配制溶液的一般實驗步驟

配制溶液的一般實驗步驟配制溶液步驟因配置的溶液不同而有所不同，現(xiàn)舉兩個例子：舉例1：配置0.05mol/L，400mLNaOH 溶液的步驟：要準(zhǔn)確配置氫氧化鈉的濃度，則要用容量瓶定容，實驗室沒有400毫升的容量瓶，則選用 500毫升的容量瓶。1.計算需要氫氧化鈉的質(zhì)量： 克2.稱1.000克氫氧化鈉于燒杯中，加少量水溶解，然后倒入500毫升容量瓶里，分 3次洗燒杯，將溶液全部倒入容量瓶里，最后用水稀釋至刻度線，搖勻，即，得到 0.05mol/L的氫氧化鈉溶液。如果不需要很準(zhǔn)確的話，可以直接用量筒量 400毫升，稱的時候只要稱 0.8克就可以了。 舉例2：配置 1.5mol/L 的稀硫酸200mL步驟：第1步：計算：根據(jù)C1V1=C2V2，計算需要濃硫酸的體積；第2步：量取，利用刻度吸管吸取需要濃硫酸的體積；第3步：稀釋，將濃硫酸轉(zhuǎn)移到小燒杯中，加少量水稀釋；第4步：轉(zhuǎn)移,待溶液溫度降低后，將燒杯中的硫酸轉(zhuǎn)移到200mL容量瓶中；第5步：洗滌，洗滌小燒杯，和轉(zhuǎn)移的時候用到的玻璃棒，至少三次，將洗滌的水一并轉(zhuǎn)移到容量瓶中；第6步：定容，加水定容到刻度線，在距離刻度線一厘米左右改用膠頭滴管定容；第7步：搖勻,將溶液搖勻,如果液面下降也不可再加水定容；第8步：將配得的溶液轉(zhuǎn)移至試劑瓶中，貼好標(biāo)簽； 舉例3：配制500mL，0.1mol/L碳酸鈉溶液步驟及注意事項 所需的儀器：燒杯、容量瓶、玻璃棒、膠頭滴管、分析天平、藥匙、量筒步驟： 第一步：計算：所需碳酸鈉的質(zhì)量=0.5*0.1*106=5.3克；第二步：稱量：在天平上稱量5.3克碳酸鈉固體，并將它倒入小燒杯中； 第三步：溶解：在盛有碳酸鈉固體的小燒杯中加入適量蒸餾水，用玻璃棒攪拌，使其溶解； 第四步：移液：將溶液沿玻璃棒注入 500mL容量瓶中； 第五步：洗滌：用蒸餾水洗燒杯 2～3次，并倒入容量瓶中； 第六步：定容：倒水至刻度線 1～2cm處改用膠頭滴管滴到與凹液面平直； 第七步：搖勻：蓋好瓶塞，上下顛倒、搖勻； 第八步：裝瓶、貼簽； 誤差分析： 固體藥品的稱量與液體藥品的量取是否準(zhǔn)確； 把溶液向容量瓶中轉(zhuǎn)移，溶液灑了； 未洗滌燒杯和玻璃棒； 用待配液潤洗了容量瓶； 定容時水加多了或加少了； 定容時未平視刻度線。仰視、俯視對溶液濃度有何影響？ ★俯視刻度線，實際加水量未到刻度線，使溶液的物質(zhì)的量濃度增大； ★仰視刻度線，實際加水量超過刻度線，使溶液的物質(zhì)的量濃度減小。市售鹽酸密度1.19，質(zhì)量分?jǐn)?shù)36%～38%以37%計算：步驟：1.計算：假若需要2mol/L的硫酸100mL，則需37%濃硫酸16.6mL；計算過程如下：假設(shè)鹽酸VmL：0.1L*2mol/L*36.5g/mol）/37%=V/1.19V=16.59mL,考慮到量筒的精確度0.1mL，故取16.6mL即可。2.量?。?6.6mL濃硫酸； 3.溶解：把 16.6mL濃硫酸倒入已經(jīng)加入蒸餾水的小燒杯中，用玻璃棒不斷攪拌。 4.轉(zhuǎn)移：待溶液冷卻后，將溶液沿玻璃棒倒入 100毫升的容量瓶中。 5.洗滌：再用少量蒸餾水洗滌燒杯和玻璃棒 2-3次，并將全部洗液移入容量瓶中。 6.定容：向容量瓶內(nèi)加蒸餾水，當(dāng)液面接近刻度線 1-2厘米處時，改用滴管滴加蒸餾水到一面恰好與刻度線相切。7.搖勻：塞上瓶塞，反復(fù)顛倒容量瓶數(shù)次，使瓶內(nèi)的溶液均勻，此時可以把溶液倒入到試劑瓶中貼標(biāo)簽保存。完成配制過程 容量瓶的使用六忌： 1.忌用容量瓶進(jìn)行溶解（體積不準(zhǔn)確） 2.忌直接往容量瓶倒液（灑到外面） 3.忌加水超過刻度線（濃度偏低） 4.忌讀數(shù)仰視或俯視（仰視濃度偏低，俯視濃度偏高） 5.忌不洗滌玻璃棒和燒杯（濃度偏低） 6.忌標(biāo)準(zhǔn)液存放于容量瓶 （容量瓶是量器， 不是容器） 1mol/L的氫氧化鈉溶液 250mL，完成下列步驟： ①用天平稱取氫氧化鈉固體/克。 ②將稱好的氫氧化鈉固體放入燒杯中加少量蒸餾水將其溶解，待完全溶解后將溶液沿玻璃棒移入250mL的容量瓶中。 ③用少量蒸餾水沖洗 2～3次，將沖洗液移入容量瓶中，在操作過程中不能損失點滴液體，否則會使溶液的濃度偏低。④向容量瓶內(nèi)加水至刻度線1～2cm時，改用膠頭滴管小心地加水至溶液凹液面與刻度線相切，若加水超過刻度線，會造成溶液濃度偏低應(yīng)該重新配制。⑤最后蓋好瓶蓋，搖勻，將配好的溶液移入試劑瓶中貼好標(biāo)簽。常用貯液與溶液1mol/L亞精胺（Spermidine ）：溶解2.55g亞精胺于足量的水中，使終體積為 10mL。分裝成小份貯存于 -20℃。1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使終體積為10mL。分裝成小份貯存于-20℃。10mol/L乙酸胺ammoniumacetate）：將77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔徑的濾膜過濾除菌。10mg/mL牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（組分V或分子生物學(xué)試劑級，無DNA酶）于9.5mL水中（為減少變性，須將蛋白加入水中，而不是將水加入蛋白），蓋好蓋后，輕輕搖動，直至牛血清蛋白完全溶解為止。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。1mol/L二硫蘇糖醇（DTT）：在二硫蘇糖醇5g的原裝瓶中加32.4mL水，分成小份貯存于-20℃，或轉(zhuǎn)移100mg的二硫蘇糖醇至微量離心管，加0.65mL的水配制成1mol/L二硫蘇糖醇溶液。8mol/L乙酸鉀（potassiumacetate）：溶解78.5g乙酸鉀于足量的水中，加水定容到100mL。1mol/L氯化鉀（KCl）：溶解7.46g氯化鉀于足量的水中，加水定容到 100mL。3mol/L乙酸鈉（sodiumacetate）：溶解40.8g的三水乙酸鈉于約90mL水中，用冰乙酸調(diào)溶液的 pH至5.2，再加水定容到100mL。0.5mol/LEDTA:配制等摩爾的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三鈉鹽?；蚍Q取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。1mol/LHEPES ：將23.8gHEPES 溶于約 90mL的水中，用NaOH調(diào)pH（6.8～8.2），然后用水定容至 100ml。1mol/LHCl：加8.6ml的濃鹽酸至91.4ml的水中。25mg/mlIPGT ：溶解250mg的IPGT（異丙基硫代-β-D-半乳糖苷）于10ml水中，分成小份貯存于-20℃。1mol/LMgCl2:溶解20.3gMgCl2·6H2O于足量的水中，定容到100mL。100mmol/LPMSF：溶解174mg的PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的異丙醇中， 定容到 10ml。分成小份并用鋁箔將裝液管包裹或貯存于-20℃。 20mg/mL 蛋白酶 K（proteinaseK）：將 200mg的蛋白酶 L加入到 9.5mL水中，輕輕搖動，直至蛋白酶 K完全溶解。不要渦旋混合。加水定容到 10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。10mg/mLR-nase （無D-Nase）（D-Nase－freeR-Nase）：溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1mL的10mmol/L的乙酸鈉水溶液中（pH5.0）。溶解后于水浴中煮沸15min，使DNA酶失活。用1mol/L的Tris－HCl調(diào)pH至7.5，于-20℃貯存。（配制過程中要戴手套） 5mol/L氯化鈉（NaCl）：溶解29.2g（NaOH

氯化鈉于足量的水中， 定容至100mL）：溶解400g氫氧化鈉顆粒于約 0.9L

。10N氫氧化鈉水的燒杯中（磁力攪拌器攪拌）

，氫氧化鈉完全溶解后用水定容至

1L

。10％SDS（十二烷基硫酸鈉） ：稱取100gSDS慢慢轉(zhuǎn)移到約含0.9L的水的燒杯中，用磁力攪拌器攪拌直至完全溶解。用水定容至1L。2mol/L山梨（糖）醇（Sorbitol）：溶解36.4g山梨（糖）醇于足量水中使終體積為 100mL。100％三氯乙酸（TCA）：在裝有 500gTCA的試劑瓶中加入 100mL水，用磁力攪拌器攪拌直至完全溶解。 （稀釋液應(yīng)在臨用前配制）2.5％X－gal（5-溴-4-氯-3-吲哚－β-