GB/T 21827-2008化學(xué)品皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗局部淋巴結(jié)方法

犐犆犛１３．３００；１１．１００

犃８０

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜２１８２７—２００８

化學(xué)品皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗

局部淋巴結(jié)方法

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（犔犔犖犃）

２００８０５１２發(fā)布２００８０９０１實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局

發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

書

中華人民共和國

國家標(biāo)準(zhǔn)

化學(xué)品皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗

局部淋巴結(jié)方法

ＧＢ／Ｔ２１８２７—２００８

中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

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開本８８０×１２３０１／１６印張０．５字?jǐn)?shù)１０千字

２００８年８月第一版２００８年８月第一次印刷

書號：１５５０６６·１３２５０２

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書

犌犅／犜２１８２７—２００８

前言

本標(biāo)準(zhǔn)等同采用經(jīng)濟合作與發(fā)展組織（ＯＥＣＤ）化學(xué)品測試指南Ｎｏ．４２９（２００２年）《皮膚變態(tài)反應(yīng)試

驗局部淋巴結(jié)法試驗》（英文版）。

本標(biāo)準(zhǔn)做了下列編輯性修改：

———增加了“范圍”一章；

———計量單位改為我國法定計量單位；

———刪除了ＯＥＣＤ的參考文獻(xiàn)部分。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國危險化學(xué)品管理標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會（ＳＡＣ／ＴＣ２５１）提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位：中國疾病預(yù)防控制中心職業(yè)衛(wèi)生與中毒控制所。

本標(biāo)準(zhǔn)參加起草單位：上海出入境檢驗檢疫局、寧波出入境檢驗檢疫局。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：劉清君、邱璐、孫金秀、史曉、馬中春。

Ⅰ

書

犌犅／犜２１８２７—２００８

犗犈犆犇引言

１．ＯＥＣＤ試驗指南立足從科學(xué)技術(shù)進(jìn)步和動物福利的角度，對檢測方法的建立和優(yōu)化進(jìn)行定期審

查，從而決定是否對現(xiàn)有的方法進(jìn)行更新或者建立新的方法指南?；诖四康?，一種新的方法，即利用

小鼠進(jìn)行的判斷皮膚變態(tài)反應(yīng)的方法———局部淋巴結(jié)法（ＬＬＮＡ）已經(jīng)得到充分的驗證并被接受成為新

的ＯＥＣＤ指南。它是目前公布的第二個評估化學(xué)品對皮膚致敏作用的動物試驗指南。另一個為利用

豚鼠進(jìn)行的最大反應(yīng)試驗和局部封閉涂皮試驗的指南。

２．ＬＬＮＡ的優(yōu)點是既體現(xiàn)了科學(xué)的進(jìn)步，又兼顧了動物福利的問題。它檢測的是皮膚變態(tài)反應(yīng)誘

導(dǎo)階段淋巴細(xì)胞的增殖，可以提供評估劑量反應(yīng)量化的數(shù)據(jù)。關(guān)于ＬＬＮＡ驗證過程以及相關(guān)工作的

綜述已經(jīng)發(fā)表。此外，值得注意的是，在豚鼠試驗中推薦使用的輕中強度的陽性對照致敏物，在ＬＬＮＡ

試驗中同樣適用。

３．ＬＬＮＡ是鑒別皮膚致敏化學(xué)品的可選擇的方法之一，它既可以識別皮膚致敏化學(xué)品，也能夠確

定那些沒有明顯皮膚致敏活性的化學(xué)品。當(dāng)然這不是說在所有的情況下ＬＬＮＡ都可以替代豚鼠試驗，

但這種方法具有一定的優(yōu)點，是變態(tài)反應(yīng)試驗可選擇的方法之一，通常也不需要對陽性和陰性結(jié)果再進(jìn)

一步確認(rèn)。

４．ＬＬＮＡ是一種體內(nèi)試驗，不可避免要使用一定量動物，但ＬＬＮＡ可以減少動物使用的數(shù)量，而

且優(yōu)化了動物接觸受試物的方法。ＬＬＮＡ是基于化學(xué)品刺激下致敏反應(yīng)的誘導(dǎo)階段建立的。與豚鼠

試驗不同，ＬＬＮＡ不需要激發(fā)皮膚的超敏反應(yīng)；而且也不需要豚鼠試驗中的最大反應(yīng)，因此不使用佐

劑，這樣就減少了動物的痛苦。雖然ＬＬＮＡ比傳統(tǒng)豚鼠試驗具有這些優(yōu)點，但同時必須認(rèn)識到ＬＬＮＡ

也有一定的缺陷（如：在某些金屬物質(zhì)的試驗中發(fā)現(xiàn)假陰性的結(jié)果，在某些皮膚刺激物試驗中出現(xiàn)假陽

性結(jié)果），這時必須進(jìn)行傳統(tǒng)的豚鼠試驗。

Ⅱ

犌犅／犜２１８２７—２００８

化學(xué)品皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗

局部淋巴結(jié)方法

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗———局部淋巴結(jié)法的范圍、試驗基本原則、試驗方法、試驗數(shù)據(jù)和

報告。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于檢測化學(xué)品致皮膚變態(tài)反應(yīng)作用，即檢測皮膚變態(tài)反應(yīng)誘導(dǎo)階段淋巴細(xì)胞增殖的反

應(yīng)，可以提供評估劑量反應(yīng)的量化數(shù)據(jù)。

２試驗基本原則

ＬＬＮＡ的基本原則是致敏化學(xué)品在暴露后，能夠誘導(dǎo)染毒部位的引流淋巴結(jié)內(nèi)淋巴細(xì)胞的增殖。

增殖反應(yīng)與化學(xué)品的劑量（和致敏原的致敏力）成比例，因此可以通過簡單的方法獲得客觀、定量的致敏

試驗數(shù)據(jù)。ＬＬＮＡ通過比較受試樣品試驗組與溶劑對照組增殖的劑量反應(yīng)關(guān)系來評估增殖狀況。對

受試樣品試驗組與溶劑對照組的增殖比率即刺激指數(shù)（犛犐）進(jìn)行比較，當(dāng)該指數(shù)大于等于３時受試樣品

才能作為潛在皮膚致敏物進(jìn)行進(jìn)一步評估。

本文所述ＬＬＮＡ法是通過放射標(biāo)記檢測細(xì)胞增殖。也可以使用其他的毒性終點的檢測手段評價

細(xì)胞的增殖，但必須提供充足的理由和科學(xué)依據(jù)，包括完全引用和方法學(xué)的描述。

３試驗方法

３．１受試物

受試樣品可以是液態(tài)、固體和顆粒狀。

賦形劑應(yīng)在考慮最大試驗濃度和可溶性的基礎(chǔ)