動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植

1、細(xì)胞全能性的定義？原因？2、植物組織培養(yǎng)的原理？基本流程？條件？培養(yǎng)基成分？3、脫分化、再分化的實質(zhì)？俞傷組織的特點？4、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的原理？去壁的方法？誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法？原生質(zhì)體融合的實質(zhì)？原生質(zhì)體融合完成的標(biāo)志？植物體細(xì)胞雜交技術(shù)完成的標(biāo)志？優(yōu)勢？5、植物繁殖的新途徑有？列舉微型繁殖、人工種子的優(yōu)點？如何使作物脫毒？6、作物新品種的培育包括？單倍體育種的流程？優(yōu)點？7、怎樣培育突變體？8、怎樣進(jìn)行細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)？動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)專題2動物細(xì)胞工程動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞融合生產(chǎn)單克隆抗體動物細(xì)胞核移植動物細(xì)胞工程常用技術(shù)其中動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)動物細(xì)胞培養(yǎng)1.動物細(xì)胞培養(yǎng)概念：從動物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個細(xì)胞,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長和增殖。2、原理：細(xì)胞增殖動物組織塊制成細(xì)胞懸液傳代培養(yǎng)胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞幼齡動物的器官組織或胚胎用胰蛋白酶等處理貼壁細(xì)胞適宜條件，原代培養(yǎng)3、動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，分裂旺盛，容易培養(yǎng)使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸，利于吸收營養(yǎng)，排出代謝廢物加入培養(yǎng)液細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)細(xì)胞生長特點：細(xì)胞貼壁、接觸抑制強(qiáng)調(diào)：動物細(xì)胞生長特性（一）：細(xì)胞貼壁：在懸液中分散的細(xì)胞貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿壁要求：表面光滑、無毒、易于貼附。接觸抑制：貼壁生長的細(xì)胞生長到表面相互接觸后，細(xì)胞停止分裂增殖（形成一個單層）。接觸抑制強(qiáng)調(diào)：動物細(xì)胞生長特性（二）：原代培養(yǎng)：動物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)：貼滿瓶壁的細(xì)胞，需要重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖。10-50代，增值緩慢，以至停止，部分細(xì)胞的細(xì)胞核型可能發(fā)生變化；50代以后，少部分細(xì)胞克服細(xì)胞壽命的自然極限，獲得不死性，即變?yōu)榘┘?xì)胞。強(qiáng)調(diào)：原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)總結(jié)：動物細(xì)胞培養(yǎng)過程胚胎或幼齡動物的組織、器官制成細(xì)胞懸液剪碎，用胰蛋白酶處理10代細(xì)胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)無限傳代單個細(xì)胞加培養(yǎng)液稀釋傳代10代以內(nèi)，遺傳物質(zhì)不改變，保持正常二倍體核型。傳代10-50代左右，增長緩慢以至于完全停止，部分細(xì)胞核型可能發(fā)生變化分瓶傳代培養(yǎng)培養(yǎng)細(xì)胞特點：細(xì)胞貼壁、接觸抑制50代后，少部分細(xì)胞獲得不死性，遺傳物質(zhì)已經(jīng)改變，等同于癌細(xì)胞。原代培養(yǎng)4、動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件:1）無菌無毒

的環(huán)境：

適宜的溫度：36.5±0.5℃適宜的酸堿度：PH：7.2-7.4液體合成培養(yǎng)基：葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等；通常還需加入血漿、血清等天然成分。4）氣體環(huán)境：2）營養(yǎng)：3）溫度和pH：“95％空氣+5％CO2”的混合氣體培養(yǎng)箱。氧氣是細(xì)胞代謝必須的；CO2維持培養(yǎng)液的PH首先對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具無菌處理；通常培養(yǎng)液中添加抗生素防止培養(yǎng)過程中污染；此外定期更換培養(yǎng)液以清除代謝產(chǎn)物，防止對培養(yǎng)細(xì)胞造成危害。5、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用（閱讀課本46-47頁）:1）生物制品的生產(chǎn)如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體2）基因工程技術(shù)中常用的受體細(xì)胞3）檢測有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性4）細(xì)胞的生理、藥理、病理研究

如用于篩選抗癌藥物

比較項目植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)原理培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)結(jié)果細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基蔗糖植物激素葡萄糖動物血清大量產(chǎn)生細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物獲得新個體或細(xì)胞產(chǎn)品1、動物細(xì)胞培養(yǎng)能否像植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個體？不能，動物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動物個體2、怎樣利用動物的細(xì)胞獲得完整的動物個體？動物細(xì)胞核移植想一想二、動物體細(xì)胞核移植技術(shù)

和克隆動物

將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中。使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。1、動物核移植：克?。褐笍囊粋€共同的祖先，通過無性繁殖的方式產(chǎn)生出來的一群遺傳特性相同的DNA分子，細(xì)胞或個體?？寺“ㄈ齻€層次

分子水平：如PCR擴(kuò)增DNA

細(xì)胞水平：如動物細(xì)胞培養(yǎng)

個體水平：如克隆動物1、動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有哪些？其中哪項技術(shù)是其他技術(shù)的基礎(chǔ)？2、動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理、過程？其中制成細(xì)胞懸液的目的？3、動物細(xì)胞生長的特性？4、原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)有什么區(qū)別？5、動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件？培養(yǎng)箱中加入5%的二氧化碳的目的是什么？6、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用？7、動物核移植的概念、原理？◆取供體細(xì)胞傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞.為什么？◆用的是減Ⅱ中期細(xì)胞，為什么？◆胚胎移植2、核移植流程供體：優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)奶牛受體：普通奶牛（卵母細(xì)胞的采集與培養(yǎng)）

1.體積大，易操作。2.含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)和營養(yǎng)條件。10代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型供體細(xì)胞（供核）細(xì)胞培養(yǎng)體細(xì)胞

卵巢卵母細(xì)胞（MⅡ中期：供質(zhì)）去核無核卵母細(xì)胞注入細(xì)胞融合重組細(xì)胞構(gòu)建重組胚胎胚胎移植代孕母體生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)基本相同的犢牛歸納:1.共分成兩大階段：核移植和胚胎移植2.生殖方式：無性生殖核移植過程3、你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動物，是對體細(xì)胞供體動物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎？為什么？不是。1）克隆動物的細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)來自于受體卵母細(xì)胞；2）生物的性狀不僅與遺傳物質(zhì)有關(guān)，還受環(huán)境影響3.體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景1、在畜牧業(yè)中可以加速家畜遺傳改良的進(jìn)程.2、保護(hù)瀕危物種.3、醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域生產(chǎn)醫(yī)用蛋白質(zhì)及組織器官的移植.4、了解胚胎發(fā)育和衰老過程；追蹤研究疾病的發(fā)展過程和治療疾病4、體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題

（閱讀課本50頁）成功率低動物幼體產(chǎn)出概率＜10％克隆動物存在著健康問題克隆動物的食品安全性問題存在爭議知識結(jié)構(gòu)

動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物核移植技術(shù)和克隆動物的概念體細(xì)胞核移植技術(shù)的過程體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題1、動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是A.動物細(xì)胞融合B.單克隆抗體C.胚胎移植D.動物細(xì)胞培養(yǎng)D2、用于動物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織，其主要原因是這