選修一知識點填空

專題1傳統(tǒng)發(fā)酵技術的應用課題1果酒和果醋和制作一,基礎知識（一）果酒制作的原理1．菌種是，屬于生物，新陳代謝類型，有氧時，進行，大量繁殖，反應式為；無氧時，能進行，反應式為。2．酵母菌繁殖的最適溫度℃左右，酒精發(fā)酵一般限制在℃。3．自然發(fā)酵過程中，起作用的主要是附著于上的野生型酵母菌。也可以在果汁中加入人工培育的酵母菌。（二）果醋制作的原理1．菌種是，屬于生物，新陳代謝類型為。只有在氧氣足夠時，才能進行旺盛的生命活動。變酸的酒表面視察到的菌膜就是在液面大量繁殖形成的。2．當氧氣,糖源都足夠時，醋酸菌將葡萄汁中的分解成，當缺少糖源時，醋酸菌將變?yōu)?，再將乙醛變?yōu)?，反應簡式為?．醋酸菌的最適合生長溫度為℃。4．菌種來源：到或購買，或從中分別醋酸菌。二,試驗設計1,流程圖葡萄發(fā)酵發(fā)酵2,制作實例試驗材料葡萄,榨汁機,紗布,醋酸菌（或醋曲）,發(fā)酵瓶（如右圖）,氣泵,體積分數(shù)為70%的酒精等。試驗步驟1．對發(fā)酵瓶,紗布,榨汁機等試驗用具進行清洗并消毒。先用溫水反復沖洗幾次，再用體積分數(shù)為的酒精擦拭消毒，晾干待用。2．取葡萄500g，去除枝梗和腐爛的子粒。3．用清水沖洗葡萄1－2遍除去污物。（留意。）4．用榨汁機榨取葡萄汁后，將其裝入發(fā)酵瓶中。（假如沒有合適的發(fā)酵裝置，可用500mL的__________替代。但注入的果汁量不要超過塑料瓶總體積的_____。）5．將發(fā)酵瓶置于相宜的溫度（________℃）下發(fā)酵。6．由于發(fā)酵旺盛期CO2的產量特別多，因此須要及時______，以防止發(fā)酵瓶爆裂。（假如是簡易發(fā)酵裝置，每天______瓶蓋2～4次。進行排氣。）7．10天后，取樣檢驗。例如，可以檢驗酒味,酒精的含量,進行酵母菌的鏡檢等工作。8．當果酒制成以后，可在發(fā)酵液中加入醋酸菌（或醋曲），然后移至_________℃條件下發(fā)酵，適時用氣泵向發(fā)酵液中_______。（假如沒有充氣裝置，可以將瓶蓋打開，在瓶口上蓋上_____。）三,操作提示（一）材料的選擇與處理選擇______的葡萄，榨汁前先將葡萄進行_______，然后再出去_______。（二）防止發(fā)酵液被污染1,榨汁機要清洗_______，并_______。2,發(fā)酵瓶要清洗_________，用體積分數(shù)________的酒精消毒。3,裝入葡萄汁后，_________充氣口。（三）限制好發(fā)酵條件1,葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時，要留出大約______的空間。2,制作葡萄酒過程中，將溫度嚴格限制在_________℃，時間限制在_________d左右，可通過出料口對發(fā)酵的狀況進行及時的監(jiān)測。3,制作葡萄醋的過程中，將溫度嚴格限制在__________℃，時間限制在_______d左右，并留意適時通過充氣口_________。四,課題延長果汁發(fā)酵后是否有酒精產生，可以用____________來檢驗。在________條件下，重鉻酸鉀與酒精反應呈現(xiàn)____________。檢測時，先在試管中加入發(fā)酵液2mL，再滴入物質的量的濃度為3mol/L的_______3滴，振蕩混勻，最終滴加常溫下______________________3滴?！窘滩拇鸢浮浚ㄒ唬┡詸谒妓黝}1.你認為應當先沖洗葡萄還是先除去枝梗？為什么？答：應當先_______，然后再____________，以避開除去枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機會。2.你認為應當從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？提示：須要從發(fā)酵制作的過程進行______的考慮。例如，榨汁機,發(fā)酵裝置要______干凈；每次排氣時只需________瓶蓋,不要完全揭開瓶蓋等。3.制葡萄酒時，為什么要將溫度限制在18～25℃？制葡萄醋時，為什么要將溫度限制在30～35℃？答：溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。_______℃最適合酵母菌繁殖。因此須要將溫度限制在其最適溫度范圍內。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長溫度為________℃，因此要將溫度限制在30～35℃。4.制葡萄醋時，為什么要適時通過充氣口充氣？答：醋酸菌是______菌，在將酒精變?yōu)榇姿釙r須要______的參加，因此要適時向發(fā)酵液中充氣。（二）［資料］發(fā)酵裝置的設計探討題請分析此裝置中的充氣口,排氣口和出料口分別有哪些作用。為什么排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接？結合果酒,果醋的制作原理，你認為應當如何運用這個發(fā)酵裝置？答：充氣口是在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進行用的；排氣口是在酒精發(fā)酵時用來排出的；出料口是用來取樣的。排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接，其目的是，其作用類似巴斯德的鵝頸瓶。運用該裝置制酒時，應當充氣口；制醋時，應將充氣口連接氣泵，輸入。課題2腐乳的制作一,基礎知識腐乳制作的原理1．腐乳的發(fā)酵有多種微生物的，其中起主要作用的是，它是一種生物，新陳代謝類型是。2．毛霉等微生物產生的蛋白酶可以將豆腐中的分解成小分子的和；脂肪酶可以將水解成和。3．現(xiàn)代的腐乳生產是在嚴格的條件下，將優(yōu)良菌種直接接種在豆腐上，這樣可以避開的污染，保證產品的質量。二,試驗設計1,試驗流程讓豆腐→加腌制→加裝瓶→腌制。2,制作實例試驗材料：含水量70%的豆腐，粽葉，盤子，鹽，黃酒，米酒，糖，香辛料等，廣口玻璃瓶，高壓鍋等。試驗步驟1．將豆腐切成3cm×3cm×1cm若干塊。2．將豆腐塊平放在鋪有干粽葉的盤內（粽葉可以供應菌種，并能起到保溫的作用），每塊豆腐等距離排放，四周留肯定的。豆腐上面再鋪上干凈的粽葉。氣候干燥時，將平盤用保鮮膜包袱，但不要封嚴，以免濕度太高，不利于毛霉的生長。3．將平盤放在溫度為℃的地方，毛霉?jié)u漸生長，大約5d后，豆腐表面叢生直立菌絲。4．當毛霉生長旺盛，并呈時，去除保鮮膜及鋪在上面的粽葉，使豆腐塊的熱量和水分能夠快速散失，同時散去霉味，這一過程一般持續(xù)36h以上。5．豆腐涼透后，將豆腐間的連在一起的菌絲拉斷，并整齊排在容器內，準備腌制。6．長滿毛霉的豆腐塊（以下稱毛坯）分層擺放，分層加鹽，并隨層高而，在接近瓶口表面鹽要鋪厚一些，以防止雜菌污染，約腌制8d。（豆腐與鹽質量分數(shù)比為5︰1）7．將黃酒,米酒和糖,香辛料等混合制成鹵湯。鹵湯酒精含量限制在左右為宜。8．將廣口玻璃瓶刷洗干凈，用高壓鍋在1000C蒸汽滅菌30min，將腐乳成坯擺入瓶中，加入鹵湯和輔料后，將瓶口用加熱滅菌，用膠條。在常溫下，一般六個月即可以成熟。三,操作提示（一）限制好材料的用量1,用鹽腌制時，留意限制鹽的用量。鹽的濃度過低，，可能導致豆腐腐?。畸}的濃度過高，會。2,乳湯中酒的含量應限制在左右。酒精含量過低，，可能導致豆腐腐??；酒精含量過高，腐乳成熟的時間將會。（二）防止雜菌污染1,用來腌制腐乳的玻璃瓶，刷干凈后要用消毒。2,裝瓶時要；加入乳湯后要用膠條將瓶口；封瓶時，最好將瓶口通過酒精燈的火焰，防止瓶口被?！窘滩拇鸢浮浚ㄒ唬┡詸谒妓黝}1.你能利用所學的生物學知識，說明豆腐長白毛是怎么一回事？答：豆腐上生長的白毛是毛霉的。嚴格地說是直立菌絲，在豆腐中還有匍匐菌絲。2.王致和為什么要撒很多鹽，將長毛的豆腐腌起來？答：鹽能，避開豆腐腐敗。3.我們平常吃的豆腐，哪種適合用來做腐乳？答：含水量為的豆腐適于作腐乳。用含水量過高的豆腐制腐乳，不易成形。4.吃腐乳時，你會發(fā)覺腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢？它對人體有害嗎？它的作用是什么？答：“皮”是前期發(fā)酵時在豆腐表面上生長的（匍匐菌絲），它能形成腐乳的“體”，使腐乳成形?！捌ぁ睂θ梭w無害。（二）練習1.答：，因此要隨著豆腐層的加高增加鹽的用量，在接近瓶口的表面，鹽要鋪厚一些，以有效防止雜菌污染。課題3制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量一乳酸菌1.代謝類型為異養(yǎng)厭氧型，在狀況下，將葡萄糖分解成乳酸2.常見種類：和3.分布：分布廣泛，,土壤,植物,人或動物的內等均有分布。4.應用：常用于生產二亞硝酸鹽1.物理性質粉末,易溶于。2.應用在食品生產中常用作食品3.分布自然界中分布廣泛。據統(tǒng)計，亞硝酸鹽在蔬菜中的平均含量約為，咸菜中平均含量在以上，而豆粉中的平均含量可達4.對人體的影響膳食中的亞硝酸鹽一般不危害人體健康，當人體攝入總量達時，會引起中毒；當攝入總量達時，會引起死亡5.我國衛(wèi)生標準亞硝酸鹽殘留量在肉制品中不得超過，醬腌菜中不超過，嬰兒奶粉中不得超過。6.代謝絕大多數(shù)亞硝酸鹽隨排出，但在特定條件下，即相宜的和肯定的作用，會轉變成致癌物質---三泡菜腌制過程1.泡菜壇的選擇（1）應選用火候好,無砂眼,,壇沿深,好的泡菜壇（2）檢查時可將壇口壓入水中，看壇內有無現(xiàn)象2.腌制（1）過程：將清水和鹽以的質量比例配制鹽水。將鹽水后備用。將蔬菜裝至時加入香辛料，裝至時，加入鹽水，要使鹽水蓋好壇蓋。將壇蓋邊沿的水槽中注滿水，以保證壇內的環(huán)境（2）條件：限制腌制的時間,溫度和食鹽的用量。溫度,食鹽用量不足，腌制時間，簡單造成細胞大量繁殖，含量增加四亞硝酸鹽的測定1.原理（1）在條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生反應后，與N—1—萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成色染料。（2）將顯色反應后的樣品與已知濃度的進行比較，可以大致出泡菜中亞硝酸鹽的含量2.測定步驟配制溶液→→制備樣品處理液→思索：亞硝酸鹽可轉化成致癌物質，為什么在食品生產中還可作為添加劑？專題2微生物的培育與應用課題1微生物的試驗室培育一基礎知識1.培育基（1）培育基的種類包括培育基和培育基等。（2）培育基的化學成分一般都含有,,,四類養(yǎng)分成分，（3）在供應上述幾種主要養(yǎng)分物質的基礎上，培育基還須要滿意微生物生長對,以及等的要求。例如：培育乳酸桿菌時須要在培育基中添加；培育霉菌時須要將培育基的PH調至；培育細菌時須要將培育基的PH調至；培育厭氧微生物時須要供應無氧的條件【思索】為什么各種養(yǎng)分基的詳細配方不同，但一般都有水,無機鹽,碳源和氮源？2.無菌技術（1）獲得純凈培育物的關鍵是。避開雜菌污染的方法主要包括以下四個內容：①②③④（2）消毒是指滅菌是指【思索】消毒與滅菌的相同點與區(qū)分分別是什么？（3）試驗室常用的消毒方法是，此外，人們也常運用化學藥劑進行消毒，如用,等。常用的滅菌方法有,,，此外，試驗室里還用或進行消毒。二試驗操作1.制備牛肉膏蛋白胨固體培育基（1）制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的方法步驟：→→→→倒平板（2）倒平板的過程【思索】⑴培育基滅菌后，須要冷卻到50左右，才能用來倒平板。你用什么方法來估計培育基的溫度？⑵為什么須要使錐形瓶的瓶口通過火焰？⑶平板冷凝后，為什么要將平板倒置？⑷在倒平板的過程中，假如不當心瘵培育基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培育微生物嗎？為什么？2.純化大腸桿菌（1）微生物接種的方法中最常用的是和。平板劃線法是指。稀釋涂布平板法是指。（2）平板劃線的操作步驟如下：①②③④⑤⑥⑦【思索】①為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結束時，仍舊須要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？②在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？③在作第二次以及其后的劃線操作是赤什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？（3）系列稀釋操作步驟：①②③（4）涂布平板操作步驟：①②③④菌種的保存為了保持菌種的純凈，需對菌種進行保藏。對于頻繁運用的菌種，我們可以采納法；對于須要長期保存的菌種，可以采納法。將菌種放在低溫環(huán)境中保藏的目的是，但時間長了菌種還是要老化的，因此對臨時保存的菌種個月后需重新接種課題2土壤中分解尿素的細菌的分別與計數(shù)1．尿素只有被分解成之后，才能被植物汲取利用。2．以土壤中能分解尿素的細菌為探討對象，要達到的兩個主要目的是：⑴；⑵。3．PCR（）是一種在體外將。此項技術的自動化，要求運用耐高溫的DNA聚合酶。思索：怎樣找耐高溫的酶呢？4．試驗室中微生物的篩選應用的原理是：人為供應有利于生長的條件（包括等），同時抑制或阻擋其他微生物生長。5．選擇培育基是指。6．常用來統(tǒng)計樣品中活菌數(shù)目的方法是。即當樣品的稀釋度足夠高時，培育基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推想出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結果精確，一般選擇菌落數(shù)在的平板進行計數(shù)。另外，也是測定微生物數(shù)量的常用方法。7．比較教材中兩位同學的操作方法，哪位同學的結果接近真實值？你認為這兩位同學的試驗須要改進呢？如須要，如何改進？8．一般來說，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目。這是因為。因此，統(tǒng)計結果一般用而不是活菌數(shù)來表示。9．設置比照試驗的主要目的是，提高試驗結果的可信度。10．比照試驗是。11．試驗設計包括的內容有：,,和，詳細的試驗步驟以及時間支配等的綜合考慮和支配。12．不同種類的微生物，往往須要不同的培育和培育。在試驗過程中，一般每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結果，這樣可以。13．無菌操作應留意什么問題？⑴⑵⑶14．在進行多組試驗過程中，應留意做好標記，其目的是。思索：應標記哪些內容？怎樣操作更有利于試驗的進行？15．對所需的微生物進行初步篩選，只是分別純化菌種的第一步，要對分別的菌種進行一步的鑒定，還須要借助的方法。思索：有哪些方法可以對菌種進行鑒定？課題3分解纖維素的微生物的分別一,課題背景分析纖維素是一種由首尾相連而成的高分子化合物，植物每年產生的纖維素能被土壤中的某些微生物分解利用，是因為它們能產生。對這些微生物的探討與利用，使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產，用處理服裝面料等。二.基礎知識：（一）纖維素和纖維素酶閱讀課本27頁基礎知識部分第一,二段，回答下列問題：1,纖維素在生物圈的分布狀況？纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質。植物的根,莖,葉等器官都含有大量的纖維素。其中是自然界中纖維素含量最高的自然產物。2,纖維素酶的組成及作用？纖維素酶是一種復合酶，一般認為它至少包括三種組分，即,和，前兩種酶使纖維素分解成，第三種酶將分解成葡萄糖。（二）纖維素分解菌的篩選閱讀課本課本28頁相關部分，回答下列問題：1,纖維素分解菌的篩選方法--，這種方法能夠通過顏色反應直接對微生物進行篩選2,纖維素分解菌的篩選方法的原理剛果紅是一種染料，它可以與纖維素形成，但并不和,發(fā)生這種反應。當纖維素被纖維素酶分解后剛果紅—纖維素的復合物就無法形成，培育基中會出現(xiàn)以纖維素分解為中心的。這樣我們可以通過是否產生透亮圈來篩選纖維素分解菌〖針對性練習1〗下列關于纖維素酶的說法，錯誤的是A,纖維素酶是一種復合酶，至少包括三種B,纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C,纖維素酶可用于去掉植物的細胞壁D,葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖三,試驗操作分別分解纖維素的微生物試驗流程：土壤取樣→→梯度稀釋→→?！寂詸谒妓黝}〗本試驗的流程與課題2中的試驗流程有哪些異同？提示：本試驗流程與課題2的流程的區(qū)分如下。課題2是將土樣制成的菌懸液直接涂布在以尿素為惟一氮源的選擇性培育基上，直接分別得到菌落。本課題通過選擇培育，使纖維素分解菌得到增殖后，再將菌液涂布在選擇培育基上。其他步驟基本一樣。土壤取樣采集土樣時，應選擇富含纖維素的環(huán)境。若找不到合適環(huán)境，可將濾紙埋在土壤中一個月左右，也會有能分解纖維素的微生物生長?！寂詸谒妓黝}〗取樣的環(huán)境是怎樣的，作出這種選擇的理由是什么？選擇的環(huán)境，如樹林中多年落葉形成的腐殖土，多年積累的枯枝敗葉等等。依據生物與環(huán)境的相互依存關系，在富含纖維素的環(huán)境中的含量相對提高，因此從這種土壤中獲得目的微生物的幾率要高于一般環(huán)境?！寂詸谒妓黝}〗將濾紙埋在土壤中有什么作用？你認為濾紙應當埋進土壤多深？提示：將濾紙埋在土壤中能使，事實上是人工設置纖維素分解菌生存的相宜環(huán)境。一般應將紙埋于深約cm左右腐殖土壤中。（二）選擇培育1.選擇培育的目的：增加，以確保能夠從樣品中分別到所須要的微生物。2.制備選擇培育基：參照課本29頁旁欄中的比例配置，回答下列問題：①旁欄中的配方是液體培育基還是固體培育基？為什么？是液體培育基，緣由是配方中無凝固劑。②這個培育基對微生物是否具有選擇作用？假如具有，是如何進行選擇的？有選擇作用，本配方中的碳源是纖維素，所以能分解纖維素的微生物可以大量繁殖。③你能否設計一個比照試驗，說明選擇培育基的作用用牛肉膏蛋白胨培育基與之比照。3,選擇培育將土樣加入裝有30ml選擇培育基的錐形瓶中，將錐形瓶固定在搖床上，在肯定溫度下震蕩培育1～2天，直至培育液變渾濁。也可重復選擇培育〖旁欄思索題〗為什么選擇培育能夠“濃縮”所需的微生物？提示：在選擇培育的條件下，可以使那些能夠適應這種養(yǎng)分條件的微生物得到快速繁殖，而那些不適應這種養(yǎng)分條件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“濃縮”的作用（三）梯度稀釋依據課題1的稀釋操作方法，將選擇培育后的培育基進行等比稀釋101～107倍。將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培育基上。（四）將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培育基上1.制備培育基:參照課本旁欄中的比例配制。2.倒平板操作。3.涂布平板：將稀釋度為104～106的菌懸液各取0.1ml涂布到平板培育基上，30℃倒置培育，菌落四周會出現(xiàn)明顯的透亮圈。4.選擇產生透亮圈的菌落（參照課本剛果紅染色法，選擇產生透亮圈的菌落，一般即為分解纖維素的菌落。）（五）剛果紅染色法方法一：先，再加入剛果紅進行顏色反應。方法二：在時就加入剛果紅。〖旁欄思索題〗這兩種方法各有哪些優(yōu)點與不足？提示：方法一缺點是操作煩瑣，加入剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜；優(yōu)點是這樣顯示出的顏色反應基本上是纖維素分解菌的作用。方法二優(yōu)點是操作簡便，不存在菌落混雜問題。缺點一是由于培育基中還含有淀粉類物質，可以使能產生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應；缺點二有些微生物具有降解色素的實力，它們在長時間培育過程中會降解剛果紅，形成明顯的透亮圈，與纖維素分解菌不易區(qū)分。〖針對性練習2〗有關選擇培育正確的敘述是（）A,可以增加纖維素分解菌的濃度B,可以削減纖維素分解菌的濃度C,所用培育基是固體培育基D,所用培育基是平板培育基四,結果分析與評價（一）培育基的制作是否合格以及選擇培育基是否篩選出菌落？設置比照，若比照的培育基在培育過程中無菌落生長則說明培育基制作合格。假如視察到產生透亮圈的菌落，則說明可能獲得了分解纖維素的微生物。（二）分別的結果是否一樣假如不同，分析產生不同結果的緣由。五,課題延長本課題對分解纖維素的微生物進行了初步的篩選，但是這只是分別純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌，還須要進行的試驗，纖維素酶的測定方法一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產生的進行定量的測定。專題3植物的組織培育技術課題1菊花的組織培育植物組織培育的相關概念和基本過程植物組織培育的相關概念（1）細胞分化：植物的個體發(fā)育過程中，細胞在__________,__________和__________上都會出現(xiàn)穩(wěn)定性的差異，形成這些差異的過程就叫做細胞分化。細胞分化是基因__________的結果。（2）細胞的全能性：__________的植物細胞仍舊具有發(fā)育成為__________的潛能。細胞全能性是組織培育的基本原理。（3）愈傷組織：由離體的植物器官,組織或細胞在肯定的培育條件下經過__________過程形成的組織，就叫愈傷組織，愈傷組織的細胞排列疏松而無規(guī)則，是一種__________的呈無定形態(tài)態(tài)的__________。（4）脫分化：由__________的植物組織或細胞產生__________的過程，稱為脫分化，又叫去分化。（5）再分化：脫分化產生的愈傷組織接著進行培育，又可以重新分化成__________，這個過程叫做再分化。（6）外植體：用于離體培育的植物器官或組織片段。植物組織培育的基本過程離體的植物組織離體的植物組織,器官或細胞組織培育脫分化愈傷組織組織培育再分化根,芽等器官人為運用植物激素限制移植——→試管苗———→完整的植物體影響植物組織培育的因素1.內部因素：不同的植物組織，培育的難易程度差別很大。同種植物材料，__________，__________等也會影響試驗結果。菊花的組織培育，一般選擇__________的莖上部新萌生的側枝。2.外部因素：（1）養(yǎng)分條件常用的是__________培育基，其主要成分包括：__________，如_____________________________；__________，如______________________________；__________等。（2）植物激素植物激素中__________和__________是啟動細胞分裂,脫分化和再分化的關鍵性因素。____________________,____________________以及__________等，都會影響試驗結果。（3）環(huán)境因素__________,__________,__________等條件也能影響植物組織培育。菊花組織培育，一般PH限制在__________；溫度限制在__________；每天用日光燈照耀__________小時?！舅妓鳌?1)MS培育基中，各種養(yǎng)分成分各有什么作用？與微生物培育基的配方相比，有什么不同(2)生長素運用的先后依次,用量比例不同分別會造成哪些影響？三,試驗操作過程1.制備MS固體培育基試驗室一般運用4℃保存的配制好的培育基母液來制備（1）配制各種母液。配制母液時，大量元素濃縮__________，微量元素濃縮__________。常溫保存。激素類,維生素類以及用量比較小的有機物可以依據1mg/ml的質量濃度單獨配制母液。用母液配制培育基時，須要依據各種母液的濃縮倍數(shù)，計算用量。（2）配制培育基。配制1LMS培育基時，將稱量好的瓊脂加入800mL蒸餾水，加熱熔化，然后加入蔗糖30g,依次加入母液，定容至1000mL。__________，然后分裝到錐形瓶中，每瓶分裝__________。（3）滅菌。高壓蒸汽滅菌2,外植體消毒選取菊花莖段時，要取____________________。無菌技術包括培育基消毒滅菌和植物材料（外植體）的消毒滅菌。對培育材料進行表面滅菌時，一方面要考慮_______________；另一方面還要考慮植物材料的__________。不同藥劑,不同植物材料，甚至不同器官要區(qū)分對待。一般狀況下，細菌污染可能是由接種人員造成的，真菌污染可能是_________滅菌不當。過程：流水沖洗→軟刷刷洗→流水沖洗①過程流水沖洗→軟刷刷洗→流水沖洗__________→無菌吸水紙吸干外植體表面→體積分數(shù)為__________的酒精中搖動2～3次，持續(xù)__________→無菌水清洗→無菌吸水紙吸干外植體表面→質量分數(shù)為0.1﹪的__________溶液中1～2min→無菌水中至少清洗3次3,接種接種前，用體積分數(shù)70%的酒精將工作臺擦拭，然后點燃酒精燈。全部的接種操作必需在酒精燈旁進行，并且每次運用器械后，都要用火焰灼燒滅菌4,培育接種后的錐形瓶最好放在__________中培育。培育期間定期消毒，溫度限制在18-22℃，并且每天用日光燈光照12h5,移栽6,栽培附：一般來說，簡單進行__________的植物，也簡單進行組織培育?！舅妓鳌浚海?）試驗操作過程中為什么要進行一系列的消毒,滅菌，試驗中是如何做到無菌操作的？（2）你準備做幾組重復？你準備設置比照試驗嗎？課題2月季的花藥培育一．被子植物花粉發(fā)育過程1．被子植物的花粉是在中由經過分裂形成的。所以，花粉是的生殖細胞。2．結合教材內容填下列示意圖：小孢子母細胞（小孢子母細胞（2n）（）時期（n）單核（）期（n）雙核期（）細胞核（n）（）細胞核（n）（）細胞（n）（）細胞（n）（）個精子(n)（）分裂（）分裂單核（）期（n）（）分裂[思索1]由此可見，被子植物的花粉的發(fā)育要經驗時期，期和期等階段。[思索2]在正常狀況下，一個小孢子母細胞可以產生個精子；在一枚花藥中可以產生個花粉。二．產生花粉植株的兩條途徑1．產生花粉植株（即單倍體植株）的兩種途徑：一是花粉通過階段發(fā)育為植株，二是通過階段發(fā)育為植株。這兩種途徑的區(qū)分主要取決于培育基中的種類及其的配比。2．填寫培育花粉植株的途徑圖解：（（）花藥中的花粉（）（）（胚狀體）（愈傷組織）（）叢芽生根移栽3．胚狀體的結構及其發(fā)育過程與種子相像，所以把胚狀體到從芽的過程稱為，而把從愈傷組織到從芽的過程稱為。4.植物體細胞發(fā)育而來的胚狀體又叫，花粉發(fā)育而來的胚狀體叫，可發(fā)育為植物，要使其成為純合的正常植株，可用處理發(fā)育中的幼苗。三．影響花藥培育的因素1．影響花粉植株勝利與否和勝利率的主要因素：和等。2．材料的選擇：①從花藥來看，應當選擇（初花期,盛花期,晚花期）的花藥；②從花粉來看，應當選擇（四分體期,單核期,雙核期,萌發(fā)期）的花粉，因為單核期以前的花藥，選擇單核期以后的花藥接種，。；③從花蕾來看，應當選擇（完全未開放,略微開放,完全盛開）的花蕾。[思索3]除此之外，你認為影響花粉誘導勝利率的因素還有哪些？植物的種類,親本生長條件,材料的低溫處理,接種密度,培育基組成,培育的環(huán)境條件等。[思索4]為什么花瓣松動會給材料消毒帶來困難？花瓣松動后，微生物就可能已經侵入到花藥，給材料消毒帶來困難。四．試驗設計1.材料的選擇選擇花藥時一般通過確定花粉發(fā)育時期，此時須要對花粉細胞核進行染色，最常用的染色劑是和，它們分別可以將細胞核染成色和色。2.材料的消毒花蕾花蕾（無菌水）清洗（無菌吸水紙）吸干水分（無菌水）沖洗3.接種和培育（1）．剝取花藥：消毒后的花蕾，要在條件下除去花萼,花瓣。在剝離花藥時，要盡量不損傷花藥，否則還要徹底除去花絲，因為。（2）．接種花藥：剝取的花藥要立即接種到上。每個培育瓶接種個花藥。（3）．培育：花藥培育利用的培育基是培育基，pH為，溫度為℃，幼苗形成之前（須要,不須要）光照。（4）．培育20－30d后，花藥開裂，長出或釋放出。前者還要轉移到上進行分化培育成再生植株；后者要盡快并轉移到新的培育基上。（5）．通過愈傷組織形成的植株，經常會出現(xiàn)的變化，因而須要鑒定和篩選?！疽呻y點撥】植物組織培育技術與花藥培育技術有何區(qū)分？相同之處：培育基的配制方法,無菌技術及接種操作等基本相同。不同之處：花藥培育的選材特別重要，需事先摸索時期相宜的花蕾；花藥裂開后釋放出的愈傷組織或胚狀體也要及時更換培育基；花北培育對培育基配方的要求更為嚴格。這些都使花藥的培育難度加大。專題4酶的探討與應用課題1果膠酶在果汁生產中的作用一,果膠與果膠酶的作用1.果膠是植物及的主要組成成分之一，由聚合而成的一種高分子化合物，不溶于。2．果膠酶（1）果膠酶的作用是分解變成可溶性的。（2）果膠酶不是特指某一種酶，而是分解的一類酶的總稱，包括酶,酶和酶等；果膠酶的化學本質是蛋白質，也能被蛋白酶水解掉；（3）膠酶具有酶的通性：只改變反應，不改變反應的平衡點。二,酶的活性與影響酶活性的因素1．酶的活性是指酶肯定化學反應的實力，其凹凸用肯定條件下酶所催化的某一化學反應的來表示。酶反應速度用內，中反應物的或產物的表示。2．影響酶活性的因素常提的是,和酶的抑制劑等。3.探究溫度和pH對酶活性的影響及探究果膠酶用量的兩個試驗都要留意試驗的基本原則：原則和原則，理解試驗中溫度梯度或pH梯度的變化在分析問題時也要用原則分析。三,果膠酶的用量生產果膠時．為了使果膠酶得到充分利用，限制好酶的用量，用量多少常通過手段探究。類型一酶的化學本質是蛋白質【例1】將腸液和果膠酶混合一段時間后，向混合液中加入果汁，結果是果汁。解析：由于果膠酶是蛋白質．腸液中有腸肽酶和胰蛋白酶，所以二者混合后果膠酶被分解．加入果汁后果汁中的果膠也不會被分解．所以果汁仍舊渾濁。答案：仍舊渾濁啟示：駕馭酶的化學本質多數(shù)為蛋白質。類型二酶特性的考查【例2】在生物體內，各種化學反應之所以能有條不紊地進行，是因為………………()A．酶的催化效率具有高效性B．酶的種類具有多樣性C．酶的催化作用具有專一性D．酶的空間結構具有穩(wěn)定性解析：生物體內同時進行很多化學反應，這些化學反應是互不干涉的，因為這些化學反應是在酶的催化下進行的，而酶具有專一性。答案：C啟示：酶的高效性,專一性,易受溫度和PH影響的特性要留意理解后能應用分析。類型三酶活性影響因素的考查【例3】下圖橫坐標均表示酶的反應條件，縱坐標為酶的反應速度，能正確反映溫度和PH與酶反應速度關系的是……()甲乙丙A．甲和乙B.乙和丙C.甲和丙D.丙和丙解析:酶活性受溫度和PH影響,在肯定溫度或PH內,隨溫度或PH的上升而上升:當超過某一溫度或PH后,隨溫度或PH上升而下降,即呈倒鐘型答案:D啟示:溫度和PH都會影響酶的活性,其中低度溫只使酶的活性降低,而高溫,過酸,過堿都會改變酶的結構，使酶徹底失活。四,試驗設計1.探究溫度和PH對果膠酶活性的影響（1）試驗六成熱那個包括,設置具有一系列梯度的和,加入果膠酶反應一段時間,。（2）該試驗的自變量事或，因變量是，檢測因變量是通過測定果汁的或來實現(xiàn)的。思索1：為什么在混合蘋果泥和果膠酶之前，要將果泥和果膠酶分裝在不同的試管中恒溫處理？提示：將果泥和果膠酶分裝在不同的試管中恒溫處理，可以保證底物和酶在混合時的溫度是相同的，避開了果泥和果膠酶混合時影響混合物的溫度，從而影響果膠酶活性的問題。思索2：為什么能夠通過測定濾出的蘋果汁的體積大小來推斷果膠酶活性的凹凸？提示：果膠酶將果膠分解為小分子物質，小分子物質可以通過濾紙，因此蘋果汁的體積大小反應了果膠酶的催化分解果膠的實力。在不同的溫度和pH下，果膠酶的活性越大，蘋果汁的體積就越大。2.探究果膠酶的用量（1）該試驗的自變量是，除此之外，影響果汁產生的因素還有,PH,,蘋果泥等無關變量。（2）推斷的思路是：假如隨著酶的用量增加，過濾到果汁的體積也增加，說明，假如當酶的用量增加到某個值后，再增加酶的用量，過濾到的果汁的體積不再改變，說明。課題2探討加酶洗衣粉的洗滌效果一,基礎知識1．加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉，目前常用的酶制劑有四類：,,和。其中，應用最廣泛,效果最明顯的是和。堿性蛋白酶能將血漬,奶漬等含有的大分子水解成可溶性的或小分子的，使污跡從衣物上脫落。同樣道理，其他酶也是將大分子物質分解為物質，從而使洗衣粉具有更好的去污實力。2,運用加酶洗衣粉時，影響酶活性的因素有,,等，為此，科學家通過生產出了特別的酶，并制成酶制劑，解決了這個問題。3,加酶洗衣粉可以降低和的用量，使洗滌劑朝的方向發(fā)展，削減對環(huán)境的污染。二,試驗設計實例1．探究一般洗衣粉和加酶洗衣粉對衣物污漬的洗滌效果試驗原理：加酶洗衣粉中含有一種或多種酶，可以將相應的大分子物質分解為物質，從而使污跡簡單從衣物上脫落，這是一般洗衣粉難以做到的。試驗材料1000mL大燒杯2只，量筒，水浴鍋，2塊相同的污染布（同種布料,同樣大小,滴入等量,同種的污染物），玻璃棒，秒表,一般洗衣粉,加酶洗衣粉等。試驗過程：①取2只1000mL大燒杯，編號為1,2。②用量筒分別量取500mL蒸餾水分別放入2只燒杯中，將燒杯放入400C的水浴鍋中保溫。③將2塊的污染布分別放入2只燒杯中浸泡時間，然后分別同時在1,2號燒杯中加入等量的洗衣粉和洗衣粉。④用玻璃棒同時,同樣強度攪拌時間。⑤視察并記錄1,2號燒杯中污染布上的污跡殘留狀況。（注：或分別將污跡洗凈，記錄洗滌所需時間。）實例2．探討溫度對加酶洗衣粉洗滌的影響試驗原理：酶的活性受溫度影響，在溫度時，酶的活性最高，高于或低于溫度時，酶的活性下降。試驗材料1000mL大燒杯4只,量筒,冰箱,水浴鍋,4塊相同的污染布（同種布料,同樣大小,滴入等量,同種的污染物），玻璃棒，秒表,加酶洗衣粉等。試驗過程：①取4只1000mL燒杯，，編號為1,2,3,4。②用量筒分別量取500mL蒸餾水放入4只燒杯中，將燒杯分別放在0C,0C,0C,0C的冰箱或水浴鍋中保溫。③將4塊的污染布同時放入4只燒杯中浸泡時間，然后分別同時加入的加酶洗衣粉。④用玻璃棒同時,同樣強度充分攪拌時間。⑤視察并記錄1,2,3,4號燒杯中污染布上的污跡殘留狀況。（注：或分別將污跡洗凈，記錄洗滌所需時間。）實例3．不同種類的加酶洗衣粉對同一污漬的洗滌效果試驗原理：不同種類的加酶洗衣粉所加的酶不同，而酶具有，所以對不同污漬的洗滌效果不同。試驗材料1000mL大燒杯5只,量筒,水浴鍋,5塊相同的污染布（同種布料,同樣大小,滴入等量,同種的奶漬,油漬或番茄汁），玻璃棒，秒表,5種洗衣粉（蛋白酶洗衣粉,脂肪酶洗衣粉,淀粉酶洗衣粉,復合酶洗衣粉和一般洗衣粉）等。試驗過程：（注：每個試驗小組的污染布是同一類型的，若某小組的拿到的是滴入奶漬的污染布，請設計該小組的試驗步驟。）①取5只1000mL燒杯，，編號為1,2,3,4,5。②用量筒分別量取500mL蒸餾水放入5只燒杯中，并將燒杯放在400C的水浴鍋中保溫。③將4塊滴入奶漬的污染布同時放入5只燒杯中浸泡相同時間，然后分別在1,2,3,4,5號燒杯中同時分別加入等量的蛋白酶洗衣粉,脂肪酶洗衣粉,淀粉酶洗衣粉,復合酶洗衣粉和一般洗衣粉。④用玻璃棒同時,同樣強度充分攪拌相同時間。⑤視察并記錄1,2,3,4,5號燒杯中污染布上的污跡殘留狀況，填入下表。（注：或分別將污跡洗凈，記錄洗滌所需時間。）組別污漬類型洗衣粉類型蛋白酶洗衣粉脂肪酶洗衣粉淀粉酶洗衣粉復合酶洗衣粉一般洗衣粉1奶漬2油漬3番茄汁結果分析思索：將不同小組的試驗結果都作統(tǒng)計并記入上表后，可以得到哪些結論？【教材答案】（一）旁欄思索題1．查閱資料，看看一般洗衣粉中包含哪些化學成分？提示：一般洗衣粉中通常包含有：,,堿劑,漂白劑等成分，有的洗衣粉中還含有增白劑,香精和色素，以及填充劑等。2．在本課題中你準備運用什么方法和標準推斷洗滌效果？提示：可在洗滌后比較污物的殘留狀況，如：已消逝,顏色變淺,面積縮小等，最好能進行定量的比較。課題3酵母細胞的固定化課題背景1,問題：酶對環(huán)境條件敏感，易失活；溶液中的酶很難回收，不能再次利用，提高了生產成本；反應后的酶會混合在產物中，如不除去，會影響產品質量。設想：將酶固定在的上。優(yōu)點：使酶既能與反應物，又能與產物，同時，固定在載體上的酶還可以。2,問題：一種酶只能催化一種化學反應，而在生產實踐中，很多產物的形成都是通過一系列的酶促反應才能得到的。設想：將合成酶的直接固定。優(yōu)點：成本，操作。一,基礎知識（一）固定化酶的應用實例1,高果糖漿是指含量為左右的糖漿，能將葡萄糖轉化為果糖的酶是。2,運用固定化酶技術，將這種酶固定在一種的載體上，再將這些酶顆粒裝到一個反應柱內，柱子底端裝上分布著很多的篩板。酶顆粒無法通過篩板的小孔，而反應溶液卻可以自由出入。生產過程中，將葡萄糖溶液從反應柱的注入，使葡萄糖溶液流過反應柱，與接觸，轉化成果糖，從反應柱的流出。反應柱能連續(xù)運用半年，大大降低了生產成本，提高了果糖的產量和質量。（二）固定化細胞技術1,固定化酶和固定化細胞是利用或方法將酶或細胞固定在肯定空間內的技術，包括,和。2,一般來說，酶更適合采納和固定，而細胞多采納固定化。這是因為細胞體積比酶分子的體積大；體積大的細胞難以被或，而個小的酶簡單從包埋材料中。3,包埋法法固定化細胞，即將微生物細胞包埋在不溶于水的的載體中。常用的載體有,,,和等。二,試驗操作（一）制備固定化酵母細胞1．酵母細胞的活化活化就是處于狀態(tài)的微生物重新復原正常的生活狀態(tài)。2．配制物質的量的濃度為0.05mol/L的CaCl2溶液3．配制海藻酸鈉溶液加熱溶化海藻酸鈉時要留意加熱，幾次，并不斷，直到海藻酸鈉為止。假如加熱太快，海藻酸鈉會發(fā)生。4．海藻酸鈉溶液與酵母菌細胞混合將海藻酸鈉溶液冷卻至，加入已活化的海藻酸鈉溶液，進行充分攪拌，使其混合，在轉移至。（二）用固定化酵母細胞發(fā)酵1．將固定好的酵母細胞（凝膠珠）用蒸餾水沖洗2-3次。2．將10%葡萄糖溶液轉移至錐形瓶中，加入固定好的酵母細胞，置于℃下發(fā)酵（時間）。三,結果分析與評價（一）視察凝膠珠的顏色和形態(tài)假如制作的凝膠珠顏色過淺,呈白色，說明海藻酸鈉濃度濃度，該種凝膠珠包埋的酵母細胞數(shù)目，影響試驗效果；假如形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形，則說明海藻酸鈉濃度濃度，制作失敗，須要再作嘗試。（二）視察發(fā)酵的葡萄糖溶液利用固定的酵母細胞發(fā)酵產生酒精，可以看到產生了很多，同時會聞到。四,課題延長工業(yè)生產中，細胞的固定化技術是在的條件下進行的?！窘滩拇鸢浮烤毩?.答：直接運用酶,固定化酶和固定化細胞催化的優(yōu)缺點如下表所示。類型優(yōu)點不足直接運用酶催化，,等。對環(huán)境條件特別，簡單；溶液中的酶，不能被再次利用，提高了生產成本；反應后酶會混在產物中，可能。固定化酶酶既能，又能，同時，固定在載體上的酶還可以被。一種酶只能催化化學反應，而在生產實踐中，很多產物的形成都通過一系列的酶促反應才能得到的。固定化細胞成本，操作。固定后的酶或細胞與反應物不簡單接近，可能導致等。3.提示：可以從酶的結構的多樣性，對理化條件的敏感程度等角度思索?！局R拓展】1,酵母細胞的活化。在缺水的狀態(tài)下，微生物會處于狀態(tài)。活化就是讓處于休眠狀態(tài)的微生物。酵母細胞所須要的活化時間較短，一般須要0.5～1h，老師須要提前做好準備。此外，酵母細胞活化時體積會變大，因此活化前應當選擇體積足夠大的容器，以避開酵母細胞的活化液溢出容器外。2,是操作中最重要的一環(huán)，涉及到試驗的成敗，老師肯定要提示學生依據教材的提示進行操作。海藻酸鈉的濃度涉及到固定化細胞的質量。假如海藻酸鈉濃度過高，將很難形成凝膠珠；假如濃度過低，形成的凝膠珠所包埋的酵母細胞的數(shù)目少，影響試驗效果。3,剛形成的凝膠珠應在中浸泡一段時間，以便形成穩(wěn)定的結構。檢驗凝膠珠的質量是否合格，可以運用下列方法。一是用鑷子夾起一個凝膠珠放在試驗桌上用手擠壓，假如凝膠珠不簡單裂開，沒有液體流出，就表明凝膠珠的制作勝利。二是在試驗桌上用力摔打凝膠珠，假如凝膠珠很簡單彈起，也能表明制備的凝膠珠是勝利的。專題5DNA和蛋白質技術課題1DNA的粗提取與鑒定一,基礎知識（一）提取DNA的方法提取生物大分子的基本思路是選用肯定的或方法分別具有不同物理或化學性質的生物大分子。對于DNA的粗提取而言，就是要利用DNA與RNA,蛋白質和脂質等在和性質方面的差異，提取，去除其他成分。（1）DNA的溶解性：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度的中溶解度不同，利用這一特點，選擇適當?shù)柠}濃度就能使充分溶解，而使雜質沉淀，或者相反，以達到分別目的。此外，DNA不溶于溶液，但是細胞中的某些蛋白質則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質進一步的分別。（2）DNA對酶,高溫柔洗滌劑的耐受性：蛋白酶能水解，但是對DNA影響。大多數(shù)蛋白質不能忍受60—80oC的高溫，而DNA在℃以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解，但對DNA影響。（二）DNA的鑒定在條件下，DNA遇會被染成色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。二,試驗設計（一）試驗材料的選取凡是含有的生物材料都可以考慮，但是運用的生物組織，勝利的可能性更大。（二）裂開細胞，獲得含DNA的濾液動物細胞的裂開比較簡單，以雞血細胞為例，在雞血細胞液中加入肯定量的，同時用玻璃棒，過濾后收集濾液即可。假如試驗材料是植物細胞，須要先用溶解細胞膜。例如，提取洋蔥的DNA時，在切碎的洋蔥中加入肯定的和，進行充分的攪拌和研磨，過濾后收集研磨液。（三）去除濾液中的雜質方案一利用DNA在不同濃度的NaCl溶液中的不同，通過限制NaCl溶液的濃度去除雜質。方案二直接在濾液中加入嫩肉粉，反應10～15min，嫩肉粉中的能夠分解蛋白質。方案三將濾液放在℃的恒溫水浴箱保溫10～15min，留意范圍。（四）DNA的析出與鑒定1,將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積,的酒精溶液（體積分數(shù)為），靜置min，溶液中會出現(xiàn)，這就是粗提取的DNA。用玻璃棒攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分。2,取兩支20ml的試管，各加入物質的量濃度為的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解。然后，向兩支試管中各加入4ml的試劑?；旌蟿蚍Q后，將試管置于中加熱5min，待試管后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變。實例：用雞血細胞液粗提取DNA并鑒定（蘇教版必修2）步驟操作圖示1,提取雞血細胞的細胞核物質將制備好的雞血細胞液（已在課前配好）5~10mL，注入到50ml燒杯中。向燒杯中加入20mL，同時用玻璃棒沿一個方向快速攪拌5min，然后，用放有紗布的漏斗將血細胞過濾至1000mL的燒杯中，取其濾液。2,溶解細胞核內的DNA將物質的量濃度為40mL加入到濾液中，并作玻璃棒沿一個方向攪拌1min，使其混合勻稱，這時DNA在溶液中呈溶解狀態(tài)。3,析出含DNA的粘稠物沿燒杯內壁緩緩加入，同時用玻璃棒沿一個方向不停地輕輕攪拌，這時燒杯中有絲狀物出現(xiàn)。接著加入蒸餾水，溶液中出現(xiàn)的黏稠物會越來越多。當黏稠物不再增加時停止加入蒸餾水。4,濾取含DNA的粘稠物用放多層紗布的漏斗，過濾溶液至1000mL的燒杯中。取紗布上的。5,將DNA的粘稠物再溶解取一個50mL燒杯，向燒杯內注入物質的量濃度為20mL。用鈍頭鑷子將紗布上的黏稠物夾至NaCl溶液中，用玻璃棒沿一個方向不停地攪拌3min，使黏稠物盡可能多地溶解于溶液中。6,過濾含DNA的氯化鈉溶液取一個100mL燒杯，用放有兩層紗布的漏斗過濾以上溶液。取其濾液（DNA溶于中）。7,提取含雜質較少的DNA在上述濾過的溶液中，加入的,體積分數(shù)為50mL（加入時動作要慢），并作用玻璃棒沿一個方向攪拌，溶液中會出現(xiàn)含雜質較少的絲狀物。當玻璃棒上出現(xiàn)絲狀物纏繞時，接著漸漸攪拌，至不再增加時，用玻璃棒將絲狀物卷起，并用濾紙吸取上面的水分。8,DNA的鑒定取兩支20mL的試管，各加入物質的量濃度為5mL，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解。然后，向兩支試管中各加入4mL的二苯胺試劑。混合勻稱后，將試管置于沸水中加熱5min，等試管冷卻后，視察并且比較兩支試管中溶液顏色的變化。三,操作提示1,以血液為試驗材料時，每100ml血液中須要加入3g，防止。2,加入洗滌劑后，動作要,，否則簡單產生大量的泡沫，不利于后續(xù)步驟地操作。加入酒精和用玻璃棒攪拌時，動作要，以免加劇，導致DNA分子不能形成絮狀沉淀。3,二苯胺試劑要，否則會影響鑒定的效果。四,課題成果評價1,是否提取出了DNA視察你提取的DNA顏色，假如不是白色絲狀物，說明DNA中的較多；二苯胺鑒定出現(xiàn)藍色說明試驗，假如不呈現(xiàn)藍色，可能所提取的DNA，或是試驗操作中出現(xiàn)，須要重新制備。2,分析DNA中的雜質本試驗提取的DNA粗制品有可能仍舊含有,,等雜質。3,不同試驗方法的比較對于不同的試驗方法，本課題可以采納分組的方法進行探討。首先選取不同的試驗材料，其次同種材料還可以采納不同方法，從多方面比較試驗結果，如DNA的,，二苯胺顯色的等，看看哪種試驗材料,哪種提取方法的效果更好。五,課題延長本課題運用的洗滌劑是多組分的混合物，在嚴格的科學試驗中很少運用。試驗室提取高純度的DAN時，通常運用,或等化學試劑?！窘滩拇鸢浮浚ㄒ唬┡詸谒妓黝}1．為什么加入蒸餾水能使雞血細胞裂開？答：蒸餾水對于雞血細胞來說是一種液體，水分可以大量進入血細胞內，使血細胞，再加上攪拌的，就加速了雞血細胞的裂開（細胞膜和核膜的裂開），從而釋放出DNA。2．加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么？答：洗滌劑是一些離子去污劑，能，有利于DNA的；食鹽的主要成分是NaCl，有利于。3．假如研磨不充分，會對試驗結果產生怎樣的影響？答：研磨不充分會使細胞核內的DNA釋放不完全，提取的DNA量，影響試驗結果，導致看不到絲狀沉淀物,用二苯胺鑒定不顯示藍色等。4．此步驟獲得的濾液中可能含有哪些細胞成分？答：可能含有,和等雜質。5．為什么反復地溶解與析出DNA，能夠去除雜質？答：用高鹽濃度的溶液溶解DNA，能除去；用低鹽濃度使DNA析出，能除去。因此，通過反復溶解與析出DNA，就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質。6．方案二與方案三的原理有什么不同？答：方案二是利用分解雜質蛋白，從而使提取的DNA與蛋白質分開；方案三利用的是DNA和蛋白質對耐受性的不同，從而使蛋白質，與DNA分別。（二）探討題圖5-1是DNA在NaCl溶液中的溶解度曲線，請依據曲線圖，思索下面的問題1．在什么濃度下，DNA的溶解度最??？DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何變化的？答：在NaCl溶液濃度為0.14mol/L時，DNA的溶解度最?。划擭aCl溶液濃度低于0.14mol/L時，隨著NaCl溶液濃度的上升，DNA的溶解度；當NaCl溶液濃度高于0.14mol/L時，隨著NaCl溶液濃度的上升，DNA的溶解度。2．如何通過限制NaCl溶液的濃度使DNA在鹽溶液中溶解或析出？答：依據DNA在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最小的特性，一般先用較高濃度的NaCl溶液使DNA溶解，然后再用蒸餾水稀釋至使DNA析出。（三）練習1．答：提取DNA的第一步是材料的選取，其目的是肯定要選取DNA含量的生物材料，否則會由于試驗過程中或多或少的損失而造成檢測的困難；第二步是DNA的釋放和溶解，這一步是試驗勝利與否的關鍵，要；第三步是DNA的純化，即依據DNA的,對及的耐受性的不同等特性，最大限度地將DNA與雜質分開；最終一步是對DNA進行鑒定，這是對整個試驗的結果的檢測。2．答：提取蛋白質比提取DNA的難度大。這是因為，與DNA相比，蛋白質對溫度,鹽濃度,pH等條件要敏感得多，很簡單；并且蛋白質的空間結構，理化性質，使得蛋白質的提取沒有一種統(tǒng)一的方法，只能依據特定蛋白質的特性摸索提取的條件，設計特定的方法?！局R拓展】1．制備雞血細胞液時，為什么要在簇新的雞血中加入檸檬酸鈉？答：制備雞血細胞液時，要在簇新的雞血中加入抗凝劑——檸檬酸鈉，。其原理是檸檬酸鈉能與血漿中Ca2+發(fā)生反應，生成檸檬酸鈣絡合物，血漿中游離的Ca2+大大削減，血液便不會凝固。2．雞血離心或靜置沉淀后，為什么要棄出上清液？答：因為上清液是，沒有血細胞。DNA主要存在于試管底部的中，所以提取雞血中的DNA時，要除去血液中的上清液。3．盛放雞血細胞液的容器最好是塑料容器，為什么？答：雞血細胞裂開以后釋放出的DNA，簡單被玻璃容器吸附，由于細胞內DNA的含量原來就比較少，再被玻璃容器吸附去一部分，提取到的DNA就會更少。因此，試驗過程中最好運用的燒杯和試管，這樣可以削減提取過程的DNA的損失。4．為什么析出DNA時要用冷卻的酒精？答：預冷的酒精溶液具有以下優(yōu)點。一是抑制核酸水解酶的活性，防止DNA降解；二是降低分子運動，易于形成沉淀析出；三是低溫有利于增加DNA分子的柔韌性，削減斷裂。課題2多聚酶鏈式反應擴增DNA片段一基礎知識1．PCR原理填寫下列表格參加的組分在DNA復制中的作用解旋酶DNA母鏈合成子鏈的原料DNA聚合酶引物DNA的兩條鏈是反向平行的，通常將DNA的羥基末端稱為，而磷酸基團的末端稱為。DNA聚合酶不能開始合成DNA，而只能，因此，DNA復制須要引物。DNA的合成方向總是。在DNA的復制過程中，復制的前提是。在體外可通過限制來實現(xiàn)。在的溫度范圍內，DNA的雙螺旋結構將解體，雙鏈分開，這個過程稱為。PCR利用了DNA的原理，通過限制溫度來限制雙鏈的解聚與結合。由于PCR過程的溫度高，導致DNA聚合酶失活，后來的DNA聚合酶的發(fā)覺和應用，大大增加了PCR的效率。PCR反應須要在肯定的緩沖溶液中供應：，，，，同時通過限制溫度使DNA復制在體外反復進行。2．PCR的反應過程PCR一般要經驗循環(huán)，每次循環(huán)可以分為,和三步。從第二輪循環(huán)開始，上一次循環(huán)的產物也作為模板參加反應，并且由延長而成的DNA單鏈會與結合，進行DNA的延長，這樣，DNA聚合酶只能，使這段固定長度的序列成指數(shù)擴增。3．試驗操作在試驗室中，做PCR通常運用，它是一種薄壁塑料管。詳細操作時，用微量移液器，按PCR反應體系的配方在中依次加入各組分，，再參照下表的設置設計好PCR儀的循環(huán)程序即可。4．操作提示為避開外源DNA等因素的污染，PCR試驗中運用的,,以及蒸餾水等在運用前必需進行。PCR所用的緩沖液和酶應分裝成小份，并在儲存。運用前，將所需試劑從冰箱拿出，放在冰塊上緩慢溶化。在微量離心管中添加反應成分時，移液管上的槍頭要。課題3血紅蛋白的提取和分別一,基礎知識（一）凝膠色譜法1,凝膠色譜法也稱做，是依據分別蛋白質的有效方法。2,凝膠事實上是一些微小的球體，這些小球體大多數(shù)是由構成的，如葡聚糖或瓊脂糖。3,在小球體內部有很多貫穿的通道，相對分子質量不同的蛋白質分子通過凝膠時速度不同，相對分子質量的蛋白質簡單進入凝膠內部的通道，路程，移動速度；而相對分子質量的蛋白質無法進入凝膠內部的通道，只能在移動，路程，移動速度。相對分子質量不同的蛋白質分子因此得以分別。（二）緩沖溶液1,緩沖溶液的作用是。2,緩沖溶液通常由溶解于水中配制而成的。3,生物體內進行的各種生物化學反應都是在肯定的pH下進行的，為了，必需保持體外的pH與體內的。（三）電泳1,電泳是指。2,很多重要的生物大分子，如多肽,核酸等都具有可解離的基團，在肯定的pH下，這些基團會帶上。在電場的作用下，這些帶電分子會向著與其所帶電荷的電極移動。電泳利用了待分別樣品中各分子的差異以及分子本身的,的不同，使帶電分子產生不同的，從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分別。3,兩種常用的電泳方法是和，在凝膠中加入SDS，電泳速率完全取決于，因此，在測定蛋白質分子量時通常運用。二,試驗操作蛋白質的提取和分別一般分為四步：,,和。（一）樣品處理1,紅細胞的洗滌：洗滌紅細胞的目的是，采集的血樣要及時分別紅細胞，分別時采納離心（500r/min），然后用膠頭吸管吸出上層透亮的，將下層暗紅色的倒入燒杯，再加入（質量分數(shù)為），緩慢攪拌min，離心，如此重復洗滌三次，直至，表明紅細胞已洗滌干凈。2,血紅蛋白的釋放：在和作用下，紅細胞裂開釋放出血紅蛋白。3,分別血紅蛋白溶液：將攪拌好的混合溶液離心（2000r/min）后，試管中的溶液分為4層。第一層為無色透亮的，第2層為白色薄層固體，是，第3層是紅色透亮液體，這是，第4層是的暗紅色沉淀物。將試管中的液體用濾紙過濾，除去脂溶性沉淀層，于分液漏斗中靜置片刻后，分出下層的。（二）粗分別：透析取1mL的血紅蛋白溶液裝入中，將透析袋放入盛有300mL的物質的量的濃度為20mmol/L的（PH7.0）中，透析12h。透析可以去除樣品中的雜質，或用于更換樣品的緩沖液。（三）純化：凝膠色譜操作1,制作凝膠色譜柱2,裝填凝膠色譜柱①裝填前將色譜柱固定在支架上。因為干的凝膠和用緩沖液平衡好的凝膠的體積，所以裝柱前須要依據色譜柱的內體積計算所須要的凝膠量。②裝填時凝膠要緩慢倒入色譜柱內，裝填時要輕輕敲動色譜柱，使凝膠裝填，色譜柱內不得有存在，一旦發(fā)覺，必需重裝。③裝填完后，連接緩沖液洗脫瓶，在約50cm高的操作壓下，用300mL物質的量濃度為20mmol/L的（PH7.0）充分洗滌平衡凝膠12h，使凝膠。3,樣品的加入和洗脫①準備：打開色譜柱下端的流出口，使柱內凝膠面上的的緩沖液與凝膠面，關閉出口。②加樣：用吸管當心地將1mL透析后的樣品加到色譜柱的頂端，留意。加樣后打開下端出口，直到樣品后，關閉下端出口。③洗脫：當心加入物質的量的濃度為20mmol/L的（PH7.0）到適當高度，連接緩沖液洗脫瓶，打開下端出口進行洗脫。待接近色譜柱時，用試管收集。（四）純度鑒定：三,操作提示1,紅細胞的洗滌洗滌次數(shù),離心速度與離心時間特別重要。洗滌次數(shù)過少，無法除去；離心速度過高和時間過長會使一同沉淀，達不到分別的效果。2,色譜柱填料的處理商品凝膠使干燥的顆粒，運用前需直接放在洗脫液中膨脹。為了加速膨脹，可以將加入洗脫液的濕凝膠用加熱，漸漸升溫至接近沸騰，通常只需1—2h。這種方法不但，而且可以除去凝膠中可能帶有的，解除膠粒內的。3,凝膠色譜柱的裝填在色譜柱中裝填凝膠的時候要盡量，以降低凝膠顆粒之間的空隙。在裝填凝膠柱時，不得有氣泡存在。氣泡會，降低。在凝膠色譜操作過程中，不能發(fā)生洗脫液，露出凝膠顆粒的現(xiàn)象。一旦發(fā)生這種狀況，凝膠色譜柱須要重新裝填。4,蛋白質的分別在蛋白質分別過程中，細致視察紅色區(qū)帶在洗脫過程中的移動狀況。假如紅色區(qū)帶地移動，說明色譜柱制作勝利?！窘滩拇鸢浮浚ㄒ唬┡詸谒妓黝}你能從凝膠色譜的分別原理分析為什么凝膠的裝填要緊密,勻稱嗎？答：凝膠事實上是一些微小的多孔球體，小球體內部有很多貫穿的通道。相對分子質量較大的蛋白質分子不能進入凝膠顆粒內部，只能分布在顆粒之間，通過的路程較短，移動速度較快；相對分子質量較小的蛋白質分子比較簡單進入凝膠內的通道，通過的路程較長，移動速度較慢。因此，樣品中相對分子質量較大的蛋白質先流出，相對分子質量中等的分子后流出，相對分子質量最小的分子最終流出，從而使各種相對分子質量不同的分子得以分別。假如凝膠裝填得不夠緊密,勻稱，就會在色譜柱內，使本該進入凝膠內部的樣品分子從這些空隙中通過，，影響分別的效果。（二）練習1．答：凝膠色譜法也稱為安排色譜法，它是依據分子量的大小分別蛋白質的方法之一。所用的凝膠事實上是一些微小的多孔球體，這些小球體大多數(shù)是由多糖類化合物構成，小球體內部有很多貫穿的通道，當一個含有各種分子的樣品溶液緩慢流經時，各分子在色譜柱內進行兩種不同的運動，即垂直向下的運動和無規(guī)則的擴散運動。相對分子質量的蛋白質分子不能進入凝膠顆粒內部，只能分布在顆粒之間，通過的路程，移動速度；相對分子質量的蛋白質分子比較簡單進入凝膠內的通道，通過的路程，移動速度。因此，樣品中相對分子質量較大的蛋白質先流出，相對分子質量中等的分子后流出，相對分子質量最小的分子最終流出，這種現(xiàn)象又叫分子篩現(xiàn)象。2．答：在肯定范圍內，能對抗外來少量強酸,強堿或稍加稀釋不引起溶液pH發(fā)生明顯變化的作用叫做緩沖作用，具有緩沖作用的溶液叫做緩沖溶液。緩沖溶液通常是由1～2緩沖劑溶解于水中制得，調整緩沖劑的配比就可制得不同pH范圍的緩沖液。緩沖溶液的作用是維持反應體系的pH不變。在生物體內進行的各種生物化學過程都是在精確的pH下進行的，受到氫離子濃度的嚴格調控。為了在試驗室條件下，就必需。3．答：電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程。很多重要的生物大分子，如氨基酸,多肽,蛋白質,核苷酸,核酸等都具有可解離基團，它們在某個特定的pH下會帶上正電或負電；在電場的作用下，這些帶電分子會向著與其所帶電荷的電極方向移動。電泳技術就是在電場的作用下，利用待分別樣品中各種分子帶電以及分子本身,等性質的差異，使帶電分子產生的遷移速度，從而達到對樣品進行,或的目的。4．答：血紅蛋白提取和分別的程序可分為四大步,包括：樣品處理,粗分別,純化和純度鑒定。首先通過,,等操作收集到血紅蛋白溶液，即樣品的處理；再經過去除分子量較小的雜質，即樣品的粗分別；然后通過將相對分子質量大的雜質蛋白除去，即