第三組-筒箭毒

筒箭毒對神經(jīng)——肌接頭的興奮傳遞的影響

第三組員：呂青，石徑，蘇萌，任燕北，牛亞蒙，王創(chuàng)威指導老師：趙文超Page

2當神經(jīng)纖維傳來的動作電位到達神經(jīng)末梢時，接頭前膜首先發(fā)生去極化，膜的去極化引起該處膜上存在的電壓門控鈣通道開放，鈣離子內(nèi)流，鈣離子濃度增高，促使突觸小泡向接頭前膜內(nèi)側(cè)移動，經(jīng)出胞過程釋放ACh至接頭間隙，與終板膜上的受體結(jié)合，引起膜通透性改變,離子通道開放，使終板膜發(fā)生去極化，產(chǎn)生終板電位，觸發(fā)收縮偶聯(lián)，引起肌肉收縮。其后ACh極迅速被突觸間隙的膽堿脂酶水解滅活。

實驗的原理：Page

3新斯的明又名普洛色林、普洛斯的明，是擬膽堿藥中的抗膽堿酯酶藥之一，是毒扁豆堿的人工合成代用品，有甲基硫酸新斯的明和溴化新斯的明兩種，均為白色結(jié)晶性粉末，無臭，味苦，極易溶于水，易溶于乙醇，幾乎不溶于乙醚。新斯的明進入機體后，通過可逆性抑制膽堿酯酶活性，使乙酰膽堿不能水解，從而提高體內(nèi)受體部位的乙酰膽堿濃度，加強和延長乙酰膽堿的作用，呈現(xiàn)出全部膽堿能神經(jīng)興奮的效應。Page

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筒箭毒屬于非去極化肌松藥，又稱競爭型肌松藥(competitivemuscularrelaxants)，右旋體具藥理活性。此類藥物與運動神經(jīng)終板膜上的N2膽堿受體結(jié)合，能競爭性地阻斷ACh的除極化作用，不引起膜通透性改變，致使離子通道關(guān)閉，終板膜不能去極化產(chǎn)生動作電位，使骨骼肌松弛。新斯的明抑制膽堿酯酶，使神經(jīng)未梢釋放的ACh不被破壞。ACh濃度升高而競爭性地對抗筒箭毒堿的肌松作用。5通過觀察神經(jīng)電、肌電與肌肉收縮，了解筒箭毒堿的對于骨骼肌神經(jīng)—肌肉接頭處興奮傳遞的影響，并分析其作用機制。實驗的目的：6實驗對象：蟾蜍

蛙類的一些基本生理活動規(guī)律與溫血動物相似，而維持其離體組織正常活動所需的理化條件比較簡單，易于建立和控制。因此在實驗中常用蟾蜍或蛙的坐骨神經(jīng)腓腸肌標本來觀察興奮。為什么老是我？Page

7實驗的儀器與試劑：蛙類手術(shù)器械一套、0.01％筒箭毒堿(任氏液配制)、0.05％新斯的明(任氏液配制)、任氏液、細線保護刺激電極2支、開放刺激電極2支、雙向電路開關(guān)、電子刺激器、隔離器、張力換能器、計算機實時記錄分析系統(tǒng)Page

8實驗的儀器與試劑：蛙類手術(shù)器械一套、0.01％筒箭毒堿(任氏液配制)、0.05％新斯的明(任氏液配制)、任氏液、細線

保護刺激電極2支、開放刺激電極2支、雙向電路開關(guān)、電子刺激器、隔離器、張力換能器、計算機實時記錄分析系統(tǒng)Page

9實驗步驟：一、制備脊蛙二、制作坐骨神經(jīng)腓腸肌標本，將制作的標本與任氏液中浸泡5-10分鐘。三、檢查標本的興奮性，用經(jīng)任氏液清潤的鋅銅弓輕輕接觸一下坐骨神經(jīng)，如腓腸肌發(fā)生迅速而明顯的收縮，則表明標本興奮性良好，實驗可用。四、將制作的坐骨神經(jīng)腓腸肌標本安裝刺激電極和記錄電極，并與張力換能器計算機實時記錄分析系統(tǒng)相連。用改變雙向開關(guān)的方向來控制刺激神經(jīng)或肌肉。將肌腱上的細線縛于張力換能器，使之與記錄系統(tǒng)相連，以記錄肌肉的收縮。各儀器接地線。Page

10五、1)尋找最適刺激強度將標本的股骨殘端固定于肌動器的螺絲孔內(nèi)。進入“刺激強度與反應的關(guān)系”實驗模塊，選擇程控模式，設(shè)置參數(shù)為起始刺激0.02伏，每間隔1秒，刺激強度增加0.01伏。隨著刺激強度增加，肌肉收縮產(chǎn)生的張力不斷增大直至最大值，此時如果接著增加刺激強度，肌肉收縮產(chǎn)生的張力不會繼續(xù)增大。肌肉出現(xiàn)最大收縮張力時所對應之最小刺激強度即為最適刺激強度。2)以最適強度刺激坐骨神經(jīng)，連續(xù)測量并記錄乙酰膽堿的濃度變化；觀察并記錄神經(jīng)電位、肌電位及肌肉收縮情況，Page

113)向坐骨神經(jīng)腓腸肌持續(xù)標本滴加0.01％筒箭毒堿，當肌電消失時，注意坐骨神經(jīng)電位的變化。放置一段時間，待標本恢復正常之后，以最適強度刺激坐骨神經(jīng)，再次連續(xù)測量并記錄乙酰膽堿的濃度變化。然后改變雙向開關(guān)方向，用電直接刺激肌肉，觀察肌電活動與肌肉的收縮。4)停止刺激肌肉，持續(xù)刺激坐骨神經(jīng)。同時緩慢滴加0.05％新斯的明0.15ml／100g，觀察神經(jīng)電位、肌電位和肌肉活動變化情況。六、再制作兩組蛙的坐骨神經(jīng)肌標本，重復實驗，記錄實驗結(jié)果。Page

12預期結(jié)果：刺激坐骨神經(jīng)，神經(jīng)動作電位出現(xiàn)，肌電位出現(xiàn)，肌肉收縮。當?shù)渭油布竞?，刺激坐骨神?jīng)，神經(jīng)動作電位正常，但不出現(xiàn)肌電位，肌肉不收縮。直接刺激肌肉，肌電位出現(xiàn)，肌肉正常收縮。在開始測量時，2）中的測量濃度與3）中的相等，在隨后的測量中，3）中的測量濃度比2）中的高。當?shù)渭有滤沟拿骱螅窠?jīng)動作電位仍正常，肌電位變?yōu)檎?，肌肉收縮。Page

13實驗分析：

結(jié)果說明箭筒毒對神經(jīng)—肌接頭興奮有抑制作用。直接刺激肌肉，肌電位出現(xiàn)，肌肉正常收縮，說明肌細胞正常，筒箭毒不是通過損傷肌細胞來抑制肌肉收縮。由于隨后的測量中，3）中的ACh濃度比2）中的高，說明筒箭毒不是通過直接分解乙酰膽堿或者增強乙酰膽堿酯酶活性來降低乙酰膽堿濃度從而抑制肌肉收縮的。滴加新斯的明后，興奮傳遞恢復正常，肌肉再次正常收縮，說明筒箭毒沒有破壞乙酰膽堿能受體。并且由于新斯的明可抑制膽堿酯酶，使神經(jīng)末梢釋放ACh不被破壞，ACh濃度升高。ACh濃度升高后，肌肉又恢復收縮，說明是筒箭毒與ACh競爭性抑制，結(jié)合終板膜的受體而形成的。若滴加筒箭毒后未出現(xiàn)預期結(jié)果，可能是因為筒箭毒的濃度太低，達不到與ACh競爭的濃度，肌肉仍正常興奮，肌肉收縮。若滴加新斯的明后未出現(xiàn)預期結(jié)果，可能是因為新斯的明的濃度太低，達不到抑制乙酰膽堿酯酶活性的效果，肌肉不收縮。Page

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制備神經(jīng)肌肉標本過程中，要不斷滴加任氏液，以防止標本干燥，喪失正常生理活性。

滴加筒箭毒堿和新斯的明溶液過程中避免兩刺激電極接觸，發(fā)生短路。

操作過程中應避免強力牽拉和手捏神經(jīng)或夾傷神經(jīng)肌肉。

分離神經(jīng)時注意手和金屬器械不要碰到神經(jīng)。

筒箭毒堿和新斯的明溶液要以任氏液為溶劑。

保持張力轉(zhuǎn)換器與標本連線的張力保持不變。15參考文獻：1.人民衛(wèi)生出版社，生理學（第2版），北京，2012年12月，57頁2.鄭州大學生理教研室，《生理實驗指導》，2010年十二月3.

醫(yī)學全在線>藥學理論>臨床用藥須知>麻醉藥及其輔助藥物>正文:筒箭毒堿的副作用/藥理作用/適應癥/用法用量Page

16殺人又救命的箭毒用毒藥殺人是古今中外謀殺案中經(jīng)常采用的方法，在中國有大家熟知的潘金蓮用砒霜毒殺武大郎，楊乃武與小白菜案中用巴豆泄死證人的藥店老板等等。拿破侖的死亡據(jù)說也有毒殺嫌疑。到了近代，發(fā)現(xiàn)了更為陰險的毒藥，可以做到既看不到明顯的中毒癥狀，也化驗不出來，因為箭毒進入人體后會很快分解為對人體無害的物質(zhì)，這給法醫(yī)正確判定死者的死因增加了極大的困難。1994年年初，日本警方相繼接到5名男女失蹤的報案，正當警方為這件渺無頭緒的案件發(fā)愁時，1月26日突然接到報告說，在鹽尻市的農(nóng)田里發(fā)現(xiàn)了一具無名女尸，接著警方又在附近搜索，3周內(nèi)又挖掘出一具男尸。次日又在雪下個不停的凍土中挖出3具尸體。這5具尸體的共同特征是，沒有任何的明顯外傷，而且在進一步的驗尸中也為發(fā)現(xiàn)任何異常，致使破案工作陷入絕境。但是在尋訪死者家屬中卻意外地收獲了一個引人注目的線索，即這5人均是愛犬的人，恰好當?shù)赜袀€訓犬所，警方沿著這一線索進行追蹤，終于將1名自報在訓犬所作訓犬員的嫌疑男子抓獲，在警方強大的攻勢下，男子承認自己以訓犬為誘餌引誘他們落入圈套，然后注射氯化琥珀膽堿骨骼肌松弛劑（箭毒）。

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