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文檔簡介
4.2比對分析序列比對(sequencealignment)指將兩個或多個序列排列在一起,標明其相似之處。序列中可以插入間隔(通常用短橫線“-”表示)。對應的相同或相似的符號(在核酸中是A,T或U,C,G,在蛋白質中是氨基酸殘基的單字母表示)排列在同一列上。序列比對常用于研究由共同祖先進化而來的序列,特別是如蛋白質序列或DNA序列等生物序列。在比對中,錯配與突變對應,而空位與插入或缺失對應。4.2.1
BLAST比對BLAST主頁http:///Blast.cgi各個序列比對的詳情4.2.2
雙序列比對舉例:RDGV基因組S8片段的中國廣西分離物(DQ364683)與泰國分離物(NC_009241)序列之間是否相關?1.打開bl2seq程序http:///Blast.cgi
2.提交序列3.參數(shù)設置4.比對結果序列比對的點矩陣示意圖目的序列參考序列比對信息4.2.3
多序列比對多序列比對(MutipleAlignment)軟件:ClustalX1.載入序列note:存儲的文件路徑及名稱不能含有中文。ClustalX載入序列界面2.參數(shù)設置雙序列比對參數(shù)設置3.完全比對完成比對輸出設置4.結果輸出比對完成界面5.結果解讀ClustalX比對文件窗口4.3基因結構識別ORF識別啟動子及轉錄因子結合位點分析重復序列分析CpGisland3′UTR區(qū)4.3.2
ORF識別及其可靠性驗證開放閱讀框(openreadingframe,ORF):從mRNA5端起始密碼子AUG到3端終止密碼子之間的核苷酸序列,各個三聯(lián)體密碼連續(xù)排列編碼一個蛋白質多肽鏈,稱為開放閱讀框。RDGVS8geneORFFinder主界面1.提交序列RDGVS8gene2.參數(shù)設置ORF識別網址:http:///projects/gorf/ORFFinder預測結果3.預測結果選取預測的ORF4.驗證參數(shù)設置BLASTP查詢界面5.結果解讀BLASTP比對結果總覽圖BLASTP比對結果描述4.3.2
啟動子及轉錄因子結合位點分析啟動子(promoter
):位于基因上游,與RNA聚合酶識別、結合并起始轉錄有關的DNA序列。轉錄因子(transcriptionalfactor,TF):能識別并結合啟動子核心序列,直接或間接參與轉錄起始復合體的形成的蛋白因子。PromoterScan界面啟動子預測網址:/molbio/proscan/Human78kdalton
glucose-regulated
protein
(GRP78)genePromoterScan預測結果啟動子閾值與該啟動子可能結合的轉錄因子考核操作題(四)在NCBI核酸數(shù)據庫中查找并下載AY999078、AY999077、AY216767三個基因cDNA序列,并進行如下操作(10分):
1.在命名為基因登錄號.txt的文件中,以FASTA格式分別保存上述三個基因cDNA序列;
2.對上述三個基因
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