植物化學(xué)保護(hù)試驗(yàn)指導(dǎo)

試驗(yàn)指導(dǎo)

農(nóng) 藥學(xué)植物化學(xué)保護(hù)編者 編者駱焱平楊葉華南熱帶農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院2022年十一月前言本試驗(yàn)指導(dǎo)是在九七年編寫的《植物化學(xué)保護(hù)試驗(yàn)指導(dǎo)》的根底上，依據(jù)華南熱帶OO二年制定的專業(yè)課程教學(xué)打算和試驗(yàn)課程教學(xué)大綱的要求進(jìn)展修訂的。該書在原試驗(yàn)指導(dǎo)的根底上，經(jīng)過增加試驗(yàn)工程、補(bǔ)充并修改局部內(nèi)容后完成。全書共分為三大局部：第一局部介紹農(nóng)藥方面的基本學(xué)問，要求學(xué)生把握常見農(nóng)藥的配制方法和鑒別方法；其次局部介紹農(nóng)藥的室內(nèi)生物〔或稱靶標(biāo)生物，如昆蟲、螨類、病菌、線蟲、雜草、鼠類等對(duì)農(nóng)藥的反響來測定農(nóng)藥的毒力和藥效的基根底，是植物保護(hù)專業(yè)的必修課程，也是一穩(wěn)固和充實(shí)理論教學(xué)，加深學(xué)生對(duì)理論學(xué)問的理解，增加學(xué)生對(duì)病蟲方面的實(shí)踐操作能力，以便在生產(chǎn)和科研上合理利用不同的測定方法，開發(fā)農(nóng)藥，劑型，的施藥方法。本試驗(yàn)指導(dǎo)的任務(wù)是：1、 教學(xué)的方法加深學(xué)生對(duì)理論課的理解，把握試驗(yàn)中的一般技術(shù)。2、 留意與有關(guān)學(xué)科的協(xié)作如昆蟲學(xué)病物學(xué)、化學(xué)、統(tǒng)計(jì)學(xué)等學(xué)科的連接。3、 突出學(xué)生的創(chuàng)力量。加上編者水平有限，難免會(huì)消滅一些缺點(diǎn)和錯(cuò)誤，期望大家批判指正，并提出貴重的意見和建議，以便逐步完善。目 錄實(shí) 驗(yàn) 知………………1第一部分 農(nóng)藥的基本學(xué)問……………………實(shí)驗(yàn)一 波爾多液的配制…………2實(shí)驗(yàn)二 石硫合劑的配制…………3第二部分 農(nóng)藥室內(nèi)生物測定技術(shù)……………………實(shí)驗(yàn)三 孢子萌發(fā)試驗(yàn)法…………4實(shí) 驗(yàn) 四 抑 制 菌 法………………6實(shí)驗(yàn)五 生長速率測定法…………8試驗(yàn)六抑制菌絲產(chǎn)生孢子囊及釋放游動(dòng)孢子試驗(yàn)… 10試驗(yàn)七殺菌劑保護(hù)作用和治療作用的測定〔離體葉片法〕… 10試驗(yàn)八殺菌劑防治橡膠炭疽病的田間藥效試驗(yàn)… 13實(shí)驗(yàn)九 定………………16實(shí)驗(yàn)十 殺蟲劑熏蒸作用的測定…………………17定… 18實(shí)驗(yàn)十二 定………………21試驗(yàn)十三有機(jī)磷殺蟲劑對(duì)膽堿酯酶活性的抑制… 22定… 25試驗(yàn)十五殺蟲劑對(duì)植物的藥害試驗(yàn)〔植株施藥法〕… 26實(shí)驗(yàn)十六 殺蟲劑的田間藥效試驗(yàn)—……………28法……………28第三部分農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)…………參 考 獻(xiàn)………………附錄………………試驗(yàn)須知本試驗(yàn)課程是以化學(xué)、植物病理學(xué)、昆蟲學(xué)、雜草學(xué)、生物統(tǒng)計(jì)學(xué)等學(xué)科為根底，以昆蟲、病菌、雜草、農(nóng)藥等為爭論對(duì)象，是一門試驗(yàn)性很強(qiáng)的課程。本書主要以《農(nóng)物保護(hù)專業(yè)的必修課程。學(xué)生在試驗(yàn)中必需努力培育自己的獨(dú)立工作力量，把握根本操作技術(shù)，通過試驗(yàn)加深對(duì)理論的理解，并運(yùn)用所學(xué)到的根本理論和根本技能為我國農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化效勞。凡參與試驗(yàn)的學(xué)生必需嚴(yán)格遵守以下規(guī)則：1、 試驗(yàn)的學(xué)生必需嚴(yán)格遵《學(xué)生試驗(yàn)手冊(cè)。2、 學(xué)生必需預(yù)習(xí)試驗(yàn)指導(dǎo)書及相關(guān)專業(yè)教材，了解每次試驗(yàn)的原理、試驗(yàn)方法和具體操作步驟。3、 時(shí)應(yīng)當(dāng)獨(dú)立思考，認(rèn)真操作，不許大聲喧嘩。4、 要疼惜儀器，節(jié)約藥品、試劑等。5、 儀器設(shè)備必需登記并依據(jù)情節(jié)輕重酌情賠償。6、 準(zhǔn)放置食物、吃東西或吸煙。7、 試驗(yàn)中要留意安全農(nóng)藥對(duì)高等動(dòng)物均有毒性，很多試劑也有—定的毒性。且未經(jīng)允許不準(zhǔn)任意攜出試驗(yàn)室外，用過的廢物一定的缸內(nèi)，不準(zhǔn)任憑亂丟。試驗(yàn)中，如覺察藥物中毒現(xiàn)象席報(bào)告教師以便急救。8、 按時(shí)完成試驗(yàn)報(bào)告試驗(yàn)完成后按教師要求48或72小時(shí)來檢查結(jié)果，按時(shí)交試驗(yàn)報(bào)告，試驗(yàn)成績以5分制計(jì)。試驗(yàn)四常見農(nóng)藥質(zhì)量的簡易鑒別[試驗(yàn)?zāi)康腯：把握常見農(nóng)藥質(zhì)量的簡易鑒別方法。[試驗(yàn)器材]：量筒、燒杯、移液管、滴管、藥勺。[試驗(yàn)藥品]：敵敵畏EC、樂果EC、馬拉硫磷EC、功夫EC、ECECWPWP、硫磺粉、特克多懸浮劑等[鑒別方法]：一、粉劑的鑒別1、 外觀 粉劑的外觀應(yīng)為疏松的細(xì)粉無團(tuán)塊但凡流淌性差，結(jié)成快狀物，或手捏成團(tuán)，不易散開，說明這些粉劑大多是存放時(shí)間過長或存放不當(dāng)，造成減效或者失效。2、吸濕性取藥粉前，先查看粉劑包裝袋外面有沒有潮濕的狀況，假設(shè)有，是吸濕性大的表現(xiàn)。然后從袋里取出一點(diǎn)藥粉倒在一張白紙上，拿起白紙，用拇指和食指在紙外面捏一下，假設(shè)粘成一片，說明這種藥粉已吸潮；假設(shè)照舊是松散的細(xì)粉，說明是好的噴粉藥劑。3、懸浮法取1g100ml10min后，靜置片刻，然后漸漸倒去上層90%左右的溶液，將剩下的溶液用重量的濾紙過濾，再將紙和沉淀物曬干或烘干，稱其重量，求出懸浮率。懸浮率〔%〕=〔樣品重-沉淀物重〕/樣品重*10030%以上為良好，證明可以使用。二、可濕性粉劑的鑒別1、 外觀可濕性粉劑應(yīng)為很細(xì)的疏松粉末，無團(tuán)塊。2、 潮濕法 稱取被檢驗(yàn)的農(nóng)藥樣品 1g，輕輕撒在200ml1min內(nèi)農(nóng)藥能夠全局部散進(jìn)入水中，即為有效農(nóng)藥。假設(shè)長時(shí)間不能潤濕而漂移在水面上，則證明農(nóng)藥已經(jīng)失效。3、懸浮法取清水11g被檢驗(yàn)的農(nóng)藥樣品，充分搖勻，靜置20-30min，觀看藥品懸浮狀況。未變質(zhì)農(nóng)藥，粉粒極細(xì)，沉淀慢而少，整個(gè)藥液濁而不清；假設(shè)杯中少局部水清亮，大局部渾濁，則還可使用；假設(shè)樣品沉淀快，而杯中大局部藥液呈現(xiàn)半透亮狀，則不能使用。4、沉淀法取5g糊狀，再加水?dāng)嚢?，未變質(zhì)的農(nóng)藥粉粒細(xì)，懸浮性好，沉淀慢而少，已變質(zhì)農(nóng)藥懸浮性不好，沉淀快而多。三、乳油的鑒別1、振蕩法首先看清瓶子內(nèi)有無分層現(xiàn)象，如有分層現(xiàn)象，說明乳化性能已經(jīng)降低，可用力振蕩均勻，靜置一小時(shí)，假設(shè)仍舊分層，說明農(nóng)藥已經(jīng)變質(zhì)。2、兌水法取清水200ml1ml待檢驗(yàn)的乳油農(nóng)藥，乳化性能好的呈放射狀向四周集中，靜置后，水面無浮油，水底無沉淀，呈乳白色液體，且均勻全都，則為正常乳油。假設(shè)外表有乳油或瓶底有沉淀，則說明藥劑已變質(zhì)。3、 加熱法先把有沉淀的乳劑農(nóng)藥連瓶放在50-55℃1h后，沉淀能漸漸溶解，溶液均勻全都，藥效一般不減，說明農(nóng)藥可以使用；假設(shè)農(nóng)藥的沉淀物不溶解，則說明農(nóng)藥已經(jīng)變質(zhì)失效。四、懸浮劑的鑒別均勻。假設(shè)因長時(shí)間存放消滅分層，經(jīng)手搖動(dòng)可恢復(fù)均勻狀態(tài)的，仍可視為合格產(chǎn)品。假設(shè)不能重變成均勻的懸浮液，底部沉淀物搖不起來，懸浮性能就不好。上述各種方法可簡便地鑒別各農(nóng)藥劑型是否變質(zhì)失效，如要進(jìn)一步了解各農(nóng)藥制劑的真實(shí)含量〔有效成份〕則需將樣品送到農(nóng)藥特地爭論機(jī)構(gòu)或農(nóng)藥檢測機(jī)構(gòu)進(jìn)展分析鑒定。此外，用上述簡易法鑒別農(nóng)藥的時(shí)候，千萬留意農(nóng)藥的毒性，不要把農(nóng)藥弄到手上，假設(shè)弄到手上或皮膚上，要立即用水沖洗，對(duì)于粉劑農(nóng)藥，先用水沖洗后，再用肥皂洗凈，對(duì)于乳油農(nóng)藥要特別留神，趕快用清水沖洗，再用堿水洗，最終用肥皂洗凈。假設(shè)遇到農(nóng)藥，不久后感覺惡心，要準(zhǔn)時(shí)去醫(yī)院請(qǐng)醫(yī)生檢查。盛過農(nóng)藥的器具要妥當(dāng)處理，不要再做其他用途。五、試驗(yàn)作業(yè)按要求完成教師布置的農(nóng)藥鑒別任務(wù)，記錄試驗(yàn)過程中所觀看的現(xiàn)象。推斷哪些劑型是合格的。試驗(yàn)六殺蟲劑觸殺作用〔contactaction〕毒力測定根本原理是將肯定濃度〔或劑量〕的殺蟲劑施于蟲體的全部或局部〔適宜部位觸殺作用。依據(jù)試蟲及藥劑劑特點(diǎn)，已被公認(rèn)而一般應(yīng)用〔1〕〔2〕〔3〕浸漬〔〕藥膜法等。法有目標(biāo)昆蟲的或墊有濕濾紙液體噴布器底部或噴粉罩底液或粉劑均勻地直接噴撒到目標(biāo)昆蟲體上，待藥液稍干或蟲體粘粉較穩(wěn)定后，將噴過藥的目標(biāo)昆蟲移入干凈的容器內(nèi)或培育皿內(nèi)，用通氣蓋蓋好，置于適合于目標(biāo)昆蟲生育的溫濕度及通氣良好的環(huán)境中恢復(fù)，1-2h后，放入無藥的穎飼料，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)〔12、24、48h，觀看目標(biāo)昆蟲Potter噴霧器，真空噴粉器等。二、點(diǎn)滴法：[根本原理部位，來測定殺蟲劑穿透表皮而引起昆蟲中毒致死的觸殺毒力。每個(gè)試蟲的某一部位都承受一樣容積的藥液，因而同一處理的每個(gè)試蟲實(shí)際承受的劑量一樣。此法是殺蟲劑觸殺毒力測定中最準(zhǔn)確的方法。也是目前普遍承受的一種測試技術(shù)。[試蟲范圍]昆蟲的觸殺毒力測定，如蚜蟲、葉蜂、二化螟、玉米螟、菜青蟲、粘蟲等。[試驗(yàn)材料]：微量注射1支、培育皿15cm6個(gè)、剪刀1棉花、蠟筆等、無水乙醚[供試藥劑]；95%敵百蟲結(jié)晶[使用濃度]：10；2.5；0.62；0.15；0.039ugl液[供試方法]：荔枝蝽蟓成蟲，24[試驗(yàn)方法]：用無水乙醇將試蟲麻醉4min，使試蟲處于麻醉狀態(tài)，每頭蟲稱重，并放在培育皿中編號(hào)〔培育皿用厚45〔4/濃度，自然枯燥后，經(jīng)1小時(shí)10mi每頭的死活狀況〔用真實(shí)死亡表示〕或正常飼養(yǎng)24小時(shí)后觀看實(shí)際死亡狀況。結(jié)果的計(jì)算：先按ug/g〔5合并計(jì)算〕然后區(qū)分：生存組生存局部致毒反響間組死亡組中間組活蟲劑量A=中間組活蟲總數(shù) B=

中間組死活蟲劑量中間組活中總數(shù)LD5=A+〕/〔mg/g體重或ug/g體重三、浸漬法〔immersionmethord〕浸漬法是一種測定殺蟲藥劑觸殺毒力的室內(nèi)測試技術(shù)。因方法簡潔快速，不需要特別儀器設(shè)備，常用于有效化合物的篩選試驗(yàn)，被聯(lián)合國食農(nóng)組織〔FAO〕推舉為蚜蟲抗藥性的標(biāo)準(zhǔn)測定方法。根本原理：用浸沾方法直接將供試殺蟲劑施于昆蟲體表，測定藥液穿透表皮引起昆蟲中毒致死的觸殺毒力。測試方法：①將試蟲〔如粘蟲、家蠶〕直接浸入藥液中，或?qū)⒃囅x放在鋼紗籠中，再浸漬；②將試蟲〔如蚜蟲〕放〔2.5cm3cm〕然后浸入藥液中；③蚜蟲、紅蜘蛛以及介殼蟲等，可以連同植物寄主一起浸入藥液。紅蜘蛛有吐絲成球現(xiàn)象，藥液不易均勻沾濕體表影響結(jié)果。可先將帶有紅蜘蛛的葉片置于豆苗〔3－5cm高然后進(jìn)展浸液。浸液肯定時(shí)間后取出晾干，或用吸水紙吸去多余藥液，再移入干凈器皿中〔大型昆蟲，如粘蟲、家蠶等需放入穎飼料境中，隔肯定時(shí)間〔12h，24h、48h〕觀看記載死亡狀況，計(jì)算死亡率〔或校正死亡率〕求得致死中濃度。幼蟲，對(duì)殺蟲劑較敏感，常用此法進(jìn)展大量化合物初篩，或用來進(jìn)行殺蟲劑殘留量的生物分析。四、藥膜法：根本原理：將肯定量的殺蟲藥劑，承受浸沾、點(diǎn)滴、噴灑等方法施于物體外表上，形成一個(gè)均勻的藥膜，然后放入肯定量的供試目標(biāo)昆蟲，讓其爬行接觸肯定時(shí)間后，再移至正常的環(huán)境條件下，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)觀看試蟲的中毒死亡反響，計(jì)算擊倒率或死亡率。亦可讓試蟲和藥膜長時(shí)間接觸而觀看試蟲的擊倒時(shí)間、直到全部試蟲被擊倒，求出擊倒率，比較毒力。還可將形成的藥膜，放置不同時(shí)間，經(jīng)受光照、雨淋等處理，然后再讓試蟲接觸，這樣可測得殘效結(jié)果。制做藥膜的方法有蠟?zāi)し?，濾紙藥膜法及玻璃藥膜法。、蠟紙藥膜法：試驗(yàn)材料：藥劑：6％六六六粉，用滑石粉稀釋成所需濃度。試蟲：赤擬谷盜或粘蟲幼蟲9cm15φcm30方法：將6％六六六粉劑用滑石粉稀釋成3%，1.5%，0.7%，0.38%六六六粉，各稱取100mg邊使藥粉在中間移動(dòng)數(shù)次，均勻分布在蠟紙上，然后將多余藥粉倒回原處，再輕輕地彈動(dòng)反面2～3下，