標準解讀

《GB/T 40192-2021 刺盤孢屬實時熒光PCR檢疫鑒定方法》是一項國家標準，旨在為刺盤孢屬（Colletotrichum）真菌的快速準確鑒定提供技術指南。該標準適用于植物及其產(chǎn)品中刺盤孢屬真菌的檢測與鑒定工作，尤其在進出口檢驗檢疫領域具有重要意義。

標準詳細規(guī)定了使用實時熒光PCR技術對刺盤孢屬進行分子生物學水平上的鑒定流程，包括樣品采集、DNA提取、引物設計、反應體系建立及結果分析等步驟。其中，對于樣本處理部分，強調(diào)了如何從待測材料中有效分離出高質(zhì)量的DNA；而針對PCR擴增環(huán)節(jié)，則明確了特定條件下目標序列的最佳擴增條件以及非特異性擴增產(chǎn)物的排除方法。此外，還介紹了基于熒光信號強度變化來判斷是否存在刺盤孢屬的方法，并給出了陽性對照和陰性對照設置的具體要求，以確保實驗結果的可靠性。


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  • 2021-05-21 頒布
  • 2021-12-01 實施
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文檔簡介

ICS6502001

CCSB.16.

中華人民共和國國家標準

GB/T40192—2021

刺盤孢屬實時熒光PCR檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofColletotrichumCordausingreal-timePCR

2021-05-21發(fā)布2021-12-01實施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

國家標準化管理委員會

GB/T40192—2021

前言

本文件按照標準化工作導則第部分標準化文件的結構和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任

。。

本文件由全國植物檢疫標準化技術委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本文件起草單位中華人民共和國寧波海關中國科學院微生物研究所中華人民共和國烏魯木齊

:、、

海關中國檢驗檢疫科學研究院

、。

本文件主要起草人段維軍蔡磊劉芳李雪蓮王翀趙鵬郭立新張慧麗張永江陳先鋒

:、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T40192—2021

刺盤孢屬實時熒光PCR檢疫鑒定方法

1范圍

本文件描述了植物病原真菌刺盤孢屬實時熒光檢疫鑒定方法

PCR。

本文件適用于攜帶刺盤孢屬病菌的植物及其產(chǎn)品中刺盤孢屬病菌的檢測篩查

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文

。,

件僅該日期對應的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于

,;,()

本文件

。

植物病原真菌檢測規(guī)范

SN/T2589

3術語和定義

本文件沒有需要界定的術語和定義

。

4刺盤孢屬的分類信息

中文名刺盤孢屬

:。

學名Colletotrichum

:Corda。

根據(jù)第版分類系統(tǒng)刺盤孢屬隸屬于真菌界子囊菌

《DictionaryoftheFungi》(10)(2008),(Fungi),

門糞殼菌綱小叢殼目小叢殼科

(Ascomycota),(Sordariomycetes),(Glomerellales),(Glomerellaceae)。

傳播途徑刺盤孢屬病菌主要由種子或病殘體等傳播也可經(jīng)風雨水和昆蟲傳播

:,、。

5鑒定原理

根據(jù)刺盤孢屬病菌的序列特征采用實時熒光方法應用所設計引物和探針對刺盤孢

DNA,PCR,

屬病菌進行檢測鑒定

。

6儀器設備器具試劑和培養(yǎng)基

、、

61儀器設備和器具

.

高壓滅菌鍋顯微鏡解剖鏡天平水浴鍋純水儀渦旋振蕩器紫外分光光度計高速冷凍離心機

、、、、、、、、

冰箱生化培養(yǎng)箱實時熒光儀微量移液器

、、PCR、(0.1μL~2.5μL、1μL~10μL、10μL~50μL、20μL~

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