠ升高主要見于妊娠、雌激素療法、鍛煉、飲酒等。ApoB

檢測(cè)方法：

常規(guī)方法：免疫投射比濁法

血清ApoB參考范圍：成人0.80-1.20g/L。危險(xiǎn)水平臨界值：1.00-1.10g/L流行病學(xué)與臨床研究已確認(rèn)，ApoB增高是冠心病危險(xiǎn)因素。ApoB升高主要見于冠心病、Ⅱa和Ⅱb型高脂蛋白血癥、腦血管病、糖尿病、妊娠、膽汁梗阻、脂肪肝、吸煙、血液透析、腎病綜合癥、慢性腎炎等。ApoB降低主要見于Ⅰ型高脂血癥、雌激素療法、肝硬化、藥物療法及感染等。四、ApoB/ApoA-I、TC／HDL-C、Tg/HDL-C、LDL-C/HDL-C比值研究發(fā)現(xiàn)：TC／HDL-C比值比非HDL-C更能預(yù)示冠心病的危險(xiǎn)。Tg/HDL-C比值有效測(cè)量血脂異常、高血壓和代謝綜合征TC／HDL-C、Tg/HDL-C、ApoB/ApoA-I、LDL-C/HDLC比值可能比單項(xiàng)血脂檢測(cè)更具臨床意義，而ApoB/poB/ApoA-I可能是其中最具說服力的指標(biāo)。五、磷脂（phospholipid、，PL）測(cè)定血清中PL包括：①磷酯酰膽堿（70%～75%）和鞘磷脂18%～20%）；②磷脂酰絲氨酸和磷脂酰乙醇胺等（3%～6%）；③溶血卵磷脂（4%～9%）?！緶y(cè)定方法】分兩大類：無機(jī)磷化學(xué)法酶法，以酶法廣泛應(yīng)用于臨床自動(dòng)化檢測(cè)。（四）磷脂測(cè)定1．化學(xué)測(cè)定法①抽提分離；②灰化；顯色、比色。2．酶測(cè)定法可分別利用磷脂酶A、B、C、D等4種酶作用，水解，測(cè)定其產(chǎn)物，對(duì)PL進(jìn)行定量，多采用磷脂酶D(PL-D)。PL-D可作用于含有卵磷脂、溶血卵磷脂和鞘磷脂以及含膽堿的磷脂，這三種磷脂約占血清總磷脂的95％。該法快速準(zhǔn)確，便于自動(dòng)化儀器進(jìn)行批量檢測(cè)?！緟⒖挤秶?.3～3.2mmol/L【臨床意義】1.血清磷脂與膽固醇密切相關(guān)，二者多成平行變動(dòng)；2.磷脂增高常見于膽汁淤滯（可能與富含磷脂成分的Lp-x增高有關(guān)）、原發(fā)性膽汁淤積性肝硬化、高脂血癥、脂肪肝、LCAT缺乏癥、腎病綜合征等時(shí)；3.磷脂及其主要成分的檢測(cè)，對(duì)未成熟兒（胎兒）繼發(fā)性呼吸窘迫綜合征出現(xiàn)的診斷有重要意義。六、游離脂肪酸（freefattyacid，F(xiàn)FA）測(cè)定臨床上將C10以上的脂肪酸稱為FFA【測(cè)定方法】酶法和非酶法，0.4～0.9mmol/L；兒童和肥胖成人稍高正常人血漿中存在LPL，可使FFA升高，因此采血后應(yīng)注意在4℃條件下分離血清并盡快進(jìn)行測(cè)定；肝素可使FFA升高，故不可在肝素治療時(shí)（后）采血，也不可利用抗凝血作FFA測(cè)定；不能立即檢測(cè)時(shí)，標(biāo)本應(yīng)冷凍保存。FFA測(cè)定標(biāo)本：在4℃條件下分離血清并進(jìn)行測(cè)定。血清FFA測(cè)定方法：

1．非酶法測(cè)定非酶法測(cè)定包括滴定法、比色法、原子吸收分光光度法和高效液相層析法。前三種方法準(zhǔn)確性差，高效液相層析法儀器太昂貴，不便于批量操作。

2．酶法測(cè)定血清中主要用脂肪酶測(cè)定。可分別測(cè)定產(chǎn)物乙酰CoA，進(jìn)行定量。酶法測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠快速，易于批量檢測(cè)?！緟⒖挤秶?.4～0.9mmol/L；兒童和肥胖成人稍高【臨床意義】1.生理性改變饑餓、運(yùn)動(dòng)、情緒激動(dòng)時(shí)；飯后及用葡萄糖后可使FFA降低，故FFA檢測(cè)時(shí)必須注意各種影響因素，以早晨空腹安靜狀態(tài)下采血為宜；2.病理性升高甲亢；未經(jīng)治療的糖尿病人（可高達(dá)1.5mmol/L）；注射腎上腺素或去甲腎上腺素及生長(zhǎng)激素后；任何能使體內(nèi)激素水平升高的疾病；藥物等；3.病理性降低用胰島素或葡萄糖后的短時(shí)間內(nèi)、某些藥物如阿司匹林、安妥明、尼克酸和心得安等【評(píng)價(jià)】

FFA水平易受各種因素影響，應(yīng)動(dòng)態(tài)觀察。七、過氧化脂質(zhì)（lipidperoxideperoxide，LPO）測(cè)定LPO：氧自由基與多聚不飽和脂肪酸反應(yīng)的產(chǎn)物。正常情況下,LPO的含量極低,但病理情況下,脂質(zhì)過氧化反應(yīng)增強(qiáng)可導(dǎo)致LPO升高，從而對(duì)細(xì)胞及胞膜的結(jié)構(gòu)和功能造成種種損傷?！緶y(cè)定方法】熒光法、比色法【參考范圍】熒光法：2～4μmol/L比色法：男性：4.14±0.78μmol/L女性：3.97±0.77μmol/L【臨床意義】1.生理性升高血漿（清）LPO水平有隨年齡增高而增加的趨勢(shì)；男性和女性的差異不明顯；2.病理性增高肝疾患如急性肝炎、肝硬化等；糖尿病；動(dòng)脈硬化，腦梗死，心肌梗死和高脂血癥；腎臟疾病如慢性腎炎和腎功能不全；惡性腫瘤；骨質(zhì)疏松癥等。脂蛋白-X是在阻塞性黃疸時(shí)出現(xiàn)的一種特殊的脂蛋白，存在于低密度脂蛋白中，其生成可能與膽汁中的磷脂反流有關(guān)。。八、脂蛋白-x(lipoprotein–x，Lp-x)測(cè)定八、脂蛋白-x(lipoprotein–x，Lp-x)測(cè)定【測(cè)定方法】電泳法，抽提和比濁法等【臨床意義】1.LP-X是膽汁淤積的敏銳而特異的生化學(xué)指標(biāo)，優(yōu)于總膽紅素、堿性磷酸酶和γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶；2.其含量與膽汁淤積程度相關(guān)，可用于鑒別阻塞類型；3.LP-X有抗動(dòng)脈粥樣硬化的功能，可能會(huì)降低動(dòng)脈粥樣硬化的風(fēng)險(xiǎn)?！驹u(píng)價(jià)】測(cè)定LP-X的標(biāo)本不宜存放，采集送檢后應(yīng)立即測(cè)定，因?yàn)檠褐泻辛姿狨ッ改芊纸釲P-X，會(huì)使測(cè)定結(jié)果減低。血漿脂代謝相關(guān)酶的測(cè)定脂蛋白脂肪酶（LPL）按每公斤體重10單位的肝素量靜脈注射，10分鐘后采集脂代謝測(cè)定LPL活性。

LPL測(cè)定方法有：①酶法，將血漿用SDS或抗體抑制HTGL活性，以LPL催化的底物減少量進(jìn)行定量；②LPL單克隆抗體的酶免疫分析法。

LPL成人參考值：在150mg/L以上；低于40mg/L，屬于LPL純合子缺乏者；40～150mg/L屬雜合子缺乏者。九、卵磷脂膽固醇酯酰轉(zhuǎn)移酶（LCAT））測(cè)定【測(cè)定方法】酶法，放射免疫分析法?！緟⒖挤秶?.放射免疫分析法(RIA)5.19～7.05mg/L2.共通基質(zhì)法(37℃)262～502U/L3.核素標(biāo)記自身基質(zhì)法58～79U/L【臨床意義】1.病理性降低急性肝炎、重癥肝炎、先天性卵磷脂膽固醇?；D(zhuǎn)移酶缺乏癥、無β-脂蛋白(β-LP)血癥、Tangier病、低膽固醇血癥、吸收不良綜合癥等；2.病理性升高原發(fā)性高脂血癥、脂肪肝、膽汁淤積癥初期、腎病綜合癥。十一、脂肪酸結(jié)合蛋白（fattyacidbindingproteins，F(xiàn)ABPs）能可逆地與飽和及不飽和長(zhǎng)鏈肪酸花生四烯酸和其他脂類九種FABPs【臨床意義】近年來研究發(fā)現(xiàn)血清H-FABP可能作為新型的心臟疾病的標(biāo)志物，敏感性和特異性高，可協(xié)助臨床上急性心肌梗死早期診斷L-FABP與一些代謝性疾病及腎損傷相關(guān)，尿液L-FABP在腎臟疾病的早期診斷中顯示一定優(yōu)勢(shì)。A-FABP在血清中的水平與代謝綜合征、動(dòng)脈粥樣硬化等密切相關(guān)?！驹u(píng)價(jià)】在心臟疾病的早期診斷中H-FABP優(yōu)于CK-MB、肌鈣蛋白等檢測(cè)項(xiàng)目；尿L-FABP對(duì)早期診斷急性腎小管方面優(yōu)于傳統(tǒng)項(xiàng)目尿素氮。十二、其他檢測(cè)近年來，為了更好的反映脂質(zhì)代謝狀況，出現(xiàn)了以下一些新的檢測(cè)指標(biāo)：非高密度脂蛋白膽固醇（non-highdensitylipopmteincholesterol,非HDL-cholesterol,HDLC）脂蛋白殘粒（remnantlipoprotein，RLP）小而密低密度脂蛋白（smallDenselowdensitylipoprotein，sdLDL）血清脂蛋白譜致動(dòng)脈粥樣硬化脂蛋白譜apoB/apoA-I、TC／HDL-C、Tg/HDL-C、LDL-C/HDL-C比值血漿靜置實(shí)驗(yàn)可作為高脂血癥的一種初篩實(shí)驗(yàn)。臨床常規(guī)血脂測(cè)定：TC、TG、HDL-C及LDL-C這四項(xiàng)，有條件的實(shí)驗(yàn)室可測(cè)定ApoAⅠ、ApoB及Lp(a)。特殊檢查項(xiàng)目，如Apo（AⅡ、CⅠ、CⅡ、CⅢ和E）、FFA、CETP、LPL、LCAT測(cè)定等，多用于科研或臨床特殊病例研究。四、脂質(zhì)檢測(cè)在健康體檢中的應(yīng)用原

則及作用四、脂質(zhì)檢測(cè)在健康體檢中的應(yīng)用原

則及作用建議20歲以上的成年人至少每5年測(cè)量1次空腹血脂，包括TC、LDL－C、HDL-C和TG測(cè)定。對(duì)于缺血性心血管病及其高危人群，則應(yīng)每3～6個(gè)月測(cè)定1次血脂。對(duì)于因缺血性心血管病住院治療的患者應(yīng)在入院時(shí)或24h內(nèi)檢測(cè)血脂。臨床出現(xiàn)高胰島素血癥高TG血癥低HDL-C血癥高血壓等四要素同時(shí)出現(xiàn)稱為代謝綜合征又稱為高脂血癥并發(fā)癥或綜合征X等代謝綜合征

上半身肥胖糖耐量異常高脂肪血癥高血壓等

為重癥四重奏(deadlyquartet)或致命四重奏Kaplan等提出致命四重奏Kaplan等提出:

上半身肥胖糖耐量異常高脂肪血癥高血壓稱為重癥四重奏

(deadlyquartet)

相互作用、相互促進(jìn)，可加快AS的形成

單獨(dú)從某一個(gè)因素來考慮則無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

２００５年，國(guó)際糖尿病聯(lián)盟（IDF）

在綜合了來自世界六大洲專家意見的基礎(chǔ)頒布新的代謝綜合征工作定義，這是國(guó)際學(xué)術(shù)界第一個(gè)代謝綜合征的全球統(tǒng)一定義。IDF新診斷指標(biāo)強(qiáng)調(diào)中心性肥胖為基本

（以腰圍進(jìn)行判斷）

代謝綜合征應(yīng)作為降低冠心病危險(xiǎn)性治療

二級(jí)目標(biāo)處理以下四項(xiàng)指標(biāo)中任兩項(xiàng)：

(1)TG水平升高：

＞150mg/dl(1.7mmol/L)或已接受相應(yīng)治療(2)低HDL-C水平降低：

男性＜40mg/dl(0.9mmol/L)

女性＜50mg/dl(1.1mmol/L)

或已接受相應(yīng)治療

(3)空腹血糖升高：

空腹血糖≥100mg/dl(5.6mmol/L)，或已接

受相應(yīng)治療或此前已診斷２型糖尿病(4)血壓升高：

收縮壓130mmHg

或舒張壓≥85mmHg

或已接受相應(yīng)治療或此前已診斷高血壓2015中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病學(xué)分會(huì)建議的診斷標(biāo)準(zhǔn)超重和（或）肥胖BMI≥25。高血糖空腹血糖（FPG）≥6.1mmol/L（110mg/dl）和（或）2hPG≥7.8mmol/L（140mg/dl），和（或）已確診糖尿病并治療者。高血壓收縮壓/舒張壓≥140/90mmHg，和（或）已確診高血壓并治療者。血脂紊亂空腹血甘油三酯≥1.7mmol/L（150mg/dl），和（或）空腹血HDL-C<0.9mmol/L（35mg/dl）（男），<1.0mmol/L（39mg/dl）（女）。具備以上4項(xiàng)組成成分中的3項(xiàng)或全部者可確診為代謝綜合征2002年全民膽固醇教育計(jì)劃

(NCEP)ATPIII

提出代謝綜合征的診斷標(biāo)準(zhǔn)

符合以下3個(gè)或3個(gè)以上：①中心性肥胖男性腰圍>102cm（美國(guó)）

女性腰圍>88cm②高甘油三酯≥150mg/dL（1.69mmol/L)③低HDL-C男性<40mg/dL（1.04mmol/L)

女性<50mg/dL(1.29mmol/L)④空腹血糖≥110mg/dL(6.1mmol/L)⑤高血壓≥130/85mmHg

2004年中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病學(xué)會(huì)

提出了中國(guó)人代謝綜合征診斷標(biāo)準(zhǔn)

(CDS標(biāo)淮)為以下5項(xiàng)具備3項(xiàng)者：①男性腰圍≥90cm;女性腰圍≥80cm

（中國(guó)健康人群腰圍范圍尚無公認(rèn))②血壓：SBP≥130mmHg

和/或DBP≥85mmHg；③血清甘油三酯：≥150mg/dL；④高密度脂蛋白膽固醇：<40mg/dL；⑤空腹血糖：≥110mg/dL。高脂血癥或高脂蛋白血癥是致AS的主要危險(xiǎn)因素；AS是一多危險(xiǎn)因素所致的慢性疾?。桓吣懝檀佳Y是缺血性心肌疾患等AS癥的獨(dú)立危險(xiǎn)因素；

通過:不良生活方式的改變

降脂減少體內(nèi)膽固醇合成等

降脂藥的使用

使急性心血管事件明顯減少

降低血TC、TG、LDL

升高血HDL

是防治AS性心腦血管疾病的重要措施。高脂蛋白血癥的預(yù)防和治療

中華心血管病學(xué)會(huì)于2007年制訂了我國(guó)“中國(guó)血脂異常防治指南”，其中:血脂危險(xiǎn)水平劃分標(biāo)準(zhǔn)和我國(guó)高脂血癥開始治療標(biāo)準(zhǔn)和治療目標(biāo)值劃分建議如表所示。高脂血癥的治療目標(biāo)值

(一)我國(guó)治療目標(biāo)值TCTGLDL-CHDL-C合適范圍<5.18≤1.70<3.37≥1.04臨界值邊緣5.18～6.191.70～2.253.37～4.12危險(xiǎn)閾值≥6.22>2.26≥4.14≥1.55血脂危險(xiǎn)水平劃分標(biāo)準(zhǔn)(mmol/L，2007)高脂血癥患者開