第七章 確認與驗證

第七章確認與驗證確認—證明廠房、設施、設備和檢驗儀器能正確運行并可達到預期結果的一系列活動。驗證—證明任何操作規(guī)程（或方法）、檢驗方法、生產(chǎn)工藝或系統(tǒng)能達到預期結果的一系列活動。驗證與確認的關系驗證和確認本質(zhì)上是相同的概念確認通常用于廠房、設施、設備和檢驗儀器驗證則用于操作規(guī)程（或方法）、生產(chǎn)工藝或系統(tǒng)第一節(jié)驗證的概念和分類一、驗證的概念20世紀50年代，美國出現(xiàn)輸液導致敗血癥的事故，到了70年代，該類案件進一步增多。1972年，英國發(fā)生德旺波特事故。美國FDA檢查后發(fā)現(xiàn)，藥廠在生產(chǎn)過程中和質(zhì)量控制過程中明顯達不到GMP規(guī)定。70年代，美國友FDA現(xiàn)場檢驗發(fā)展成為過程驗證，并逐步在制藥業(yè)中得到了共識。早期驗證主要強調(diào)對滅菌工序的驗證，1978年美國FDA公布《藥品工藝檢查驗收標準》，提出工藝驗證概念。1987年，美國FDA發(fā)布《藥品生產(chǎn)工藝驗證總則指南》。驗證就是證明任何程序、生產(chǎn)過程、設備、物料、活動或系統(tǒng)確實能“達到預期”效果的有“文件證明”的一系列活動。驗證的是GMP的理論基礎，驗證的思想與GMP的中心思想是一致的。預期效果預期的效果是一個定量值，而且是符合規(guī)定的通用標準值，而不是企業(yè)自己的標準。形成文件驗證過程中的各項活動要形成文件，包括驗證計劃、驗證方案、測試記錄、驗證報告等。驗證的意義驗證是藥品生產(chǎn)企業(yè)實施GMP的基礎。驗證可提高企業(yè)經(jīng)濟效益。及時糾正偏差，提高人員的安全保障減少對半成品和成品的檢驗依賴性減少廢品、返工和投訴二、驗證的分類按驗證方式（實施時間）：前驗證、同步驗證、回顧性驗證、再驗證。按驗證對象：廠房設施與設備的驗證、產(chǎn)品工藝驗證、分析方法驗證、清潔驗證。（一）前驗證1．設計確認2．安裝確認3．運行確認4．性能確認（二）同步驗證同步驗證系指在系統(tǒng)或工藝等常規(guī)運行的同時進行的驗證。也就是從活動進行過程中獲得的數(shù)據(jù)作為分析和評價的依據(jù)，以證明系統(tǒng)或活動達到預計要求的活動。采用這種驗證方式的先決條件為：應有完善的取樣計劃，生產(chǎn)及工藝條件的監(jiān)控比較充分，有經(jīng)過驗證的檢驗方法，方法的靈敏度及選樣性等比較好，對所驗證的產(chǎn)品或工藝已有相當?shù)慕?jīng)驗及把握。（三）回顧性驗證回顧驗證系指利用對現(xiàn)有的歷史數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，收集證據(jù)，以證明程序、生產(chǎn)過程、設備、物料、活動或系統(tǒng)達到預期要求的行為。適用情況：①關鍵質(zhì)量屬性和關鍵工藝參數(shù)均已確定；②已確立了合適的中間控制和認可標準；③從來沒有因為除了操作人員失誤或設備故障這些與設備適應性無關的因素之外的原因而造成值得注意的生產(chǎn)過程或產(chǎn)品的不合格；④現(xiàn)有成品的雜質(zhì)情況已確定。（四）再驗證再驗證是指指工藝、程序、系統(tǒng)、設備經(jīng)過驗證并在使用一個階段以后，以及某些要素發(fā)生改變時所進行的驗證。目的在于證實已驗證狀態(tài)沒有發(fā)生飄移而進行的驗證。第二節(jié)廠房設施與設備的驗證一、設計確認企業(yè)根據(jù)藥品生產(chǎn)的實際情況，對生產(chǎn)所用的設備設計和選型，從設備的價格、性能及設定的參數(shù)等方面加以考查，寫出論證報告，經(jīng)審核批準，選定供應廠商。二、安裝確認對設備性能參數(shù)、安裝環(huán)境和安裝過程進行確認，在設備安裝后進行各種系統(tǒng)檢查及技術資料的文件化工作。三、運行確認通過單機試車和系統(tǒng)試車確定設備的運行是否符合設定標準。主要考察：SOP草案的適用性設備運行參數(shù)的波動性儀表可靠性設備運行的穩(wěn)定性四、性能確認模擬實際生產(chǎn)情況，一般先用空白料進行試車，以確定設備的適用性。第三節(jié)分析方法的驗證一、分析方法驗證的概念是指對藥品生產(chǎn)過程中所使用的檢測方與分析方法進行驗證，證明這些方法確實能達到預期檢驗目的。二、分析方法驗證的內(nèi)容1、準確度準確度指用該方法檢測結果與真實值或參考值接近的程度，一般以百分回收率表示。2、精密度精密度指在規(guī)定的測試條件下，同一個均勻樣品，經(jīng)多次取樣測定所得結果之間的接近程度。 重復性中間精密度重現(xiàn)性3、專屬性專屬性指在其他成分可能存在的情況下，對被分析物進行準確可靠測定的能力。如何排除雜質(zhì)干擾？4、檢測限度：樣品中被測物能被檢測出的最低量。5、定量限度：樣品中被測物能被測定的最低量。6、線性性：指在給定范圍內(nèi)，檢測結果與樣品中被測物濃度呈正比的程度。7、范圍：測試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。第四節(jié)無菌工藝驗證注射劑的風險風險1-微生物污染風險2-熱原的污染風險3-不溶性微粒風險4-純度其他風險：安全性（組織的刺激性，毒性發(fā)應）、滲透壓、pH。一、無菌工藝驗證概述最終滅菌工藝先將藥品的各個部件（產(chǎn)品，容器和密封件）在符合要求的環(huán)境下組成最終的包裝形式，最后讓產(chǎn)品在其最終容器中進行滅菌處理。無菌生產(chǎn)工藝藥品的各個部件（產(chǎn)品，容器和密封件）分別經(jīng)過滅菌處理，再在高潔凈度的環(huán)境中組裝最終產(chǎn)品，但產(chǎn)品裝入其最終容器后不再進行滅菌處理。相對于最終滅菌工藝，無菌生產(chǎn)工藝易受到多方面因素的影響，產(chǎn)品的無菌性非常脆弱，生產(chǎn)難度更高，且需承擔的質(zhì)量風險也更大。無菌工藝驗證是實現(xiàn)產(chǎn)品無菌保證的關鍵。無菌生產(chǎn)系統(tǒng)28消毒劑滅菌設備清洗設備蒸汽滅菌干熱滅菌水預處理純蒸汽發(fā)生器高風險操作區(qū)域混合灌裝其他VHP,EO發(fā)生器凍干機最終滅菌壓縮空氣無菌檢測無菌工藝驗證是指證明按照預定的工藝規(guī)程使用的設備和包裝材料能夠始終如一的生產(chǎn)出符合要求的無菌產(chǎn)品，從而確認無菌生產(chǎn)工藝系統(tǒng)的可靠性和適用性。最為常用的無菌工藝驗證方法是培養(yǎng)基灌裝試驗，即采用正常生產(chǎn)的灌裝程序，用培養(yǎng)基代替產(chǎn)品灌封來模擬無菌灌裝操作的無菌性。二、無菌工藝驗證要點1、培養(yǎng)基選擇無抑菌作用較好的澄明度易于滅菌2、最劣工況理念最劣工況的目的是有意對工藝、系統(tǒng)、設備在更高的挑戰(zhàn)條件下進行驗證。儲存時間灌裝設備、灌裝部件、儲罐、無菌物料、藥液在實際灌裝前能夠放置的最長時間例1:用需要再滅菌前的灌裝設備、灌裝部件、儲罐、無菌物料參與培養(yǎng)基灌裝例2:無菌過濾后存放在儲罐內(nèi)的培養(yǎng)基到實際生產(chǎn)時產(chǎn)品的最大儲存時間后再灌裝無菌灌裝時間在培養(yǎng)基灌裝中模擬用時最長的瓶子滿批量生產(chǎn)需要的時間，其中包括正常的干擾時間（換班、設備維修）。灌裝速度和瓶子規(guī)格最慢的速度，最大的瓶子規(guī)格最小的瓶子規(guī)格，最快的速度人員培養(yǎng)基灌裝時模擬無菌區(qū)可能容納最多的人數(shù)無菌區(qū)工作人員至少每年參與一次培養(yǎng)基灌裝操作干擾正常的（灌裝線裝配，稱量調(diào)節(jié)，加膠塞，處理倒瓶，取樣，環(huán)境監(jiān)測）。非正常的（設備故障，灌裝線堵塞，軌道調(diào)節(jié)，拆卸/替換破損的部件）。干擾的次數(shù)應該不少于正常生產(chǎn)時發(fā)生的次數(shù)。工藝氣體使用氮氣的，因考慮其不利于微生物生長，以壓縮空氣代替。3、驗證規(guī)模污染率低于0.1%計算公式：實際污染率=(95%置信限值)/(灌封容器數(shù))×100%污染瓶數(shù)與95%置信限值間的關系污染瓶數(shù)01234567891095%置信限值34.746.37.759.1510.5111.8413.1514.4315.7116.964、驗證次數(shù)初次驗證，至少要連續(xù)成功灌封3個批次。再驗證，至少需要成功灌封1個批次。5、培養(yǎng)基罐裝試驗流程將培養(yǎng)基暴露于設備、容器膠塞密封系統(tǒng)的表面和關鍵環(huán)境條件中，并模擬實際生產(chǎn)完成工藝操作。對裝有培養(yǎng)基的密閉容器進行培養(yǎng)以檢查微生物的生長。評價結果，確定實際生產(chǎn)中（如灌裝前的調(diào)試、加入無菌原輔材料、無菌連接、灌裝和密封）產(chǎn)品污染的可能性。

6、環(huán)境監(jiān)測空氣凈化系統(tǒng)的驗證（溫濕度，壓差，空氣流向，風速，高效過濾器泄漏測試）環(huán)境性能測試（靜態(tài)＋動態(tài)）懸浮粒子和恢復速率測試

微生物測試：空氣浮游菌，沉降菌，表面微生物人員監(jiān)測7、樣品收集與培養(yǎng)微生物浸泡法：將鋁蓋去除;倒置于菌懸液中4小時;取出后消毒外表面;20-25℃和30-35℃分別培養(yǎng)7天，共14天，每天觀察生長情況。菌液待確認密封口支架培養(yǎng)基容器8、結果評價與失敗調(diào)查灌封量<5000瓶時，若有1瓶污染，需徹底調(diào)查，并重新驗證(3批)。灌封量為5000-10000瓶時，若有1瓶污染，視調(diào)查結果決定是否需要重新進行1批培養(yǎng)基灌封試驗；若有兩瓶污染，必須重新驗證（3批），同時進行徹底調(diào)查。灌封量>10000瓶時，若有1瓶污染，需徹底調(diào)查；若有兩瓶污染，必須進行徹底調(diào)查，并重新驗證（3批）。第五節(jié)清潔驗證清潔驗證就是指對廠房設施、設備儀器和容器具清潔所使用的規(guī)程，也稱為清潔規(guī)程進行驗證，確認其效果有效、穩(wěn)定。建立清潔標準建立取樣方法建立檢驗方法建立數(shù)據(jù)分析方法一、清潔驗證工作階段開發(fā)階段—制定清潔規(guī)程；方案準備階段—確定最難清除物質(zhì)、取樣點、最大殘留量標準等；方案實施階段—開展試驗、獲得數(shù)據(jù)、評價結果、得出結論、確立規(guī)章；監(jiān)控及在驗證階段—投入運行的清潔方法監(jiān)控，有變更的實行表更管理，并確定在驗證的周期。二、清潔方法的選定1、清潔方式手工清潔：人工持清潔工具，按預定的要求清洗設備，根據(jù)目測清潔的程度，直至清潔完成。自動清潔：由自動化的專門設備按一定的程序自動完成整個清潔過程的方式。清潔方式選用自動清潔：設備體積龐大、內(nèi)表面光滑無死角，生產(chǎn)使用的物料或產(chǎn)品易溶，如大容量注射劑的配制系統(tǒng)。手工清潔：設備死角較多，產(chǎn)品易粘結、易結塊注射劑的罐裝機、膠囊填充機及制粒機、壓片機。2、清潔規(guī)程清潔規(guī)程規(guī)定每臺設備的清洗程序，從而保證每個操作人員都能以可重復的方式對其進行清洗，并獲得相同的清潔效果。清潔規(guī)程要點拆卸應規(guī)定清潔一臺設備需要拆卸的程度。如大容量注射劑的灌裝機、一步制粒機在清潔前需要預先拆卸到一定程度。小針的灌裝機可以完全拆卸。預洗預洗的目的是除去大量的（可見的）殘余產(chǎn)品或原料，為此后的清潔創(chuàng)造一個基本一致的起始條件。水質(zhì)要求：飲用水清洗用清潔劑以一定的程序除去設備上看不到的產(chǎn)品。為提高清洗效率，可采用多步清洗的方式。水質(zhì)要求：飲用水、純化水淋洗用水淋洗設備表面，以除去設備上看不到的清潔劑。水質(zhì)要求：純化水、注射用水。干燥對于須暴露保存的設備，應進行干燥；對于經(jīng)過驗證的清潔程序，如果設備淋洗后要進行滅菌處理，或是高溫無菌的注射用水淋洗并保持密閉的設備可不進行干燥。檢查經(jīng)清潔驗證程序的清洗的設備，可通過目檢方式進行檢查，如目檢發(fā)現(xiàn)殘留物，向負責人匯報以采取糾偏措施。儲存、裝配規(guī)定已清潔設備和部件的儲存條件和最長儲存時間，防止再次污染。規(guī)定被拆卸部件重新裝配的各步操作。3、選用清潔劑原則安全、無危害性、無毒性溶解性好，易被純水去除低發(fā)泡的經(jīng)濟實惠成份明確符合食品標準或相關法規(guī)清潔劑水溶性清潔劑水:水溶性制劑堿性清潔劑，如NaOH溶液、表面活性劑:油性制劑弱堿溶液，如Na2CO3、NaHCO3:弱酸性制劑弱酸溶液:弱堿性制劑清潔劑有機溶劑清潔劑乙醇易揮發(fā)的溶劑三、清潔驗證的合格標準1、最難清潔物質(zhì)通常以各組分中最難溶解的物質(zhì)作為最難清潔物質(zhì)?；钚猿煞秩芙舛确浅Ｐ〉妮o料溶解度最小的活性成分2、最難清潔部位和取樣點取樣點選擇原則：最難清潔的部位流動為層流部位設備內(nèi)部死角清潔劑不易接觸的部位容易吸附殘留物的部位壓力、流速迅速變化處3、殘留物限度的確定確立殘留物限度時隔復雜的問題，由于設備和產(chǎn)品差別太大，F(xiàn)DA無通用標準，但是，驗證過程必須要求有明確的殘留物限度。濃度限度（10ppm）上一批產(chǎn)品的殘留質(zhì)全部溶解到下一批產(chǎn)品中所致的濃度不得高于10ppm合理性：一般分析方法能檢測，非高活性產(chǎn)品足夠安全，適用于液體制劑、原料。生物學活性限度MTDD/1000MTDD為藥品注冊必備數(shù)據(jù)，經(jīng)過多期臨床驗證充分考慮了個體差異符合GMP足夠安全的理念適用于各種復雜情況如特殊表面特別適用于高活性物質(zhì)舉例A產(chǎn)品B產(chǎn)品備注每日使用1-5片每片5mg最低日治療劑量：5mgx1片=5mg每日使用2-6片每片重0.5g每日最多使用制劑數(shù)為6片，即3g最低日劑量1/1000計算：5mgx1片x1/1000=5μgA產(chǎn)品為先加工產(chǎn)品，5mg是成品中主藥的含量B產(chǎn)品為后續(xù)加工產(chǎn)品應控制的限度：5μg(A)/3g(B)=1.7μg(A)/g(B)肉眼觀察限度經(jīng)驗定性標準用于已驗證設備的日常監(jiān)控4、微生物含量限度以滿足生產(chǎn)和質(zhì)量控制標準為出發(fā)點。以大輸液滅菌前帶菌量限度100CFU/100ml為例：最終淋洗液樣品10CFU/100ml設備表面微生物限度Lm計算Lm=殘留微生物總量M/總表面積S/安全因子FM=100cfu/100mlX最小批量B（kg