食品中維生素c測(cè)定

課程名稱(chēng)食品理化檢測(cè)技術(shù)授課班級(jí)營(yíng)養(yǎng)1431授課時(shí)間2016.4.20授課時(shí)數(shù)2本次內(nèi)容維生素c的測(cè)定教具多媒體教學(xué)目標(biāo)能力（技能）目標(biāo)知識(shí)目標(biāo)1.能配制維生素c標(biāo)準(zhǔn)溶液；2.能用2,6-二氯靛酚法進(jìn)行維生素c的測(cè)定；3.能繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。了解維生素c對(duì)人體的作用，分類(lèi)以及常見(jiàn)食物維生素c含量的高低；掌握維生素c的測(cè)定原理，實(shí)驗(yàn)過(guò)程。重點(diǎn)

維C測(cè)定原理難點(diǎn)

樣品處理、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制作能力訓(xùn)練方式方法講解、問(wèn)答、互動(dòng)教學(xué)環(huán)節(jié)時(shí)間安排復(fù)習(xí)：5min；講解、互動(dòng)：75min小結(jié)：5min；看書(shū)鞏固知識(shí)點(diǎn)：5min課外作業(yè)預(yù)習(xí)課堂考勤47參考資料《食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)》《食品理化檢測(cè)技術(shù)》食品中維生素測(cè)定維生素缺乏會(huì)引起哪些疾病？壞血?。浩つw、牙齦以及黏膜上的出血點(diǎn)維c含量：橘肉：35mg/100g橘皮：>216mg/100g不同維生素在人體作用每100g食品中維生素c含量維c含量：橘肉：35mg/100g橘皮：>216mg/100g一、概述維生素C：又名抗壞血酸、強(qiáng)還原性維生素分類(lèi)：脂溶性維生素水溶性維生素維生素含量測(cè)定方法液相色譜法1比色法2氧化還原法（2,6-二氯靛酚法，碘量法））3熒光法：紫外線(xiàn)照射下、硫色素發(fā)出熒光、熒光強(qiáng)度與硫色素量成正比4一、高效液相色譜

色譜法的一個(gè)重要分支，以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。液相色譜儀結(jié)構(gòu)圖二、2,6二氯靛酚滴定法2,6二氯靛酚(染料）

顏色受存在狀態(tài)和外界環(huán)境影響。

存在狀態(tài)氧化態(tài)：深藍(lán)色還原態(tài)：無(wú)色外界環(huán)境酸性：淺紅色堿性：深藍(lán)色1.實(shí)驗(yàn)原理

用藍(lán)色的堿性染料標(biāo)準(zhǔn)溶液,對(duì)含維生素C的酸性浸出液進(jìn)行氧化還原滴定,染料被還原為無(wú)色,當(dāng)?shù)竭_(dá)滴定終點(diǎn)時(shí),多余的染料在酸性介質(zhì)中則表現(xiàn)為淺紅色,由染料用量計(jì)算樣品中還原型抗壞血酸的含量。還原型脫氫型二酮古樂(lè)糖酸水解新鮮食品主要以還原型存在當(dāng)抗壞血酸全部被氧化后，稍多加一些染料，使滴定液呈淡紅色，即為終點(diǎn)。VC還原型脫氫VC氧化型2,6-二氯酚靛酚氧化型(酸性溶液中,呈粉紅色)2,6-二氯酚靛酚還原型(無(wú)色)2.儀器、試劑（1）1%，2%的草酸（乙二酸：HOOC—COOH）（2）維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液（3）2,6-二氯靛酚棕色瓶保存于冰箱內(nèi)，需標(biāo)定后使用。標(biāo)定維生素c的濃度；計(jì)算滴定度（2,6-二氯靛酚相當(dāng)于維生素c的量）（4）6%的KI溶液0.6g碘化鉀溶解于9.4g水中。

（5）0.001mol/L的KIO3若配制200ml上述濃度的碘酸鉀，需稱(chēng)量碘酸鉀的量為多少？MKIO3=214m=cvM=0.001×200×10-3×214=0.0428g3.實(shí)驗(yàn)步驟（5min）加入適量白陶土震蕩、靜止、過(guò)濾、收集濾液。脫色樣品50g，加入2%的草酸100ml，搗碎，過(guò)濾。提取

吸取5ml濾液用2,6-二氯二靛酚滴定至粉紅色。滴定

空白試驗(yàn)應(yīng)用什么代替樣品？空白用2%的草酸溶液5ml代替樣品，用燃料滴定至粉紅色。4.計(jì)算維生素c含量（mg/100g）：V1：樣品消耗燃料的量；V2：空白樣品消耗燃料的量；T:滴定度；m：滴定時(shí)濾液中樣品量。注意事項(xiàng)2012樣品應(yīng)在草酸溶液中處理，避免維c氧化2013草酸可換做其他酸，如鹽酸、乙酸等。2014樣品處理中若有泡沫需用辛醇、硅油消泡。2015試劑配制需用重蒸餾水經(jīng)過(guò)兩次蒸餾的水，出去雜質(zhì)三、2,4-二硝基苯肼法原理：

活性炭氧化樣品中還原型抗壞血酸為脫氫抗壞血酸、與顯色劑2,4-二硝基苯肼生成紅色脎、根據(jù)脎在硫酸溶液中含量與抗壞血酸含量成正比進(jìn)行比色測(cè)定二、試劑2012

硫酸溶液配制20132,4-二硝基苯肼：遇明火極易燃燒爆炸。干燥時(shí)經(jīng)震動(dòng)、撞擊會(huì)引起爆炸，過(guò)濾2014硫脲：空氣中易潮解、遇明火可燃2015活性炭處理：鹽酸回流、過(guò)濾、烘干01除去可溶性無(wú)機(jī)物、有機(jī)物三、實(shí)驗(yàn)步驟樣品制備25ml樣品濾液2g活性炭振搖1min、過(guò)濾、濾液10ml10ml硫脲取4ml稀釋液1mi苯肼溶液37℃水浴3h試管放入冰水中5ml85%硫酸30min500nm測(cè)波長(zhǎng)維C易被氧化、酸性介質(zhì)中速度能得到緩解活性炭起氧化作用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

待測(cè)物質(zhì)濃