藥物分析巴比妥類的分析(SYSH)

巴比妥類鎮(zhèn)靜催眠藥物的分析AnalysisofBarbiturates巴比妥類結(jié)構(gòu)性質(zhì)與鑒別特殊雜質(zhì)檢查含量測定體內(nèi)藥物分析10-1一、巴比妥類藥物的結(jié)構(gòu)剖析

InterpretationofChemicalStructure丙二酸脲素123456

三類：

5,5-二取代巴比妥類

1,5,5-三取代巴比妥類代表物見表10-1(P265.)

硫代巴比妥類巴比妥類10-2123456巴比妥類5,5-二取代巴比妥類

R1R2

巴比妥C2H5-

C2H5-

苯巴比妥C2H5-

戊巴比妥

C2H5-

異戊巴比妥

C2H5-

司可巴比妥

-C2H5-1,5,5-三取代巴比妥類

（少數(shù)）如：己瑣巴比妥硫代巴比妥類

硫噴妥鈉

5-3電離，弱酸性與金屬離子反應(yīng)氫活潑，與香草醛反應(yīng)UV，隨電離級數(shù)變化IR，巴比妥類結(jié)構(gòu)1.環(huán)狀母核部分（決定巴比妥類藥物的特性）：丙二酰脲（1,3-二酰亞胺基團(tuán)）堿性條件水解2.取代基部分（區(qū)別各種巴比妥類藥物）：苯環(huán)、不飽和鍵(烯丙基)、硫元素硫元素反應(yīng)碘、溴、高錳酸鉀反應(yīng)硝化、硫酸-亞硝酸鈉、甲醛-硫酸反應(yīng)5-4(一)性狀白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉未，具有固定的熔點(diǎn)?？諝庵蟹€(wěn)定，加熱多升華。游離巴比妥類藥物微溶或極微溶于水，易溶于乙醇及有機(jī)溶劑；其鈉鹽則易溶于水，而不溶于有機(jī)溶劑。二、性質(zhì)與鑒別 PropertiesandIdentification示例10-8

ChP中苯巴比妥鈉的熔點(diǎn)鑒別法：取本品約0.5g，加水5ml溶解后，加稍過量的稀鹽酸，即析出白色結(jié)晶性沉淀，濾過，沉淀用水洗凈，在105℃干燥后，熔點(diǎn)應(yīng)為174~178℃。

特征熔點(diǎn)行為(P271.)——鑒別、純度測定藥物本身、鈉鹽酸化析出產(chǎn)物、衍生物的熔點(diǎn)方法：鈉鹽+酸→游離巴比妥類藥物↓

→過濾、洗滌、干燥→測熔點(diǎn)5-41.弱酸性2.水解反應(yīng)（在堿性條件下水解，放出NH3）3.絡(luò)合反應(yīng)（與重金屬離子Co,Cu,Ag,Hg反應(yīng)）4.香草醛反應(yīng)（Vanillin反應(yīng)）5.特殊取代基反應(yīng)（苯環(huán)，不飽和取代基，S）（6.鈉鹽反應(yīng)）(二)化學(xué)性質(zhì)1.弱酸性1,3-二酰亞胺基團(tuán)，烯醇互變，水溶液中發(fā)生二級電離。

藥物具有弱酸性，可與強(qiáng)堿反應(yīng)生成水溶性的(鈉)鹽。成鹽后，水溶液呈堿性，加酸后析出結(jié)晶。2.水解反應(yīng)

酰亞胺結(jié)構(gòu)，堿性條件共沸，釋放氨氣，使紅色石蕊試紙變藍(lán)。

本類藥物的鈉鹽，在吸濕情況下也能發(fā)生水解。pH11以上隨堿度的增加水解速度加快。P266.示例10-1JP15巴比妥的鑒別：取巴比妥0.2g，加氫氧化鈉試液10ml，加熱煮沸，則產(chǎn)生具氨臭的氣體，可使紅色石蕊試紙變藍(lán)。3.絡(luò)合反應(yīng)（與重金屬離子Ag,Cu,Co,Hg反應(yīng)）(1)與銀鹽的反應(yīng)

(2)與銅鹽的反應(yīng)(3)與鈷鹽的反應(yīng)(4)與汞鹽反應(yīng)（5,5-取代）

銀鹽反應(yīng)：鑒別

取供試品約0.1g，加碳酸鈉試液1ml與水10ml，振搖2分鐘，濾過，濾液中逐滴加入硝酸銀試液，即生成白色沉淀，振搖，沉淀即溶解；繼續(xù)滴加過量的硝酸銀試液，沉淀不再溶解。SS紫色或紫色沉淀綠色（含硫巴比妥）5,5-取代基親脂性↑，紫色易進(jìn)入氯仿

銅鹽反應(yīng)鑒別

取供試品50mg，加吡啶溶液(1→10)5ml，溶解后加銅吡啶試液1ml，即顯紫色或生成紫色沉淀。CoH2NCH(CH3)2H2NCH(CH3)2

汞鹽反應(yīng)

鈷鹽反應(yīng)4.香草醛反應(yīng)（Vanillin反應(yīng)）棕紅色紫色變藍(lán)色加乙醇香草醛+濃硫酸活潑氫5.特殊取代基反應(yīng)（苯環(huán)，不飽和取代基，S）

硝化反應(yīng)苯巴比妥與KNO3—H2SO4反應(yīng)生成黃色與NaNO2—H2SO4反應(yīng)苯巴比妥與NaNO2—H2SO4反應(yīng)生成橙黃色→橙紅色與甲醛—H2SO4反應(yīng)苯巴比妥與甲醛—H2SO4反應(yīng)生成玫瑰紅色環(huán)(1)芳環(huán)取代基的反應(yīng)(2)不飽和鍵反應(yīng)與溴試液或碘試液的反應(yīng)

司可巴比妥可使溴試液或碘試液褪色與KMnO4的反應(yīng)

可還原紫色的KMnO4為棕色的MnO2（3）硫元素的反應(yīng)示例10-4ChP中注射用硫噴妥鈉的鑒別：取本品約0.2g，加氫氧化鈉試液5ml與醋酸鉛試液2ml，生成白色沉淀；加熱后，沉淀變?yōu)楹谏?.UV（紫外）光譜特征2.IR（紅外）光譜特征3.TLC（薄層色譜）特征（比移值一致）4.顯微結(jié)晶(三)譜學(xué)性質(zhì)硫代巴比妥的紫外吸收光譜

A.HCl液(0.1mol/L)

B.NaOH液(0.1mol/L)巴比妥類藥物的紫外吸收光譜A.H2SO4液(0.05mol/L,未電離)B.pH9.9緩沖液(一級電離)C.pH13NaOH液(1mol/L,二級電離)λ(nm)2902702502300.51.01.5A3202802402000.80.50.2λ(nm)AABC2382873041.巴比妥類藥物紫外吸收光譜特征

2.巴比妥類藥物薄層色譜行為示例10-3BP2010中苯巴比妥的TLC鑒別：取苯巴比妥供試品和對照品各適量，分別加乙醇制成每1ml中約含1mg的溶液作為供試品和對照品溶液，各量取10l，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以三氯甲烷-乙醇-濃氨水(80∶15∶5)混合液的下層溶液為展開劑，展開后，晾干，立即于254nm紫外光下檢測。供試品溶液的主斑點(diǎn)位置和大小與對照品溶液的均一致。3.巴比妥類藥物紅外吸收光譜特征5,5-二乙基巴比妥鈉5-44.顯微結(jié)晶A.巴比妥結(jié)晶；

B.苯巴比妥結(jié)晶三、特殊雜質(zhì)檢查苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查苯巴比妥的合成工藝：C2H5OH,H2SO4［水解］［酯化］CH2CONH2，CH2COOC2H5C2H5ONaOCOC2H5OC2H5CCONaOC2H5COOC2H5ⅠHCl酸化，消除ⅡCHCOOC2H5COOC2H5C2H5Br［乙基化］Ⅲ[酸析]HCl主要特殊雜質(zhì)：中間體I、II、III及反應(yīng)副產(chǎn)物苯基丙二酰脲Ⅱ

副產(chǎn)物：檢查項(xiàng)目及方法：酸度：

（檢查副產(chǎn)物苯基丙二酰脲）副產(chǎn)物5-H活性強(qiáng)，酸性強(qiáng)

示例10-9

取本品0.20g，加水10ml，煮沸攪拌1min，放冷，濾過，取濾液5ml，加甲基橙指示液1滴，不得顯紅色溶液澄清度：

示例10-9取本品1.0g，加乙醇5ml，加熱回流3min，溶液應(yīng)澄清（檢查中間體II和III等乙醇中不溶物）中性或堿性雜質(zhì)

利用雜質(zhì)與苯巴比妥在堿性下溶解性差異（檢查中間體I及其副產(chǎn)物以及降解產(chǎn)物等）示例10-11 ChP中苯巴比妥的中性或堿性物質(zhì)檢查法：取本品1.0g，置分液漏斗中，加氫氧化鈉試液10ml溶解后，加水5ml與乙醚25ml，振搖1分鐘，分取醚層，用水振搖洗滌3次，每次5ml，取醚液經(jīng)干燥濾紙濾過，濾液置105℃恒重的蒸發(fā)皿中，蒸干，在105℃干燥1小時，遺留殘?jiān)坏贸^3mg。

有關(guān)物質(zhì)——HPLC法5-6四、含量測定Assay銀量法溴量法酸堿滴定法（醇-水中、膠束中、非水）紫外分光光度法（直接UV、提取后UV、差示UV）HPLC法1、銀量法——與重金屬離子絡(luò)合反應(yīng)基于巴比妥類藥物在合適的堿性溶液中，可與銀離子定量成鹽。示例10-14 ChP中異戊巴比妥的銀量測定法：取本品約0.2g，精密稱定，加甲醇40ml使溶解，再加新鮮配制的3%無水碳酸鈉溶液15ml，照電位滴定法，用硝酸銀滴定液(0.1mol/L)滴定，即得。每1ml硝酸銀滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于22.63mg的C11H18N2O3。溶劑：甲醇、3％無水碳酸鈉電位法判斷終點(diǎn)

含量＝TVf/w

×100%2、溴量法——司可巴比妥（不飽和取代基）凡在5位取代基含有不飽和鍵的巴比妥類藥物，其不飽和鍵能與溴定量地發(fā)生加成反應(yīng)，故可采用溴量法測定其含量。*指示劑：淀粉指示劑

5-7示例10-15 ChP中司可巴比妥鈉的溴量測定法：取本品約0.1g，精密稱定，置250ml碘瓶中，加水10ml，振搖使溶解，精密加入溴滴定液(0.05mol/L)25ml，再加鹽酸5ml，立即密塞并振搖1分鐘，在暗處靜置15分鐘后，注意微開瓶塞，加入碘化鉀試液10ml，立即密塞，搖勻后，用硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定，至近終點(diǎn)時，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，即得。每1ml溴滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于13.01mgC12H17N2NaO3。3、酸堿滴定法非水酸量法——弱酸性巴比妥類藥物在非水溶劑中酸性增強(qiáng)，用堿性標(biāo)準(zhǔn)液滴定，終點(diǎn)明顯常用溶劑：二甲基甲酰胺非水酸量法----弱酸性

巴比妥類藥物在非水溶劑中酸性增強(qiáng)，用堿性標(biāo)準(zhǔn)液滴定，終點(diǎn)明顯常用溶劑：二甲基甲酰胺滴定液：甲醇鈉(鉀)指示劑：麝香草酚藍(lán)5-84、提取重量法5、UV法

酸性溶液無吸收，堿性介質(zhì)紫外特征吸收——定量（表10-2）6、HPLC法圖10-5空白血清和對照品血清HPLC圖A.空白血清;B.對照品血清1.苯巴比妥;2.苯妥英;3.卡馬西平;4.阿普唑侖（內(nèi)標(biāo)）

練習(xí)題[A型題]1.苯巴比妥中檢查的特殊雜質(zhì)是A.巴比妥B.間氨基酚C.水楊酸D.中性或堿性物質(zhì)E.氨基酚2.司可巴比妥鈉《中國藥典》規(guī)定的含量測定方法為A.中和法B.溴量法C.碘量法D.紫外分光法E.高錳酸鉀法

[B型題]A.與碘試液